張新閣

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骨橋蛋白（OPN）在子癇前期患者胎盤組織中的表達(dá)及作用分析

張新閣

目的 探析骨橋蛋白（OPN）在子癇前期患者胎盤組織中的表達(dá)及作用。方法 選擇我院產(chǎn)科2013年1月～2014年12月收治75例子癇前期住院分娩產(chǎn)婦及75例健康產(chǎn)婦進(jìn)行研究，將其作為研究組和對照組，研究組30例為輕度PE（輕度組）、45例為重度PE（重度組），用免疫組織化學(xué)方法檢測兩組胎盤組織中OPN表達(dá)情況并比較。結(jié)果 研究組和對照組均存在明顯OPN表達(dá)，以胎盤絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞胞膜、胞質(zhì)以及胎盤毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞為主要表達(dá)部位；在OPN免疫反應(yīng)產(chǎn)物吸光度方面，重度組OPN免疫反應(yīng)產(chǎn)物吸光度最低，對照組最高，三組間兩兩比較均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 OPN參與子癇前期發(fā)病，且在子癇前期患者胎盤組織中表達(dá)明顯減弱，但到底是PE病因還是疾病結(jié)果有待深入研究。

OPN；子癇前期；胎盤組織；表達(dá)

子癇前期（preeclampsia，PE）為妊娠期特有多系統(tǒng)疾病，對母嬰健康有較大危害。該病發(fā)病率在5%左右，為導(dǎo)致圍生期死亡主要并發(fā)癥之一［1］。PE主要臨床表現(xiàn)為母體綜合征（蛋白尿、高血壓，伴或不伴有多器官系統(tǒng)損傷），部分孕婦還會伴有胎兒綜合征（胎兒窘迫、胎兒生長受限），以致圍產(chǎn)兒患病率、死亡率升高。骨橋蛋白（osteopontin，OPN）為多功能細(xì)胞因子及黏附蛋白，在介導(dǎo)細(xì)胞分化、遷移、黏附、增殖、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、免疫調(diào)節(jié)、炎癥及對感染性疾病免疫能力方面作用重大［2］。本文以我院產(chǎn)科收治的75例子癇前期住院分娩產(chǎn)婦及75例健康產(chǎn)婦進(jìn)行研究，探析骨橋蛋白（OPN）在子癇前期患者胎盤組織中表達(dá)及作用，現(xiàn)報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

1.1.1納入標(biāo)準(zhǔn)（1）符合第七版《婦產(chǎn)科學(xué)》［3］中PE診斷標(biāo)準(zhǔn)；（2）自愿加入研究。

1.1.2排除標(biāo)準(zhǔn)（1）合并糖尿病與高血壓者；（2）合并免疫系統(tǒng)疾病者；（3）合并肝腎、心臟功能障礙者。

1.1.3分組資料選擇我院產(chǎn)科2013年1月～2014年12月收治的子癇前期住院分娩產(chǎn)婦75例作為研究組，其中30例為輕度PE、45例為重度PE。另從同期住院分娩健康產(chǎn)婦中隨機(jī)抽取75例作為對照組。研究組年齡在22～31歲，平均（28.9±4.0）歲。孕周在34～41周，平均（37.7±1.8）周。對照組年齡在23～30歲，平均（28.7±3.8）歲。孕周在33～40周，平均（37.6±1.7）周。兩組年齡、孕周的比較無顯著差異（P＞0.05），具有可比性。

1.2方法

產(chǎn)婦娩出胎盤后避開鈣化、壞死、出血部位取3～4塊胎盤中央絨毛豐富部位母體面胎盤組織，大小在1.0 cm×1.0 cm×1.5 cm，生理鹽水沖洗并置于液氮中，過夜后保存在-80℃溫度下。另取1.0 cm×1.0 cm×1.5 cm新鮮胎盤置于4%多聚甲醛中固定，用于免疫組化測定。胎盤組織OPN蛋白表達(dá)用SP法（免疫組織化學(xué)方法）檢測：4%多聚甲醛固定的小塊胎盤組織行常規(guī)脫水、透明、石蠟包埋后切片，厚度5μm，每個組織塊取3張。鼠抗OPN單克隆抗體室溫孵育切片過夜；生物素化兔抗鼠IgG室溫孵育1h；以DAB/H2O2顯色，之后蘇木精輕度復(fù)染。抗體稀釋液替代一抗，行陰性對照，反應(yīng)呈陰性。光學(xué)顯微鏡下選取5個高倍視野（×400）觀察照相，測定切片OPN免疫反應(yīng)產(chǎn)物的吸光度值。比較兩組胎盤組織中OPN表達(dá)情況，包括部位及表達(dá)水平等。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法

2　結(jié)果

研究組和對照組均存在明顯OPN表達(dá)，以胎盤絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞胞膜、胞質(zhì)以及胎盤毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞為主要表達(dá)部位；在OPN免疫反應(yīng)產(chǎn)物吸光度方面，重度組OPN免疫反應(yīng)產(chǎn)物吸光度為（0.33±0.06），輕度組為（0.62±0.05），對照組為（0.98±0.09），重度組OPN免疫反應(yīng)產(chǎn)物吸光度最低，對照組最高，三組間兩兩比較均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

3　討論

近百年來國際醫(yī)學(xué)界對PE病因形成多種學(xué)說，包括免疫學(xué)說、胎盤血管損傷學(xué)說、基因遺傳學(xué)說、凝血與纖溶系統(tǒng)失調(diào)學(xué)說、滋養(yǎng)層淺表植入學(xué)說、前列腺素系統(tǒng)學(xué)說、腎素-血管緊張素-醛固酮學(xué)說等［4］。近年，學(xué)者更傾向于認(rèn)同滋養(yǎng)層淺表植入學(xué)說，即為滋養(yǎng)細(xì)胞功能障礙引發(fā)PE［5］。原因在于有病理生理學(xué)研究顯示，滋養(yǎng)細(xì)胞分化異常導(dǎo)致浸潤表淺、胎盤淺著床、螺旋動脈重鑄失敗、過度炎性反應(yīng)、血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷等為PE特征性病理生理變化。

有臨床研究證實［6］，OPN為影響子宮胚胎微環(huán)境重要因素，其在胎盤上及滋養(yǎng)細(xì)胞中都有表達(dá)，與整合素受體結(jié)合，參與調(diào)節(jié)絨毛侵入、胎盤形成、介導(dǎo)細(xì)胞遷移、母胎界面免疫調(diào)節(jié)等過程，與子癇前期發(fā)病有密切關(guān)系。OPN為重要細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)構(gòu)組分，富含精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸三肽序列，在各種組織及體液中廣泛存在，具多種生物學(xué)活性。為明確OPN在子癇前期發(fā)病機(jī)制中作用，本次以我院患者進(jìn)行研究，比較不同程度子癇前期患者及正常孕婦胎盤組織中OPN蛋白表達(dá)情況。結(jié)果顯示，OPN蛋白在兩組胎盤組織中均表達(dá)，且以胎盤絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞胞質(zhì)、胞膜及胎盤毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞為主。且PE組患者水平明顯低于對照組，PE組中則是重度低于輕度，提示隨著疾病的發(fā)生及發(fā)展，胎盤中OPN蛋白表達(dá)明顯減弱。由此我們推測胎盤組織中OPN低表達(dá)與PE發(fā)病有著重要聯(lián)系，OPN表達(dá)的降低會改變子宮-胎盤微環(huán)境，信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑也會受到直接影響［7］，從而引發(fā)母胎界面免疫失衡，導(dǎo)致滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲力不足與螺旋動脈重鑄失敗，胎盤淺著床，最終引發(fā)PE。此外，OPN低表達(dá)還可能通過打破MMPs/TIMPs平衡，引發(fā)過度炎癥反應(yīng)誘導(dǎo)PE發(fā)生。國外有研究指出［8］，正常妊娠過程中，OPN對滋養(yǎng)層生長及侵入的調(diào)節(jié)過程復(fù)雜，而葡萄胎、胎兒生長受限、自然流產(chǎn)及子癰前期等妊娠相關(guān)疾病中該種調(diào)節(jié)被改變，與本次研究保持一致，但OPN低表達(dá)到底是PE病因還是疾病結(jié)果有待進(jìn)一步研究。

綜上，OPN在子癇前期患者胎盤組織中表達(dá)明顯減弱，且參與PE發(fā)病，OPN低表達(dá)到底是PE病因還是疾病結(jié)果有待進(jìn)一步研究。

［1］夏俊霞，喬福元，蘇放明，等. 子癇前期患者胎盤骨橋蛋白的表達(dá)及意義［J］.華中科技大學(xué)學(xué)報（醫(yī)學(xué)版），2010，39（2）：184-188.

［2］夏俊霞，喬福元，吉瓊梅，等. 骨橋蛋白在缺氧對滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲力影響機(jī)制中的作用［J］. 華中科技大學(xué)學(xué)報（醫(yī)學(xué)版），2012，41（4）：431-435.

［3］樂杰. 婦產(chǎn)科學(xué)［M］. 第7版. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：92-93.

［4］徐亞玲，常穎，陳敘. 子癇前期預(yù)測指標(biāo)的臨床應(yīng)用研究進(jìn)展［J］.國際婦產(chǎn)科學(xué)雜志，2016，43（1）：11-14.

［5］李滿超，何志明，周祎，等. 骨橋蛋白在體重不一致性雙胎胎盤中的表達(dá)［J］.中國產(chǎn)前診斷雜志（電子版），2013，5（3）：14-20.

［6］謝暢，穆飆，趙永聚，等. 樂至黑山羊OPN基因多態(tài)性及其與胎盤效率的相關(guān)性研究［A］.//第十六次全國動物遺傳育種學(xué)術(shù)討論會暨紀(jì)念吳仲賢先生誕辰100周年論文集［C］. 2011：387.

［7］夏俊霞，喬福元，蘇放明. 子癇前期患者胎盤骨橋蛋白及整合素ανβ3的表達(dá)及意義［J］. 華西醫(yī)學(xué)，2010，25（2）：322-325.

［8］沈瑤，林建華. 子癇前期胎盤因素在胎兒生長受限中的作用［J］.現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展，2010，19（1）：59-62.

The Expression and Function of Osteopontin （OPN） in Placenta Tissue of Patients with Preeclampsia

ZHANG Xinge Department of Pathology，Central Hospital of Zhumadian City，Zhumadian He'nan463000，China

Objective To study the expression and function of osteopontin（OPN） in placenta tissue of patients with preeclampsia. Methods 75 cases of pregnant women with preeclampsia admitted into our hospital from January 2013 to December 2014 and 75 healthy women were selected as the research object，as the study group and the control group，30 cases in the study group were mild PE （mild group），45 cases were severe PE （severe group）. The expression of OPN in placenta tissue of the two groups was detected and compared by immunohistochemical method. Results Therewere obvious expression of OPN of the two groups and the cell membrane of placental trophoblast cells，cytoplasm and placental capillary endothelial cells were the mainly expressing parts. From the aspect of absorbtivity of immune response of OPN，the absorbtivity of OPN immune reaction product of the severe group was the lowest while the control group was highest. The contrast differences among the three groups were statistically signifcant （P＜0.05）. Conclusion OPN is involved in the pathogenesis of preeclampsia，and its expression in placenta of patients with preeclampsia decreases signifcantly，but further study is needed to confrm whether the results are caused by PE or disease.

OPN，Preeclampsia，Placenta tissue，Expression

R714.245

A

1674-9308（2016）18-0035-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2016.18.022

河南省駐馬店市中心醫(yī)院病理科，河南 駐馬店 463000