胡方方 郝林 曹義娟 顧娟 劉小燕 楊亞茹 韓從輝

徐州市中心醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心，東南大學(xué)（徐州）生殖醫(yī)學(xué)研究所（江蘇徐州 221009）

XYY綜合征一例報(bào)告并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)*

胡方方 郝林 曹義娟 顧娟 劉小燕 楊亞茹 韓從輝**

徐州市中心醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心，東南大學(xué)（徐州）生殖醫(yī)學(xué)研究所（江蘇徐州 221009）

XYY綜合征（XYY syndrome）又名超雄綜合征，系染色體數(shù)為47條，性染色體為XYY、常染色體正常的疾病。XYY綜合征于1961年由Sandberg等首先報(bào)道。本文回顧分析一例XYY綜合征患者的臨床資料，并結(jié)合國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)對(duì)其臨床特征、子代遺傳、合并不育的治療等進(jìn)行分析與討論，為該綜合征的診斷和治療提供一定的依據(jù)。

資料與方法

一、臨床資料

患者，王某某，男，28歲，以“結(jié)婚5年，未避孕未孕”為主訴就診?；颊呓Y(jié)婚6年，夫妻同居，性生活正常，非近親結(jié)婚，表型均正常。該患者系第1胎第1產(chǎn)，無(wú)長(zhǎng)時(shí)間與放射物質(zhì)、化學(xué)物質(zhì)、有毒有害物質(zhì)接觸史，父母非近親結(jié)婚?；颊卟轶w：身高183cm，體質(zhì)量76kg，發(fā)育良好，反應(yīng)一般，性格內(nèi)向，智力正常，無(wú)暴力行為，心肺正常，耳位及大小均正常，無(wú)漏斗胸，無(wú)翼狀肩，體態(tài)瘦長(zhǎng)。男科檢查：陰毛呈男性型分布，雙側(cè)精索靜脈未觸及曲張。患者妻子曾生化妊娠一次，后一直未避孕未孕，后行兩次夫精宮腔內(nèi)人工授精，未孕。

二、輔助檢查

按照世界衛(wèi)生組織（WHO）第五版精液常規(guī)檢查提示：2011年10月份檢測(cè)精液體積為3.9mL，pH6.5，精子濃度51.3×106/mL（參考值為大于15×106/mL），前向運(yùn)動(dòng)精子（PR）百分率為6.6%（參考值為大于32%），非前向運(yùn)動(dòng)精子（NP）百分率為43.8%，不運(yùn)動(dòng)精子（IM）百分率為49.5%，總活力（PR+ NP）百分率為50.4%（參考值為大于40%），精子總數(shù)為200.1×106（參考值為39×106/每次射精）。2013年11月份檢測(cè)精液結(jié)果提示：精液體積為2.0mL，pH7.0，精子濃度165.9×106/mL（參考值為大于15×106/mL），前向運(yùn)動(dòng)精子（PR）百分率為5.0%（參考值為大于32%），非前向運(yùn)動(dòng)精子（NP）百分率為3%，不運(yùn)動(dòng)精子（IM）百分率為95%，總活力（PR+NP）百分率為8%（參考值為大于40%）。免疫血清學(xué)檢查提示抗精子抗體測(cè)定為陰性。生殖性激素測(cè)定結(jié)果為：促黃體生成素3.56 mIU/ mL（參考值為1.5～9.3 mIU/mL），促卵泡生成素3.66 mIU/mL（參考值為1.4～18.1 mIU/mL），雌二醇20.00 pg/mL（參考值為0～54 pg/mL），垂體泌乳素8.9 ng/ mL（參考值2.1～17.7ng/mL），睪酮378.85 ng/mL（參考值241～827 ng/mL）。

二、臨床檢測(cè)

1．細(xì)胞遺傳學(xué)檢測(cè)：取夫妻雙方外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)，常規(guī)G顯帶制備染色體，油鏡下計(jì)數(shù)分析100個(gè)核型，美國(guó)自然基因有限公司（Nature Gene Corporation）的VIDEO TEST karyo3.0染色體核型分析軟件分析100個(gè)核型。根據(jù)國(guó)際人類染色體命名系統(tǒng)（ISCN）2013分析標(biāo)準(zhǔn)確定染色體核型。

2．Y染色體AZF基因微缺失檢測(cè)：（1）DNA提取 根據(jù)知情同意原則，抽取患者靜脈血2ml，EDTA抗凝，采用全血DNA提取試劑盒進(jìn)行DNA抽提（美國(guó)QIAGEN公司提供），直接用于PCR擴(kuò)增；（2）PCR擴(kuò)增 根據(jù)歐洲生殖協(xié)會(huì)推薦標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行設(shè)計(jì)，運(yùn)用多重 PCR技術(shù)快速檢測(cè)Y染色體AZF基因家族AZFa、AZFb、AZFb/c、AZFc 4個(gè)區(qū)域中的15個(gè)序列標(biāo)簽位點(diǎn)（sequence tagged sites， STS）微缺失（包括由歐洲男科學(xué)會(huì)EAA推薦的6個(gè)STS位點(diǎn)）。每個(gè)樣品需做4個(gè)多重PCR反應(yīng)，第一組包括sY254、sY143、sY242、sY255 4個(gè)位點(diǎn)，第二組包括sY84、sY239、sY152 3個(gè)位點(diǎn)，第三組包括sY86、sY127、sY145、sY124 4個(gè)位點(diǎn)，第四組包括sY134、sY82、sY128、sY133 4個(gè)位點(diǎn)。另外，每組設(shè)置一對(duì)擴(kuò)增SRY基因（位于Y染色體短臂上的性別決定基因）的引物，作為內(nèi)對(duì)照；（3）凝膠電泳分析 按照《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》（第三版）［1］制備 2.0%瓊脂糖凝膠。取10μL PCR 產(chǎn)物直接加入上樣孔進(jìn)行電泳。取出凝膠在凝膠成像分析系統(tǒng)下拍攝結(jié)果。

結(jié) 果

一、G顯帶核型分析為47, XYY

見(jiàn)圖1。

圖1 患者外周血染色體核型分析圖

二、Y染色體AZF基因微缺失檢測(cè)提示患者的AZF基因未見(jiàn)缺失

見(jiàn)圖2。

圖2 AZF缺失檢測(cè)結(jié)果

根據(jù)臨床檢測(cè)診斷患者精子活力較低，且夫精人工授精3次未孕，建議對(duì)女方患者促排卵后行卵胞漿內(nèi)單精子注射術(shù)（intracytoplasmic sperm injection, ICSI）。經(jīng)臨床遺傳咨詢提示，染色體核型為47, XYY的后代有性染色體非整倍體發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，但概率較低，建議行ICSI后再行產(chǎn)前診斷。臨床醫(yī)生同患者談話提出，如果患者臨床妊娠，那么建議其行羊水穿刺進(jìn)行染色體核型分析以確診其染色體核型，如果染色體核型遺傳了父親的XYY，應(yīng)進(jìn)行遺傳咨詢，在患者知情同意的情況下確定是行人工流產(chǎn)還是繼續(xù)受孕。

根據(jù)臨床遺傳咨詢建議，患者于2013年在我院生殖醫(yī)學(xué)中心行ICSI?；颊咝卸绦чL(zhǎng)方案，促性腺激素釋放激素類似物（GnRHa）促排卵9d，女方行多普勒超聲引導(dǎo)下取卵術(shù)，獲卵14枚，經(jīng)透明質(zhì)酸酶液處理后拆除卵母細(xì)胞周圍的顆粒細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)第一極體排出的成熟卵子（MⅡ）有8枚，行ICSI后，有6枚卵子正常受精，取卵后第三天倒置NIKON2000顯微鏡下觀察，根據(jù)1999年Gardner提出的人類胚胎分級(jí)系統(tǒng)評(píng)價(jià)，見(jiàn)5枚胚胎為一級(jí)、二級(jí)和三級(jí)胚胎，1枚胚胎退化。新鮮周期移植2枚胚胎，玻璃化冷凍3枚胚胎。新鮮移植胚胎未見(jiàn)胚胎著床，玻璃化冷凍胚胎解凍第一周期行胚胎移植術(shù)后未見(jiàn)胚胎著床，第二周期行胚胎解凍移植后12d，血人絨毛促性腺激素結(jié)果為5.11 mIU/mL（參考值為＜3 mIU/mL），為生化妊娠。

而后因經(jīng)濟(jì)問(wèn)題未再行人類輔助生殖技術(shù)，至今未孕。

討 論

XYY綜合征在臨床上比較少見(jiàn)，大約每1000個(gè)新生男性中有1人為47, XYY［2］。XYY綜合征的臨床表現(xiàn)有很大的不同，但歸納起來(lái)主要有身材高大、智力正?；蛴休p度低下、性格孤僻暴躁，偶爾可見(jiàn)隱睪、睪丸發(fā)育不全、精子形成障礙、尿道下裂等。結(jié)合該例患者，其身材高大、性格內(nèi)向以及精液分析異常與文獻(xiàn)報(bào)道相符。

XYY綜合征是一種性染色體非整倍體現(xiàn)象。性染色體非整倍體主要是父源性的，對(duì)活產(chǎn)新生兒及流產(chǎn)胎兒的研究表明，50%的47, XXY、80%的45, X及100%的47, XYY均源自父方［3］。XYY非整倍體的產(chǎn)生大部分為新發(fā)生的突變，即其父親染色體正常，但精原細(xì)胞在進(jìn)行第二次減數(shù)分裂時(shí)受到某種因素影響而造成Y染色體不分離從而形成YY精子，YY精子與正常含X染色體的卵子結(jié)合后形成染色體核型為XYY的患者，亦有很少一部分患者是由其父親染色體核型47, XYY遺傳而來(lái)［4］。

XYY核型理論上可形成4種類型精子：X、Y、XY、YY精子，與正常卵子結(jié)合后可生育出46, XX、46, XY、47, XXY、47, XYY的后代，后代染色體異常發(fā)生率為50%，但臨床上47, XYY后代染色體異常發(fā)生很少報(bào)道，通常為1%或更低?？赡艿慕忉屖?3, X或23, Y相比，24, XY超單倍體（hyperhaploid）少見(jiàn)［5］。

XYY患者的非整倍體后代遠(yuǎn)少于預(yù)期值的原理與在47, XXY或47, XXX中觀察到的一致，文獻(xiàn)中報(bào)道［6］XYY患者精子中的性染色體非整倍體率正常或輕度增高。在已報(bào)道的XYY患者中［2,7］，其中4例XY精子比例增高（0.3～9.37）%，6例YY精子比例增高（0.08～4. 65）%。Milazzo等［8］通過(guò)熒光原位雜交技術(shù)（f l uorescence in situ hybridization, FISH）和原位末端標(biāo)記法（Terminal deoxynu-cleotidyl transferase dUTP nick end labeling, TUNEL）研究證實(shí)XYY患者20 000精子染色體核型發(fā)現(xiàn)僅0.7%的精子染色體異常，XYY男性額外Y染色體在生殖細(xì)胞減數(shù)分裂時(shí)期通過(guò)凋亡而被清除，進(jìn)而可發(fā)育成正常的23, X和23, Y精子。

47, XYY男性通常睪丸大小正常并有正常的外生殖器，本例患者睪丸大小正常并有正常的外生殖器。大約半數(shù)病例有明顯的精子生成抑制；生精小管在組織學(xué)上可能僅由睪丸支持細(xì)胞構(gòu)成，平均血漿睪酮水平正常［9］。本例患者的睪酮水平正常。有學(xué)者通過(guò)對(duì)睪丸組織的超微結(jié)構(gòu)研究檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，生精小管管腔內(nèi)精子數(shù)量少，生精細(xì)胞排列紊亂，生精過(guò)程明顯阻滯［10］。本例患者的精液分析提示患者為重度弱精子癥，XYY患者精子生成障礙可能是額外的Y染色體干擾了精子的生成，從而造成精子數(shù)量低。

47, XYY患者大部分可自然懷孕或體外授精助孕而生育后代。然而，有研究表明47, XYY患者性染色體和常染色體異常率（38%）與正常對(duì)照組（1%）比較明顯增多，而胚胎非整倍體率達(dá)32%，最終導(dǎo)致女性早期復(fù)發(fā)性流產(chǎn)率明顯增加［11］。Martin等對(duì)47, XYY患者進(jìn)行精子FISH研究，發(fā)現(xiàn)XY非整倍體精子較正常對(duì)照組明顯增多，而YY精子增多不明顯，增多的XY精子與正常女性含X染色體的卵子結(jié)合產(chǎn)生XXY核型后代，但此核型僅55.3%可以出生，其余可能表現(xiàn)為流產(chǎn)、死胎等。YY精子與含X染色體的卵子結(jié)合產(chǎn)生XYY核型，但XYY核型后代幾乎100%可以出生［12-14］。

XYY患者不增加其子代性染色體異常的風(fēng)險(xiǎn)，而常染色體發(fā)生次級(jí)不分離的風(fēng)險(xiǎn)卻遠(yuǎn)高于對(duì)照。了解精子染色體情況對(duì)正確評(píng)估生育子代的遺傳風(fēng)險(xiǎn)有重要意義，而外周血染色體核型分析并不能代表精子染色體情況，因此，通過(guò)應(yīng)用FISH技術(shù)分析該類患者的精子染色體，可為評(píng)估其子代染色體異常風(fēng)險(xiǎn)提供客觀的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)［15］。

本例患者進(jìn)行了人類輔助生殖技術(shù)（assisted reproductive technology, ART）的胞漿內(nèi)單精子注射，且形成了5枚胚胎可用，進(jìn)行了兩次移植，一次未妊娠，一次生化妊娠。針對(duì)47, XYY綜合征患者生育子代，應(yīng)積極治療，若藥物治療不能使其懷孕，要借助輔助生殖技術(shù)使其懷孕，治療的同時(shí)要讓患者及時(shí)冷凍精子，以免治療后檢測(cè)不到精子引起不必要的醫(yī)療糾紛，必要時(shí)行胚胎植入前遺傳學(xué)診斷（preimplantation genetic diagnosis, PGD）和產(chǎn)前診斷，提高妊娠率，降低異常風(fēng)險(xiǎn)。47, XYY綜合征表型一般正常，也能夠生育后代，且幼兒期沒(méi)有典型的癥狀，部分因童年或成年語(yǔ)言發(fā)育遲緩或?qū)W習(xí)困難等問(wèn)題就診，臨床上常造成漏診，因此孕期的早期篩查結(jié)合幼兒早期的遺傳檢查對(duì)此類患者具有重要意義［17］。

XYY染色體核型；核型分析

1 薩姆布魯克, D.w.拉塞爾著，黃培堂等譯. 分子克隆實(shí)驗(yàn)指南（第3版）. 北京: 科學(xué)出版社, 2002

2 Martin RH. Cytogenetic determinants of male fertility.Hum Reprod Update2008；14（4）: 379-390

3 Kim IW, Khadilkar AC, Ko EY,et al.47, XYY syndrome and male infertility.Rev Urol2013；15（4）: 188-196

4 齊治平, 董媛, 杜日成, 等. 熒光原位雜交檢測(cè) 47, XYY, inv（9）（p11q12）一例. 中華醫(yī)學(xué)遺產(chǎn)學(xué)雜志 2013；30（4）: 502-503

5 高慶華, 韓春梅, 孫獻(xiàn)瑩. 哺乳動(dòng)物X、Y精子分離研究進(jìn)展. 中國(guó)男科學(xué)雜志 2008；9（10）: 252.

6 Kirkpatrick G, Ferguson KA, Gao H,et al. A comparison of sperm aneuploidy rates between infertile men with normal and abnormal karyotypes.Hum Reprod2008；23（7）: 1679-1683

7 Tempest HG. Meiotic recombination errors, the origin of sperm aneuploidy and clinical recommendations.Syst

Biol Reprod Med2011；57（1-2）: 93-101

8 Milazzo JP, Rives N, Mousset-Siméon N,et al. Chromosome constitution and apoptosis of immature germ cells present in sperm of two 47, XYY infertile male.Hum Reprod2006, 21（7）: 1749-1758

9 Shakkebaek NE, Zeuthen E, Nielsen J,et al. Abnormal spermatogenesis in XYY males:A repoert on 4 cases ascertained through a population study.Fertil Steril1973；24（5）: 390-395

10 劉永章, 周波, 黃學(xué)鋒. 47, XYY綜合征患者精子間質(zhì)核的FISH檢測(cè)及睪丸組織超微結(jié)構(gòu)的研究. 遺傳學(xué)進(jìn)步與人口健康高峰論壇文集 2008；1（3）: 47-48

11 賀林. 臨床遺傳學(xué).賀林，馬端，段濤主編. 染色體疾病. 上海: 上?？茖W(xué)技術(shù)出版社, 2013: 83-87

12 Martin RH, Rademaker AW. Aneuploidy analysis in spermatozoa from a 47, XYY male.Hum Repord1999；14（Abstract Book1）: 134

13 Wong EC, Ferguson KA, Chow V,et al. Sperm aneuploidy and meiotic sex chromosome conf i gurations in an infertile XYY male.Hum Reprod2008；23（2）: 374-378

14 沈?qū)W萍, 張甦, 沈國(guó)松. 47, XYY綜合征患者精子染色體的FISH研究. 浙江醫(yī)學(xué) 2012；34（4）: 253-255

15 張建林, 李海波, 姜?jiǎng)偃A, 等. 一個(gè)超雄綜合征伴Yqh+家系的遺傳學(xué)分析.中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志 2014；31（2）: 210-213

（2016-05-05收稿）

10.3969/j.issn.1008-0848.2016.06.011

R596.12

資助： 江蘇省婦幼健康科研項(xiàng)目（F201561）；2.江蘇省重點(diǎn)研發(fā)項(xiàng)目（BE2016641）；3.徐州市衛(wèi)生創(chuàng)新（科技攻關(guān)）團(tuán)隊(duì)和江蘇省重點(diǎn)研發(fā)項(xiàng)目資助（XWCX201603）

**通訊作者，E-mail:hanchdoctor@qq.com