黃攀,呂朋沙,程方俊,林雅,張婷婷,林永潤,單文杰,刀麗梅,方志超

(西南大學(xué)榮昌校區(qū)動物醫(yī)學(xué)系,重慶榮昌402460)

雛鵝人工感染沙門菌的病理組織學(xué)觀察

黃攀,呂朋沙,程方俊,林雅,張婷婷,林永潤,單文杰,刀麗梅,方志超

(西南大學(xué)榮昌校區(qū)動物醫(yī)學(xué)系,重慶榮昌402460)

為了研究沙門菌感染雛鵝的主要病理組織學(xué)變化.采取腹腔注射沙門菌人工感染7日齡健康雛鵝,對發(fā)病雛鵝進(jìn)行病理剖檢,并采取肺臟、肝臟、脾臟和腸道病料制作病理切片,光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行病理組織學(xué)觀察.受感染雛鵝剖檢病變可見皮下、心肌、肺臟、脾臟、腸道、腦膜等多處出血,肝臟壞死,膽囊、脾臟腫大;顯微病理組織學(xué)變化為肝、脾、肺、腸道等器官出血、細(xì)胞變性、壞死,有炎性細(xì)胞浸潤.結(jié)果表明,感染沙門菌雛鵝出現(xiàn)了廣泛性的組織損傷,同時伴隨著機體各器官明顯的炎癥反應(yīng).

沙門菌;病理組織學(xué);雛鵝

沙門菌(Salmonella)屬的成員可感染多種動物和人,大部分具有很強的致病性.根據(jù)細(xì)菌生化特征,可將沙門菌分為傷寒沙門菌、豬霍亂沙門菌和腸炎沙門菌,研究顯示,腸炎沙門菌是引起食源性疾病發(fā)生的最常見病原菌[1].鵝沙門菌病又稱鵝副傷寒,本病主要危害3周齡以內(nèi)的雛鵝,使之發(fā)生敗血癥、胃腸炎及其他組織局部炎癥,呈急性或亞急性經(jīng)過,成年鵝呈慢性或隱性經(jīng)過.雛鵝感染沙門菌的死亡率比較高,嚴(yán)重可達(dá)80%[2],常常給養(yǎng)鵝戶帶來較大經(jīng)濟(jì)損失.

人食用感染了副傷寒的鵝肉、鵝蛋等,會引起沙門菌中毒,嚴(yán)重時可發(fā)生死亡.食源性沙門菌病已成為世界各地重要的公共衛(wèi)生問題.據(jù)估計,在中國有22.2%食源性疾病是由沙門菌造成;在美國每年通過肉類、家禽產(chǎn)品而感染沙門菌的死亡人數(shù),達(dá)到了因感染食源性細(xì)菌而住院治療人數(shù)的7.5%[3-4].

近年來,國內(nèi)不少學(xué)者開始研究沙門菌感染不同動物的病理組織學(xué)變化,進(jìn)而比較沙門菌對不同動物的易感性,但對于鵝副傷寒的病理組織學(xué)觀察還少有報道.國內(nèi)關(guān)于鵝副傷寒的報道大都側(cè)重于對該病臨床病例的臨床癥狀和剖檢變化的描述,對于本病的病理組織學(xué)研究還未見報道.本試驗以腸炎沙門菌人工感染雛鵝,對受感染的雛鵝進(jìn)行臨床癥狀、剖檢觀察及顯微病理組織學(xué)觀察,研究了鵝副傷寒病的病理組織學(xué)變化.為研究沙門菌對不同動物的易感性差異奠定基礎(chǔ),同時為有效防控和診斷鵝副傷寒提供參考.

1　材料與方法

1.1菌株來源于2013年9月在重慶地區(qū)某養(yǎng)鵝場采集并分離純化、鑒定的腸炎沙門菌株Rcg-1,由西南大學(xué)榮昌校區(qū)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)教研室保存.

1.2試驗動物4日齡雛鵝12只(購自非疫區(qū)的健康雛鵝),飼養(yǎng)3 d未發(fā)現(xiàn)有異?，F(xiàn)象.

1.3菌液的制備勾取已純化單個菌落,接種到5 mL LB液體培養(yǎng)基中,37℃恒溫培養(yǎng)18 h,細(xì)菌數(shù)約在7X108CFU/mL.

1.4人工感染雛鵝模型的構(gòu)建隨機將健康雛鵝分成2組,試驗組與對照組.每組6只,試驗組每只雛鵝腹腔注射沙門菌0.2 mL,對照組每只注射生理鹽水0.2 mL,隔離飼養(yǎng),觀察并記錄結(jié)果.

1.5病理組織學(xué)觀察觀察感染雛鵝主要器官的解剖學(xué)病理變化,并采取其病變的肝臟、脾臟、肺臟和腸道,固定于10%福爾馬林后制作病理切片,光學(xué)顯微鏡下觀察組織學(xué)病理變化.

2　結(jié)果

2.1雛鵝人工感染后臨床癥狀經(jīng)人工感染菌株Rcg-1的試驗組雛鵝于12 h后相繼出現(xiàn)臨床癥狀,主要表現(xiàn)有精神沉郁、不食、腳軟,排綠色或白色糞便,部分病例眼瞼腫脹、出血并伴有神經(jīng)癥狀,頭頸震顫.對照組雛鵝表現(xiàn)正常.

2.2剖檢病理變化對試驗組雛鵝剖檢,可見皮下有出血現(xiàn)象,心肌出血,心冠脂肪出血;肝臟腫大、色暗紅、充血,表面及切面散在有針尖大小的灰黃色壞死灶;膽囊擴(kuò)張、內(nèi)充滿膽汁(見中插彩版圖1);部分肺臟嚴(yán)重出血、變成暗紅色至黑色(見中插彩版圖2);脾充血、腫大約1～2倍,顏色紫黑色;腸道充血、出血(見中插彩版圖3);軟腦膜出血嚴(yán)重(見中插彩版圖4).

2.3病理組織學(xué)觀察肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)不明顯,排列紊亂,呈現(xiàn)蜂窩狀;胞漿呈現(xiàn)完全的空泡;肝竇淤血、里有少量紅細(xì)胞;肝實質(zhì)內(nèi)可見多個壞死灶,壞死灶內(nèi)肝細(xì)胞大部分壞死崩解,有淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞浸潤(見中插彩版圖5).脾臟彌漫性出血(見中插彩版圖6),淋巴細(xì)胞部分壞死.肺臟的肺毛細(xì)管出血,其內(nèi)巨噬細(xì)胞增加,肺毛細(xì)管與支氣管之間有少量均質(zhì)的紅細(xì)胞(見中插彩版圖7).腸黏膜上皮細(xì)胞變性、壞死,且大部分脫落.黏膜下層毛細(xì)血管擴(kuò)張、充血,有淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞浸潤.肌層和漿膜毛細(xì)血管擴(kuò)張、充血,間質(zhì)淋巴細(xì)胞浸潤(見中插彩版圖8).

3　討論

禽沙門菌病是危害養(yǎng)鵝業(yè)的主要疫病之一,不但降低了其商品價值,還給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失.近年來,榮昌縣某些養(yǎng)鵝場飼養(yǎng)的雛鵝發(fā)生疑似感染沙門菌的病例,發(fā)病率和死亡率甚高,2周齡以內(nèi)的雛鵝致死率可達(dá)15%以上.目前多種禽類如雞、朱鹮、鷓鴣都有過沙門菌感染的病理組織學(xué)變化的報道,但雛鵝沙門菌感染引起的顯微病理組織學(xué)變化尚未見報道.由于沙門菌引起的不同動物體的病變并不完全一致,所以受感染動物的主要臟器的病理組織學(xué)變化也并不完全相同.

本試驗通過被感染雛鵝的臨床癥狀發(fā)現(xiàn),雛鵝出現(xiàn)了結(jié)膜炎、下痢及神經(jīng)癥狀等.結(jié)膜為沙門菌的重要感染途徑,致使受感染雛鵝發(fā)生結(jié)膜炎,出現(xiàn)眼瞼腫脹等癥狀.沙門菌感染雛鵝后,首先侵害其消化道而引發(fā)下痢.沙門菌侵入中樞神經(jīng)及腦部,引發(fā)神經(jīng)癥狀.這與單林等關(guān)于雛鵝副傷寒的臨床癥狀報道相一致[5].

本試驗通過被感染雛鵝剖檢病變結(jié)果發(fā)現(xiàn),受感染雛鵝可見組織器官出現(xiàn)不同程度的損傷,多處出血,說明該病可致雛鵝發(fā)生敗血癥;腦膜出血,沙門菌侵入腦部,與臨床神經(jīng)癥狀有一定相關(guān)性;肝臟壞死,膽囊、脾臟腫大,存在明顯的炎性反應(yīng);黃嬙等等曾報道禽類受沙門菌感染,剖檢病變發(fā)現(xiàn)主要臟器出血、腸炎等[6],與本試驗結(jié)果相一致,這為臨床上對鵝副傷寒的診斷提供較為可靠的依據(jù).

光鏡下病理組織學(xué)觀察可見肝臟、肺臟、脾臟、以及腸道等多器官出血和炎性細(xì)胞浸潤,多臟器出現(xiàn)壞死細(xì)胞.說明該病造成了雛鵝廣泛的組織損傷,同時伴隨著機體的全身性炎癥反應(yīng),繼而出現(xiàn)變性和壞死.這些顯微病理組織學(xué)變化與剖檢中出血、腫大、壞死等病變特征密切相關(guān).試驗菌株感染雛鵝后,最初主要侵害消化道,引起腸道炎癥,出現(xiàn)下痢,隨后引起菌血癥,病原菌隨血液循環(huán)進(jìn)入肝臟、肺臟、脾臟等組織器官,引發(fā)敗血癥.病原菌快速繁殖并產(chǎn)生大量毒素,對各組織器官造成損傷,引起雛鵝發(fā)病及死亡.目前,多種禽類都有過沙門菌感染的病理組織學(xué)報道.何玉龍等對因沙門菌感染而致死的朱鹮病理學(xué)觀察,顯微病理組織學(xué)病變?yōu)楦渭?xì)胞顆粒變性、壞死,有炎性細(xì)胞浸潤,肺臟嚴(yán)重出血,腸黏膜脫落[7];王龍濤等對感染雞傷寒沙門菌的病死雞只進(jìn)行病理組織學(xué)觀察,結(jié)果顯示,肝小葉內(nèi)局部出現(xiàn)壞死,有淋巴細(xì)胞浸潤,肺臟出現(xiàn)單核細(xì)胞浸潤等,小腸絨毛膜變性、壞死[8].通過對比發(fā)現(xiàn),雛鵝、朱鹮、雞的沙門菌病的顯微病理組織學(xué)變化,均可引起肝細(xì)胞的變性、壞死,多器官出血,且伴有炎性細(xì)胞浸潤.本試驗結(jié)果豐富了沙門菌病的病理學(xué)內(nèi)容,為研究沙門菌對不同動物的易感性差異奠定基礎(chǔ).

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H istopathological changes resulted from Salm onella inoculation in Gosling

HUANG Pan,LV Peng-sha,Cheng Fang-jun,LIN Ya,ZHANG Ting-ting, LIN Yong-run,SHAN Wen-jie,DAO Li-mei,FANG Zhi-chao
(Department of Veterinary Medicine,Rongchang Campus of Southwest University,Chongqing 402460,China)

To investigate the histopathology of goslings infected with salmonella,seven-day-old goslings with good conditions were intraperitoneally inoculated with 0.2 mL Salmonella.The pathological changes were observed with naked-eye after autopsy. Meanwhile,tissues of lungs,liver,spleen and intestines were prepared into paraffin sections,followed by histopathology observa?tion under a microscope.The results showed that hemorrhage in subcutaneous,cardiac,lung,spleen,intestine and meninx,necro?sis in liver,tumefaction of spleen and gallbladder in goslings.The histopathology under the microscope were hemorrhage,cell de?generation,necrosis and inflammatory infiltration in liver,spleen,lung and intestine.In conclusion,goslings infected with salmonel?la show extensive tissues damage,and significant inflammatory response in multiple organs.

Salmonella;histopathology;gosling Corresponding au thor:CHENG Fang-jun

S852.61+2

A

0529-6005(2016)02-0038-02

2014-08-22

西南大學(xué)基本科研業(yè)務(wù)費專項資金項目(XDJK-2012C100)

黃攀(1990-),男,碩士生,研究方向為動物微生物學(xué)及免疫學(xué),E-mail:1161634045@qq.com

程方俊,E-mail:cfj-xn@163.com