□ 程相玲 商丘市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督檢驗測試中心
轉(zhuǎn)基因食品檢測技術(shù)的進展研究
□ 程相玲商丘市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督檢驗測試中心
伴隨著科學技術(shù)的不斷發(fā)展,轉(zhuǎn)基因檢測技術(shù)在農(nóng)業(yè)中的運用范圍也在逐步加強。轉(zhuǎn)基因食品為我國的發(fā)展帶來了很大的經(jīng)濟收益,提高了農(nóng)業(yè)發(fā)展空間。近幾年來,我國轉(zhuǎn)基因食品檢測技術(shù)在不斷發(fā)展,逐漸成熟,然而很多人也對轉(zhuǎn)基因食品的安全問題表示質(zhì)疑。
轉(zhuǎn)基因食品工程是應用基因工程技術(shù)把一種或多種外源性基因從生物體外挪用到一種設定的生物體中,使其能夠進行蛋白質(zhì)的表達,此過程就是“轉(zhuǎn)基因技術(shù)”。轉(zhuǎn)基因食品是在轉(zhuǎn)基因原料上生產(chǎn)的食品。
轉(zhuǎn)基因食品作為當前的一種爭議食品,一直到現(xiàn)在,轉(zhuǎn)基因食品的安全問題也很難給出準確的答案,更沒有科學的依據(jù)證實轉(zhuǎn)基因食品的安全性,所以,轉(zhuǎn)基因食品的安全問題也成為國際關(guān)注的焦點問題。在不斷完成市場化的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品迫切需要建立一套精確、高效的轉(zhuǎn)基因食品檢測方法,不斷改進我國轉(zhuǎn)基因食品監(jiān)管方面的科學規(guī)范。
轉(zhuǎn)基因食品外援蛋白質(zhì)印記檢測法的運用發(fā)展
蛋白質(zhì)印記法是轉(zhuǎn)基因食品外源蛋白質(zhì)檢測方法的一種。蛋白質(zhì)印記法的檢測依據(jù)是指具備高分離能力的電泳以及具備特殊性的抗體和具備靈敏性的顯色酶反應完全融合起來,然后完成包含復雜混合物的食品中特殊的蛋白質(zhì)的檢測,完成食品雜質(zhì)的分離。這不但便于完成對靈敏度為2~6 ng的特殊蛋白質(zhì)進行檢測,而且便于準確判定轉(zhuǎn)基因食品中目標蛋白質(zhì)的檢測,特別是不可溶蛋白質(zhì)的深入研究,例如針對轉(zhuǎn)基因大豆合成酶的檢測。
復合擴增PCR轉(zhuǎn)基因食品檢測技術(shù)運用
復合擴增PCR檢測法是現(xiàn)在廣泛運用的轉(zhuǎn)基因食品檢測方法,通常來講,普通PCR技術(shù)1次只能檢測1種目標片段,PCR技術(shù)就是在PCR的反應系統(tǒng)中加入2對或2對以上的引物,完成PCR反應的多個靶序列。食品檢測者想要獲取詳細的轉(zhuǎn)基因信息,就要對待檢測的轉(zhuǎn)基因食品經(jīng)過利用PCR反應試劑以及PCR反應原理,不斷進行PCR檢測,和一般的PCR檢測方式比較,更加便于完成多個靶位點的統(tǒng)一檢測,提高轉(zhuǎn)基因食品檢測技術(shù)速度。由于常規(guī)的PCR食品檢測技術(shù)在進行檢測時過程比較復雜,并且投入成本較高,對于環(huán)境也存在潛在的污染問題,這些種種原因都迫使常規(guī)的PCR轉(zhuǎn)基因食品檢測技術(shù)的使用受到阻礙。然而復合PCR方式又能很好的防治這些不利因素的出現(xiàn),而且能夠獲取眾多基因片段信息,加強符合PCR檢測技術(shù)的應用范圍,讓PCR檢測技術(shù)在操作步驟上更加簡單,減小了轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品污染程度,使轉(zhuǎn)基因食品的檢測結(jié)果更加準確和高效。
外源DNA檢測技術(shù)
轉(zhuǎn)基因的外源基因包含目的基因、標記基因以及調(diào)控基因3個主要成分。轉(zhuǎn)基因食品的調(diào)控基因包含啟動子和終止子。轉(zhuǎn)基因食品的外源檢測技術(shù)的依據(jù)就是以被插入轉(zhuǎn)基因生物中的特異外源基因為主體,依照轉(zhuǎn)基因食品DNA序列為目標開展DNA檢測的方式。
轉(zhuǎn)基因食品核算檢測是重要的轉(zhuǎn)基因食品檢測技術(shù),重點檢測啟動子、終止子以及基因,便于為檢測轉(zhuǎn)基因食品制造良好的條件。
基因芯片檢測技術(shù)
基因芯片是把眾多DNA集中排布在玻片或者硅片載體上所構(gòu)成的微炬陣。它能把抗性基因、啟動子以及終止子的靶片段排列在玻片上刺成芯片,把從要檢查的樣品中抽取的DNA擴增,進行標記后再和芯片交融,掃描儀對雜交后的信號進行檢測,再通過計算機軟件研究判別,從而獲得樣品里的基因序列特點或是基因表達特點等信息?;蛐酒膽媚軌?qū)悠烽_展平行處理。然而成本昂貴,致使此方法很難開展。
LAMP檢測
LAMP就是環(huán)介導等溫擴增技術(shù),是在恒溫核酸擴增方式。這種技術(shù)能在恒溫下實現(xiàn)反應,所以只需要水浴鍋就能實現(xiàn)。此外LAMP擴增產(chǎn)物在染料過高的條件下能夠顯現(xiàn)顏色反應,用肉眼能夠進行觀察,而且在反應中能夠產(chǎn)生白色沉淀產(chǎn)品,能夠經(jīng)過濁度儀檢查其渾濁程度進行判別,使檢測過程變得簡單。然而此技術(shù)在現(xiàn)階段運用中還不成熟,條件摸索還需要不斷進行深入研究。
聯(lián)用檢測技術(shù)
每個檢測方法都有其自身的優(yōu)、缺點,把有關(guān)聯(lián)的技術(shù)進行聯(lián)用是一種很好的互補方法,現(xiàn)階段已出現(xiàn)將ELISA技術(shù)和PCR技術(shù)聯(lián)用,PCR和基因芯片技術(shù)融合,PCR技術(shù)和等離子共振技術(shù)融合等。
近幾年來,我國轉(zhuǎn)基因食品檢測技術(shù)在不斷發(fā)展、成熟,在不斷完成市場化的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品需要迫切建立一套精確、高效的轉(zhuǎn)基因食品檢測方法,不斷改進我國轉(zhuǎn)基因食品監(jiān)管方面的科學規(guī)范。