北京市平谷區(qū)食品藥品安全監(jiān)控中心（101200）劉紅玉 張悅

酸棗仁為鼠李科植物酸棗ZiziphusjujubaMill. var.spinosa(Bunge)Hu ex H. F.Chou的干燥成熟種子[1]。味甘、酸，平，歸肝、膽、心經(jīng)。臨床主要用于寧心安神，養(yǎng)心補(bǔ)肝，斂汗，生津。用于治療虛煩不眠，驚悸多夢(mèng)，體虛多汗及津傷口渴等。滇棗仁，又稱(chēng)為理?xiàng)椚省⒕挆椚?，為同屬植物滇刺棗Ziziphus mauritianaLam.的干燥成熟的種子，是云南的地方習(xí)慣用藥，但與酸棗仁在性狀、成分及功效等方面均有差異。近年來(lái)，由于資源緊缺，市場(chǎng)上用滇棗仁冒充酸棗仁出售的現(xiàn)象日益增多，因此進(jìn)行二者的鑒別研究非常重要。本文對(duì)近年來(lái)酸棗仁及滇棗仁鑒別的相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行梳理，為日常工作中鑒別酸棗仁與滇棗仁提供依據(jù)。

1 性狀鑒別

酸棗仁表面為紫紅色或紫褐色，而滇棗仁為棕黃色或棕色，色澤有差異。二者均呈扁圓形，一面隆起，另一面較平坦，但酸棗仁中間可見(jiàn)一條隆起的縱線紋，滇棗仁無(wú)此特征；二者表面平滑有光澤，有時(shí)有裂紋，質(zhì)堅(jiān)硬，破開(kāi)種皮后有白色種仁一枚，富油性。氣微，味淡[2]。酸棗仁與滇棗仁的表面特征略有差異，但差異不明顯。此法可作為鑒別二者的輔助方法，但本法只能用于外觀未破損的完整藥材，對(duì)酸棗仁粉末或者以酸棗仁入藥的中成藥不能鑒別，具有局限性。

2 顯微鑒別

取粉末，置顯微鏡下觀察，均具有種皮柵狀細(xì)胞、草酸鈣簇晶及較少的石細(xì)胞，二者并無(wú)明顯差異。觀察其組織結(jié)構(gòu)可以發(fā)現(xiàn)，酸棗仁的種皮柵狀細(xì)胞較長(zhǎng)，子葉表皮細(xì)胞中含1～2個(gè)細(xì)小草酸鈣簇晶，營(yíng)養(yǎng)層較寬。而滇棗仁的種皮柵狀細(xì)胞較短，子葉表皮細(xì)胞中不含細(xì)小草酸鈣簇晶，營(yíng)養(yǎng)層較窄[3]。與性狀鑒別相同，顯微鑒別差異并不顯著，只適用于完整藥材，不適用于酸棗仁粉末及以酸棗仁入藥的中成藥。

3 理化鑒別

研究表明[4]，取粉末，甲醇提取，滴于濾紙，加氨水后置紫外燈光（365nm）下觀察，酸棗仁呈天藍(lán)色熒光，滇棗仁呈黃綠色熒光，可以將二者區(qū)別。此外，酸棗仁與滇棗仁對(duì)不同化學(xué)試劑，呈現(xiàn)不同顏色，可以用于二者鑒別[5]。例如取粉末加水微沸，過(guò)濾，取濾液用正丁醇萃取，萃取液置蒸發(fā)皿中蒸干，加冰醋酸，溶液傾入試管，加濃硫酸，二者均產(chǎn)生淡紅色環(huán)，但酸棗仁溶液上層呈淡棕黃色，而滇棗仁呈翠綠色。二者粉末用乙醚振搖提取后揮盡乙醚，殘?jiān)颖姿峒皾饬蛩?，酸棗仁呈棕黃色，滇棗仁呈紫紅色。也可以取粉末，加乙醇加熱回流，濾液加入香草醛無(wú)水乙醇溶液，再加72%硫酸，酸棗仁溶液顯渾濁的黃棕色，久置呈灰棕黃色；滇棗仁溶液顯澄清的黃棕色，久置呈紅棕色。此方法操作簡(jiǎn)單快速，結(jié)果明確，但是否適用于檢驗(yàn)以酸棗仁入藥的中成藥還需進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，同時(shí)對(duì)于鑒別酸棗仁中摻入滇棗仁的摻偽品具有一定的難度。

4 薄層色譜鑒別

將酸棗仁與滇棗仁粉末的甲醇提取液作為供試品溶液進(jìn)行薄層色譜鑒別。酸棗仁具有10個(gè)斑點(diǎn)，滇棗仁具有9個(gè)斑點(diǎn)，其中有8個(gè)斑點(diǎn)位置相同[6][7]。雖然二者的薄層色譜略有差異，但點(diǎn)樣量、顯色劑等因素會(huì)對(duì)薄層色譜的結(jié)果產(chǎn)生影響，故二者的鑒別需要進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。除了采用薄層法對(duì)二者進(jìn)行定性鑒別，也有人采用薄層掃描法對(duì)酸棗仁與滇棗仁中酸棗仁皂苷A、B進(jìn)行定量分析，結(jié)果表明：酸棗仁中酸棗仁皂苷A、B的含量明顯高于滇棗仁[8]。此方法不僅可以用于鑒別酸棗仁藥材與飲片，也可以用于含有酸棗仁的中成藥。

5 紫外光譜鑒別

取二者粉末的無(wú)水乙醇提取液，用紫外分光光度法測(cè)量其最大吸收，可以發(fā)現(xiàn)，酸棗仁的最大吸收峰在212nm，226nm，而滇棗仁的最大吸收峰211nm[6]。此法操作簡(jiǎn)單，結(jié)果明確，可以鑒別酸棗仁與滇棗仁，但對(duì)于酸棗仁中摻入滇棗仁的摻偽品，無(wú)法鑒別。有學(xué)者[9]對(duì)二者粉末的甲醇提取液進(jìn)行紫外導(dǎo)數(shù)光譜測(cè)定，酸棗仁和滇棗仁的零階導(dǎo)數(shù)光譜雖然在327.0nm和272±1nm處各有二吸收峰，但二者各峰的吸收強(qiáng)度差別較大，且酸棗仁與滇棗仁的二階導(dǎo)數(shù)光譜在200～400nm范圍內(nèi)均無(wú)重疊，且信號(hào)尖銳，分辨率高，可以將二者鑒別開(kāi)。

6 紅外光譜鑒別

取二者粉末，加石油醚脫脂，于60℃干燥至恒重，溴化鉀壓片，分別測(cè)定其紅外光譜，結(jié)果表明，酸棗仁與滇棗仁的紅外光譜在1000～3500cm-1范圍內(nèi)無(wú)顯著性差異[8]。

李彥文等取酸棗仁與滇棗仁的粉末，不脫脂直接進(jìn)行溴化鉀壓片，測(cè)定其紅外光譜，結(jié)果表明，在1800～960cm-1間，二者峰數(shù)、峰位、峰形和峰強(qiáng)基本一致，在1651cm-1、1545cm-1、1454cm-1、1240cm-1等附近有強(qiáng)吸收。另外酸棗仁在1745cm-1與1160cm-1附近則出現(xiàn)油脂峰；滇棗仁在1710cm-1附近出現(xiàn)羧酸峰，二者均由CO振動(dòng)產(chǎn)生。說(shuō)明酸棗仁富含油脂成分，滇棗仁富含酸類(lèi)成分，可以鑒別二者。將二者的圖譜做二階導(dǎo)數(shù)處理，發(fā)現(xiàn)二者的峰數(shù)、峰強(qiáng)、峰谷等均有明顯差異，也可以鑒別二者的不同。

7 HPLC-ELSD鑒別

采用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)，通過(guò)多成分的含量測(cè)定及HPLC指紋圖譜的進(jìn)行分析，對(duì)16批次酸棗仁、10批次的滇棗仁及1批次的摻偽品進(jìn)行測(cè)定，研究結(jié)果表明，二者均可以檢測(cè)到斯皮諾素、酸棗仁皂苷A、酸棗仁皂苷B、白樺脂酸，但酸棗仁中酸棗仁皂苷A的含量約為0.3257～1.6724mg/g，酸棗仁皂苷B約為0.1486～0.2985mg/g；滇棗仁中酸棗仁皂苷A、B的含量極低，有些樣品中甚至檢測(cè)不到；而二者摻偽品含酸棗仁皂苷A為0.0940mg/g，酸棗仁皂苷B為0.1010mg/g。因此，酸棗仁皂苷A、B可以作為鑒別二者的依據(jù)。同時(shí)二者的指紋圖譜中，酸棗仁具有14個(gè)共有色譜峰，滇棗仁比酸棗仁多出3號(hào)峰及16號(hào)峰，這兩個(gè)特征峰也可以用于鑒別酸棗仁與滇棗仁，但仍需要進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)鑒定其結(jié)構(gòu)。

8 高效毛細(xì)管電泳法鑒別

通過(guò)酸棗仁及滇棗仁的蛋白質(zhì)高效毛細(xì)管電泳譜圖可知，二者的酸性提取液、堿性提取液及中性提取液中，酸棗仁樣品與滇棗仁樣品有不同的強(qiáng)吸收峰，其圖譜存在顯著差異，可以用于鑒別二者。用高效毛細(xì)管電泳（HPCE）法對(duì)酸棗仁及滇棗仁中有效成分酸棗仁皂苷B進(jìn)行含量測(cè)定，測(cè)定結(jié)果表明：兩者的酸棗仁皂苷B含量接近。HPCE法分離效率高，分析速度快，樣品和試劑用量少，易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。

9 UPLC-QTOF/MS鑒別

采用超高效液相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜法(UPLC-QTOF/MS法)鑒別酸棗仁與滇棗仁，此方法找出了酸棗仁與滇棗仁的專(zhuān)屬性特征離子峰，與對(duì)照藥材相結(jié)合，可以用于二者的鑒別，建立了酸棗仁和滇棗仁的離子鑒別方法。超高效液相色譜法分離能力高、靈敏度高、分析周期短，對(duì)二者的真?zhèn)舞b別及摻偽品的區(qū)分有一定優(yōu)勢(shì)。

10 DNA指紋圖譜鑒別

劉萍等人根據(jù)中藥材的遺傳多態(tài)性，運(yùn)用隨機(jī)擴(kuò)增DNA多態(tài)性(RAPD)分析技術(shù)，對(duì)酸棗仁及其易混淆品、偽品進(jìn)行分析比較。DNA指紋圖譜可以看出，由于酸棗仁與滇棗仁來(lái)自同屬植物，遺傳基因具有一定的相似性，因此二者具有部分共同的譜帶，但同時(shí)二者又有各自的特征性譜帶，可以區(qū)別酸棗仁與滇棗仁，對(duì)于二者的摻偽品也可以進(jìn)行鑒別。

從上可知，酸棗仁與滇棗仁的性狀及組織結(jié)構(gòu)存在差異，可以作為其鑒別方法，但只適用于外觀完整的中藥材，不能適用于藥材粉末以及以酸棗仁入藥的中成藥；理化鑒別方法較多，易于操作，結(jié)果明確，可以與其他方法一起聯(lián)合應(yīng)用，作為鑒別的輔助方法，但對(duì)于成分較為復(fù)雜的中成藥，中成藥中含有的其他成分可能會(huì)影響理化鑒別的結(jié)果；而薄層法用于定性鑒別時(shí)，由于受點(diǎn)樣量等因素的影響，作為二者的鑒別依據(jù)需要進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證；紫外光譜及紅外光譜均為定性鑒別，通過(guò)酸棗仁與滇棗仁最大吸收峰的差異或其光譜中各峰數(shù)、峰位及峰強(qiáng)的差異鑒別酸棗仁與滇棗仁，而酸棗仁與滇棗仁在未進(jìn)行脫脂處理的情況下，可以采用紅外光譜或其二階導(dǎo)數(shù)光譜進(jìn)行鑒別，但石油醚脫脂后的光譜無(wú)顯著差異。

HPLC-ELSD法測(cè)定了二者斯皮諾素、酸棗仁皂苷A、酸棗仁皂苷B、白樺脂酸的含量，結(jié)果表明，酸棗仁、滇棗仁及二者的摻偽品中的酸棗仁皂苷A、B含量不同；薄層色譜掃描法表明酸棗仁中酸棗仁皂苷A、B的含量明顯高于滇棗仁；高效毛細(xì)管電泳法認(rèn)為二者的酸棗仁皂苷B含量接近。這三種方法不僅可以應(yīng)用于中藥材及飲片，也可以用于含酸棗仁的中成藥，2015版《中國(guó)藥典》中采用HPLC-ELSD法測(cè)定酸棗仁中酸棗仁皂苷A的含量[1]。

DNA圖譜法是根據(jù)中藥材的遺傳多態(tài)性，運(yùn)用隨機(jī)擴(kuò)DNA多態(tài)性(RAPD)分析技術(shù)鑒別酸棗仁與滇棗仁，靈敏性高，結(jié)果明確。但由于RAPD分析技術(shù)應(yīng)用于中藥仍具有一定的局限性，且對(duì)于不同生長(zhǎng)年限造成的藥材差異尚無(wú)法進(jìn)行鑒別，還需要進(jìn)一步的研究。

以上的檢驗(yàn)方法各有利弊，日常工作中可以將酸棗仁的各項(xiàng)鑒別方法相結(jié)合，定性定量方法相結(jié)合，以更好發(fā)揮各鑒別方法的優(yōu)勢(shì)。