孫政華， 郭 玫*， 邵 晶， 王志旺

（1.甘肅中醫(yī)藥大學(xué)，甘肅蘭州730000；2.甘肅省高校中［藏］藥化學(xué)與質(zhì)量研究重點實驗室，甘肅中醫(yī)藥大學(xué)，甘肅蘭州730000；3.甘肅省中藥藥理與毒理學(xué)重點實驗室，甘肅中醫(yī)藥大學(xué)，甘肅蘭州730000）

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大孔吸附樹脂純化富集五脈綠絨蒿總生物堿

孫政華1，2， 郭 玫1，2*， 邵 晶1，3*， 王志旺1，3

（1.甘肅中醫(yī)藥大學(xué)，甘肅蘭州730000；2.甘肅省高校中［藏］藥化學(xué)與質(zhì)量研究重點實驗室，甘肅中醫(yī)藥大學(xué)，甘肅蘭州730000；3.甘肅省中藥藥理與毒理學(xué)重點實驗室，甘肅中醫(yī)藥大學(xué)，甘肅蘭州730000）

摘要：目的 優(yōu)化大孔吸附樹脂純化富集藏藥五脈綠絨蒿Meconopsis integrifolia中總生物堿的工藝。方法 以鹽酸罌粟堿為對照品，采用紫外分光光度法測定總生物堿含有量；以吸附率及解吸率等為指標(biāo)，考察不同型號樹脂；考察靜態(tài)吸附-解吸附動力學(xué)曲線，確定吸附和解吸時間。然后，篩選解吸劑體積分數(shù)、上樣液質(zhì)量濃度、流量等相關(guān)參數(shù)。結(jié)果 AB-8型樹脂對五脈綠絨蒿總生物堿的吸附解吸性能最好，比吸附量44.15 μg/g、吸附率86.74％，解吸率91.39％，靜態(tài)吸附和解吸時間分別為8 h和10 h。結(jié)論 經(jīng)AB-8大孔樹脂純化富集后，所得干浸膏中五脈綠絨蒿總生物堿純度提高了2.39倍，回收率為79.88％，而且干浸膏黏度和吸濕性均降低。

關(guān)鍵詞：五脈綠絨蒿；總生物堿；大孔吸附樹脂

邵 晶，女，副教授，從事中藥和中藥制劑有效部位及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。Te1：（0931）8765394，E-mai1：cn221@163.com

Purification technology for total alkaloids from Meconopsis quintuplinervia Regel by macroporous resin

SUN Zheng-hua1，2， GUO Mei1，2*， SHAO Jing1，3*， WANG Zhi-wang1，3
（1.Gansu University of Chinese Medicine，Lanzhou 73OOOO，China；2.Gansu Provincial High Educational Key Laboratory for Chemistry and Quality of Traditional ChineseMedicine，Gansu University of ChineseMedicine，Lanzhou 73OOOO，China；3.Gansu Provincial Key Laboratory for Pharmacology and Toxicology of Traditional Chinese Medicine，Gansu University of Chinese Medicine，Lanzhou 73OOOO，China）

KEY WORDS：Meconopsis quintuplinervia Rege1；tota1a1ka1oids；macroporous resin

綠絨蒿收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn).藏藥》第一冊，為常用藏藥，是罌粟科綠絨蒿屬植物，主要分布于西藏、青海、甘肅等地，基源復(fù)雜，其中五脈綠絨蒿Meconopsis quintuplinervia Rege1、全緣綠絨蒿Meconopsis integrifolia（Maxim.）Franch和紅花綠絨蒿Meconopsis punicea Maxim均系其主流品種。其味甘、澀，性涼，具有清熱、消炎、止痛、鎮(zhèn)咳、平喘、利尿等功效，藏醫(yī)主要用其治療肝炎、肺炎、膽囊炎、肺結(jié)核、胃潰瘍等疾病，并且該植物消炎止痛的功效在臨床尤為突出［1-2］。本實驗以純化富集五脈綠絨蒿總生物堿為目標(biāo)，篩選了大孔樹脂型號及純化工藝參數(shù)，確定最佳工藝條件，為進一步研究藏藥綠絨蒿總生物堿抗炎鎮(zhèn)痛作用機理及其提取物的制備提供了科學(xué)方法，為相關(guān)新藥的開發(fā)提供工作基礎(chǔ)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器與設(shè)備 BS-124S電子天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）；UV-3300紫外-可見分光光度計、石英比色皿（上海美譜達儀器有限公司）；小型粉碎機（北京興時利和科技發(fā)展有限公司）。

1.2 實驗藥物與試劑 五脈綠絨蒿采自甘肅甘南，經(jīng)甘肅中醫(yī)藥大學(xué)晉玲教授鑒定為罌粟科植物綠絨蒿Meconopsis integrifolia（Maxim.）Franch的干燥全草。罌粟堿對照品（中國食品藥品檢定研究院，編號171214-200404）。NKA-9、D101、AB-8、DM-301、HPD-100樹脂（天津市海光化工有限公司）。實驗用水為娃哈哈純凈水（杭州娃哈哈集團有限公司）；其它試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 五脈綠絨蒿總生物堿含有量測定方法的建立［3-4］

2.1.1 對照品溶液的制備 精密稱取罌粟堿對照品15.4 mg，0.01 mo1/L鹽酸溶液溶解并定容至250 mL量瓶中，即得61.6 μg/mL鹽酸罌粟堿對照品溶液。

2.1.2 供試品溶液的制備 精密稱取五脈綠絨蒿粗粉2.0 g，置于250 mL錐形瓶中，加10 mL氨水充分攪拌，靜置30 min，加95％乙醇60 mL，超聲提取40 min，放冷，抽濾，濾液轉(zhuǎn)移至蒸發(fā)皿中，水浴揮干溶劑，加0.01 mo1/L鹽酸5 mL使其完全溶解，過濾，即得。

2.1.3 測定波長選擇 掃描鹽酸罌粟堿對照品溶液和純化后綠絨蒿總生物堿的紫外光譜圖，并結(jié)合文獻，確定以其最大吸收波長416 nm為檢測波長。2.1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密吸取鹽酸罌粟堿對照品溶液1.0、2.0、4.0、5.0、6.0 mL，分別置于分液漏斗中，加醋酸鹽緩沖液5.0 mL、溴甲酚綠2.0 mL搖勻，再加氯仿16 mL充分振搖，靜置，分取氯仿層，在416 nm處測定其吸光度，再以0.01 mo1/L鹽酸同法作空白對照。以罌粟堿濃度（x）為橫坐標(biāo)，吸光度（A）為縱坐標(biāo)繪圖，結(jié)果在3.85～23.10 μg/mL范圍內(nèi)，兩者呈良好的線性關(guān)系，回歸方程A=0.032 3x+0.026 3，r= 0.998 5。

2.1.5 精密度試驗 精密吸取同一供試品溶液0.5 mL，按“2.1.4”項下方法測定吸光度，連續(xù)測定5次。結(jié)果，平均值為0.428，RSD為0.33％，表明儀器精密度良好。

2.1.6 穩(wěn)定性試驗 精密吸取同一供試品溶液0.5 mL，按“2.1.4”項下方法分別于0、2、4、6、20 h測定吸光度。結(jié)果，RSD為1.95％，表明樣品溶液在20 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.1.7 重復(fù)性試驗 精密稱取5份樣品，按“2.1.2”項下方法制備供試品溶液，“2.1.4”項下方法測定吸光度。結(jié)果，RSD為2.30％，表明該方法重復(fù)性良好。

2.1.8 加樣回收率試驗 精密稱定含有量已知的樣品1 g，共6份，分別加入鹽酸罌粟堿對照品溶液，按“2.1.2”項下方法制備供試品溶液，“2.1.4”項下方法測定吸光度。結(jié)果，平均回收率為97.49％，RSD為2.25％，表明加樣回收率良好。

2.1.9 樣品中總生物堿含有量的測定 精密吸取樣品溶液1.0 mL，于蒸發(fā)皿中水浴揮干溶劑，加0.01 mo1/L鹽酸5.0 mL使其完全溶解，過濾，精密吸取4.0 mL，按“2.1.4”項下方法測定吸光度，代入回歸方程，計算總生物堿含有量，得五脈綠絨蒿粗提液中總生物堿的質(zhì)量濃度為10.18 μg/mL。

2.2 大孔吸附樹脂純化五脈綠絨蒿總生物堿的工藝研究

2.2.1 五脈綠絨蒿粗總生物堿溶液的制備［3-4］稱取五脈綠絨蒿粗粉200 g，95％乙醇回流提取2次（第1次1 000 mL，浸漬12 h，回流1.5 h；第2次800 mL，回流1 h），濾過，合并濾液，減壓回收溶劑，轉(zhuǎn)移至蒸發(fā)皿，蒸干至無醇味。殘留物用石油醚振搖脫脂后，加0.01 mo1/L鹽酸溶液100 mL溶解，并調(diào)pH值至2～3，過濾，濾液加濃氨水調(diào)pH值至9～10，再用氯仿萃取數(shù)次，合并氯仿層，回收溶劑，殘留物即為五脈綠絨蒿總生物堿，加水?dāng)嚢柘♂屩?00 mL，備用。

2.2.2 樹脂的預(yù)處理［4-6］分別取NKA-9、D101、AB-8、DM-301、HPD-100 5種型號大孔樹脂，95％乙醇浸泡24 h，使其充分溶脹，再用95％乙醇洗至流出液加適量蒸餾水時，無白色渾濁現(xiàn)象，最后用蒸餾水洗至水液澄清無醇味，備用。

2.2.3 樹脂型號對五脈綠絨蒿總生物堿富集的影響［4-5］分別準(zhǔn)確稱取預(yù)處理好的5種型號大孔吸附樹脂3份，每份2 g，置于具塞錐形瓶中，加入總生物堿質(zhì)量濃度為10.18 μg/mL的綠絨蒿提取液10.0 mL，25℃下振搖吸附12 h，再靜置吸附12 h，使其達到飽和吸附，過濾，適量蒸餾水沖洗樹脂，合并濾液，水浴蒸干，殘留物加0.01 mo1/L鹽酸5.0 mL以使其完全溶解，過濾，精密吸取濾液2.0 mL，按“2.1.4”項下方法測定吸光度，并計算其總生物堿含有量和比吸附量。

取上述吸附已達飽和并沖洗濾出的樹脂，再加入95％乙醇50 mL進行解吸，25℃下振搖12 h，再靜置12 h，吸取上層液5.0 mL，水浴蒸干，殘留物加0.01 mo1/L鹽酸5.0 mL使其完全溶解，過濾，精密吸取2.0 mL，按“2.1.4”項下方法測定其吸光度，計算解析液中總生物堿含有量和解析率，結(jié)果見表1、圖1，計算公式如下。

比吸附量（μg/g）=（C0-Ce）×V/m；比解吸量（μg/g）=C1V/m；解吸附率（％）=比解吸量/比吸附量×100％。其中，C0為起始質(zhì)量濃度，Ce為平衡質(zhì)量濃度，V為溶液體積，m為樹脂質(zhì)量，C1為解吸液濃度。

由表1和圖1可知，5種大孔吸附樹脂的比吸附量按大小，依次為AB-8＞D-101＞NKA-9＞DM-301＞HPD-100；解吸率按大小，依次為AB-8＞D-101＞NKA-9DM-301＞HPD-100。而且，AB-8型樹脂的比吸附量為44.15 μg/g、吸附率為86.74％，比解吸量為10.35 μg/g，解吸率為91.39％。由于吸附解吸性能最好，因此選擇AB-8型樹脂。

表1　樹脂型號對綠絨蒿總生物堿富集的影響（n=3）Tab.1 Effects ofmacroporous resin types on the purification of total alkaloids from Meconopsis quintuplinervia Regel（n=3）

圖1　樹脂型號對五脈綠絨蒿總生物堿富集的影響Fig.1 Effects of macroporous resin types on the purification of total alkaloids from Meconopsis quintuplinervia Regel

2.2.4 靜態(tài)吸附時間和靜態(tài)解吸時間對五脈綠絨蒿總生物堿富集的影響［6-7］精密稱取預(yù)處理的AB-8型大孔吸附樹脂4 g，置于具塞磨口錐形瓶中，精密加入總生物堿質(zhì)量濃度為10.18 μg/mL的綠絨蒿提取液40.0 mL，25℃下靜置，進行吸附。然后，分別在1、2、4、6、8、10、12、24 h時吸取上清液2.0 mL，水浴蒸干，殘渣加0.01 mo1/L鹽酸5.0 mL使其完全溶解，過濾，精密吸取4.0 mL，按“2.1.4”項下方法測定其吸光度，計算上清液中殘留總生物堿含有量，并換算成在t時刻內(nèi)AB-8型樹脂對綠絨蒿總生物堿的比吸附量，結(jié)果見表2。再以比吸附量（μg/g）對時間t（h）作圖，得到AB-8型大孔吸附樹脂的靜態(tài)吸附動力學(xué)曲線，見圖2。

將吸附24 h后的樹脂過濾，蒸餾水沖洗，加入95％乙醇50 mL進行解吸，25℃下靜置，1、2、 4、6、8、10、12、24 h時吸取上清液2.0 mL，過濾，蒸干，加0.01 mo1/L鹽酸5.0 mL使其完全溶解，過濾，精密吸取4.0 mL，按“2.1.4”項下方法測定其吸光度，并計算總生物堿含有量，計算在t時刻內(nèi)AB-8型樹脂的比解吸量，結(jié)果見表2。以比解吸量（μg/g）對時間t（h）作圖，得到AB-8型樹脂的靜態(tài)解吸附動力學(xué)曲線，見圖3。

由圖2和圖3可知，AB-8型大孔吸附樹脂靜態(tài)吸附過程中的比吸附量在8 h后增加緩慢，基本達到平衡，而在靜態(tài)解吸過程中的比解吸量在10 h后基本達到平衡。結(jié)合實際工業(yè)生產(chǎn)情況，選擇靜態(tài)吸附時間為10 h，解吸時間也為10 h。

表2　AB-8型大孔吸附樹脂靜態(tài)吸附-解吸附動力學(xué)曲線數(shù)據(jù)（n=3）Tab.2 Data of the kinetic curve of static adsorption and desorption for AB-8 macroporous resin（n=3）

圖2　AB-8型大孔吸附樹脂的靜態(tài)吸附動力學(xué)曲線Fig.2 K inetic curve of static adsorption for AB-8 macroporous resin

圖3　AB-8型大孔吸附樹脂的靜態(tài)解吸附動力學(xué)曲線Fig.3 K inetic curve of static desorp tion for AB-8 macroporous resin

2.2.5 解吸劑濃度對五脈綠絨蒿總生物堿富集的影響［8-9］準(zhǔn)確稱取預(yù)處理的AB-8型樹脂2 g，置于具塞磨口錐形瓶中，加入總生物堿質(zhì)量濃度為10.18 μg/mL的五脈綠絨蒿提取液10.0 mL，25℃下靜置吸附10 h，過濾，蒸餾水沖洗，合并濾液，水浴蒸干。殘留物加0.01 mo1/L鹽酸5.0 mL使其完全溶解，過濾，精密吸取4.0 mL，按“2.1.4”項下方法測定其吸光度，并計算其總生物堿含有量和比吸附量。

取上述各吸附已達飽和并沖洗過濾的樹脂，分別加入100％、90％、80％、70％、60％、50％的乙醇50 mL進行解吸，25℃下靜置10 h，過濾，濾液蒸干，殘留物加0.01 mo1/L鹽酸5.0 mL使其完全溶解，過濾，精密吸取4.0 mL，按“2.1.4”項下方法測定其吸光度，并計算其總生物堿含有量和比解吸量，考察其解吸率，結(jié)果見表3、圖4。

由表3和圖4可知，80％以上乙醇水溶液的吸附、解吸附效果較好，解吸率可達90.29％。同時，考慮到隨著解吸劑體積分數(shù)的增加，解吸下的雜質(zhì)也會增多，因此選擇80％的乙醇溶液作為解吸劑較合理。

表3　解吸劑濃度對五脈綠絨蒿總生物堿富集的影響（n=3）Tab.3 Effects of strippant concentrations on the purification of total alkaloids from Meconopsis quintuplinervia Regel（n=3）

圖4　解吸劑濃度對五脈綠絨蒿總生物堿富集的影響Fig.4 Effects of strippant concentrations on the purification of total alkaloids from Meconopsis quintuplinervia Regel

2.2.6 藥液質(zhì)量濃度對綠絨蒿總生物堿富集的影響［4，9］精密稱取15份已預(yù)處理好的AB-8樹脂，每份2 g，分別精密加入總生物堿質(zhì)量濃度為20.36、10.18、6.75、5.09、4.07 μg/mL的綠絨蒿提取液10.0 mL，平行3份，靜置吸附10 h，過濾，蒸餾水沖洗，合并濾液，水浴蒸干，殘留物加0.01 mo1/L鹽酸5.0 mL使其完全溶解，過濾，精密吸取4.0 mL，按“2.1.4”項下方法測定其吸光度，并計算比吸附量和吸附率，結(jié)果見表4、圖5。由表4和圖5可知，當(dāng)上樣液質(zhì)量濃度為6.75～10.18 μg/mL時，吸附率較好，因此選擇吸附質(zhì)量濃度6.5～10.0 μg/mL范圍內(nèi)均可。

表4　藥液質(zhì)量濃度對五脈綠絨蒿總生物堿富集的影響（n=3）Tab.4 Effects of soup concentrations on the purification of total alkaloids from Meconopsis quintuplinervia Regel（n=3）

圖5　藥液質(zhì)量濃度對五脈綠絨蒿總生物堿富集的影響Fig.5 Effects of soup concentrations on the purification of total alkaloids from Meconopsis quintuplinervia Regel

2.2.7 動態(tài)解吸洗脫液體積流量的選擇［10-11］精密稱取9份已預(yù)處理好的AB-8樹脂，每份10 g，濕法裝柱，加入五脈綠絨蒿總生物堿含有量為10.18 μg/mL的上柱液20.0 mL，交換吸附10 h，平行3份。吸附飽和后，蒸餾水洗至無色，分別調(diào)節(jié)體積流量為0.5、1.0、1.5 mL/min，收集溶液，過濾，水浴蒸干，加0.01 mo1/L鹽酸5.0 mL使其完全溶解，過濾，精密吸取4.0 mL，按“2.1.4”項下方法測定其吸光度，并計算其總生物堿含有量和比吸附量。

取蒸餾水洗至無色的樹脂，90％乙醇40 mL解吸，分別調(diào)節(jié)體積流量為0.5、1.0、1.5 mL/min，收集洗脫液，過濾，水浴蒸干，加0.01 mo1/L鹽酸5.0 mL使其完全溶解，過濾，精密吸取4.0 mL，按“2.1.4”項下方法測定其吸光度，并計算其總生物堿含有量和比解吸量，考察其解吸率，結(jié)果見表5、圖6。

由表5和圖6可知，在動態(tài)解吸過程中，洗脫液體積流量在0.5～1.0 mL/min時，解吸率達80％以上，總生物堿吸附和解吸效果均較好；但再降低體積流量時，吸附量并沒有明顯提高，說明體積流量過快時，化學(xué)成分還未被樹脂完全吸附便已流出色譜柱，但過慢則會延長操作周期。同時，考慮到實際生產(chǎn)情況，選擇流量為1.0 mL/min。

表5　洗脫液流量對五脈綠絨蒿總生物堿富集的影響（n= 3）Tab.5 Effects of strippant flow rates on the purification of total alkaloids from Meconopsis quintuplinervia Regel（n=3）

圖6　洗脫液流量對五脈綠絨蒿總生物堿富集的影響Fig.6 Effects of strippant flow rates on the purification of total alkaloids from Meconopsis quintuplinervia Regel

2.3 驗證性試驗 取已處理好的AB-8樹脂30 g裝柱，量取總生物堿質(zhì)量濃度為10.18 μg/mL的五脈綠絨蒿提取液100 mL上樣，吸附10 h。先用蒸餾水以1.0 mL/min的體積流量洗滌至洗脫液無色，再用90％乙醇以1.0 mL/min的體積流量洗脫，洗脫液用量為500 mL，收集洗脫液，回收溶劑，蒸干，殘渣加蒸餾水100 mL溶解定容。

再精密吸取1.0 mL至蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，殘渣加0.01 mo1/L鹽酸5.0 mL使其完全溶解，過濾，精密吸取4.0 mL，按“2.1.4”項下方法測定其吸光度，并計算其總生物堿含有量（μg/mL）。另外，分別精密吸取上述經(jīng)樹脂純化處理并蒸干重新溶解的溶液25 mL，以及未經(jīng)樹脂純化的原提取液25 mL，蒸干，稱定質(zhì)量，計算浸膏中總生物堿含有量（μg/g），結(jié)果見表6。

表6　大孔樹脂純化五脈綠絨蒿中總生物堿的驗證試驗（n=3）Tab.6 Verification tests for the purification of total alkaloids from Meconopsis quintuplinervia Regel by macroporous resin （n=3）

由表可知，AB-8大孔樹脂純化綠絨蒿中總生物堿后，所得干浸膏中總生物堿的含有量由172.34 μg/g提高到412.32 μg/g，純度提高了2.39倍，回收率為79.88％。

3 討論

現(xiàn)有的消炎止痛藥大多主要作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，緩解疼痛的作用較強，但其大部分藥物反復(fù)應(yīng)用易于成癮，本課題組期望從植物藥中尋找出一種不會成癮、療效安全、質(zhì)量可控的新型消炎止痛藥物。經(jīng)初步研究，綠絨蒿屬藏藥在消炎止痛方面有其獨特的療效，極有希望開發(fā)成為新型的消炎止痛藥。本課題組前期已通過耳廓腫脹法、腹腔毛細血管通透性實驗及醋酸致小鼠扭體實驗，追蹤研究了五脈綠絨蒿活性部位，結(jié)果顯示其原生藥中所含的總生物堿與總黃酮均有一定的抗炎鎮(zhèn)痛作用，而且前者鎮(zhèn)痛作用明顯優(yōu)于后者［10-11］。為了更好地深入研究五脈綠絨蒿總生物堿抗炎鎮(zhèn)痛作用機制及量效關(guān)系，必須對其進行有效的純化富集。

大孔吸附樹脂具有較好的吸附性能，而且理化性質(zhì)穩(wěn)定，不溶于酸、堿及有機溶劑，對有機物的選擇性較好，不受無機鹽類及強離子低分子化合物存在的影響，解吸容易，再生簡單，使用壽命長［12-13］。該填料為吸附和篩選原理相結(jié)合的分離材料，對化學(xué)成分有選擇性吸附，其吸附作用是通過表面吸附、表面電性或形成氫鍵所產(chǎn)生的，吸附過程主要是被吸附物通過樹脂孔徑進入樹脂內(nèi)部，被樹脂的內(nèi)表面選擇性吸附，所以樹脂的比表面積、極性及孔徑、成分分子量等是影響吸附效果的主要因素［14-15］，只有合適的孔徑和性質(zhì)，被吸附物才能進入樹脂并被有選擇性地吸附。因此，不同型號的大孔樹脂對不同成分的吸附與解吸能力存在較大差別，應(yīng)從吸附性能、經(jīng)濟性及生產(chǎn)的實用性等方面綜合評價，選擇樹脂型號。此外，其純化效果與吸附時間、解吸時間、解吸劑體積分數(shù)、上樣液質(zhì)量濃度、流量等因素均有關(guān)系，需進行系統(tǒng)考察［14-15］。

在本實驗中，所需要富集的是五脈綠絨蒿中的總生物堿部位，在提取過程中，采用堿溶處理方法，將生物堿以游離態(tài)提取出來。再以吸附率、解吸率等為指標(biāo)，考察對比了5種樹脂，結(jié)果發(fā)現(xiàn)AB-8型樹脂對五脈綠絨蒿總生物堿吸附解吸的性能最好，因此選擇AB-8型樹脂。靜態(tài)吸附和解吸附的動力學(xué)曲線顯示，靜態(tài)吸附8 h及解吸10 h后基本達到平衡，結(jié)合實際工業(yè)生產(chǎn)情況，選擇吸附和解吸時間均為10 h。大孔吸附樹脂常用的解吸劑是不同體積分數(shù)的乙醇，本實驗考察了100％、90％、80％、70％、60％、50％這6種不同體積分數(shù)乙醇的解吸效果，結(jié)果顯示80％以上乙醇解吸效果均較好，解吸率可達90％，考慮到隨著解吸劑濃度的增加，解吸出的雜質(zhì)可能也會增多，故選擇80％的乙醇溶液作為解吸劑較合理。解吸劑流量過快，則化學(xué)成分還未被樹脂完全吸附便流出色譜柱，但過慢則會延長操作周期，實驗發(fā)現(xiàn)，1 mL/min左右的流量較為適宜。上樣液質(zhì)量濃度過高，則溶液過于黏稠，會在樹脂顆粒表面形成粘性吸附，嚴(yán)重影響吸附效果；上樣液質(zhì)量濃度過低，則待吸附成分分散在大量溶劑中，減少了與大孔樹脂接觸吸附的時間，吸附效果也會受到影響。實驗顯示，上樣液質(zhì)量濃度為6.5～10.0 μg/mL均可。

經(jīng)AB-8大孔樹脂純化后，所得干浸膏中五脈綠絨蒿總生物堿純度提高了2.39倍，回收率為79.88％，所得純化物更容易干燥處理，干浸膏黏度和吸濕性均降低，說明通過AB-8大孔樹脂純化富集后，除去了較多的多糖、蛋白質(zhì)等成分，提高了提取物中總生物堿的含有量，使藥效成分得到有效富集，為藏藥五脈綠絨蒿活性部位總生物堿提取物的內(nèi)在質(zhì)量提高提供了科學(xué)方法，也為后期相應(yīng)的新藥開發(fā)研究提供了研究基礎(chǔ)。

參考文獻：

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［質(zhì) 量］

*通信作者：郭 玫，女，教授，碩士生導(dǎo)師，從事中藥有效成分與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。Te1：（0931）8765394，E-mai1：guomeig@sina.com

作者簡介：孫政華（1989—），男（苗族），碩士，從事中藥有效成分與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。Te1：（0931）8765394，E-mai1：412124387@ qq.com

基金項目：甘肅省中醫(yī)藥管理局基金項目（GZK-2008-31）；甘肅省中醫(yī)藥英才基金項目（GZK-2010-52）

收稿日期：2015-09-01

doi：10.3969/j.issn.1001-1528.2016.01.016

中圖分類號：R284.2

文獻標(biāo)志碼：A

文章編號：1001-1528（2016）01-0077-07