湯禮賓　章志福

(深圳市龍華新區(qū)人民醫(yī)院　廣東 深圳　518109)

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Survivin、Smac/DIABLO表達(dá)水平與胎膜早破的關(guān)系分析

湯禮賓章志福

(深圳市龍華新區(qū)人民醫(yī)院廣東 深圳518109)

【摘要】目的研究Survivin、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶激活劑(Smac)/DIABLO與胎膜早破的關(guān)系。方法選取深圳市龍華新區(qū)人民醫(yī)院收治的30例胎膜早破孕婦作為觀察組，同期選取30例體檢正常的孕婦作為對照組。兩組均采集孕婦胎膜破口部位組織，采用免疫組織生化方法測定胎膜組織中Survivin及Smac/ DIABLO表達(dá)水平。結(jié)果觀察組患者胎膜組織細(xì)胞Survivin及Smac/ DIABLO蛋白陽性檢出率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論Survivin及Smac/DIABLO表達(dá)水平與孕婦胎膜早破關(guān)系密切，可以較準(zhǔn)確地反應(yīng)胎膜早破的情況，可為臨床診斷提高依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】Survivin蛋白；半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶激活劑；胎膜早破

胎膜早破是臨床上較為常見的一種婦產(chǎn)科并發(fā)癥，主要是由于胎膜細(xì)胞凋亡從而降低患者的胎膜組織強(qiáng)度和彈性所致[1]。臨床研究表明，患者的胎膜細(xì)胞凋亡情況與Survivin及半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶激活劑(Smac)/ DIABLO蛋白表達(dá)水平相關(guān)[2]。本研究就Survivin、Smac/ DIABLO與胎膜早破的關(guān)系進(jìn)行分析，現(xiàn)報告如下。

1資料與方法

1.1一般資料選取深圳市龍華新區(qū)人民醫(yī)院2013年8月至2014年6月收治的30例胎膜早破孕婦作為觀察組，孕周為32～42周，年齡為20～35歲，單活胎。另外選取30例同期體檢正常的孕婦作為對照組，年齡為22～37歲，孕周為33～42周，單活胎。兩組研究對象年齡、孕周等基本資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2檢測方法采集胎膜破口處組織(2 cm×2 cm×0.5 cm)，采用免疫組織生化檢測方法測定胎膜組織中的Survivin以及Smac/ DIABLO蛋白水平。檢測主要試劑：TUNEL試劑盒購自美國Roche公司，兔抗人Smac多克隆抗體由北京博奧森公司提供，ABC步法試劑盒、DAB試劑盒由武漢博士德公司提供。采用TUNEL試劑盒進(jìn)行胎膜凋亡細(xì)胞原位標(biāo)記，檢測患者血液樣本中細(xì)胞因子的凋亡水平。將標(biāo)記好的溶液作為TUNEL反應(yīng)混合物。將光鏡下觀察到的細(xì)胞核棕黃色顆粒細(xì)胞作為陽性細(xì)胞，即凋亡細(xì)胞。將每例采樣血液樣本均計(jì)數(shù)500個細(xì)胞。凋亡指數(shù)為TUNEL染色陽性檢測細(xì)胞的百分率。采用10%濃度的福爾馬林溶液對所有采樣的血液標(biāo)本進(jìn)行固定，用石蠟包埋，切片后制成4 mm左右的石蠟切片，然后做HE染色。采用免疫組化ABC法檢測Survivin和Smac/DIABLO在胎膜中的表達(dá)情況。以細(xì)胞核和(或)細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃顆粒為Survivin陽性。

1.3結(jié)果評價選取5個高倍視野(×400)進(jìn)行檢測，其中每個視野計(jì)數(shù)中含有100個腫瘤細(xì)胞，應(yīng)用臨床半定量積分法判斷檢測結(jié)果：陽性細(xì)胞數(shù)含量0%～5%為0分，含量6%～25%為1分，含量26%～50%為2分，含量51%～75%為3分，含量>75%為4分；陽性檢測強(qiáng)度以患者多數(shù)細(xì)胞的呈色反應(yīng)為準(zhǔn)，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。2者之積為最后評分。Smac在胎膜中的表達(dá)主要在羊膜上皮細(xì)胞、絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞薄膜和胞漿，陽性細(xì)胞染色呈棕黃色，不著色為陰性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 17.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。定性資料采取率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1Survivin蛋白陽性檢出率對照組患者胎膜組織細(xì)胞檢出Survivin蛋白陽性7例(23.33%)，觀察組檢出16例(53.33%)。觀察組患者胎膜組織細(xì)胞Survivin蛋白陽性檢出率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.2Smac/DIABLO蛋白陽性檢出率對照組患者胎膜組織細(xì)胞檢出Smac/DIABLO蛋白陽性13例(43.33%)，觀察組檢出23例(76.67%)。觀察組患者胎膜組織細(xì)胞Smac/DIABLO蛋白陽性檢出率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

3討論

胎膜早破是婦產(chǎn)科臨床較常見的一種妊娠期并發(fā)癥[3]。該病病情復(fù)雜兇險，其確切致病機(jī)制尚未明確。臨床主要表現(xiàn)為突發(fā)性陰道排液、臍帶脫垂及宮內(nèi)感染等嚴(yán)重癥狀，極有可能導(dǎo)致早產(chǎn)，增加新生兒死亡的風(fēng)險。同時，胎膜早破也會威脅到產(chǎn)婦的生命健康與安全。有研究數(shù)據(jù)表明，胎膜早破并發(fā)癥的發(fā)生與患者胎膜細(xì)胞凋亡有關(guān)[4]。Survivin是凋亡抑制蛋白家族中的一種，具有抑制細(xì)胞凋亡及調(diào)節(jié)細(xì)胞周期的雙重功能。Survivin主要表達(dá)于胚胎和發(fā)育的胎兒內(nèi)部組織中。目前研究數(shù)據(jù)表明，Survivin在多種腫瘤中的高表達(dá)與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及轉(zhuǎn)移均密切相關(guān)[5]。但是，Survivin與胎膜早破的關(guān)系研究相對較少。Smac/DIABLO是一種新近發(fā)現(xiàn)的線粒體膜間蛋白，是Caspase的線粒體激活因子。Smac/DIABLO通過解除凋亡抑制蛋白對Caspase 3、7和9的抑制作用而發(fā)揮促凋亡作用。目前已有實(shí)驗(yàn)證實(shí)抑制Smac/DIABLO的表達(dá)可減少細(xì)胞凋亡，但僅從蛋白角度進(jìn)行研究，未直接檢測胎膜早破患者及正常孕婦胎膜組織中細(xì)胞凋亡的情況。目前Survivin與Smac/DIABLO這對抑制細(xì)胞凋亡和促進(jìn)細(xì)胞凋亡的蛋白在胎膜早破患者胎膜組織中的表達(dá)與細(xì)胞凋亡是否具有一致性有待檢驗(yàn)。

本研究結(jié)果顯示，兩組患者檢測結(jié)果都發(fā)現(xiàn)了Survivin與Smac/DIABLO的表達(dá)，觀察組患者Survivin蛋白表達(dá)水平高于對照組(P<0.05)，說明Survivin蛋白表達(dá)水平與孕婦胎膜早破關(guān)系密切，可以較準(zhǔn)確地反應(yīng)患者胎膜的狀況。觀察組胎膜組織Smac/DIABLO表達(dá)水平顯著高于對照組(P<0.05)，說明胎膜組織Smac/DIABLO表達(dá)水平與孕婦胎膜早破有關(guān)，具有較高的診斷價值。

綜上所述，Survivin、Smac/DIABLO與孕婦胎膜早破的關(guān)系密切，可以較準(zhǔn)確地反應(yīng)胎膜早破的情況，可為臨床診斷提高依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1]李穎,胡瓊,王凱,等.細(xì)胞色素C、Smac與胎膜早破相關(guān)性的研究[J].遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2011,34(6):591-594.

[2]王春妍,楊向東,胡東勝.大承氣湯對急性肝衰竭大鼠肝組織Smac、細(xì)胞色素C及Caspase-3表達(dá)的影響[J].中華中醫(yī)藥雜志,2015,30(4):1249-1252.

[3]趙媛媛,王妙英,焦朋增,等.孕產(chǎn)婦血清中Toll-4、MMP-9、sICAM-1水平與早產(chǎn)和未足月胎膜早破的相關(guān)性研究[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2015,24(26):2930-2932.

[4]張閣.胎膜早破孕婦血清CRP和白介素-1與胎膜早破相關(guān)性分析[J].臨床醫(yī)學(xué)工程,2015,22(6):757-758.

[5]王妙英,焦朋增,趙媛媛.蛋白酶、IL-8與未足月胎膜早破合并絨毛膜羊膜炎及妊娠結(jié)局的關(guān)系[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2015,24(20):2188-2190,2206.

(收稿日期：2015-12-08)

【中圖分類號】R 714.43+3

doi:10.3969/j.issn.1004-437X.2016.04.023