曲建國

HPLC法對(duì)布洛芬混懸液中5種合成著色劑的檢測(cè)分析

曲建國

目的研究高效液相色譜法(HPLC)對(duì)布洛芬混懸液中5種合成著色劑的檢測(cè)效果。方法使用聚酰胺法對(duì)布洛芬混懸液中的合成著色劑進(jìn)行純化與提取,分別采用HPLC進(jìn)行合成著色劑測(cè)定。結(jié)果檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、日落黃以及誘惑紅濃度分別在0.41～12.33、0.51～15.27、0.81～24.11、0.72～21.21、0.52～15.10 μg/ml的范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好；5種合成著色劑的回收率均＞99%,精確度＞0.8；上海強(qiáng)生公司生產(chǎn)的布洛芬混懸液中合成著色劑主要為誘惑紅,含量較低,從種類和含量兩方面均優(yōu)于天大藥業(yè)生產(chǎn)的,且安全性更好。結(jié)論HPLC法檢測(cè)布洛芬混懸液中合成著色劑的效果良好,操作方便簡單,精確度高,可重復(fù)利用,經(jīng)濟(jì)性高。

高效液相色譜法；布洛芬；著色劑；檢測(cè)

布洛芬中合成著色劑作為廣泛使用的藥用輔料之一,在人體內(nèi)容易轉(zhuǎn)化成其他有害衍生物,影響患者的身體健康,因此對(duì)合成著色劑進(jìn)行檢測(cè)是十分必要的［1,2］。目前對(duì)于合成著色劑的檢測(cè)方法主要為HPLC法,本研究旨在探討HPLC法對(duì)布洛芬混懸液中5種合成著色劑的檢測(cè)效果,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 儀器和藥品 選擇的高效液相色譜儀為Agilent 1260色譜儀,安捷倫(Chem Station工作站),Venusil MPC18柱。甲醇為色譜純,乙酰胺、聚酰胺粉、甲酸、無水乙醇以及氨水為分析純,水為超純水。準(zhǔn)備不同廠家生產(chǎn)的100ml布洛芬混懸液(A組:上海強(qiáng)生制藥有限公司,國藥準(zhǔn)字H19991011;B組:天大藥業(yè)有限公司,國藥準(zhǔn)字H10980251),分別精密吸取備0.50mg/ml的檸檬黃0.8ml、莧菜紅1.2ml、胭脂紅1.6ml、日落黃1.4ml以及誘惑紅0.5ml置于50ml的容量瓶內(nèi),加水稀釋、搖勻,作為混合標(biāo)準(zhǔn)品。

1.2 研究方法 精密量取5ml布洛芬混懸液放置于20ml的量瓶中,注入清水至刻度線,振蕩搖勻,全部轉(zhuǎn)移至離心管中,進(jìn)行離心操作,選取上清液。將上清液加熱到60℃,將聚酰胺粉倒入將色素吸附出來并轉(zhuǎn)移至G3垂容漏斗中,用檸檬酸溶液攪拌抽濾,然后再用甲醇、甲酸以3∶2的比例進(jìn)行攪拌洗滌,直至溶液無色,再加水直至溶液呈中性。最后將無水乙醇、氨水、水按7∶2∶1的比例進(jìn)行5次解吸,5ml/次。收集解吸液自然蒸發(fā)至近干后加水溶解至10ml,利用濾膜濾過作為供試品。色譜柱選擇250mm×4.6mm,流動(dòng)相：A組：0.02 mol/L的乙酸銨,B組：甲醇。室溫為25℃,檢測(cè)波長250 nm,梯度條件見表1。將5種合成著色劑標(biāo)準(zhǔn)液按照一定比例稀釋成系列溶液,按照色譜條件進(jìn)行測(cè)定,記錄色譜圖,以峰面積為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算線性方程。

表1 梯度條件表

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 5種合成著色劑的線性方程和最佳濃度見表2。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)品的回收率情況比較 5種合成著色劑的回收率均＞99%,精確度＞0.8,各合成著色劑之間回收率、精確度比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見表3。

2.3 兩個(gè)產(chǎn)家布洛芬混懸劑合成著色劑的含量比較 上海強(qiáng)生公司生產(chǎn)的布洛芬混懸液中合成著色劑主要為誘惑紅,含量為(4.05±0.53) μg/ml；天大藥業(yè)生產(chǎn)的布洛芬混懸液中合成著色劑為檸檬黃和胭脂紅,含量分別為(38.33±0.45)、(33.49±0.97)μg/ml。見表4。

表2 5種合成著色劑的線性方程和最佳濃度表

表3 標(biāo)準(zhǔn)品的回收率情況比較

表4 兩組布洛芬混懸劑合成著色劑的含量(±s,μg/ml)

表4 兩組布洛芬混懸劑合成著色劑的含量(±s,μg/ml)

注：與A組比較,aP＜0.05

組別 容量(ml) 檸檬黃 胭脂紅 誘惑紅A組 1 0 0 4.05±0.53 B組 1 38.33±0.45a 33.49±0.97a 0a

3 討論

本文發(fā)現(xiàn)檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、日落黃以及誘惑紅濃度分別在0.41～12.33、0.51～15.27、0.81～24.11、0.72～21.21、0.52～15.10 μg/ml的范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。此外,5種合成著色劑的回收率均＞99%,精確度＞0.8,說明HPLC法檢測(cè)合成著色劑無浪費(fèi),較經(jīng)濟(jì)。由于合成著色劑的極性較大,在色譜體系中是以離子化的形式存在的,在檢測(cè)過程中添加無機(jī)電解質(zhì)可以提高響應(yīng)值,改善分離度。在本次研究中,以0.02 mol/L的乙酸銨和甲醇為流動(dòng)相系統(tǒng)進(jìn)行梯度洗脫,可以使各色譜分離良好,保留時(shí)間更長。此外,上海強(qiáng)生公司生產(chǎn)的布洛芬混懸液中合成著色劑主要為誘惑紅,含量較低,從種類和含量兩方面均優(yōu)于于天大藥業(yè)生產(chǎn)的,因此家屬在布洛芬混懸液的選擇上可優(yōu)先選擇前者。

綜上所述,HPLC法檢測(cè)布洛芬混懸液中合成著色劑的效果良好、 操作方便簡單、 精確度高、 可重復(fù)利用、 經(jīng)濟(jì)性高。

［1］劉志輝.HPLC法測(cè)定布洛芬混懸液中5種合成著色劑.中國藥事,2014,28(12):1322-1326.

［2］鄒尚榮,申坤,李燕青,等.HPLC法測(cè)定右旋布洛芬緩釋膠囊有關(guān)物質(zhì).海峽藥學(xué),2014,26(2):59-63.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.09.218

2016-01-31］

110036 遼寧省藥品檢驗(yàn)檢測(cè)院檢驗(yàn)一室