姜樹朋，李艷，童永清

(武漢大學人民醫(yī)院檢驗醫(yī)學中心，湖北 武漢 430060)

武漢地區(qū)536名體檢人群ALDH2的基因多態(tài)性分布

姜樹朋，李艷，童永清

(武漢大學人民醫(yī)院檢驗醫(yī)學中心，湖北 武漢 430060)

目的 了解武漢地區(qū)體檢人群ALDH2基因多態(tài)性的分布情況。方法選取2015年6月至2016年4月在武漢大學人民醫(yī)院進行ALDH2基因檢測的無親緣關系健康體檢人群536名，其中男性384名，女性152名。采用基因芯片法檢測ALDH2 rs671基因多態(tài)性，同時與已報道的其他地區(qū)ALDH2 rs671基因型結(jié)果進行比較。結(jié)果在武漢地區(qū)536名體檢人群中，ALDH2 rs671三種基因型即GG型、GA型和AA型頻率分別為64.18%、31.90%和3.92%；不同年齡段ALDH2基因型分布比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。本地區(qū)與上海、洛陽、西寧、四川地區(qū)ALDH2 rs671基因型比較差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，與北京、臺灣和山東地區(qū)比較差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。結(jié)論武漢地區(qū)ALDH2 rs671基因多態(tài)性分布具有地域特異性，ALDH2 GG型是本地區(qū)優(yōu)勢基因型。

乙醛脫氫酶2；rs671；基因多態(tài)性

乙醇主要在肝臟中代謝，即乙醇在乙醇脫氫酶(ADH)的催化下氧化生成乙醛，再由乙醛脫氫酶2 (ALDH2)催化生成乙酸，進入三羧酸循環(huán)，徹底氧化成CO2和水。乙醛脫氫酶2是該代謝過程中的主要關鍵酶[1]。乙醛脫氫酶基因位于12號染色體(12q24.2)，它的主要多態(tài)性是rs671，即ALDH2*1基因在第12號外顯子發(fā)生1510G＞A變異，形成ALDH2*2，相應地，酶的第504位氨基酸由谷氨酸(Glu)變?yōu)橘嚢彼?Lys)，在其作用下，乙醛代謝成乙酸的速度減慢，造成乙醛在體內(nèi)堆積，引發(fā)肝臟損傷，甚至導致終末期肝病或肝癌。此外，ALDH2 rs671基因多態(tài)性與心血管病疾病、精神分裂癥、阿茨海默癥等的發(fā)生或發(fā)展具有一定聯(lián)系[2-4]。本研究通過PCR基因芯片雜交法檢測536名體檢人群ALDH2 rs671基因型，調(diào)查武漢地區(qū)ALDH2基因多態(tài)性分布情況。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年6月至2016年4月于武漢大學人民醫(yī)院進行ALDH2基因檢測的無親緣關系健康體檢人群，其中男性384名，女性152名。

1.2 試劑和儀器 上海百傲科技股份有限公司ALDH2基因檢測試劑盒，由上海百傲科技股份有限公司生產(chǎn)。基因擴增儀：Bio-Rad T100 PCR儀(美國伯樂公司)?；蛐酒瑱z測儀器：e-Hyb全自動雜交儀(上海百傲公司)；BE-2.0生物芯片識讀儀(上海百傲公司)。

1.3 方法 采集受檢者2 mL EDTA-K2抗凝血，按照試劑盒說明書進行基因組DNA提取，按下列條件進行基因擴增：50℃5 min；94℃5 min；94℃25 s，60℃25 s，72℃30 s，35個循環(huán)；72℃5 min；4℃保存。然后按照試劑盒要求進行芯片雜交，判讀結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS20.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，Hardy-Weinberg平衡分析采用χ2檢驗，不同年齡組ALDH2基因型分布采用Kruskal-Wallis H檢驗，并將武漢地區(qū)ALDH2基因型分布頻率分別與文獻報道上海等7個地區(qū)的ALDH2基因型分布頻率相比較，兩地區(qū)間的基因多態(tài)性頻率分布的差異比較采用2×2列表的χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 ALDH2 G1510A基因分型結(jié)果 經(jīng)PCR-芯片雜交法反應后，所得結(jié)果利用分析軟件確定各樣本基因型。ALDH2三種基因型依次是GG、GA、AA，見圖1。

圖1 ALDH2 G1510A基因分型結(jié)果

2.2 Hardy-Weinberg平衡分析 對收集的536名體檢人群ALDH2的基因型檢測數(shù)據(jù)進行Hardy-Weinberg遺傳平衡檢驗，見表1，ALDH2 G與A兩種等位基因的頻率分別為80.13%和19.87%，差異無統(tǒng)計學意義(χ2=0.001 9，P＞0.05)，說明檢驗結(jié)果符合Hardy-Weinberg遺傳平衡定律，該樣本具有區(qū)域群體代表性。

表1 Hardy-Weinberg遺傳平衡檢驗

2.3 本地區(qū)不同年齡組體檢人群ALDH2 rs671基因型分布情況 536名體檢人群ALDH2基因GG型、GA型和AA型頻率分別為64.18%，31.90%和3.92%。見表2，將該人群分為4個年齡組，不同年齡組基因型進行Kruskal-Wallis H檢驗，差異無統(tǒng)計學意義(χ2= 1.699，P＞0.05)。

表2 武漢地區(qū)不同年齡組體檢人群ALDH2 rs671基因型分布情況(例)

2.4 本地區(qū)與文獻報道我國其他地區(qū)ALDH2 rs671基因型比較 根據(jù)相關文獻報道數(shù)據(jù)[5-11]，本研究武漢地區(qū)536名體檢人群ALDH2基因的分型數(shù)據(jù)與上海等其他7個地區(qū)數(shù)據(jù)進行比較，見表3。本地區(qū)與上海、洛陽、西寧、四川地區(qū)ALDH2 rs671基因型差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，與北京、臺灣和山東地區(qū)比較差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。

表3 武漢地區(qū)與文獻報道我國其他地區(qū)ALDH2 rs671基因型比較(例)

3 討 論

乙醛脫氫酶2是酒精代謝過程中的關鍵酶[12]。Rs671(1510G＞A)是ALDH2基因上最重要的一個SNP位點，該位點與ALDH2蛋白的空間結(jié)構(gòu)有關，因此影響該酶的活性。ALDH2 rs671野生純合子(GG型)顯示正常的酶活性；rs671雜合子(GA型)大約只有其正常活性的6%；而rs671突變純合子(AA型)對于乙醛降解基本上不具備酶活性,導致乙醛在體內(nèi)積累[1]，引發(fā)“飲酒臉紅反應”。相關動物實驗證實，乙醛脫氫酶2缺乏可以激活IL-6/STAT3通路，這條信號的持續(xù)激活可發(fā)生促炎反應，導致肝損傷[13]。另外，乙醛是一類非常活潑的分子，它可以修飾蛋白質(zhì)和核酸，導致這些生物分子功能發(fā)生障礙[14]。ALDH2除了具有脫氫酶活性外，還有酯酶的催化活性，其酯酶活性可以通過將硝酸甘油脫硝產(chǎn)生NO，進而引起血管擴張，當rs671位點變異后，硝酸甘油代謝速率大大降低，從而無法產(chǎn)生一氧化氮，難以發(fā)揮藥效[15-16]。因此，檢測ALDH2基因多態(tài)性不僅可以指導健康飲酒，還可指導硝酸甘油合理用藥。

本研究對武漢地區(qū)體檢人群進行了大樣本流行病學調(diào)查，武漢地區(qū)ALDH2 rs671基因多態(tài)性分布具有地域特異性，ALDH2 GG型是本地區(qū)優(yōu)勢基因型。將武漢與各地報道數(shù)據(jù)進行比較，結(jié)果顯示武漢地區(qū)ALDH2基因型與上海、洛陽、西寧、四川地區(qū)ALDH2基因型差異無統(tǒng)計學意義，與北京、臺灣和山東地區(qū)比較差異有統(tǒng)計學意義。表明武漢地區(qū)人群ALDH2 rs671 GG基因型的頻率大于臺灣人群，但小于北京與山東人群，GG型地域分布總體上具有北高南低的趨勢。

2014年發(fā)布的《世界癌癥報告》重點揭示了酒精在癌癥中的作用，該報告顯示，全球3.5%的癌癥與酒精有關。Jin等[17]通過小鼠模型和臨床數(shù)據(jù)，揭示了ALDH2是一種肝癌的腫瘤抑制因子，而ALDH2基因多態(tài)性變異，即ALDH2*2等位基因可能是肝癌發(fā)生的風險因素，ALDH2*2等位基因與乙醇的相互作用可能具有比先前理解的更重要的人類公共健康危害作用。因此，為了身體健康，ALDH2*2等位基因攜帶者，即ALDH2 GA型/AA型，應該慎重飲酒。

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Distribution of ALDH2 gene polymorphism in 536 cases of health checkup in Wuhan.

JIANG Shu-peng,LI Yan, TONG Yong-qing.Department of Clinical Laboratory,Renmin Hospital of Wuhan University,Wuhan 430060,Hubei,CHINA

ObjectiveTo study the distribution of aldehyde dehydrogenase 2 family(ALDH2)gene polymorphism of health checkup in Wuhan.MethodsA total of 536 cases of health checkup,whose ALDH2 genotype were detected in Renmin Hospital of Wuhan University from June 2015 to April 2016,among which 384 were male and 152 were female,were selected as the research objects.The polymorphism of ALDH2 rs671 was detected by gene-chip method,and the results were compared with ALDH2 rs671 genotype of other regions.ResultsThe frequencies of type GG,type GA and type AA in ALDH2 rs671 in 536 cases of health checkup in Wuhan were 64.18%,31.90%and 3.92%,respectively. There was no significant difference in ALDH2 genotype distribution among different age groups(P＞0.05).There was no significant difference in ALDH2 genotype between this region and Luoyang,Xining,Shanghai,Sichuan(P＞0.05),but there was significant difference between this region and Beijing,Taiwan,Shandong(P＜0.05).ConclusionThe distribution of ALDH2 rs671 gene polymorphism is regionally specific in Wuhan,and ALDH2 genotype GG is the dominant genotype in this region.

Aldehyde dehydrogenase 2 family(ALDH2);rs671;Gene polymorphism

R194.3

A

1003—6350（2016）23—3820—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.23.011

2016-07-12)

國家重點臨床?？平ㄔO項目(編號：財社[2010]305號)

李艷。E-mail：yanlitf1120@163.com。