王　路，　劉　旻，　徐　承，　孫雪嬌，　劉　暢，　程　江

(石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，新疆 石河子 832000)

氟化鈉抗凝管離心前、后放置時(shí)間對(duì)血糖測(cè)定值的影響

王路1，劉旻，徐承，孫雪嬌，劉暢，程江

(石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，新疆 石河子 832000)

摘要：目的探討氟化鈉抗凝管離心前、后放置時(shí)間對(duì)血漿葡萄糖(簡(jiǎn)稱血糖)測(cè)定值的影響。方法將同一份血液標(biāo)本置于5支肝素鈉-氟化鈉管和5支酸化氟化鈉管中，血液標(biāo)本隨機(jī)分為兩組，一組分別于即刻、0.5、1、2、4 h離心后再檢測(cè)血糖濃度；另一組立即離心，分別于即刻及放置0.5、1、2、4 h后檢測(cè)血糖濃度。結(jié)果肝素鈉-氟化鈉管和酸化氟化鈉管離心前放置0.5、1、2、4 h的血糖測(cè)定值與即刻測(cè)定值比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且2種抗凝管之間差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；肝素鈉-氟化鈉管和酸化氟化鈉管及時(shí)離心后放置0.5、1、2、4 h的血糖測(cè)定值與即刻測(cè)定值比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，且2種抗凝管之間差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。離心前、后肝素鈉-氟化鈉管和酸化氟化鈉管血漿葡萄糖測(cè)定值的差值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論氟化鈉抗凝管如及時(shí)離心，血漿葡萄糖濃度可穩(wěn)定4 h。若不能及時(shí)離心，肝素鈉-氟化鈉管血糖濃度將在4 h內(nèi)降低，而酸化氟化鈉管能穩(wěn)定4 h。因此，為了立即抑制糖酵解，血液需要酸化。

關(guān)鍵詞：血糖；氟化鈉抗凝管；離心；放置時(shí)間；酸化

中圖分類號(hào)：

文章編號(hào)：1673-8640(2015)01-061-03R446.1

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：碼：A

DOI：10.3969/j.issn.1673-8640.2015.01.015

作者簡(jiǎn)介：王路，女，1989生，學(xué)士，主要從事分子生物學(xué)檢測(cè)工作。

通訊作者：程江，聯(lián)系電話：0993-2850957。

收稿日期：(2014-03-23)

血漿葡萄糖(簡(jiǎn)稱血糖)檢測(cè)是目前臨床生化檢驗(yàn)的常規(guī)項(xiàng)目。糖尿病的診斷和治療有賴于準(zhǔn)確的血糖檢測(cè)結(jié)果。分析前階段質(zhì)量保證的重要性在于保證檢驗(yàn)結(jié)果能真實(shí)、客觀的反映患者當(dāng)前病情或健康狀態(tài)[1]。在實(shí)際工作中，由于血液離體后會(huì)發(fā)生糖酵解而消耗血糖，若不及時(shí)離心，則不能反映受檢者的真實(shí)狀況。為提高血糖檢測(cè)分析前質(zhì)量，我們探討了氟化鈉抗凝管離心前、后放置時(shí)間對(duì)血糖測(cè)定值的影響。

材料和方法

一、材料

1.采血管(1)肝素鈉-氟化鈉采血管：由浙江拱東醫(yī)療科技有限公司提供(批號(hào)：1206267)；(2)自制酸化氟化鈉抗凝管(pH值5.5)：準(zhǔn)確稱取枸櫞酸0.26 g、枸櫞酸鈉·2H2O 0.7 g、肝素鈉0.3 mg、氟化鈉6 mg，加蒸餾水20 mL溶解，用經(jīng)高壓滅菌的玻璃試管分裝，每瓶0.1 mL，50 ℃烤箱烘干備用。

2.儀器與試劑采用葡萄糖氧化酶法檢測(cè)血糖。儀器為ROCHE Modular DPP全自動(dòng)生化分析儀，試劑為原裝配套試劑(批號(hào)：681598-01)。校準(zhǔn)品為Roche c.f.a.s校準(zhǔn)品(批號(hào)：172156-01)。室內(nèi)質(zhì)控品由Bio-Rad 公司提供(批號(hào)：4737-04、4738-04)。

二、方法

1.標(biāo)本采集10 min內(nèi)采集40份志愿者靜脈血液標(biāo)本(5個(gè)人同時(shí)為志愿者抽血)，同一份血標(biāo)本分別置于5支肝素鈉-氟化鈉管和5支自制酸化的氟化鈉管內(nèi)，每管內(nèi)約2 mL，充分混勻，隨機(jī)分為兩組，每組20份，一組立即離心，分別檢測(cè)即刻及放置室溫0.5、1、2、4 h的血糖。另一組分別于檢測(cè)即刻及放置室溫0.5、1、2、4 h后再離心的血糖。

2.質(zhì)控當(dāng)天標(biāo)本測(cè)定前進(jìn)行質(zhì)控品的測(cè)定。結(jié)果在控時(shí)，再進(jìn)行標(biāo)本測(cè)定，并同時(shí)加測(cè)質(zhì)控品，2次質(zhì)控結(jié)果均在控視當(dāng)天標(biāo)本測(cè)定結(jié)果有效。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

結(jié)果

肝素鈉-氟化鈉管和酸化氟化鈉管離心前放置0.5、1、2、4 h的血糖測(cè)定值與即刻測(cè)定值比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且兩種抗凝管之間差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；肝素鈉-氟化鈉管和酸化氟化鈉管及時(shí)離心后放置0.5、1、2、4 h的血糖測(cè)定值與即刻測(cè)定值比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，且兩種抗凝管之間差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

肝素鈉-氟化鈉管和酸化氟化鈉管分別在即刻、0.5、1、2、4 h離心檢測(cè)血糖濃度的差值(即肝素鈉-氟化鈉管測(cè)定值-酸化氟化鈉管測(cè)定值)和離心后在即刻、0.5、1、2、4 h檢測(cè)血糖濃度的差值結(jié)果見(jiàn)表2，其變化曲線見(jiàn)圖1。

重復(fù)測(cè)量數(shù)據(jù)的方差分析顯示離心前、后放置不同時(shí)間的肝素鈉-氟化鈉管和酸化氟化鈉管測(cè)定血糖濃度的差值有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

組別抗凝管即刻0.5h1h2h4h離心前肝素鈉-氟化鈉管6.05±1.095.60±1.00*#5.52±0.98*#5.38±0.97*#5.37±0.96*#酸化氟化鈉管6.04±1.096.03±1.096.02±1.086.05±1.106.03±1.09離心后肝素鈉-氟化鈉管5.29±0.985.25±1.005.32±1.015.35±1.005.24±1.02酸化氟化鈉管5.32±0.965.30±0.975.36±0.985.28±0.965.34±0.98

注：與即刻比較，*P<0.05；與酸化氟化鈉管比較，#P<0.05

組別即刻0.5h1h2h4h離心前-0.012±0.0240.425±0.052*0.507±0.045*0.667±0.043*0.668±0.034*離心后-0.032±0.017-0.052±0.037-0.040±0.0320.064±0.031-0.098±0.024

注：與即刻測(cè)定差值比較，*P<0.05

圖1　離心前、后放置不同時(shí)間的肝素鈉-氟化鈉管和

討論

血糖作為反映糖代謝紊亂的重要指標(biāo)，其結(jié)果的準(zhǔn)確性直接影響到患者的診斷與治療。有研究顯示，臨床上血糖分析的誤差主要來(lái)源于標(biāo)本的采集與保存(5%～10%)，遠(yuǎn)高于實(shí)驗(yàn)室分析誤差(<3%)[2]。

在臨床工作中，血液標(biāo)本一般在采集后2 h左右才能送往檢驗(yàn)科。在室溫條件下，血液離體后標(biāo)本中血糖酵解率為每小時(shí)5%～7%。在血細(xì)胞(白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板)增多的情況下，降解的速度更快。為了防止血液離體后血糖發(fā)生酵解，氟化鈉是一種較理想的抗凝劑。當(dāng)應(yīng)用葡萄糖氧化酶法測(cè)定血糖時(shí)，采用肝素鈉-氟化鈉作為抗凝劑效果最好[3]。

氟化鈉采血管通過(guò)阻斷糖酵解途徑中的烯醇化酶，抑制甘油3磷酸脫氫酶的活性，使葡萄糖分解抑制。但有報(bào)道顯示氟化鈉抑制糖酵解不是直接的，完全抑制延長(zhǎng)達(dá)4 h[4]。氟化鈉采血管中血樣離心前放置時(shí)間增加會(huì)導(dǎo)致葡萄糖濃度測(cè)定值降低[5]。立即穩(wěn)定血糖，防止離心前糖酵解的發(fā)生，額外的酸化是非常有必要的[6]。因?yàn)殍蹤此峋彌_液(pH值5.5)的pH值遠(yuǎn)離糖酵解過(guò)程中的3個(gè)關(guān)鍵酶(己糖磷酸激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶)的最適pH值，而且氟離子能夠競(jìng)爭(zhēng)性的抑制酶的作用點(diǎn)，使酶失活，兩者的協(xié)同作用能夠迅速抑制糖酵解。本研究采用酸化氟化鈉管和肝素鈉-氟化鈉管采集血液標(biāo)本，并放置不同時(shí)間后離心檢測(cè)血糖濃度。結(jié)果顯示未離心放置不同時(shí)間的測(cè)定值與即刻測(cè)定值比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與文獻(xiàn)報(bào)道[4]一致。由此說(shuō)明氟化鈉作為糖酵解的抑制劑不夠充分，酸化可取代氟化鈉作為推薦方法。本研究結(jié)果還顯示酸化氟化鈉管和肝素鈉-氟化鈉管立即離心，再放置不同時(shí)間后檢測(cè)血漿葡萄糖濃度，結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

綜上所述，在檢測(cè)血糖濃度，尤其是在進(jìn)行75 g葡萄糖耐量試驗(yàn)時(shí)，如使用氟化鈉抗凝管采集血液標(biāo)本且不能及時(shí)離心、送檢，則氟化鈉抗凝管需要額外的酸化，這樣才可以獲得精準(zhǔn)的血糖濃度。

參考文獻(xiàn)

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(本文編輯：龔曉霖)