謝穎苑,廖飛揚,李天卓,杜翔鷹,吳婷婷,容衛(wèi)冰

(廣東省湛江市林業(yè)科學研究所,廣東 湛江 524000)

桉樹組培廠季節(jié)性污染及防控

謝穎苑,廖飛揚,李天卓,杜翔鷹,吳婷婷,容衛(wèi)冰

(廣東省湛江市林業(yè)科學研究所,廣東 湛江 524000)

摘要:總結了多年組培苗生產經驗,根據不同月份的溫度、濕度及接種手操作等數據,提出了組培桉樹污染隨溫度、濕度和操作人員的不同而產生變化,防控污染的措施應該隨實際情況而調整。

關鍵詞:桉樹組培廠;污染率;溫度;濕度;接種手;防控

1引言

桉樹是世界四大速生栽培樹種,具有速生豐產、適應性強、生產周期短和用途廣泛等特點。桉樹組培培養(yǎng)技術的日益成熟推動了我國南方地區(qū)桉樹林業(yè)的快速發(fā)展。但是桉樹組織培養(yǎng)中的污染是影響組培生產的最大障礙之一,直接影響生產成本和珍貴科研材料的保全。有研究表明:污染率每升高5%,試管苗繁殖速度遞減40%,室內直接生產成本遞增10%,污染率越高,成本遞增越大,當污染率達30%時,成本將增至106.5%[1]。本研究以廣東省湛江林業(yè)科學研究所桉樹組織培廠培養(yǎng)車間的桉樹組織污染物為對象,明確溫度、濕度對污染影響及接種手不規(guī)范操作導致污染等規(guī)律,為桉樹組織培養(yǎng)工作控制污染發(fā)生提供一定的理論和實踐依據。

2材料與方法

(1)供試材料。對湛江市林業(yè)科學研究桉樹組培廠培養(yǎng)室2009~2014年污染情況進行收集記錄。

(2)桉樹組培廠污染隨室內溫度和濕度的變化。每月定時、定點在培養(yǎng)室中放置溫度計和濕度計收集記錄數據。

(3)桉樹組培廠污染季節(jié)性變化。每月定期統(tǒng)計組培廠生產情況,通過組培污染瓶苗數據反映出污染隨月份而產生變化。

(4)桉樹組培廠細菌污染受不同接種手操作產生的影響。通過接種手A和B使用同一臺無菌工作臺和同一套接種工具,定期定點對接種手細菌污染率數據統(tǒng)計,得出接種手的不規(guī)范操作導致污染增加,規(guī)范操作是保證質量的重要環(huán)節(jié)之一。

3結果與分析

3.1　桉樹組培中溫度和濕度對污染的影響。

從圖1看到,組培培養(yǎng)車間內污染率是隨室內溫度升高而增高,最低值為1月份6.54%,7月份達到最高值21.49%,其中6、7、8月份為污染高峰期:1、2、3、4月份為低峰期。

圖1　溫度對污染率的影響

從圖2看出,濕度對污染影響并不直接,3月份濕度達到最高值66.05%rh,但污染率僅為6.6%,2月份濕度66.0%rh,污染率也只是6.45%,兩者低污染率。但在7月溫度27.56℃、濕度53.01%rh,時污染率達到最高峰21.49%,6月溫度27.3℃、濕度49.7%rh,污染率也達到比較高的17.94%。

圖2　濕度對污染率的影響

從圖1和圖2比較看出,污染率隨溫度升高明顯增大,但隨濕度升高污染率變化并不很明顯,兩個最高污染數值都是在高溫且較高的濕度時產生。說明要控制污染主要是降低溫度,控制一定的濕度。

3.2　桉樹組培廠污染季節(jié)性變化

組培瓶苗的污染率月份間相差也很大,一年中6、7、8月份真菌污染率較高,與當時的高溫和相對較高的濕度有關。其它月份污染以細菌為主,而1、2、3、4月份組培污染相對較輕,總菌量較少(圖3)。

圖3　月份對污染率的影響

3.3　桉樹組培廠細菌污染受不同接種手操作的影響

組織培養(yǎng)中的細菌污染主要是由于組培苗污染或者是人工操作污染引起,表現(xiàn)為培養(yǎng)材料周圍出現(xiàn)白色暈圈、膿狀物癥狀。

從表1可以看到,接種手A平均污染率為6.2%,最高時為9.77%;接種手B平均污染率為9.13%,最高時為16.96%,說明了A的污染率較穩(wěn)定,B的穩(wěn)定性較差。

表1　不同接種手對污染率的影響

從圖4可以看到雖然有2個月份接種手A污染率比接種手B稍高,說明了接種手操作也有一定隨機性,但總體來說接種手A污染率是較低,說明了細菌污染主要是通過接觸污染和操作不當造成。接種過程中有瓶苗細菌鑒別環(huán)節(jié),帶細菌繼代分化苗無論是再分化,或者是做生根苗,都會引起細菌再次交叉污染,所以在接種手操作培訓中,如何鑒別細菌是較重要的一個環(huán)節(jié),因此加強人員操作培訓、規(guī)范操作流程是有效減少污染發(fā)生的重要途徑。

圖4　接種手A和接種手B污染率對比

4結語

在桉樹組培廠生產中,6、7、8月份是是污染最高的季節(jié),污染物多為真菌,因真菌傳播、快繁殖快,主要是空氣傳播,難控制,用酒精和新潔爾消毒效果差,甲醛熏蒸可使組培環(huán)境空氣中真菌減少87%~100%[2],因此要用高錳酸鉀1月空氣熏蒸滅菌一次,甲醛用量4~6mL/m3,高錳酸鉀3~66mL/m3[3],并且此季節(jié)為需求淡季,應減少生產。在11、12、1、2月份產苗高峰期,培養(yǎng)室內盡量少用甲醛+高錳酸鉀消毒,因為甲醛在滅菌過程中也會對瓶苗造成一定傷害,造成繼代苗生長緩慢甚至少部份苗干枯,這期間污染源主要為細菌,要經常用70%酒精噴霧和2%新潔爾溶液擦洗培養(yǎng)室地面、門窗、培養(yǎng)架和培養(yǎng)瓶表面。其他月份消毒方式可以酌情處理。

防控細菌污染是另一重要環(huán)節(jié),加強接種手操作培訓,制定嚴格的操作流程,嚴格執(zhí)行操作程序也是有效減少污染發(fā)生的有效途徑。污染物發(fā)生存在應溫度及濕度變化而變化,根據其發(fā)生規(guī)律,制定各月份不同的消毒流程和消毒時間,即可以減少消毒藥劑對人員、組培環(huán)境的毒害[4],同時又能有效地預防和降低污染的發(fā)生。因此在植物組織培養(yǎng)過程中,注重溫度和濕度的調節(jié),減少接種操作環(huán)節(jié)污染,可以有效減少培養(yǎng)物的污染率。

參考文獻:

[1] 田郎,謝發(fā)成,鄭炎誠,等.香蕉試管苗生產的成本分析及其控制對策[J].熱帶作物科技,1998,23(2):4446.

[2] 汪一婷,王連平.工廠化生產組培苗的污染及其控制研究[J].安徽農業(yè)科學,2005,33(12):2357~2358.

[3] 杜雪玲,張振霞.植物組織培養(yǎng)中的污染成因及其預防[J].草業(yè)科學,2005,2(1):24~27.

[4] 方麗,王連平,茹水江,等.植物組培過程中污染微生物種類及其季節(jié)性的變化[J].浙江農業(yè)學報,2013,25(2):284~287.

中圖分類號:S723.1

文獻標識碼:B

文章編號:1674-9944(2015)01-0034-02

作者簡介:謝穎苑(1985—),女,廣東湛江人,助理工程師,主要從事林木組培繁育方面的工作。

收稿日期:2014-12-12