宋藝君,樊怡媛,郭　濤,魏　婷 ,王昌利﹡

(1.陜西中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，咸陽(yáng)　712046；2.解放軍第451醫(yī)院，西安　710054)

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均勻設(shè)計(jì)法優(yōu)選焦山楂飲片微波炮制工藝

宋藝君1,樊怡媛1,郭濤2,魏婷1,王昌利1﹡

(1.陜西中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，咸陽(yáng)712046；2.解放軍第451醫(yī)院，西安710054)

摘要：目的優(yōu)選焦山楂最佳炮制工藝。 方法以外觀性狀和內(nèi)在質(zhì)量(浸出物、總黃酮、有機(jī)酸)為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用U8(83)均勻?qū)嶒?yàn)設(shè)計(jì)，對(duì)火力、時(shí)間以及平鋪飲片厚度3個(gè)因素進(jìn)行考察。結(jié)果確定焦山楂的最佳炮制工藝：取凈山楂置于微波爐中，飲片平鋪厚度2 cm,火力60% 加熱2 min。結(jié)論確定的焦山楂炮制工藝合理可行，可制備出優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定的焦山楂飲片。

關(guān)鍵詞：焦山楂；均勻設(shè)計(jì)；炮制工藝

山楂為薔薇科植物山里紅CrataeguspinnatifidaBge. var.majorN. E.Br.或山楂CrataeguspinnatifidaBge.的干燥成熟果實(shí)，具有消食健胃、行氣散瘀、化濁降脂[1-2]等功效，臨床常用于治療肉食積滯、胃脘脹滿、瘀血經(jīng)閉、高脂血癥等。現(xiàn)代藥理研究表明，山楂還可抑菌、抗腫瘤、保護(hù)人血管內(nèi)皮細(xì)胞，并具有對(duì)心血管系統(tǒng)、消化系統(tǒng)等多方面的作用[2-3]。山楂歷代炮制方法包括炒、炒焦、炒炭、蒸、醋炙、酒炙、姜汁炙等，沿用至今并被全國(guó)及各地炮制規(guī)范所收載的炮制方法主要為炒山楂、焦山楂、山楂炭[4-6]。目前對(duì)山楂的炮制主要采用炒藥鍋這種傳統(tǒng)的炮制設(shè)備[7]，這種設(shè)備操作程序雖然簡(jiǎn)單，但火候、溫度、時(shí)間等因素不易控制，常使藥材達(dá)不到規(guī)定程度；并且操作時(shí)煙塵大，易污染工作環(huán)境。為適應(yīng)中藥炮制的現(xiàn)代發(fā)展，同時(shí)進(jìn)一步優(yōu)化、規(guī)范山楂的炮制工藝，以保證飲片質(zhì)量，本實(shí)驗(yàn)采用微波炮制新技術(shù)對(duì)山楂的炮制工藝進(jìn)行優(yōu)選。

1儀器與試藥

1.1儀器WP800L23型微波爐(佛山市順德格蘭仕生活電器銷售有限公司)；UV1102型紫外分光光度計(jì)(上海天美科學(xué)儀器有限公司)；ISO9001型電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)；YHG-9925A電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海姚氏儀器設(shè)備廠)；堿式滴定管(泰興市龍港玻璃儀器廠)。

1.2試藥山楂飲片，購(gòu)自西安盛興中藥飲片廠，經(jīng)陜西中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院王繼濤教授鑒定為薔薇科植物山楂CrataeguspinnatifidaBge.的干燥成熟果實(shí)。蘆丁對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)0080-9705);乙醇、酚酞、鄰苯二甲酸氫鉀、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、檸檬酸等均為分析純。

2均勻設(shè)計(jì)法優(yōu)選焦山楂炮制工藝

2.1因素水平設(shè)計(jì)通過U8(83)均勻?qū)嶒?yàn)設(shè)計(jì),對(duì)影響焦山楂飲片質(zhì)量的主要因素(火力、時(shí)間、平鋪飲片厚度)進(jìn)行考察，優(yōu)選最佳炒制工藝，具體設(shè)計(jì)見表1。

2.2實(shí)驗(yàn)方法照均勻設(shè)計(jì)方案，取一定量生山楂飲片，置于微波爐中，平鋪成一定厚度，按照設(shè)定的火力、時(shí)間進(jìn)行炮制，取出放涼，即得。

2.3考察指標(biāo)選擇依據(jù)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

2.3.1傳統(tǒng)質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)的選擇依據(jù)和標(biāo)準(zhǔn)飲片的傳統(tǒng)質(zhì)量評(píng)價(jià)是以飲片外觀性狀為主要指標(biāo)，是中醫(yī)藥寶貴經(jīng)驗(yàn)的總結(jié)，可在相當(dāng)程度上反映飲片質(zhì)量。

表1因素水平表

Tab.1 The factors and levels of the experiment design

水平因素A,火力/%B,平鋪飲片厚度/cmC,時(shí)間/min1400.50.5260113801.524100235400.54660157801.56810027

外觀性狀評(píng)分標(biāo)準(zhǔn): 參照 《中國(guó)藥典》2010年版焦山楂項(xiàng)下規(guī)定 (圓形片，皺縮不平，表面焦褐色，內(nèi)部黃褐色，有焦香氣) 將性狀評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定為：表面焦褐色4～5分，焦黃色2～3分，黃色或黑色1分；內(nèi)部黃褐色4～5分，焦褐色2～3分，黃色或黑色1分。

2.3.2內(nèi)在質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)山楂主要功效是行氣散瘀和消食健胃[1]，物質(zhì)基礎(chǔ)是浸出物、有機(jī)酸和總黃酮，選用山楂中浸出物、有機(jī)酸、總黃酮作為內(nèi)在質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)。

2.4總黃酮含量測(cè)定

2.4.1對(duì)照品溶液制備取蘆丁對(duì)照品適量，精密稱定，加體積分?jǐn)?shù)70% 的乙醇制成每 1 mL 含 0.208 mg 蘆丁的對(duì)照品溶液。

2.4.2供試品溶液制備取山楂藥粉約0.5 g，精密稱定，置 于100 mL 圓底燒瓶中，精密加入體積分?jǐn)?shù)70% 乙醇50 mL，回流提取1 h, 放冷，過濾，加體積分?jǐn)?shù)70% 乙醇定容至50 mL量瓶中。精密移取1 mL，置于10 mL量瓶中，用體積分?jǐn)?shù)70% 乙醇定容至刻度。

2.4.3測(cè)定方法精密吸取對(duì)照品溶液、樣品溶液各1 mL，分別置于10 mL量瓶中，精密加入50 g ·L-1亞硝酸鈉0.4 mL，搖勻，放置6 min，加入100 g ·L-1硝酸鋁溶液0.4 mL，放置6 min，加40 g ·L-1NaOH溶液4 mL，加蒸餾水定容至刻度，搖勻，放置15 min，以相應(yīng)試劑為空白，于500 nm處測(cè)定吸光度。

2.5有機(jī)酸含量測(cè)定

2.5.1供試品溶液制備精密稱取山楂細(xì)粉約1 g，精密加入水100 mL，室溫下浸泡4 h，時(shí)時(shí)振搖，濾過，得到續(xù)濾液即為供試品溶液。

2.5.2測(cè)定方法精密吸取供試品溶液 25 mL，加水50 mL，加入酚酞指示液2滴，用氫氧化鈉滴定液滴定，即得。每1 mL氫氧化鈉滴定液(0.1 mol·L-1)相當(dāng)于6.404 mg的枸櫞酸。

2.5.3氫氧化鈉滴定液配制按照《中國(guó)藥典》2010年版附錄XV F配制氫氧化鈉滴定液，并用鄰苯二甲酸氫鉀基準(zhǔn)物標(biāo)定，得氫氧化鈉滴定液濃度0.1018 mol·L-1。

2.6浸出物測(cè)定照醇溶性浸出物測(cè)定法(附錄X A)項(xiàng)下的熱浸法測(cè)定，用乙醇作溶劑。

2.7結(jié)果分析采用SPSS17.0軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析，以各影響因素為自變量，以各指標(biāo)成分(性狀、浸出物含量、有機(jī)酸含量、總黃酮含量)分別為因變量。結(jié)果見表2。

表2均勻設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

Tab.2 Result of U8(83) design experiment

實(shí)驗(yàn)號(hào)ABCy1,性狀得分y2,浸出物含量/%y3,有機(jī)酸含量/%y4,總黃酮含量/%1147532.204.592.312285646.246.573.433333847.366.713.0244711049.266.823.075528513.810.770.746666613.160.570.797714710.120.480.728852923.083.351.63

對(duì)性狀得分逐步回歸得方程：y1=1.75+0.075x1, r=0.968, P<0.05;對(duì)浸出物含量逐步回歸得方程：y2=15.126+24.411x2-4.557x3, r=0.972, P<0.05;對(duì)有機(jī)酸含量逐步回歸得方程：y3=1.489+4.108x2-0.812x3, r=0.972,P<0.05,對(duì)總黃酮含量逐步回歸得方程：y4=0.869+1.727x2-0.299x3, r=0.976,P<0.05。

由y1可知，x1的優(yōu)化值越大越好，但考慮到火力太大會(huì)炮制過度，選定x1優(yōu)化值為60%；由y2、y3、y4可知，x2優(yōu)化值越大越好，選定x2優(yōu)化值為2 cm；x3優(yōu)化值越小越好，但考慮到時(shí)間太短，計(jì)時(shí)有誤差，故選定2 min。綜合考慮，最終確定最佳炮制工藝為平鋪飲片厚度2 cm，火力60% 加熱2 min。

3工藝驗(yàn)證

取生山楂飲片,照確定的最佳工藝參數(shù)制備焦山楂飲片，對(duì)其進(jìn)行性狀評(píng)分和成分評(píng)分，結(jié)果見表3。

由表 5可見，制備得到的焦山楂飲片性狀均符合要求，各評(píng)價(jià)指標(biāo)RSD<3%,表明該工藝穩(wěn)定可行，得到的成品質(zhì)量穩(wěn)定。

4小結(jié)與討論

采用綜合評(píng)分法對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，把焦山楂飲片的傳統(tǒng)質(zhì)量和內(nèi)在質(zhì)量結(jié)合在一起，可較全面客觀地反映各因素水平對(duì)炮制品質(zhì)量的影響。經(jīng)過實(shí)驗(yàn)，在火力、飲片厚度和時(shí)間方面確定了具體參數(shù)，具體為: 取一定量生山楂飲片置于微波爐中，飲片平鋪厚度2 cm，加熱0.5 min，取出放涼，即得。驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，優(yōu)選的焦山楂炮制工藝穩(wěn)定可行。

表3驗(yàn)證結(jié)果

Tab.3 The result of verification experiment

編號(hào)性狀得分浸出物含量/%有機(jī)酸含量/%總黃酮含量/%1表面焦褐色,內(nèi)部黃褐色,有焦香氣48.266.783.142表面焦褐色,內(nèi)部黃褐色,有焦香氣49.136.523.213表面焦褐色,內(nèi)部黃褐色,有焦香氣48.286.833.06RSD%—1.022.482.39

微波炮制技術(shù)作為一種新的中藥炮制方法[8-10]，操作準(zhǔn)確，火力和時(shí)間易控制，與傳統(tǒng)炮制方法相比，具有省工、省時(shí)、工藝簡(jiǎn)便、易掌握、飲片色澤美觀、潔凈度高、無環(huán)境污染、質(zhì)地酥松、利于藥材中有效成分的溶出、工藝指標(biāo)可量化等優(yōu)點(diǎn)，有著廣闊的發(fā)展前景,在實(shí)驗(yàn)研究和工業(yè)大規(guī)模生產(chǎn)中具有推廣價(jià)值。其在中藥炮制方面的應(yīng)用，不僅提供了中藥炮制的新工藝，還提高了中藥飲片的質(zhì)量和臨床療效[11-13]。

通過微波炮制均勻設(shè)計(jì)，優(yōu)選出焦山楂最佳炮制工藝，對(duì)于規(guī)范山楂的炮制工藝、保證山楂飲片的質(zhì)量以及臨床用藥安全有效具有一定意義。

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Optimization of the processing technology for cokeCrataegifructusby uniform design method

Abstract:ObjectiveTo optimize the processing technology for coke Crataegi fructus.Method With the appearance and inherent quality(extract，total flavonoids，organic acid) as evaluation index U8(83) uniform experimental design was used to optimize,the fire strength, time and thickness of pieces. Results The optimal preparation conditions were as follows: microwave oven, the thickness of pieces 2 cm, fire 60% and the heating time 2 min. Conclusion The processing technology is reasonable and feasible, and the high quality of coke Crataegi fructus was obtained.

Key words:coke Crataegi Fructus; uniform design; processing technology

收稿日期：(2015-04-31)

通信作者：*王昌利，男，教授

作者簡(jiǎn)介：宋藝君，女，講師

中圖分類號(hào)：R282

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1004-2407(2016)01-0032-03

doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2016.01.010