□ 鄒詩婷　廣東省惠州市質(zhì)量計量監(jiān)督檢測所

食品理化檢驗標準中對熒光法的實際應用

□ 鄒詩婷廣東省惠州市質(zhì)量計量監(jiān)督檢測所

近些年，國內(nèi)食品工業(yè)化程度日益擴大與迅猛提升，廣泛應用了更多新添加劑與工業(yè)技術(shù)，導致國內(nèi)屢次發(fā)生食品安全事件。食品安全已升級為現(xiàn)階段全社會重點關(guān)注的重點話題。從根本上說，食品安全問題一方面與國民生命安全、身體健康有著直接相關(guān)性，另一方面還會對社會長期發(fā)展與安全產(chǎn)生直接性影響。熒光檢測技術(shù)是以輻射躍遷原理為基礎(chǔ)的一種特異性檢測工藝，該技術(shù)的出現(xiàn)和原子、分子結(jié)構(gòu)的相關(guān)性極強，而且具有較強的選擇性、較高靈敏度以及精準定量等諸多優(yōu)勢，在復雜基質(zhì)中分析與檢測相關(guān)化合物較為適用。

食品檢測標準中對分子熒光法的應用

熒光分光光度法

充分粉碎、凈化、提取以及濃縮定容待測基質(zhì)之后，無需其他手段，將樣液直接導入檢測比色皿中，通過其所出現(xiàn)的熒光強度進行定量檢測，此為當前標準中應用比較廣泛的一種分光光度檢測模式。因為選擇無分離檢測模式，所以通常具有較高前處理凈化要求，一般會結(jié)合應用層析凈化?，F(xiàn)階段國內(nèi)食品安全檢測標準中，選擇這一方法檢驗的主要物質(zhì)包括黃曲霉毒素、伏馬毒素、噻菌靈和腹瀉型貝類毒素等，所涉及主要基質(zhì)有乳制品、糧油、果蔬、茶葉、水質(zhì)以及飼料等。該法的優(yōu)勢在于：不需要分離，人工操作方便，因采用比色皿作為檢測池，具有較大的光程，有較高的靈敏度。

薄層色譜-熒光法

該方法是基于初步分離而實現(xiàn)的半定量檢測方法。前處理試樣后，在薄層色譜板中點樣，以標準溶液為參比，其定量依據(jù)是：若試樣點熒光強度比標準溶液點強，那么必須適度稀釋試樣，直到試樣點強度等同于標準溶液點，同時依照稀釋倍數(shù)對具體濃度進行計算；若熒光強度比標準溶液點弱，那么其具體含量比檢出限低。定性依據(jù)是：標準溶液點和試樣點遷移距離具有一致性；標準溶液點和試樣點具有相同的熒光色度，那么能夠判斷試樣內(nèi)部存在目標化合物?，F(xiàn)階段，國內(nèi)食品安全檢測標準中，選擇這一方法展開檢驗的相關(guān)物質(zhì)包括玉米赤霉烯酮、黃曲霉毒素以及T-2毒素等，涉及到的相關(guān)基質(zhì)有奶油、配合飼料、新鮮豬組織和牛乳制品等。該法的優(yōu)勢在于：儀器簡單，引入分離設置，增加Rf值作為定性依據(jù)，對試樣中的熒光雜質(zhì)進行分離，降低干擾。

高效液相色譜-熒光法

該方法是現(xiàn)階段國內(nèi)食品安全標準中廣泛應用的分子熒光檢測法，普遍應用于真菌毒素、獸藥殘留以及人工色素等相關(guān)檢驗中。

1.獸藥殘留檢測

所選藥物為阿維菌素類藥物，主要有多拉菌素、阿維菌素以及伊維菌素等，屬于大環(huán)內(nèi)酯類獸藥，其功效主要包括殺螨、殺菌等。現(xiàn)階段標準中所選檢測方式主要是甲醇-乙腈提取，通過N-甲基咪唑啉衍生化，結(jié)合液相色譜-熒光檢測系統(tǒng)，475 nm的發(fā)射波長，365 nm的激發(fā)波長?，F(xiàn)階段，選擇這一方法的有農(nóng)業(yè)部公告與國家標準等，樣品基質(zhì)主要包括牛、乳制品、水產(chǎn)品、雞組織以及牛組織等。

2.色素染料檢測

應用比較常見的一種人工色素就是堿性桃紅T，區(qū)域標準所選檢測方法是：堿化甲醇提取樣品，正己烷加以凈化、二氯甲烷加以萃取，由高效液相色譜熒光檢測器展開檢測，572 nm的發(fā)射波長，271 nm的激發(fā)波長，4 μg/kg的檢出限。結(jié)晶紫與孔雀石綠均為兼具殺菌劑與燃料功能的兩種化學藥品，而且普遍應用于水產(chǎn)品中。國際檢測方法是：對于樣品內(nèi)部所殘留結(jié)晶紫或者孔雀石綠，通過氰化鉀將其還原成代謝產(chǎn)物隱性結(jié)晶紫或者孔雀石綠，乙酸銨-乙腈混合液加以提取，酸性氧化鋁-丙基磺酸加以凈化，進入熒光檢測器展開高效檢測，360 nm的發(fā)射波長，265 nm的激發(fā)波長，0.5 μg/kg的檢出限。

食品檢測標準中對原子熒光法的應用

原子熒光法就是在原子吸收光譜與原子發(fā)射光譜間介入的一種光譜分析技術(shù)。其基本原理是原子化待測元素，對原子蒸氣進行光源輻射到高能態(tài)，將特征波長熒光發(fā)射出來，通過熒光波長定性與強度定量，被廣泛應用于檢測食品重金屬含量中。此處主要介紹原子熒光法中的微波消除-原子熒光光譜法，該方法是將特定酸與樣品置于消解罐中，放入微波消解儀內(nèi)部，高溫增壓環(huán)境下根據(jù)設定消解程序確保樣品能夠及時消化與溶解，與以往消解方法相比，該法的優(yōu)勢在于：充分消解樣品，具有較高回收率；較低空白值，便于消化、無交叉污染與元素損失，能夠同時完成多元素聯(lián)測。被廣泛應用于檢驗檢疫行業(yè)與農(nóng)業(yè)部標準中，選擇這一方法檢驗的主要物質(zhì)包括硒、砷以及銻等，涉及主要基質(zhì)有食品接觸材料、稻米以及飼料等。

展望

隨著近些年電子學與材料學的進步與發(fā)展，使得很多新型光源的激發(fā)光強度得到很大程度的提升，進而提升熒光檢測靈敏度，微型化與小型化成為熒光檢測的主流。而且在聯(lián)用技術(shù)領(lǐng)域，芯片電泳與毛細管電泳等技術(shù)得到廣泛應用，同時也為定量與定性工作奠定技術(shù)型支持，隨著近些年食品理化檢驗標準的逐漸成熟，具有更為優(yōu)越性能的分離聯(lián)用技術(shù)與新型光源技術(shù)必然成為食品安全領(lǐng)域發(fā)展的主流趨勢。