宋金萍，黃睿，盧佩佩

(新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)檢驗中心，新疆 烏魯木齊 830001)

BC-6800血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類復(fù)檢規(guī)則的制定及應(yīng)用評價

宋金萍，黃睿，盧佩佩

(新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)檢驗中心，新疆 烏魯木齊 830001)

目的 建立BC-6800血細(xì)胞分析儀復(fù)檢規(guī)則，并評價其合理性。方法應(yīng)用BC-6800血液分析儀檢測400份血常規(guī)標(biāo)本，同時每份標(biāo)本制做兩張血涂片，由從事形態(tài)學(xué)工作10年以上的兩名檢驗人員進(jìn)行人工鏡檢。計算真陽性率、真陰性率、假陽性率、假陰性率。結(jié)果人工鏡檢的結(jié)果與儀器的報警信息比較，陽性符合率為28%，假陽性率為8%，陰性符合率為65.5%，假陰性率為2.5%。本實驗室制定的復(fù)檢規(guī)則漏檢率（假陰性率）為2.5%，符合國際血液學(xué)復(fù)審協(xié)作組關(guān)于假陰性率小于5%的規(guī)定，復(fù)檢率為24%。結(jié)論我室將在檢驗工作中嚴(yán)格遵守這些復(fù)檢規(guī)則，并根據(jù)臨床需求進(jìn)一步完善復(fù)檢規(guī)則，降低漏檢率和推片率。

BC-6800血細(xì)胞分析儀；復(fù)檢規(guī)則；漏檢率

隨著檢驗現(xiàn)代化和自動化的發(fā)展，大部分的檢驗項目都由大型儀器完成，這極大地提高了樣本篩檢的效率，是實現(xiàn)臨床大批量樣本自動化檢測的必要條件。血常規(guī)的檢查也不例外，各種帶分類的血細(xì)胞分析儀早已取代人工鏡檢。然而至今為止，再精準(zhǔn)的儀器也無法完全取代人工鏡檢，只能作為初篩實驗，特別是在病理條件下，儀器的檢測結(jié)果就不如人工鏡檢的結(jié)果準(zhǔn)確可靠。人工鏡檢結(jié)果仍是血常規(guī)形態(tài)學(xué)分析的金標(biāo)準(zhǔn)，這一點毋庸置疑[1-2]。如何利用血細(xì)胞自動化儀器在進(jìn)行大批量樣本快速篩查的同時又能保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確、可靠已成為所有醫(yī)學(xué)實驗室不可回避的問題。因此建立適合自己實驗室的復(fù)檢規(guī)則成為解決這一問題的有效手段。本實驗室參考2005年國際血液學(xué)復(fù)檢專家組推薦的41條自動血細(xì)胞分析和分類復(fù)檢規(guī)則通則[3]，結(jié)合BC-6800自動血細(xì)胞分析儀分析性能，分析在我院就診的門診及病房400例患者的血常規(guī)標(biāo)本，特制訂了適合我實驗室的血常規(guī)分析的復(fù)檢規(guī)則。

1 資料與方法

1.1 一般資料 400份血常規(guī)標(biāo)本來自于2014年10月10～14日在我院就診的門診患者和病房患者。所有標(biāo)本于采血30 min內(nèi)由BC-6800自動進(jìn)樣模式進(jìn)行檢測包括全血細(xì)胞計數(shù)(CBC)，白細(xì)胞分類(DC)，有核紅細(xì)胞(NRBC)和網(wǎng)織紅細(xì)胞(RET)。采血當(dāng)日由推片機制備血涂片標(biāo)本，每份血樣制備兩張血涂片。

1.2 儀器與試劑 BC-6800全自動血細(xì)胞分析儀、原裝配套試劑、校準(zhǔn)物和質(zhì)控物由中國邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司提供。SP-1000i推片機由日本希森美康公司提供。Olympus雙筒顯微鏡購自日本奧林巴斯光學(xué)工業(yè)株式會社，用于血涂片顯微鏡檢查。

1.3 方法

1.3.1 儀器的校準(zhǔn)和驗證 邁瑞公司工程師用SC-CALPLUS全血校準(zhǔn)物對BC-6800血細(xì)胞分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)，并調(diào)整校準(zhǔn)系數(shù)，然后再用邁瑞配套的全血室內(nèi)質(zhì)控物進(jìn)行嚴(yán)格的室內(nèi)質(zhì)量控制，保證結(jié)果的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。

1.3.2 人工鏡檢 人工鏡檢由從事形態(tài)學(xué)工作10年以上的兩名中級以上職稱的檢驗人員獨立完成。人工鏡檢內(nèi)容包括：(1)白細(xì)胞(WBC)形態(tài)觀察及數(shù)量評估；(2)血小板(PLT)大小、形態(tài)觀察及數(shù)量評估；(3)有無巨大PLT及PLT聚集；(4)紅細(xì)胞(RBC)大小、染色及形態(tài)；(5)其他異常：NRBC、RBC冷凝集及寄生蟲等。兩人各自獨立完成鏡檢后，將鏡檢結(jié)果逐一詳細(xì)記錄，且兩人中只要有一人人工鏡檢結(jié)果為陽性，則判斷為陽性。

1.3.3 涂片鏡檢陽性判斷 依據(jù)國際上制定的12條鏡檢陽性規(guī)則[4]，我實驗室在具體的操作中應(yīng)用如下：(1)紅細(xì)胞明顯大小不等，細(xì)胞體積大小相差1倍以上；(2)有30%以上的紅細(xì)胞中央淡染區(qū)擴大超過1/2；(3)巨大血小板的數(shù)目超過15%；(4)含杜勒小體的粒細(xì)胞超過10%；(5)含中毒顆粒的粒細(xì)胞超過10%；(6)空泡變性粒細(xì)胞超過10%；(7)原始和幼稚細(xì)胞超過1%；(8)早幼粒細(xì)胞和中幼粒細(xì)胞超過1%；(9)晚幼粒細(xì)胞超過2%；(10)異型淋巴細(xì)胞超過5%；(11)NRBC超過1%；(12)漿細(xì)胞超過1%。

1.4 “報警(IP)信息”系統(tǒng)的設(shè)置 BC-6800血細(xì)胞分析儀為每個可疑報警信號(Q-flag)設(shè)置1個直方圖來表達(dá)“是或否”，共20條報警信息。包括白細(xì)胞減少(WBC＜2.50×109/L)，白細(xì)胞增多(WBC＞18.00×109/L)；嗜中性粒細(xì)胞減少(Neut#＜1.00×109/L)，嗜中性粒細(xì)胞增多(Neut#＞11.00×109/L)；淋巴細(xì)胞減少(Lym#＜0.80× 109/L)，淋巴細(xì)胞增多(Lym#＞4.00×109/L)；單核細(xì)胞增多(Mon#＞1.50×109/L)；嗜酸性粒細(xì)胞增多(Eos#＞0.70× 109/L)，嗜堿性粒細(xì)胞增多(Bas#＞0.20×109/L)；出現(xiàn)有核紅細(xì)胞(NRBC#＞0.010且NRBC%＞1.00)；紅細(xì)胞大小不均(RDW-CV＞22.0或RDW-SD＞64)；低色素性紅細(xì)胞(MCHC＜290 g/L)；小細(xì)胞性紅細(xì)胞(MCV＜70.0 fL)；大細(xì)胞性紅細(xì)胞(MCV＞110.0 fL)；紅細(xì)胞增多(RBC＞6.5×1012/L)；貧血(HGB＜90 g/L)；網(wǎng)織紅細(xì)胞增多(RET#＞0.2或RET%＞5.00)；血小板減少(PLT＜60× 109/L)，血小板增多(PLT＞600×109/L)；三系減少(WBC＜4.00×109/L、RBC＜3.50×1012/L和PLT＜100×109/L)。

1.5 初檢規(guī)則的建立 依據(jù)BC-6800儀器的20條報警信息關(guān)于WBC、RBC、PLT數(shù)量及形態(tài)異常的提示并結(jié)合41條國際復(fù)檢規(guī)則，制定出BC-6800的26條初檢規(guī)則，見表1。

表1 BC-6800儀器血細(xì)胞計數(shù)與WBC分類的初檢規(guī)則

1.5.1 初檢規(guī)則的調(diào)整及評估 在26條初檢規(guī)則的基礎(chǔ)初上首先去掉第25和26條。然后再在上述基礎(chǔ)上去掉第19條除PLT聚集外的PLT和MPV報警。接著第16條和第17條去掉RBC報警信息。修改第3條為＜2.5×109/L或＞30.0×109/L；修改第11條為Neut#＜1.0×109/L或＞20×109/L或Neu%＞85%且異型淋巴細(xì)胞/原始細(xì)胞；修改第12條為Lym#＞5.0×109/L且Lym%＞65%；修改第13條為Mono#＞1.5×109/L或Mon%＞15%。去掉第18條，修改第4條為＜70×109/L或＞1 000×109/L。修改第5條為＜70 g/L或＞200 g/L。應(yīng)用初檢規(guī)則400份標(biāo)本中只有6份標(biāo)本為假陰性，假陰性率為1.5%(6/400)，但復(fù)檢率較高為44.75% (179/400)，假陽性率為28.3%(113/400)。調(diào)整和修改之后的復(fù)檢規(guī)則假陰性率為2.5%(10/400)，復(fù)檢率為28%(112/400)，其中假陽性率為12.5%(50/400)，白血病細(xì)胞無漏檢。

1.5.2 復(fù)檢規(guī)則的確立 本實驗室接收的主要是急重癥患者的標(biāo)本，最終筆者結(jié)合標(biāo)本特點、儀器性能和臨床的需求制定了適合BC-6800的19條復(fù)檢規(guī)則，見表2。

表2 BC-6800儀器血細(xì)胞計數(shù)與WBC分類的復(fù)檢規(guī)則

2 討 論

每個醫(yī)學(xué)臨床實驗室采購的血液分析儀品牌不同，相應(yīng)的儀器的檢測原理和報警信息也不同，從而也導(dǎo)致了其識別血細(xì)胞形態(tài)的能力也存在差異。因而，依據(jù)不同的機型，并結(jié)合實驗室所接收標(biāo)本的特點，制定相應(yīng)的復(fù)檢規(guī)則是非常有必要的。

本實驗室結(jié)合臨床和實驗室工作的需求遵循3條原則。第一，控制漏診率(假陰性率＜5%)，在臨床可接受水平的范圍內(nèi)調(diào)整規(guī)則，盡可能地控制漏診率到最低水平；第二，確保無血液病細(xì)胞漏檢。血常規(guī)是血液病篩查和檢測最常用的檢測項目，一些與血液病密切相關(guān)的復(fù)檢規(guī)則，雖然假陽性率較高，但是去掉容易漏檢，故依據(jù)這一原則而保留；第三，控制復(fù)檢率。在補充儀器檢測的基礎(chǔ)上既提高檢驗質(zhì)量，又不影響工作效率。

本次復(fù)檢規(guī)則的總符合率為93.5%，其中陰性符合率為65.5%，陽性符合率為28%，假陽性率為4%，假陰性率為2.5%。假陰性標(biāo)本主要涉及紅細(xì)胞大小不均(1%)和血小板聚集(1%)，其次是原始細(xì)胞和異型淋巴細(xì)胞以及有核紅細(xì)胞(0.5%)。關(guān)于紅細(xì)胞大小不均和血小板聚集的假陰性的報警信息，可以適當(dāng)調(diào)低儀器報警系統(tǒng)的靈敏度，來降低假陰性率。但是為了防止漏檢白細(xì)胞，原始細(xì)胞和異型淋巴仍然設(shè)置為復(fù)檢規(guī)則。而關(guān)于有核紅細(xì)胞的報警，除了新生兒科的標(biāo)本，在白細(xì)胞計數(shù)正常且不伴有其他參數(shù)報警時，可以不鏡檢；但如果伴有原始細(xì)胞/異型淋巴細(xì)胞則必須鏡檢[5]。

制定本次復(fù)檢規(guī)則選取的標(biāo)本數(shù)量相對較小，運行之后，要嚴(yán)格按照復(fù)檢規(guī)則，對報警的標(biāo)本進(jìn)行鏡檢。鏡檢結(jié)果登記在血涂片記錄表上，并繼續(xù)做統(tǒng)計分析，進(jìn)一步完善復(fù)檢規(guī)則。

[1]朱忠勇.怎樣看待血液及尿分析儀的過篩作用[J].臨床檢驗雜志, 2003,21(6):321-323.

[2]朱曉輝,何菊英,朱忠勇.應(yīng)用血液分析儀后復(fù)查血片的內(nèi)容和方法及程序[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2003,26(12):785-787.

[3]興勇,叢玉隆.應(yīng)重視和提升傳統(tǒng)血液形態(tài)學(xué)檢驗水平[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2006,29(6):481-482.

[4]中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志編輯委員會.全國血液學(xué)復(fù)檢專家小組工作會議紀(jì)要暨血細(xì)胞自動計數(shù)復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)釋義[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志, 2007,30(4):380-382.

[5]畢燕玲,黃美群,寧秋,等.Sysmex XE-5000血液分析儀復(fù)檢規(guī)則的改進(jìn)與臨床應(yīng)用[J].廣東醫(yī)學(xué),2012,33(11):1578-1580.

Establishment and clinical evaluation of hematology review criteria for differential leucocytes count of BC-6800 hematology analyzer.

SONG Jin-ping,HUANG Rui,LU Pei-pei.Clinical Laboratory Center,the People's Hospital of Xinjiang Uyghur Autonomous,Urumqi 830001,Xinjiang,CHINA

Objective To establish the hematology review criteria for differential leucocytes count of BC-6800 hematology analyzer,and evaluate its rationality.MethodsA total of 400 blood samples were detected with BC-6800 hematology analyzer.At the same time,two blood smears were produced for each specimen,and artificial microscopy was carried out by two inspectors who have 10 years of morphological inspection work experience.The true positive rate,true negative rate,false positive rate and false negative rate were calculated based on that.ResultsThe comparison of the results of artificial microscopy and the instrument alarm information showed that the positive coincidence rate,the false positive rate,the negative coincidence rate and the false negative rate were 28%,8%,65.5%, 2.5%,respectively.The missed rate of review criteria(false negative rate)established in our laboratory was 2.5%, which was in line with the standard of the false negative rate(＜5%)of the International Collaborative Group with 24% re-examination rate.ConclusionWe will strictly abide by these review criteria,further improve the criteria based on clinical need,and reduce the missed rate and re-examination rate.

BC-6800 hematology analyzer;Review criteria;Missed rate

R446.11+3

A

1003—6350（2016）23—3831—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.23.015

2016-06-27)

宋金萍。E-mail：xjsongjp@sina.com