王麗娟　托婭

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外周血中性粒細胞CD64在細菌感染性疾病中的臨床研究新進展

王麗娟托婭

【摘要】外周血中性粒細胞CD64用于鑒別診斷細菌感染性疾病越來越受到臨床的廣泛關(guān)注。研究表明，中性粒細胞CD64檢測不僅有助于細菌感染的早期診斷，對感染嚴重程度的評估及預后判斷也有重要意義。隨著中性粒細胞CD64檢測在臨床應用中的不斷拓展，中性粒細胞CD64逐漸成為臨床抗生素治療效果的評估手段。本文就近年來其在細菌感染性疾病中的臨床應用研究做一綜述。

【關(guān)鍵詞】生物標志物；中性粒細胞CD64；流式細胞術(shù)；感染；膿毒癥

人體的免疫反應在促炎－抗炎反應機制之間具有高度復雜的動態(tài)平衡關(guān)系，且涉及細胞和細胞因子。當免疫系統(tǒng)被激活，例如細菌感染時，免疫反應與促炎－抗炎反應處于平衡且同步發(fā)生的狀態(tài)。在全身性炎癥反應綜合征（systemic inflammatory response syndrome，SIRS），即膿毒癥時，免疫系統(tǒng)受到過度刺激導致機體內(nèi)促炎－抗炎自穩(wěn)失衡，大量分泌的促炎性細胞因子會導致白細胞過度活化，釋放裂解酶和毒性自由基，造成內(nèi)皮細胞損傷，血管通透性增加，發(fā)生循環(huán)障礙，最終引起多器官功能衰竭。過度抗炎反應會引起免疫抑制，這使得患者更容易出現(xiàn)繼發(fā)感染［1］。

SIRS不僅由感染引起，嚴重創(chuàng)傷或燒傷、手術(shù)、胰腺炎以及缺血－再灌注等多種因素也可以誘發(fā)SIRS。由細菌感染引發(fā)的SIRS患者，可能會進一步發(fā)展為嚴重SIRS、感染性休克，最終導致死亡［2］。盡管抗生素的應用已較為普遍，但SIRS患者的病死率仍然很高，有研究［3］顯示SIRS患者病死率高達50%。造成高病死率的一個主要原因是錯過最佳的治療時機，造成了不可逆損傷。因此，對于SIRS患者，抗生素的早期治療可以增加生存機率。

目前，診斷SIRS的金標準仍然是血培養(yǎng)［4］。然而血培養(yǎng)耗時較長、陽性率較低，無法及時提供早期的診斷依據(jù)。在此期間，感染患者的病情可能迅速惡化。因此，在血培養(yǎng)結(jié)果報告之前，臨床醫(yī)生往往選擇廣譜抗生素用于治療。然而，非細菌感染的患者使用抗生素不僅會增加細菌耐藥性的出現(xiàn)，而且會產(chǎn)生昂貴的醫(yī)療費用，增加患者的負擔。因此，臨床醫(yī)生需要一種能夠快速可靠地檢測SIRS及其相關(guān)感染的生物標志物，用于及早判斷是否應用抗生素治療。

1　中性粒細胞CD64的生物學特性

中性粒細胞CD64是近年來新發(fā)現(xiàn)的一項針對細菌感染的特異性指標。CD64是免疫球蛋白超家族成員IgG Fc受體之一，又稱FcγRⅠ，是唯一的高親和力受體，可以結(jié)合單體的IgG1和IgG3。主要表達于單核細胞、巨噬細胞及樹突狀細胞表面，其表達受細胞因子的調(diào)控，對體液免疫和細胞免疫有重要的調(diào)節(jié)作用。正常情況下，外周血中性粒細胞表面CD64呈低水平表達，當受到細菌細胞壁成分脂多糖的刺激后（即發(fā)生感染時），4－6 h之內(nèi)外周血中性粒細胞CD64在促炎細胞因子的作用下會明顯升高，可高達10倍以上，因此可作為細菌感染的早期檢測指標［5－8］。

2　中性粒細胞CD64的檢測方法

流式細胞儀是目前檢測中性粒細胞CD64的首選方法。早期的研究者采用密度梯度離心法分離細胞后通過間接免疫熒光法檢測CD64的表達。如今，幾乎所有的研究者均采用直接免疫熒光法檢測全血中性粒細胞CD64的熒光強度，少數(shù)研究者直接用熒光強度的百分比進行比較，或根據(jù)其淋巴細胞CD64的熒光強度進行計算，從而得出中性粒細胞CD64指數(shù)的大小。

3　中性粒細胞CD64的臨床診斷效能

3.1中性粒細胞CD64對于成人SIRS的診斷效能Wang等［9］進行了一項薈萃分析，通過檢索PubMed、EMBASE、ISI、Web of Knowledge等數(shù)據(jù)庫，選取了符合納入標準的8項研究共1986例患者，最后進行分析歸納、總結(jié)得出中性粒細胞CD64的表達對于細菌感染的早期診斷是很有價值的生物標志物。在成年SIRS患者的診斷中，其敏感性和特異性分別為76%和85%。陽性似然比、陰性似然比和診斷比值比分別為8.15、0.16和60.41，受試者工作特征曲線下面積為0.95。由此得出CD64表達可作為SIRS早期診斷有效的生物標志物，但檢測結(jié)果不能單獨作為診斷指標，而應結(jié)合病史、體格檢查及其他檢查結(jié)果綜合判斷。

Livaditi等［10］選取47例成人重癥SIRS患者進行前瞻性研究，測定其中性粒細胞CD64（同時還測定了其他臨床常用的生物標志物）在SIRS發(fā)病24 h內(nèi)的表達水平。結(jié)果顯示，與健康對照組比較，CD64表達水平明顯升高，且隨著其嚴重程度的增加而不斷上升。受試者工作特征曲線分析顯示其具有較高的靈敏度和特異性。此外，CD64表達增加與28 d病死率顯著相關(guān)，說明中性粒細胞CD64指數(shù)能夠可靠地評估病程階段，以及疾病嚴重程度，預測SIRS的28 d病死率。

Icardi等［11］曾對109例患者進行了為期2個多月的監(jiān)測，同時檢測外周血中性粒細胞CD64指數(shù)并進行細菌培養(yǎng)。研究發(fā)現(xiàn)，CD64指數(shù)的預測值≤1.19時血培養(yǎng)結(jié)果陰性；CD64指數(shù)的預測值＞1.19時血培養(yǎng)和／或其最終的臨床診斷結(jié)果陽性。CD64診斷的敏感性和特異性分別為94.6%和88.7%，陽性預測值和陰性預測值分別為89.8%和94%。這進一步證明了CD64對于細菌感染的早期診斷價值。Cid等［6］在最近的一項薈萃分析中指出，CD64作為SIRS的診斷標志物其敏感性為79%，特異性達91%。

雖然大多數(shù)研究都是在較小的患者群體中進行，且研究方法尚需進一步完善，但研究結(jié)果還是比較一致的。幾乎所有相關(guān)研究均得出如下結(jié)論，CD64的表達對于細菌感染具有相對特異性，可將其應用于SIRS的診斷中。

3.2中性粒細胞CD64對于新生兒及兒童SIRS的診斷效能新生兒SIRS在某些方面不同于成人SIRS，臨床癥狀通常比成人更輕，特異性不明顯，臨床評分系統(tǒng)無明顯的優(yōu)勢，傳統(tǒng)的實驗室檢測診斷性能差［12，13］。因此，將中性粒細胞CD64作為新生兒及兒童SIRS診斷的生物標志物單獨討論是必要的。據(jù)報道［14，15］，健康新生兒中性粒細胞CD64較成年人有較高的表達水平，這可能會影響檢測的診斷效能。

邵潔等［16］對89例疑似SIRS患兒進行研究，根據(jù)其臨床表現(xiàn)、血培養(yǎng)及5項非特異性指標［白細胞（white blood cell，WBC）、血小板、血漿C反應蛋白（C reactive protein，CRP）、微量血沉、未成熟中性粒細胞與中性粒細胞總數(shù)比值］，分為SIRS組和非SIRS感染組，同時設對照組，采用流式細胞儀對所有患兒的外周血中性粒細胞CD64的表達進行檢測，結(jié)果顯示，中性粒細胞CD64對兒童SIRS診斷的敏感性為97.4%，特異性為84.0%，陽性預測值為82.6%，陰性預測值為97.6%。CD64檢測的陽性率為62.9%，高于血培養(yǎng)和5項非特異性指標的陽性率。由此可見，外周血中性粒細胞CD64測定可作為新生兒SIRS早期診斷的指標，并可以判斷療效。

Streimish等［17］對中性粒細胞CD64指數(shù)在新生兒SIRS診斷價值的研究顯示，對于早發(fā)性SIRS，當CD64指數(shù)的cutoff值為2.38時，其敏感性、特異性和陰性預測值分別為100%，68%和100%；對于遲發(fā)性SIRS，當CD64指數(shù)的cutoff值為3.62時，其敏感性、特異性和陰性預測值分別為75%，77%和96%。說明中性粒細胞CD64指數(shù)可作為診斷新生兒SIRS的一項有價值的生物標志物。

Gámez－Díaz等［18］進行的一項大樣本的研究顯示，成人、新生兒及兒童的CD64指數(shù)的敏感性與特異性差異無統(tǒng)計學意義，說明中性粒細胞CD64作為一項診斷SIRS的生物標志物，在成人、新生兒及兒童中均適用。

4　中性粒細胞CD64在鑒別診斷中的價值

多項研究［5，8，19，20］均證明中性粒細胞CD64對于鑒別診斷細菌感染與病毒、真菌及支原體等非細菌感染性疾病具有較高的敏感性和特異性。章洪院等［21］回顧性分析了64例能找到病原學依據(jù)的社區(qū)獲得性肺炎患者，其中細菌性肺炎患者30例，肺炎支原體肺炎患者34例，同時選擇30例健康者為對照組，測定CD64、降鈣素原、超敏CRP及WBC。得出細菌性肺炎組CD64、降鈣素原、超敏CRP及WBC的檢測結(jié)果均高于肺炎支原體肺炎組及對照組，差異均具有統(tǒng)計學意義（P均＜0.05）。孫麗等［22］進行了相同的研究，得出CD64診斷細菌性肺炎的敏感性為84%，特異性為91%，CRP診斷細菌性肺炎的敏感性為89%，特異性為78%，說明CD64可作為細菌性感染和非細菌性感染鑒別診斷的指標。

盧小嵐等［23］將61例感染發(fā)熱患者以白細胞分類和病原體分離培養(yǎng)結(jié)果為依據(jù)分為細菌感染組32例和病毒感染組29例，隨機選擇同期的健康體檢者29例作為正常對照組；采用流式細胞術(shù)檢測外周血中性粒細胞CD64的熒光強度并計算CD64指數(shù)，細菌感染組CD64指數(shù)為（4.33±2.24），明顯高于病毒感染組（2.83±1.36）和正常對照組（1.96±0.24）。

5　中性粒細胞CD64對病情嚴重程度及預后判斷的價值

所起鳳等［24］對103例重癥感染患者的研究顯示，SIRS患者的CD64指數(shù)最高，且明顯高于局部細菌感染患者，對細菌感染患者行抗生素治療后，CD64指數(shù)明顯低于治療前，且差異有統(tǒng)計學意義。馮萍、蔡鵬威等［8，25］多位研究者也做過類似的研究，證明CD64不僅可作為細菌感染患者的早期診斷指標，對于其病情嚴重程度及預后判斷也是可靠的指標。

6　展望

在目前發(fā)現(xiàn)的診斷細菌性感染的眾多生物標志物中，中性粒細胞CD64是一個比較新穎且可靠的生物標志物。中性粒細胞CD64的檢測有助于細菌感染的早期診斷、鑒別診斷、疾病嚴重程度的評估以及預后判斷。中性粒細胞CD64指數(shù)水平可幫助臨床排除及初步判斷不明原因發(fā)熱患者感染的病原體種類，且較細菌感染檢測的金標準—細菌培養(yǎng)可有效縮短檢測時間，并指導臨床合理使用抗生素，降低因抗生素的不合理使用而導致的細菌耐藥性及多重耐藥菌株的出現(xiàn)。加之采用先進的流式細胞術(shù)檢測技術(shù)，可保證檢測結(jié)果的準確性，相信隨著對中性粒細胞CD64研究的不斷完善，其終將成為臨床上更加方便而準確的診斷細菌感染性疾病的生物標志物。

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（本文編輯：李霦）

綜述

收稿日期：（2015－12－29）

doi：10.3969／j.issn.1674－7151.2016.01.013

通訊作者：托婭，E－mail：antuoya＠163.com

基金項目：內(nèi)蒙古自治區(qū)自然科學基金（2014MS0854）；內(nèi)蒙古醫(yī)科大學附屬醫(yī)院重大科研項目（NYFY－ZD2012015）
作者單位：010050呼和浩特市，內(nèi)蒙古醫(yī)科大學附屬醫(yī)院檢驗科