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（吉林大學動物科學學院，吉林長春130062）

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葡萄糖酸鈉對肉雞屠宰性能及免疫性能的影響

■陳洪影周長海段曉翔張麗明馮騰廖先東李亮于航宇劉博學

（吉林大學動物科學學院，吉林長春130062）

摘要：試驗通過將葡萄糖酸鈉添加到肉雞飼料中，研究其對AA+肉雞屠宰性能以及免疫性能的影響。試驗選取AA+肉雞1日齡健康肉雞240只，隨機分為A、B、C、D四個處理組，每組60只，組內6個重復，每個重復10只。試驗分為試驗前期（0～21日齡）、試驗后期（22～42日齡）2個階段。其中對照組（A組）飼喂基礎日糧，試驗組B、C、D組在基礎日糧的基礎上分別添加0.1%、0.2%、0.3%的葡萄糖酸鈉。結果表明：在日糧中添加葡萄糖酸鈉，21日齡精肉率，對照組（A組）與D組相比，差異顯著（P< 0.05），且D組高于A組；42日齡精肉率，對照組(A組)與試驗C組相比，差異顯著（P<0.05）；在日糧中添加葡萄糖酸鈉可以有效提高肉雞脾臟系數(shù)，其中B組最高，且顯著高于對照組（A組）；在日糧中添加葡萄糖酸鈉可以有效提高肉雞脾臟中IL-2 mRNA的表達量，B組、C組、D組均高于A組，其中B組最高，顯著高于對照組（A組）。由此可見，在日糧中添加葡萄糖酸鈉可以改善肉雞精肉率，提高屠宰性能；葡萄糖酸鈉可以提高肉雞的免疫性能，且日糧中添加0.1%葡萄糖酸鈉效果最佳。

關鍵詞：葡萄糖酸鈉；AA+肉雞；屠宰性能；免疫性能

20世紀50年代開始，科學家們發(fā)現(xiàn)，在飼料中添加一定濃度的抗生素對預防動物疾病、促進動物生長、提高飼料利用率等方面起到了積極的作用，飼料抗生素被世界各國廣泛使用[1]。但是，長期使用抗生素，容易引起畜禽機體產(chǎn)生依賴性，限制了體內免疫細胞機能的發(fā)揮，使機體免疫功能下降，抵抗疾病能力降低[2]；使用抗生素有可能使動物產(chǎn)生基因突變、畸形、致癌；抗生素大量排出動物體外，也可能造成環(huán)境污染[3]。鑒于抗生素產(chǎn)生的副作用，2006年1月，歐盟全面禁止食品動物使用抗生素促生長飼料添加劑[4]。因此，飼用抗生素替代物的研制與開發(fā)是各國畜牧業(yè)迫切需要解決的問題[4]。葡萄糖酸鈉是廣泛用于工業(yè)中的一種有機酸鹽，價格低廉、性質穩(wěn)定，作為一種新型飼料添加劑，不被動物腸道吸收利用，可以被某些有益微生物利用的特點，近年來受到廣泛關注。周長海等報道，葡萄糖酸鈉具有促進仔豬生長發(fā)育、改善仔豬飼料報酬、預防仔豬腹瀉的效果,有望作為抗生素促生長劑的替代品應用在斷乳仔豬飼料中,作為仔豬非抗生素促生長劑的新型添加劑[5]。本試驗以AA+肉雞為研究對象，通過在基礎日糧中添加適量葡萄糖酸鈉，研究其對肉雞屠宰性能、免疫性能的影響，旨在研究葡萄糖酸鈉是否可以作為新型抗生素替代物添加在肉雞配合飼料中并確定其最適添加量。

1　材料與方法

1.1試驗材料與地點

飼料級葡萄糖酸鈉，又名五羥基乙酸鈉，其分子式為C6H11O7Na，相對分子質量為218.14，外觀為白色或淺黃色的粉末，純度100%。

試驗動物為肉雞初生雛雞，品種為AA+肉雞，購于吉林農業(yè)大學孵化場。

1.2試驗設計及日糧

試驗選擇AA+肉雞出生雛240只，隨機分為A、B、C、D 4個處理組，每組60只，組內6個重復，每個重復10只。A組飼喂基礎日糧(基礎日糧組成及營養(yǎng)水平見表1)，不添加葡萄糖酸鈉，B、C、D組分別在基礎日糧基礎上添加0.1%、0.2%、0.3%的葡萄糖酸鈉。試驗分為兩個階段：試驗前期(1～21 d)、試驗后期(22～42 d)。

1.3飼養(yǎng)管理

本試驗采用的飼養(yǎng)方式是前期育雛室籠養(yǎng)，后期平面飼養(yǎng)，自由采食和自由飲水，舍內溫度、濕度、光照、通風等飼養(yǎng)管理條件均保持一致，常規(guī)免疫。

1.4測試指標及方法

1.4.1屠宰性能指標測定

在試驗的21日齡和42日齡，每組所有雞先稱重，然后在每組各重復取出一只與該重復平均體重相近的雞進行屠宰，取肝臟、胸肉、腿肉，并稱重，最后計算胸肉率、腿肉率和肝臟比例、脾臟系數(shù)。

活重:指在屠宰前禁食12 h后的重量(g)；

胸肉率（%）=胸肉重/活體重×100；

腿肉率（%）=腿肉重/活體重×100；

精肉率（%）=（胸肉率+腿肉率）×100；

肝臟比例（%）=肝臟重/活體重×100；

脾臟系數(shù)（%）=脾臟重/活體重×100。

表1　基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平（風干基礎）

1.4.2脾臟中IL-2mRNA相對表達量的測定目的基因相對表達量按以下公式計算：

ΔCt=Ct目的基因-Ct參考基因；

-ΔΔCt=ΔCt試驗組-ΔCt對照組；

目的基因相對表達量= 2^(-ΔΔCt)（Ct為閾值循環(huán)）。

1.4.2.1總RNA的提取及cDNA的合成

每組隨機取6個脾臟樣本提取總RNA，RNA提取所用的離心管、槍頭等均用0.1%DEPC水處理過夜后，高壓滅菌。提取步驟按照RNA(試劑盒)動物組織總RNA提取試劑盒（invitrogen）操作說明進行，并利用紫外分光光度計檢測其濃度和純度。

取2 μg總RNA按cDNA第一鏈合成試劑盒（invi?trogen）操作說明反轉錄得到cDNA。

1.4.2.2引物的設計與合成

在GenBank上查找到雞的IL-2基因以及內參基因β-actin的mRNA序列，使用Primer3.0設計引物。引物由華大科技合成，引物詳細信息見表2。

表2　引物序列及參數(shù)

1.4.2.3IL-2 mRNA熒光定量PCR檢測

采用SYBR Green染料法在實時熒光定量PCR擴增儀上進行擴增。反應體系為：

SYBR Green 10 μl；Primer Forward 0.4 μl；Primer Reverse 0.4 μl；cDNA 2 μl；ddH2O 7.2 μl；Total 20 μl。

反應程序：95℃15 min，1個循環(huán)；95℃10 s，60℃30 s，40個循環(huán)。反應結束后進行熔解曲線分析，判定引物的特異性。采用上述反應體系和條件對各樣本進行實時熒光定量PCR擴增。

1.5數(shù)據(jù)處理與分析

運用Excel 2010對試驗數(shù)據(jù)進行初步的統(tǒng)計分析，利用SPSS13.0統(tǒng)計軟件中ANOVA進行方差分析，表中試驗數(shù)據(jù)用“平均值±標準誤”表示，以P<0.05作為顯著性判斷標準。

2　結果與分析

2.1葡萄糖酸鈉對AA+肉雞屠宰性能的影響(見表3、表4)

表3　試驗各組AA+肉雞21日齡屠宰性能（%）

表4　試驗各組AA+肉雞42日齡屠宰性能（%）

由表3可見，21日齡精肉率，對照組（A組）與試驗組D組相比，差異顯著（P<0.05），且D組精肉率明顯高于A組。21日齡胸肉率、腿肉率以及肝臟比例，對照組與試驗組相比差異不顯著（P>0.05）。

由表4可見，42日齡精肉率，對照組(A組)與試驗組C組相比，差異顯著（P<0.05），且C組精肉率明顯高于A組。42日齡胸肉率、腿肉率以及肝臟比例，對照組與試驗組相比差異不顯著（P>0.05）。

2.2葡萄糖酸鈉對免疫性能的影響(見圖1、圖2)

2.2.1葡萄糖酸鈉對肉雞脾臟系數(shù)的影響

由圖1可見，與對照組(A組)相比，試驗組B組脾臟系數(shù)明顯提高，且差異顯著（P<0.05）；試驗組C組、D組中脾臟系數(shù)亦高于A組，但是差異不顯著（P>0.05），其中添加葡萄糖酸鈉組中，B組最高，D組最低。

圖1　葡萄糖酸鈉對肉雞脾臟系數(shù)的影響

2.2.2葡萄糖酸鈉對肉雞脾臟中IL-2 mRNA表達量的影響

圖2　葡萄糖酸鈉對肉雞脾臟中IL-2 mRNA表達量的影響

由圖2可見，與對照組(A組)相比，試驗組B組脾臟中IL-2 mRNA的表達量明顯提高，且差異顯著（P< 0.05）；試驗組C組、D組中IL-2 mRNA的表達量亦高于A組，但是差異不顯著（P>0.05），其中添加葡萄糖酸鈉組中，B組最高，C組最低。

3　討論

3.1葡萄糖酸鈉對肉雞屠宰性能的影響

葡萄糖酸鈉作為飼料添加劑替代抗生素的研究，在國內家禽飼料中相關的研究報告較少見。在K.A.Rafacz-Livingston（2005）等的試驗中，8～22日齡的低磷肉雞飼糧中添加葡萄糖酸鈉，可以提高雛雞對植酸磷的利用率以及提高肉雞的生產(chǎn)性能和肉雞脛骨灰分含量[6]；楊寧（2009）等在葡萄糖酸鈉和植酸酶對肉雞營養(yǎng)利用和屠宰性能的影響試驗中得出：在促進肉雞腹脂率的提高方面，葡萄糖酸鈉和植酸酶存在著互作效應[7]；T.Poeilhampha等(2011)報道，在豬日糧中添加葡萄糖酸鈉，可以顯著地促進豬的生長，具體的機制尚不清楚[8]。本試驗結果顯示：日糧中添加適量的葡萄糖酸鈉，可以顯著提高肉雞精肉率，提高屠宰性能，進而提高經(jīng)濟效益，這可能是與葡萄糖酸鈉進入肉雞體內后，改善肉雞體內蛋白質轉化有關的因素，但具體機制需要進一步研究。

3.2葡萄糖酸鈉對肉雞免疫性能的影響

脾臟是禽類重要的外周免疫器官，聚集著大量B細胞、T細胞，是免疫應答的重要場所，同時也是體內產(chǎn)生抗體的主要器官，參與全身細胞免疫及體液免疫[9]。Rivas等認為，脾臟免疫器官重量是反映免疫器官功能狀態(tài)的一個重要指標[10]。IL-2對于機體的免疫應答起著重要的作用，IL-2是一種重要的免疫調節(jié)因子，在促進T細胞的活化與增殖、B細胞的生長與分化，增強NK細胞、單核細胞殺傷活性等功能中發(fā)揮著重要的作用[11-13]。本研究表明，在日糧中添加葡萄糖酸鈉，能夠顯著提高肉雞脾臟系數(shù)，其中添加0.1%葡萄糖酸鈉組與對照組相比差異顯著且最高；在日糧中添加葡萄糖酸鈉，能夠促進肉雞脾臟IL-2 mRNA的表達量，其中添加0.1%葡萄糖酸鈉組明顯高于對照組，且差異顯著，這與本試驗中肉雞脾臟系數(shù)的變化具有一致性，但是0.2%組、0.3%組與0.1%組相比，脾臟中IL-2 mRNA的表達量有降低的趨勢，說明高劑量的葡萄糖酸鈉有可能對動物產(chǎn)生免疫抑制作用,這與馬可為等（2008）研究結論一致，日糧中添加不同水平的葡萄糖酸鈉能夠提高肉雞免疫器官指數(shù)，提高了肉雞的免疫機能。這可能是由于葡萄糖酸鈉是不能被動物體吸收和利用，可以直接進入肉雞腸道，通過促進腸道內乳酸菌、雙歧桿菌等有益微生物的增殖或抑制腸道內有害菌大腸桿菌的數(shù)量來調節(jié)腸道菌群生態(tài)環(huán)境，從而起預防動物疾病，提高免疫性能，發(fā)揮類似抗生素的作用。

4　結論

①在日糧中添加0.2%葡萄糖酸鈉可以顯著增加42日齡肉雞的精肉率（胸肉+腿肉）。

②在日糧中添加0.1%葡萄糖酸鈉可以顯著提高肉雞的脾臟系數(shù)，且顯著提高脾臟中IL-2 mRNA的表達量，提高肉雞免疫性能；其中在日糧中添加0.1%葡萄糖酸鈉對肉雞的免疫效果最佳。

③葡萄糖酸鈉能夠產(chǎn)生與抗生素類似的作用，且0.1%葡糖糖酸鈉添加量為最適添加量，有望替代抗生素。

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（編輯：劉占，laramie_liu@139.com）

Effect of sodium gluconate on slaughter performance and immune function of broilers

Chen Hongying, Zhou Changhai, Duan Xiaoxiang, Zhang Liming, Feng Teng, Liao Xiandong, Li Liang, Yu Hangyu, Liu Boxue

Abstract：Sodium gluconate was added in feed to study the effects on slaughter performance and im?mune function of broilers. Two hundred and forty one-year-old AA broiler chickens were divided into 4 groups, that is group A, group B, group C, group D. There are 6 replicates in each group and 10 chickens per replicate. The control group was fed the basal diet. For treatment group, sodium gluco?nate was supplemented in feed at 0.1%, 0.2%, 0.3% of diet. There are two stages in the experiment, 0～ 21 days and 22～42 days. The result showed that compared with the control group, the treatment group D were significantly improved (P<0.05) on lean meat rate at 21 days of age and the treatment group C were significantly improved (P<0.05) on lean meat rate 42 days of age. Sodium gluconate can improve spleen coefficient and AMPs on expression of IL-2 mRNA in spleen of broilers, and group B was sig?nificantly different than the control group (P<0.05). In conclusion, the supplementation of sodium glu?conate can improve lean meat rate and immune function of broilers. And the group that added with 0.1% sodium gluconate was the best.

Key words：sodium gluconate；AA+broilers；slaughter performance；immune function

基金項目：吉林省科技廳國際科技合作項目[20120731]；吉林省科技廳自然科學基金項目[20140101131JC]

收稿日期：2015-10-09

作者簡介：陳洪影，碩士，研究方向為動物營養(yǎng)與飼料科學。

中圖分類號：S816.32

文獻標識碼：A

文章編號：1001-991X（2016）02-0038-04

doi:10.13302/j.cnki.fi.2016.02.008