萬兵兵,劉 曄,吳 越,劉世亮,王國(guó)文,張東艷,姜 瑛*(.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 資源與環(huán)境學(xué)院,河南 鄭州450002; 2.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 資源與環(huán)境科學(xué)學(xué)院,江蘇 南京20095; .山東省土壤肥料總站,山東 濟(jì)南 25000)

煙草根際解磷解鉀菌的篩選鑒定及應(yīng)用效果研究

萬兵兵1,2,劉 曄1,吳 越3,劉世亮1,王國(guó)文1,張東艷1,姜 瑛1*
(1.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 資源與環(huán)境學(xué)院,河南 鄭州450002; 2.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 資源與環(huán)境科學(xué)學(xué)院,江蘇 南京210095; 3.山東省土壤肥料總站,山東 濟(jì)南 250100)

為了解決植煙區(qū)土壤及煙草磷、鉀缺乏問題,從長(zhǎng)勢(shì)較好的煙草根際土壤中篩選解磷解鉀菌株,并對(duì)其進(jìn)行鑒定。結(jié)果表明,從長(zhǎng)勢(shì)較好的煙草根際土壤中篩選出一株高效解磷解鉀菌株YC4,其對(duì)無機(jī)磷、難溶性鉀的溶解量分別達(dá)到286.33、17.90 mg/L。經(jīng)形態(tài)觀察、生理生化特性測(cè)定及 16S rDNA序列分析確定該菌株為彎曲芽孢桿菌(Bacillusflexus)。盆栽試驗(yàn)結(jié)果表明,接種該菌株的盆栽土壤有效磷、有效鉀含量分別比未接種該菌株處理(對(duì)照)提高了6.81%、4.72%;接種菌株處理煙草根總長(zhǎng)、根總表面積、根總體積和根尖總數(shù)分別較對(duì)照顯著提高45.33%、55.96%、78.00%、28.30%,鮮質(zhì)量約為對(duì)照的2倍,株高增幅達(dá)21.03%,干質(zhì)量、SPAD值及植株的磷、鉀含量分別較對(duì)照提高91.55%、14.03%、18.29%、29.57%。綜上,該菌株可提高植煙區(qū)土壤有效磷、有效鉀含量,促進(jìn)煙草生長(zhǎng)。

根際促生菌； 解磷解鉀菌； 煙草生長(zhǎng)

煙草是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)作物,種植面積已超過130萬hm2,居世界首位,主要分布在云南、山東、河南、甘肅、湖南等5個(gè)省份。其中，河南省的種植面積居全國(guó)第三,主要分布在許昌、南陽、周口和駐馬店等地,是我國(guó)濃香型煙葉的代表[1-2]。煙葉除作為卷煙的原料之外,其所含的大量的天然化學(xué)物質(zhì),如煙堿、蛋白質(zhì)、茄尼醇、尼古丁,都是優(yōu)質(zhì)的化工和醫(yī)藥原料[3]。

煙區(qū)土壤中磷、鉀元素含量及供應(yīng)情況對(duì)煙草的生長(zhǎng)、產(chǎn)量及品質(zhì)有很大的影響。河南省有83.22%的植煙區(qū)土壤有效磷含量低于20 mg/kg,64.83%的植煙區(qū)土壤有效鉀含量低于150 mg/kg,有效養(yǎng)分的缺乏嚴(yán)重制約著煙草產(chǎn)業(yè)的發(fā)展[2,4-5]。提高土壤中有效養(yǎng)分含量是解決這一問題的主要途徑,而長(zhǎng)期、大量施用工業(yè)化肥會(huì)使有害物質(zhì)殘留量日趨增加,土壤微生態(tài)平衡失調(diào),質(zhì)量下降,同時(shí)會(huì)引發(fā)水體富營(yíng)養(yǎng)化,對(duì)食品安全、人類健康及生態(tài)環(huán)境造成極大威脅[6]。因此,在當(dāng)今大力發(fā)展生態(tài)農(nóng)業(yè)的背景下,應(yīng)減少農(nóng)藥和化肥的使用,采用生態(tài)方法促進(jìn)土壤磷、鉀的溶解,提高有效磷、有效鉀含量[7-8]。而接種土壤中附生于植物根系的某些植物根際促生菌(plant growth promoting rhizobacteria,PGPR)能夠活化土壤中的無效養(yǎng)分,促進(jìn)植物生長(zhǎng)及其對(duì)礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)的吸收和利用,是生態(tài)農(nóng)業(yè)發(fā)展的有效途徑之一[9-10]。

許昌市是河南省重要的煙葉產(chǎn)區(qū)，而該煙區(qū)土壤速效鉀含量處于缺乏狀態(tài),有效磷含量也處于中等水平[11]。為此,本研究從許昌市煙草種植區(qū)選出一棵長(zhǎng)勢(shì)較好的煙草,采集其根際土壤,篩選根際菌,分離純化能夠溶解無機(jī)磷、難溶性鉀的根際促生菌,進(jìn)行液體搖瓶培養(yǎng)、煙草盆栽試驗(yàn),以期解決植煙區(qū)土壤缺磷、缺鉀問題。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試土壤 土壤為許昌植煙區(qū)的0～20 cm潮土,其基本養(yǎng)分含量如表1所示。

表1 供試土壤基本養(yǎng)分含量

1.1.2 培養(yǎng)基 LB培養(yǎng)基：蛋白胨 10 g、酵母提取物 5 g、NaCl 10 g、瓊脂 20 g、蒸餾水1 000 mL,pH 值7.0～7.2,121 ℃滅菌30 min[12]。

無機(jī)磷培養(yǎng)基：Ca3(PO4)25 g、葡萄糖10 g、(NH4)2SO40.5 g、NaCl 0.3 g、MgSO4·7H2O 0.3 g、KCl 0.3 g、蒸餾水1 000 mL,pH 值7.0～7.2,121 ℃滅菌30 min[12]。

液態(tài)解鉀細(xì)菌培養(yǎng)基：蔗糖10.0 g、酵母膏0.5 g、(NH4)2SO41.0 g、K2HPO4·3H2O 2.0 g、MgSO4·7H2O 0.5 g、CaCO31.0 g、鉀長(zhǎng)石粉1.0 g、蒸餾水1 000 mL, pH 值7.0～7.2,121 ℃滅菌30 min[12]。

若需要用固體培養(yǎng)基時(shí),在以上配方基礎(chǔ)上加瓊脂20 g/L。

1.2 解磷解鉀菌株的篩選

從許昌植煙區(qū)大田中選出一株長(zhǎng)勢(shì)較好的煙草,除去地上部分,將根部及根部土壤裝入無菌袋中供分析。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi),取該煙草樣品根部1 mm范圍內(nèi)的根際土壤,懸浮于無菌水中,即成根際土壤懸浮液,按梯度稀釋后,選擇適當(dāng)稀釋度分別在LB固體培養(yǎng)基上涂平板 ( 每一梯度3～5皿 ),于 28 ℃ 恒溫箱培養(yǎng),根據(jù)菌落形態(tài),挑選LB 平板上生長(zhǎng)的單菌落,劃線分離,4 ℃保存在平板上,備用[13-14]。

將分離純化的菌株分別接種于盛有30 mL無機(jī)磷培養(yǎng)基的150 mL三角瓶中,放置于搖床中,于30 ℃ 180 r/min條件下培養(yǎng)。培養(yǎng)3 d后,培養(yǎng)液于10 000 r/min 離心10 min,取上清液,測(cè)定有效磷含量。

同時(shí),將分離純化的菌株分別接種于盛有30 mL液態(tài)解鉀細(xì)菌培養(yǎng)基的150 mL三角瓶中,按照以上條件進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)液離心后測(cè)定有效鉀含量。

1.3 菌株形態(tài)、生理生化及分子鑒定

菌株的形態(tài)鑒定: 將篩選的菌株接種到LB平板上,30 ℃培養(yǎng)24 h,觀察菌落大小、形狀、表面形態(tài)、邊緣特征、隆起形狀、透明度、濕潤(rùn)或干燥、光滑或粗糙、菌落及培養(yǎng)基的顏色等。

菌株生理生化指標(biāo)鑒定：革蘭氏染色、好氧性、接觸酶、甲基紅、乙酞甲基甲醇(V-P)、淀粉水解、明膠水解、硝酸鹽還原、檸檬酸鹽利用等試驗(yàn)的方法均參照《常見細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊(cè)》[15]和《伯杰細(xì)菌鑒定手冊(cè)》[16]。

菌株分子鑒定: 將菌株用 LB 液體培養(yǎng)基培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,離心收集菌體,采用 SDS-CTAB法提取總基因組DNA,采用細(xì)菌16S rDNA通用引物27f(5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′)和 1492r (5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′)進(jìn)行16S rDNA 的PCR 擴(kuò)增。PCR 反應(yīng)條件：94 ℃預(yù)變性30 s;94 ℃變性30 s,52 ℃退火30 s,72 ℃延伸60 s,35個(gè)循環(huán);最后72 ℃延伸10 min。將PCR 產(chǎn)物進(jìn)行1.5%瓊脂糖凝膠電泳,然后切膠回收、純化、測(cè)序(北京美億美生物技術(shù)有限公司),根據(jù)獲得的16S rDNA序列在GenBank中Blast 搜索同源序列,通過 MEGA 5.0 軟件建立系統(tǒng)發(fā)育樹[17]。并在NCBI上提交該菌株的分子序列,獲得登錄號(hào)。

1.4 解磷解鉀菌的應(yīng)用效果檢測(cè)

將供試土壤剔除雜物,過2 mm篩,每個(gè)盆裝700 g土壤,選出12棵長(zhǎng)勢(shì)較好、均勻一致的煙草苗,移栽于已裝好供試土壤的盆中,注射無菌水,使盆栽土壤含水量達(dá)到田間持水量的(60± 2)%[18]。盆栽試驗(yàn)共設(shè)置以下2個(gè)處理。接菌處理(YC4)：向盆栽中噴灑10 mL解磷解鉀菌菌液,接種量為108cfu/g,重復(fù)6次;對(duì)照(CK)：加入等量的無菌水,重復(fù)6次。培養(yǎng)30 d后取土壤樣品和植株。取樣前選擇晴朗的天氣在8：00—10：00用SPAD-502葉綠素儀活體測(cè)量中部葉片的SPAD值,每個(gè)葉片測(cè)定上(葉尖)、中(葉中部)和下(葉基)3個(gè)部位,每個(gè)部位測(cè)定3次,計(jì)算平均值。取樣后,測(cè)定株高、鮮質(zhì)量,然后經(jīng)85 ℃殺青30 min 后, 在65 ℃條件下烘干,測(cè)定干質(zhì)量,粉碎后過0.45 mm篩,經(jīng)H2SO4-H2O2消化后,分別采用鉬銻抗比色法、火焰光度計(jì)法測(cè)定植株磷、鉀含量[19];并用根系掃描儀(LA1600+ scanner,Canada)掃描獲得根系圖像,用根系分析軟件(Winrhizo2003b,Canada)分析獲取根總長(zhǎng)、根總面積、根總體積、根尖總數(shù)等二維形態(tài)參數(shù);另外,分別采用0.5 mol/L NaHCO3溶液浸提—分光光度計(jì)法、2 mol/L HNO3溶液浸提—火焰光度法測(cè)定土壤有效磷、有效鉀含量[19]。

2 結(jié)果與分析

2.1 煙草根際解磷解鉀菌株的篩選及其對(duì)磷、鉀的溶解效果

從煙草根際土壤中共分離純化出9個(gè)菌株,分別標(biāo)記為YC1～YC9。經(jīng)過液體培養(yǎng)基搖瓶試驗(yàn),結(jié)果表明,9個(gè)菌株解無機(jī)磷的能力差異較大(圖1)。其中,菌株YC1、YC4、YC6和YC8對(duì)無機(jī)磷的溶解量達(dá)到140 mg/L以上,具有高效的解無機(jī)磷能力,顯著高于其他菌株;進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn),YC4和YC6對(duì)無機(jī)磷的溶解量能夠達(dá)到200 mg/L以上,顯著高于其他菌株,尤其是YC4,對(duì)無機(jī)磷的溶解量最高,達(dá)286.33 mg/L,顯著高于其他菌株。在菌株解鉀能力復(fù)篩試驗(yàn)中,YC3、YC4、YC8、YC9菌株對(duì)難溶性鉀鹽的溶解能力較強(qiáng),解鉀量達(dá)到16 mg/L以上,顯著高于其他菌株;尤其是菌株YC3,其解鉀量最高,達(dá)到18.38 mg/L,高于YC4解鉀量17.90 mg/L,但未達(dá)到顯著水平。綜合以上結(jié)果,YC4具有高效解磷解鉀能力。

不同字母表示不同菌株間差異顯著(P<0.05)圖1 9個(gè)菌株對(duì)無機(jī)磷、難溶性鉀的溶解效果

2.2 YC4菌株的菌落形態(tài)分析

經(jīng)平板劃線可見,YC4菌落呈米黃色,不透明,表面濕潤(rùn)且扁平,中央向上隆起,邊緣光滑,不規(guī)則桿狀排列,產(chǎn)芽孢(圖2)。

圖2 YC4菌株的菌落形態(tài)

2.3 YC4菌株的生理生化特性分析

經(jīng)過革蘭氏染色、好氧性、接觸酶、甲基紅、V-P、淀粉水解、明膠水解、硝酸鹽還原、檸檬酸鹽利用試驗(yàn)(表2)發(fā)現(xiàn),YC4菌株兼性厭氧,除檸檬酸鹽利用項(xiàng)目顯陰性外,其他測(cè)試項(xiàng)目均呈陽性。

表2 YC4菌株的生理生化特性

注：+為陽性 ;-為陰性。

2.4 YC4菌株的16S rDNA序列系統(tǒng)發(fā)育分析

利用Blast對(duì)YC4菌株16S rDNA序列進(jìn)行同源性比對(duì)發(fā)現(xiàn),菌株YC4與BacillusflexusIFO15715(AB021185)同源性為100%;構(gòu)建菌株YC4的16S rDNA系統(tǒng)發(fā)育樹(圖3),并結(jié)合該菌株的生理生化特性,最終鑒定YC4菌株為彎曲芽孢桿菌(Bacillusflexus),在NCBI上提交菌株YC4的16S rDNA序列,并獲得登錄號(hào)為KP743125。

圖3 YC4菌株16S rDNA基因序列的系統(tǒng)發(fā)育分析

2.5 YC4菌株的應(yīng)用效果

2.5.1 接種YC4對(duì)土壤有效磷和速效鉀含量的影響 由圖4 可見,與對(duì)照相比,噴灑YC4菌液的盆栽土壤中有效磷、速效鉀含量均有所增加,但差異未達(dá)到顯著水平,其中有效磷含量提高了6.81%,速效鉀含量提高了4.72%,說明篩選出的高效解磷解鉀菌YC4能夠促進(jìn)土壤中無機(jī)磷、難溶性鉀的溶解。

圖4 接種YC4菌株對(duì)土壤有效磷和有效鉀含量的影響

2.5.2 接種YC4對(duì)煙草根系形態(tài)和煙株生長(zhǎng)的影響 土壤中的有效養(yǎng)分含量影響煙草根系的生長(zhǎng)發(fā)育[20],特別是有效磷含量與煙草苗期的生長(zhǎng)發(fā)育關(guān)系密切[21]。由表3可知,接種菌株YC4能夠促進(jìn)煙草根系的生長(zhǎng)發(fā)育,與對(duì)照相比,噴灑菌液的煙草根系的總長(zhǎng)度、總面積、總體積均極顯著增加,增幅分別達(dá)到45.33%、55.96%、78.00%,根尖總數(shù)顯著增加28.30%。

煙草苗期根系形態(tài)的良好建成是地上植株健壯生長(zhǎng)的基礎(chǔ)[22]。由表4可知,與對(duì)照相比,經(jīng)YC4菌液噴灑的煙草植株鮮質(zhì)量提高近1倍,株高和干質(zhì)量也分別提高了21.03%和91.55%,差異均達(dá)到極顯著水平;SPAD值增加14.03%,植株中磷含量增加18.29%,鉀含量增加29.57%,差異均達(dá)到顯著水平。SPAD值代表了葉片中葉綠素含量,光合作用是作物產(chǎn)量形成的基礎(chǔ), SPAD值的提高對(duì)作物產(chǎn)量的提升具有重要意義。煙草植株中磷、鉀含量影響著煙葉的香味、可燃性及色澤,是評(píng)價(jià)煙葉化學(xué)成分和等級(jí)分類的重要指標(biāo)。由此可見,噴灑YC4菌液能夠大幅度提高煙草幼苗的鮮質(zhì)量、干質(zhì)量、株高、SPAD值以及磷、鉀含量,為后期煙葉產(chǎn)量及品質(zhì)的提高打下良好的基礎(chǔ)。

表3 接種YC4菌株對(duì)煙草根系形態(tài)的影響

注：同列數(shù)據(jù)后*、**分別表示處理之間差異顯著(P<0.05)、極顯著(P<0.01),下同。

表4 接種YC4菌株對(duì)煙草植株生長(zhǎng)的影響

3 結(jié)論

本試驗(yàn)從長(zhǎng)勢(shì)較好的煙草根際土壤中篩選分離出解磷解鉀菌株YC4, 液體搖瓶試驗(yàn)結(jié)果表明,該菌株具有較強(qiáng)的解無機(jī)磷、難溶性鉀的能力,溶解量分別高達(dá)286.33 mg/L 、17.90 mg/L。對(duì)該菌株的生理生化特性進(jìn)行分析,并進(jìn)行基因序列比對(duì)及系統(tǒng)發(fā)育分析,最終確定該菌株為彎曲芽孢桿菌(Bacillusflexus)。盆栽試驗(yàn)結(jié)果表明,與對(duì)照相比,YC4菌液能夠有效促進(jìn)土壤中無機(jī)磷、難溶性鉀的溶解,提高土壤中磷、鉀的有效含量,促進(jìn)煙草幼苗根系生長(zhǎng),使根變得更長(zhǎng),根尖數(shù)變多;提高煙草幼苗株高、干鮮質(zhì)量、SPAD值及植株中磷、鉀含量,為提高煙葉產(chǎn)量和改善煙葉品質(zhì)奠定良好的基礎(chǔ),對(duì)農(nóng)田中煙草的種植有實(shí)際指導(dǎo)意義。

[1] 董梅,蘇建東,劉廣玉,等.面向?qū)ο蟮臒o人機(jī)遙感影像煙草種植面提取和監(jiān)測(cè)[J].測(cè)繪科學(xué),2014,39(9):87-90.

[2] 張翔,黃元炯,范藝寬,等.河南省植煙土壤與烤煙施肥的現(xiàn)狀、存在問題及對(duì)策[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué),2004(11):54-57.

[3] 王幼君,李淑芬.茄尼醇和尼古丁的提取與工藝研究[J].天津化工,2003,17(3):37-40.

[4] 黎妍妍,張翔,許自成,等.河南煙區(qū)土壤養(yǎng)分狀況分析[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2006,34(10):2207-2208.

[5] 朱杰,趙會(huì)納,郭燕,等.河南煙區(qū)植煙土壤養(yǎng)分狀況綜合評(píng)價(jià)[J].鄭州輕工業(yè)學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2009,24(1):22-26.

[6] 劉淑琮,馮炘,于潔.植物根際促生菌的研究進(jìn)展及其環(huán)境作用[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2009,48(11):2882-2887.

[7] 付恭華,王瑩,鄢幫有.生態(tài)農(nóng)業(yè)與中國(guó)未來的糧食安全[J].江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(社會(huì)科學(xué)版),2013,12(3):289-294.

[8] 李太平,桑閏生,馬萬明.論生態(tài)農(nóng)業(yè)的發(fā)展[J].中國(guó)農(nóng)史,2011(2):122-128.

[9] Kloepper J W.Free-living bacterial inocula for enhancing crop productivity [J].Trends Biotechnol,1989,7(2):39-44.

[10] 趙小蓉,林啟美.微生物解磷的研究進(jìn)展[J].土壤肥料,2001(3):7-11.

[11] 范藝寬,張翔,李富欣,等.河南省煙區(qū)土壤磷素資源狀況與動(dòng)態(tài)變化研究[J].中國(guó)煙草科學(xué),2003,24(3):14-15.

[12] 許光輝,鄭洪元.土壤微生物分析方法手冊(cè)[M].北京:農(nóng)業(yè)出版社,1986.

[13] 康慧穎,王偉,劉佳莉,等.兩株具促生作用的苜蓿內(nèi)生菌的分離純化與鑒定[J].微生物學(xué)通報(bào),2015,42(2):280-288.

[14] 王春霞,王道本,周啟.棉花根際促生菌的分離和篩選[J].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1996,15(3):233-236.

[15] 東秀珠,蔡妙英.常見細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊(cè)[M].北京:科學(xué)出版社,2001.

[16] 布坎南.伯杰細(xì)菌鑒定手冊(cè)[M].北京:科學(xué)出版社,1984.

[17] 雷劍,楊新筍.甘薯RAPD-PCR反應(yīng)條件的優(yōu)化[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2009,48(10):2343-2346.

[18] 毛小芳,胡鋒,陳小云,等.不同土壤水分條件下華美新小桿線蟲對(duì)枯草芽孢桿菌數(shù)量、活性及土壤氮素礦化的影響[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào),2007,18(2):405-410.

[19] 鮑士旦.土壤農(nóng)化分析[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2000.

[20] 張惠林,朱列書.煙草根系研究現(xiàn)狀[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技,2009(8):111-112.

[21] 潘瑤,鄭小東,張振華,等.磷脅迫和激素對(duì)煙草根系發(fā)育的影響及機(jī)理研究進(jìn)展[J].湖南農(nóng)業(yè)科學(xué),2012(4):39-41.

[22] 陳義強(qiáng).氮磷鉀肥對(duì)烤煙內(nèi)在品質(zhì)的影響及其施肥模型[D].鄭州:河南農(nóng)業(yè)大學(xué),2008.

Screening,Identification of Phosphate- and Potassium-solubilizing PGPR and Its Promoting Effect on Tobacco

WAN Bingbing1,2,LIU Ye1,WU Yue3,LIU Shiliang1,WANG Guowen1,ZHANG Dongyan1,JIANG Ying1*
(1.College of Resources and Environment,Henan Agricultural University,Zhengzhou 450002,China; 2.College of Resources and Environmental Science,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095，China; 3.Soil and Fertilizer Station of Shandong Province,Ji’nan 250100，China)

Some phosphorus- and potassium-solubilizing PGPR strains were isolated from tobacco rhizosphere soil and identified to solve the problem of lack of phosphorus and potassium in tobacco planting soil.The results showed that YC4 strain isolated from tobacco rhizosphere soil could transform the hard-soluble phosphorus and potassium into the soluble nutrients,the transformation amounts of tricalcium phosphate and potassium silicate were 286.33 mg/L,17.90 mg/L respectively.YC4 strain was identified asBacillusflexusbased on morphological observation,physiological and biochemical characteristics test and 16S rDNA gene conserved sequence analysis.Pot experiment results showed that compared with the non-inoculated treatment(CK),the concentrations of available phosphorous and potassium of the treatment inoculated with YC4 significantly increased by 6.81%,4.72% respectively,which led to the root length,surface area,root volumes,root tips number of tobacco increased by 45.33%,55.96%,78.00% and 28.30%,respectively.With respect to plant morphological characteristics,the average wet weight was 2 times higher than the CK,and height of tobacco inoculated with YC4 significantly increased by 21.03%;the dry weight and SPAD value significantly increased by 91.55% and 14.03% respectively,and the total P and total K contents of tobacco significantly increased by 18.29% and 29.57%,respectively.Overall,YC4 strain could improve the contents of total P and total K in soil,promote the growth of tobacco.

PGPR; phosphate- and potassium-solubilizing strain; tobacco growth

2016-03-16

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(41401274)；河南省煙草公司重點(diǎn)項(xiàng)目(HYKJ201215)；河南省教育廳項(xiàng)目(15A210012,14B210025)；河南省科技廳項(xiàng)目(162102410031)；鄭州市民生進(jìn)步科技工程項(xiàng)目(131PCXTD613)

萬兵兵(1990-),男,河南商丘人,在讀碩士研究生,研究方向：土壤生態(tài)學(xué)。E-mail：15136200211@163.com

*通訊作者：姜 瑛(1986-),女,河南信陽人,講師,博士,主要從事土壤生態(tài)學(xué)研究。E-mail:JY27486@163.com

S154.39;S572

A

1004-3268(2016)09-0046-06