宋祖賢，曹　奕，王　琳

（1.安徽中醫(yī)藥大學(xué)2014級(jí)碩士研究生，安徽 合肥 230038；2.安徽中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院，安徽 合肥 230061）

針灸對(duì)缺血性腦卒中血管新生相關(guān)信號(hào)通路影響研究進(jìn)展

宋祖賢1，曹奕2，王琳2

（1.安徽中醫(yī)藥大學(xué)2014級(jí)碩士研究生，安徽 合肥 230038；2.安徽中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院，安徽 合肥 230061）

缺血性腦卒中的治療有多種方法，如神經(jīng)保護(hù)、抗凝、溶栓、增加血容量、外科手術(shù)及康復(fù)治療等。而針灸治療缺血性腦卒中具有顯著的療效。針刺既可改善缺血區(qū)腦組織的能量代謝與血液循環(huán)，發(fā)揮腦保護(hù)作用，又可以激活腦組織不同區(qū)域，提高視覺(jué)皮層區(qū)域腦組織血氧飽和度［1］。針灸治療還具有影響某些信號(hào)通路，促進(jìn)血管新生，抗自由基氧化等作用。缺血性損傷在內(nèi)皮祖細(xì)胞及細(xì)胞因子的綜合作用下可以促進(jìn)新生血管的形成。在腦缺血病程中，神經(jīng)血管單元因長(zhǎng)時(shí)間缺血缺氧而發(fā)生壞死和凋亡，因此及時(shí)恢復(fù)血供、開(kāi)放側(cè)支循環(huán)及促進(jìn)血管新生十分重要。血管新生是指在原有血管基礎(chǔ)上，通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞芽生，血管分裂、分支而形成復(fù)雜血管網(wǎng)絡(luò)，并使其功能與局部需要相適應(yīng)的過(guò)程。研究顯示內(nèi)皮組細(xì)胞、細(xì)胞因子等因素均與血管新生有密切聯(lián)系［2］。

1　缺血性腦卒中與相關(guān)信號(hào)通路

Notch信號(hào)通路。婁遠(yuǎn)蕾等［3］實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)腦缺血后腦組織缺血皮質(zhì)區(qū)NICD蛋白的表達(dá)明顯的上調(diào)，提示Notch信號(hào)通路參與了腦缺血后血管新生過(guò)程的調(diào)控。有研究表明抑制Notch信號(hào)衰減的內(nèi)脂素可以有效地誘導(dǎo)體內(nèi)體外的血管生成［4］。Notch能夠有效地調(diào)控VEGF受體的表達(dá)，該受體是血管密度的關(guān)鍵調(diào)控因子，Notch信號(hào)的缺失或異位激活可分別導(dǎo)致血管密度的增加或者減低［5］。Notch1在調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞VEGFR-1中扮演重要角色，其功能可能表現(xiàn)為血管生成及病理生理等方面［6］。王拯等［7］認(rèn)為Notch信號(hào)通路與其他信號(hào)通路，如血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子，BMP-SMAD及細(xì)胞外基質(zhì)分子交互作用共同協(xié)調(diào)血管新生的過(guò)程。當(dāng)人體急性創(chuàng)傷或急性缺血再灌注損傷時(shí)，阻斷Notch信號(hào)通路可以促進(jìn)血管生成［8］。內(nèi)皮細(xì)胞中的Notch信號(hào)活性與VEGF-VEGFR/Dll4-Notch這一信號(hào)回路處于動(dòng)態(tài)平衡，從而可以保證正常的血管萌芽和血管網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建。此信號(hào)還能夠影響細(xì)胞外基質(zhì)成分的生成和分布，具有穩(wěn)定血管壁的作用，進(jìn)而調(diào)控動(dòng)靜脈分化的作用［9］。Notch信號(hào)分子在血管內(nèi)皮細(xì)胞中均有良好的表達(dá)，能夠誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生、分化［10］。激活Jagged1/Notch3可以促進(jìn)新生血管生成，提高缺血區(qū)域的血流灌注［11］。激活Dll4同樣可以促進(jìn)缺血區(qū)的血管生成［12］。

Sonic hedgehog（Shh）信號(hào)通路。范層層［13］等觀測(cè)到缺血性腦卒中可以上調(diào)Shh信號(hào)通路成分在大鼠側(cè)腦室下帶（SVZ）區(qū)的表達(dá)，提示Shh信號(hào)通路可能對(duì)于參與卒中后神經(jīng)再生的機(jī)制具有調(diào)控作用。Renault等［14］發(fā)現(xiàn)，Shh可以促進(jìn)毛細(xì)血管形態(tài)發(fā)生，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞遷移，并且在內(nèi)皮細(xì)胞上Shh是通過(guò)Rho途徑而非經(jīng)典的Gli途徑調(diào)節(jié)血管生成。

其他信號(hào)通路。在神經(jīng)細(xì)胞中JNK通路隨著p-MKK4、p-JNK和p-c-Jun表達(dá)增加而被激活，調(diào)節(jié)JNK信號(hào)通路在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡中可以發(fā)揮重要的作用［15］。Toll樣受體（Toll like receptors，TLRs）作為炎癥信號(hào)受體，其信號(hào)通路在腦缺血發(fā)生后引發(fā)的炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)過(guò)程中起到重要作用，與炎癥介質(zhì)表達(dá)關(guān)系密切［16］。武菲等［17］等發(fā)現(xiàn)，經(jīng)典Wnt信號(hào)通路抑制劑Dkk-1參與缺血神經(jīng)損傷的病理生理過(guò)程，Wnt信號(hào)在調(diào)節(jié)成體神經(jīng)干細(xì)胞對(duì)稱性分裂中發(fā)揮作用。薛金龍等［18］研究表明大鼠造模后可激活了Wnt信號(hào)通路發(fā)揮保護(hù)神經(jīng)，促進(jìn)神經(jīng)發(fā)生的作用。

2　針灸對(duì)血管新生相關(guān)信號(hào)通路的影響

體針。姚建寧等［19］認(rèn)為曲池、足三里等穴位可以明顯的改善MCAO大鼠的神經(jīng)功能缺損癥狀，降低腦梗死范圍，炎癥反應(yīng)能夠明顯的緩解，電針調(diào)控NF-KB信號(hào)通路，抑制炎癥因子分泌來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)腦缺血的治療等機(jī)制可能與此相關(guān)。胥虹貝等［20］用線栓法建立大鼠大腦中動(dòng)脈阻塞腦缺血模型取“百會(huì)”穴及左側(cè)“四關(guān)”穴為相應(yīng)電針穴位，研究表明電針可通過(guò)上調(diào)局灶腦缺血/再灌注大鼠腦缺血皮質(zhì)區(qū)eNOS和金屬基質(zhì)蛋白酶的表達(dá)，從而促進(jìn)血管再生。徐曉明等［21］等發(fā)現(xiàn)，電針?biāo)疁涎艽龠M(jìn)缺血大鼠腦內(nèi)血管內(nèi)皮細(xì)胞CD34的表達(dá)，促進(jìn)微血管密度的增加，故增加了血管新生的力度。丁玲等［22］以線栓法復(fù)制大鼠MCAO模型，使用電針對(duì)百會(huì)、水溝、足三里穴進(jìn)行刺激，使大鼠梗死灶周圍BFGF表達(dá)顯著上調(diào)，ES表達(dá)明顯下降，提示針灸可能通過(guò)雙向調(diào)節(jié)血管生成促進(jìn)因子及血管生成抑制因子，促進(jìn)血管新生，改善缺血區(qū)半暗帶的血供，促進(jìn)缺血后的神經(jīng)功能恢復(fù)。張珊珊等［23］采用線栓法制備SD大鼠局灶腦缺血再灌注模型，取雙側(cè)“合谷”穴為電針穴位可提高p-AKT1表達(dá)水平，加強(qiáng)PI3K/AKT通路激活，促進(jìn)EPCs歸巢至缺血組織區(qū)，從而促進(jìn)血管再生。

頭針。唐強(qiáng)等［24］采用頭穴叢刺療法與康復(fù)治療及模型組相對(duì)比，針康治療組mNSS評(píng)分降低（P＜0.05），bFGF蛋白表達(dá)升高（P＜0.05），AS蛋白表達(dá)降低（P＜0.05）。針康法可通過(guò)上調(diào)bFGF蛋白表達(dá)和下調(diào)AS蛋白表達(dá)，促使血管新生，減輕缺血性腦損傷，加快腦卒中后期受損腦組織的修復(fù)，從而促進(jìn)缺血性腦卒中神經(jīng)功能恢復(fù)。朱路文等［25］采用頭穴叢刺與現(xiàn)代康復(fù)技術(shù)的結(jié)合，利用頭穴叢刺能夠透過(guò)顱骨，刺激大腦皮層，直達(dá)責(zé)任病灶;從而促進(jìn)腦缺血區(qū)半暗區(qū)VEGF、LN的表達(dá)，進(jìn)一步促進(jìn)腦缺血后微血管的再生，改善血腦屏障的通透性。楊敏等［26］采用改進(jìn)的線栓法制做永久性大腦中動(dòng)脈閉塞模型，選取頂顳后斜線、頂顳前斜線，與模型組比較，頭皮針組各時(shí)間點(diǎn)大鼠腦組織VEGF含量增多，ES含量減少，得出頭針可能通過(guò)上調(diào)缺血區(qū)VEGF的表達(dá)、下調(diào)ES來(lái)引導(dǎo)腦缺血再灌注后的血管新生，有利于改善缺血半影區(qū)血液供應(yīng)和促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)。

眼針。宓丹等［27］采用改良線栓法制備局灶性腦缺血再灌注模型用眼針進(jìn)行治療，定位取肝區(qū)、上焦區(qū)、下焦區(qū)、腎區(qū)。發(fā)現(xiàn)眼針可以通過(guò)上調(diào)VEGF、VEGFR2及其mRNA的表達(dá)，促進(jìn)微血管新生。趙丹玉等［28］對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠模型進(jìn)行眼針刺激能夠抑制TLR4及MyD88的表達(dá)，抑制炎癥因子的表達(dá)而減輕其炎癥反應(yīng)，從而達(dá)到對(duì)腦皮層組織的保護(hù)目的。許秀洪等［29］參照Longa法復(fù)制局灶腦缺血再灌注模型，表里經(jīng)配穴電針組取表里經(jīng)配穴的足三里、三陰交和尺澤、合谷行電針治療。發(fā)現(xiàn)表里經(jīng)配穴法可以調(diào)控JNK信號(hào)通路，下調(diào)p-JNK表達(dá)，減輕細(xì)胞凋亡，保護(hù)大腦神經(jīng)元。

3　小　結(jié)

近年來(lái)，越來(lái)越多的研究發(fā)現(xiàn)多種信號(hào)通路在血管生成中發(fā)揮重要作用，但目前對(duì)缺血性腦卒中的研究多以實(shí)驗(yàn)為主，臨床研究較少，因此還應(yīng)更多地結(jié)合現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)，在不違背醫(yī)學(xué)倫理學(xué)的前提下開(kāi)展臨床研究，從而為治療缺血性腦血管疾病提供幫助。同時(shí)，針刺治療的手法多樣，穴位各異，故應(yīng)以中醫(yī)基礎(chǔ)理論為指導(dǎo)結(jié)合現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)手段，運(yùn)用循證醫(yī)學(xué)方法，尋找出有效又系統(tǒng)規(guī)范的針灸治療方案，提高腦梗死治療效果。

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1004-2814（2016）10-1039-02

曹 奕

2016-05-23