孔昌盛，陳 俊，鄒曉艷，張 義，朱玲娜

（1.宜昌市夷陵醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北宜昌 443100;2.三峽大學(xué)仁和醫(yī)院手足顯微外科）

503例尿培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本病原菌分布及耐藥性分析

孔昌盛1，陳 俊2，鄒曉艷1，張 義1，朱玲娜1

（1.宜昌市夷陵醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北宜昌 443100;2.三峽大學(xué)仁和醫(yī)院手足顯微外科）

目的:分析我院尿培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本的細(xì)菌分布及耐藥情況，為臨床合理選用抗菌藥物提供依據(jù)。方法:回顧性分析我院2013年1月-2014年12月尿培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本病原菌分布情況和耐藥性。結(jié)果:共分離菌株503株，其中革蘭陰性細(xì)菌377株(75.0%）、革蘭陽(yáng)性細(xì)菌85株(16.9%）、真菌41株(8.1%）;檢出率最高的前3位病原菌依次為大腸埃希菌(62.0%）、腸球菌屬(10.5%）和肺炎克雷伯菌(9.3%）。藥敏結(jié)果顯示大腸埃希菌對(duì)頭孢噻肟、頭孢曲松、喹諾酮類(lèi)的耐藥率超過(guò)50%;肺炎克雷伯菌對(duì)阿莫西林/克拉維酸、頭孢噻肟、頭孢曲松的耐藥率超過(guò)42%，對(duì)呋喃妥因的耐藥率超過(guò)40%;屎腸球菌對(duì)各種抗菌藥物的耐藥率明顯高于糞腸球菌，對(duì)喹諾酮的耐藥率為100%。結(jié)論:我院尿路感染病原菌種類(lèi)復(fù)雜多樣、耐藥程度嚴(yán)重，應(yīng)及時(shí)監(jiān)測(cè)病原菌的菌群種類(lèi)分布和耐藥變遷，以指導(dǎo)臨床合理、規(guī)范地使用抗菌藥物。

尿培養(yǎng);菌群分布;耐藥性

有學(xué)者報(bào)道[1]，尿路感染在醫(yī)院感染中僅次于呼吸道感染，位居第2位，占16.3%。由于反復(fù)感染與長(zhǎng)期應(yīng)用抗菌藥物所導(dǎo)致的細(xì)菌耐藥是治療失敗的主要原因之一，監(jiān)測(cè)尿路感染細(xì)菌的構(gòu)成和耐藥性，對(duì)臨床選擇藥物具有重要價(jià)值[2-3]。本研究回顧分析了我院2013-2014年尿培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本的細(xì)菌分布和耐藥性，旨在為臨床合理使用抗生素提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 按照尿培養(yǎng)陽(yáng)性的標(biāo)準(zhǔn)，2013年1月-2014年12月從宜昌市夷陵醫(yī)院患者中篩選出尿培養(yǎng)陽(yáng)性的菌株503例(多次尿培養(yǎng)陽(yáng)性的只納入第一次結(jié)果）。

1.2 方法 ⑴按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第3版）的要求進(jìn)行標(biāo)本采集和培養(yǎng)。⑵采用ATB細(xì)菌鑒定儀及其配套的板條、試劑（法國(guó)生物梅里埃公司）進(jìn)行菌種鑒定。⑶采用K-B法進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn)，判定標(biāo)準(zhǔn)按美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI）2013年版的規(guī)定[4]。質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌ATCC29213、大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853，購(gòu)自衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心。⑷檢測(cè)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs):按CLSI推薦的紙片篩選法和酶抑制劑增強(qiáng)確證試驗(yàn)檢測(cè)大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、產(chǎn)酸克雷伯菌和奇異變形桿菌中產(chǎn)ESBLs菌株。

2 結(jié)果

2.1 病原菌分布 503株致病菌中，革蘭陰性細(xì)菌377株（75.0%）、革蘭陽(yáng)性細(xì)菌85株（16.9%）、真菌41株（8.1%）；大腸埃希菌中ESBLs陽(yáng)性株數(shù)184株，陽(yáng)性率為59.0%（184/312），肺炎克雷伯菌中ESBLs陽(yáng)性株數(shù)20株，陽(yáng)性率為42.6%(20/47）。見(jiàn)表1:

表1 503株病原菌構(gòu)成比

2.2 大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇異變形桿菌的耐藥性 未檢出對(duì)碳青霉烯類(lèi)藥物耐藥的大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇異變形桿菌。三種病原菌的耐藥率見(jiàn)表2:

表2 大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇異變形桿菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率[例(%）]

2.3 腸球菌屬、鏈球菌屬、葡萄球菌屬的耐藥性 14株葡萄球菌中，耐甲氧西林(MRS）菌株5株，占35.7%。腸球菌屬、鏈球菌屬、葡萄球菌屬具體耐藥率見(jiàn)表3:

表3 腸球菌屬、鏈球菌屬、葡萄球菌屬對(duì)抗菌藥物的耐藥率[例(%）]

3 討論

近年來(lái)，隨著廣譜抗菌藥物、免疫抑制劑、激素及介入技術(shù)等先進(jìn)醫(yī)療手段的廣泛應(yīng)用，尿路感染發(fā)病率日益增多[3]。本研究顯示，泌尿道感染致病菌以革蘭陰性細(xì)菌為主(75.0%），主要致病菌為大腸埃希菌，占62.0%，高于國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道[5-6]。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs陽(yáng)性率分別為59.0%和42.6%，低于國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道[5-6]。

由于臨床上對(duì)懷疑大腸埃希菌感染的尿路感染患者經(jīng)驗(yàn)用藥常偏重，而大腸埃希菌對(duì)常用抗菌藥物的總體耐藥性偏高，導(dǎo)致了更多的耐藥菌及真菌感染的出現(xiàn)。實(shí)際上，對(duì)于非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌菌株，選擇第2、3代頭孢菌素亦可取得很好的療效;對(duì)于產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌菌株，由于其耐藥質(zhì)粒上常攜帶ESBLs酶、AmpC酶、喹諾酮類(lèi)耐藥基因、氨基糖苷類(lèi)鈍化酶等耐藥基因，因而具備多藥耐藥特性，對(duì)青霉素、頭孢菌素及氨曲南均呈現(xiàn)高度耐藥，故建議首選β-內(nèi)酰胺酶抑制劑、碳?xì)涿赶╊?lèi)藥物[7-9]。另外，為減少ESBLs菌株的出現(xiàn)，應(yīng)避免長(zhǎng)期使用第2代頭孢菌素或同類(lèi)間頻繁更換，以減少細(xì)菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗菌藥物耐藥的產(chǎn)生和播散。值得注意的是ESBLs種類(lèi)繁多，多數(shù)酶所水解的底物具有一定專(zhuān)一性，并非每一種酶對(duì)各種頭孢菌素類(lèi)或氨曲南的水解程度完全一樣。本次監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，我院大腸埃希菌對(duì)喹諾酮類(lèi)的耐藥率達(dá)50%以上，這可能與本院經(jīng)常使用喹諾酮類(lèi)藥物治療尿路感染有關(guān)，也可能由于近年來(lái)很多養(yǎng)殖業(yè)用喹諾酮類(lèi)藥物預(yù)防動(dòng)物感染等有關(guān)[10]。因此，目前臨床醫(yī)生經(jīng)驗(yàn)用藥不要選用此類(lèi)藥物。

本院尿培養(yǎng)分離的革蘭陽(yáng)性球菌以腸球菌屬、鏈球菌屬和葡萄球菌屬為主。腸球菌對(duì)喹諾酮類(lèi)的耐藥率最高達(dá)100%，屎腸球菌的耐藥率顯著高于糞腸球菌。由于腸球菌的耐藥機(jī)制獨(dú)特，已對(duì)人類(lèi)健康造成了極大威脅，其具有的多重耐藥性、天然耐藥性以及獲得性耐藥等特性，給臨床腸球菌感染的治療和控制帶來(lái)了極大困難，應(yīng)引起足夠重視[11]。鏈球菌屬對(duì)紅霉素、克林霉素、左氧氟沙星的耐藥率較高，但對(duì)青霉素的耐藥率只有11.1%，因此，尿路感染檢出鏈球菌屬，可優(yōu)先選擇青霉素作為常規(guī)藥物。葡萄球菌屬對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)、克林霉素耐藥率較高，對(duì)青霉素的耐藥率高達(dá)100%，且耐甲氧西林菌株占比35%以上，其對(duì)所有β內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素耐藥，特別是兒科患者臨床抗生素使用面十分狹窄，糖肽類(lèi)抗生素是治療耐甲氧西林葡萄球菌感染的療效最佳的藥物。

本研究顯示，我院兩年間在尿液中檢出真菌41株，僅次于肺炎克雷伯菌，這可能是臨床廣譜抗菌藥物大量使用，人體菌群失調(diào)，激素和免疫抑制劑應(yīng)用過(guò)多、介入操作使機(jī)體免疫力低下，條件致病菌大量繁殖所致;也可能由于臨床采集尿液時(shí)操作不規(guī)范、標(biāo)本采集后未及時(shí)送檢和接種以及標(biāo)本污染有關(guān)。

綜上，本院尿路感染病原菌種類(lèi)復(fù)雜多樣且耐藥程度嚴(yán)重，應(yīng)加強(qiáng)清潔中段尿培養(yǎng)的送檢，并及時(shí)監(jiān)測(cè)病原菌的菌群分布和耐藥性的發(fā)展趨勢(shì)，以指導(dǎo)臨床合理、規(guī)范地使用抗菌藥物，為患者制定合理有效的治療方案。

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DISTRIBUTION AND DRUG RESISTANCE OF PATHOGEN IN URINE CULTURE POSITIVE SPECIMENS OF 503 CASES

KONG Chang-sheng, CHEN Jun, ZOU Xiao-yan, et al
(CLinicaL Laboratory Department of Yichang YiLing HospitaL, Hubei Yichang 443100, China)

Urine culture; Βacterial f ora distribution; Drug resistance

R446.5

A

1004-6879(2016）04-0291-04

2015-06-20）

【ABSTRACT】Objective:To investigate the bacterial distribution and drug resistance in culture-positive urine in our hospital, and to provide reference for rational use of antibiotics in clinic.Methods:Distribution and drug resistance to pathogens in 503 culture-positive specimens from 2013.1 to 2014.12 were retrospectively analyzed.Results:503 bacterial strain were isolated, which included 377 strains of gram-negative bacteria strain (75.0%), 85 strains of gram-positive bacteria strain (16.9%) and 41 stains of fungus (8.1%); The highest detection rate of the top three strains were Escherichia coli (62.0%), Enterococcus (10.5%) and Klebsiella pneumoniae (9.3%). The resistance rate of Escherichia coli to cefotaxime, ceftriaxone and quinolones were all higher than 50%. The resistance rate of Klebsiella pneumoniae to amoxicillin/clavulanic acid, cefotaxime, and ceftriaxone were all higher than 42%; resistance rate to nitrofurantoin was higher 40%. The antimicrobial resistance of Enterococcus faecium was signif cantly higher than Enterococcus faecalis; and the resistance rate to quinolones was 100.00%.Conclusions:The pathogens of urinary tract infection in our hospital are complex and diverse, and the drug resistance is serious. In order to guide clinical rational and standard use of antibiotics, the distribution of pathogenic bacteria and the changes of drug resistance should be timely monitored.