■麻志紅 李香子 于 伽 高青山 嚴昌國

（1.延邊大學農學院動物科學系，吉林延吉 133000；2.延邊大學肉牛科學與產業(yè)技術協同創(chuàng)新中心，吉林延吉 133000）

花生是重要的油料作物之一，其種植遍布世界，是一種商品利用率很高的經濟作物。研究表明，花生殼營養(yǎng)豐富，含有多種動物所需要的營養(yǎng)物質，可作為動物的粗飼料?；ㄉ鷼ぶ饕獱I養(yǎng)成分是粗纖維，其含量可達65.7%～79.3%，和其它粗飼料相比，它還富含鈉、鋅、鐵、鋁、錳等。除此之外，花生殼中還含具有保健功能的木糖、皂草苷、β-谷固醇素、胡蘿卜素等活性成分，含有抗氧化的多酚類物質3.34%～7.13%。蔣長苗等研究表明，與未發(fā)酵的花生殼相比，發(fā)酵的花生殼其蛋白質提高了6.3%、無氮浸出物提高了3.7%，而纖維素含量則降低了12.5%。花生殼的營養(yǎng)價值和消化率相對而言是比較高的，近幾年其應用于畜牧生產的研究效果較好。劉思來等研究使用粉碎花生殼粉來代替育肥豬飼料中的10%的玉米粉，豬肉品質得到一定程度的改善。潘國家等將15%的全價配合飼料用發(fā)酵的花生殼粉代替，豬糞便臭味降低，減少了環(huán)境的污染，降低了飼料成本。將米糠、麩皮跟花生殼以一定比例制成混合飼料可以直接用于禽畜，可使出肉率在一定程度上提高，育肥時間也被大大縮短。目前，反芻動物營養(yǎng)仍主要集中于研究瘤胃微生物對飼料養(yǎng)分的消化代謝機理和對各營養(yǎng)的適宜需要量等的應用研究。本試驗使用粗料花生殼和發(fā)酵花生殼與精料玉米粉按不同比例混合應用于延邊黃牛的體外培養(yǎng)，研究花生殼對瘤胃微生物活性的影響，為研究花生殼在反芻動物中的應用以及比較發(fā)酵和未發(fā)酵花生殼對瘤胃微生物影響提供理論基礎。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

選擇2頭安裝有永久性瘤胃瘺管成年健康的延邊黃牛，以供瘤胃液的采集。試驗動物每日飼喂2次（07:00和16:00），自由飲水，基礎日糧精粗比為6∶4。體外培養(yǎng)底物為精飼料（玉米-豆粕型）：粗飼料（發(fā)酵和未發(fā)酵的花生殼）=7∶3；人工唾液的配制參考Mc-Dougall的方法。

1.2 試驗設計

試驗采用單因素試驗設計，根據培養(yǎng)底物中飼糧精粗比不同分為4組，每組3個重復。每組飼糧精粗比為高精料∶未發(fā)酵花生殼=7∶3（HC組），低精料∶未發(fā)酵花生殼=3∶7（LC組），高精料∶發(fā)酵花生殼=7∶3（HCF組），低精料：發(fā)酵花生殼=3∶7（LCF組）。在培養(yǎng)12 h內各時間點分別測定pH值、氨態(tài)氮（NH3-N）、揮發(fā)性脂肪酸（VFA）、產氣量、二氧化碳（CO2）、氫氣(H2)和甲烷(CH4)含量。

1.3 測定指標及方法

在1、3、6 h和12 h采集瘤胃液，用雷磁pHS-3C pH計測定pH值。在培養(yǎng)1、3、6 h和12 h分別取體外培養(yǎng)液1 ml用靛酚比色法測定NH3-N含量。使用安捷倫（GC-7890A）氣相色譜儀采用外標法測定揮發(fā)性脂肪酸（VFA）濃度，利用火焰離子檢測器（FID）進行檢測，進樣溫度170℃，柱溫120℃，檢測器溫度200℃，色譜柱型號Agilent 1 9091F-112（25 m×320 μm×0.5 μm）。在培養(yǎng)1、3、6、9 h和12 h得到的樣品產氣壓分別轉化成產氣體積，依照空白試驗校正并計算累計產氣量。用島津GC-20140氣相色譜儀采用外標法測定CO2、H2、CH4，使用TCD檢測器進行檢測，色譜柱型號:HS7 VPCPII)m×4 mm。

1.4 數據處理

試驗數據經Excel 2007初步處理后，采用SPSS 17.0中的one-way ANOVA程序進行，以P＜0.05作為差異顯著性判斷標準。

2 結果與分析

2.1 花生殼對瘤胃微生物體外發(fā)酵pH值的影響

表1 花生殼對培養(yǎng)液pH值的影響

由表1可見，1 h時，LCF顯著高于HCF（P＜0.05），HCF 顯著高于HC組（P＜0.05），HC組顯著高于LC（P＜0.05）；6 h時，HC、LC與HCF組顯著低于LCF組（P＜0.05）；12 h時，HC、HCF組顯著低于 LCF組（P＜0.05）。

2.2 花生殼對瘤胃微生物體外發(fā)酵NH3-N濃度的影響

由表2可知，發(fā)酵1 h時，HC組顯著高于HCF組（P＜0.05）；在3 h時，HC、LC組顯著低于HCF、LCF組（P＜0.05）；在6 h時，HC組顯著低于HCF、LCF組（P＜0.05）；在12 h時，各組間差異不顯著（P＞0.05）。

表2 花生殼對培養(yǎng)液NH3-N濃度的影響(mg/dl)

2.3 花生殼對瘤胃微生物體外發(fā)酵VFA濃度的影響

表3 花生殼對培養(yǎng)液VFA的影響(mmol/ml)

由表3可知，乙酸在1 h和3 h時各組間差異不顯著（P＞0.05），在 6 h時，HC組顯著高于 LCF組（P＜0.05），LC組顯著高于HCF、LCF組（P＜0.05），HCF組顯著高于LCF組（P＜0.05）；12 h時，HC組顯著高于LC、LCF組（P＜0.05），HCF組顯著高于LCF組（P＜0.05）。

丙酸在1、3 h時，HC組顯著高于LCF組（P＜0.05）；6 h時，HC、LC組與HCF組各組間差異不顯著（P＞0.05）；12 h時，HC組顯著高于LC、HCF、LCF組（P＜0.05），HCF組顯著高于LC、LCF組（P＜0.05）。

丁酸在1 h時，各組差異不顯著（P＞0.05）；在3 h時，HC組顯著高于HCF、LCF組（P＜0.05）；在6 h時，HCF顯著高于LCF組（P＜0.05）；在12 h時，HC組顯著高于LC、LCF組（P＜0.05）。

乙酸/丙酸比值在1 h與3 h時，LCF組顯著高于HC、LC、HCF組（P＜0.05）；在6 h時，LCF顯著高于HC、HCF組（P＜0.05）；在12 h時，LCF組顯著高于HC、HCF組（P＜0.05），LC組顯著高于HC組（P＜0.05）。

總揮發(fā)性脂肪酸在1、3 h，時各組差異不顯著（P＞0.05）；在6 h時，HC、LC組與HCF組各組間差異不顯著（P＞0.05），HCF組顯著高于LCF組（P＜0.05）；在12 h時HC組顯著高于LC、LCF組（P＜0.05）。

2.4 花生殼對瘤胃微生物體外發(fā)酵產氣量的影響（見表4）

表4 花生殼對培養(yǎng)液產氣量的影響（ml）

由表4可知，HC產氣量最高，LCF產氣量最低。在發(fā)酵1 h時，HC和HCF、LCF都差異不顯著(P＞0.05)；在3 h時，HC組顯著高于LCF組(P＜0.05)；在6、9 h和12 h時，HC組顯著高于LC、HCF、LCF組（P＜0.05）。

2.5 花生殼對瘤胃微生物體外發(fā)酵氣體成分的影響

由表5可知，氫氣在1、3、6、12 h時，含量各組之間差異不顯著（P＞0.05），在9 h時LC組顯著高于HC、HCF、LCF組（P＜0.05）。

表5 花生殼對培養(yǎng)液氣體成分的影響(μmol/ml)

甲烷在1 h時，LC組顯著高于LCF組（P＜0.05）；在6 h時，HC組顯著高于HCF、LCF組（P＜0.05），LC組顯著低于LCF組（P＜0.05）；在9 h時，HC組顯著高于LC、HCF、LCF組（P＜0.05），LC顯著高于HCF、LCF組（P＜0.05），HCF組顯著高于LCF組（P＜0.05）；在12 h時，各組間差異不顯著（P＞0.05）。

二氧化碳含量在發(fā)酵1 h時，HC、LC組與HCF組各組間差異不顯著（P＞0.05）；在3 h時，HC、LC組顯著高于HCF、LCF組（P＜0.05）；在6 h時，HC組顯著高于LCF組（P＜0.05）；在9 h時，LCF組顯著高于其他三組（P＜0.05），HCF組顯著低于LCF組（P＜0.05）；在12 h時，HC組顯著高于LC組（P＜0.05）。

3 討論

試驗發(fā)現，6 h時，LCF組的pH值顯著高于其他三組（P＜0.05），說明發(fā)酵花生殼更有利于微生物的發(fā)酵?；ㄉ鷼さ奶砑訉Π睉B(tài)氮濃度影響不顯著，這與Slyter等研究相符。VFA濃度的高低是反芻動物瘤胃發(fā)酵參考的主要指標之一，這是由于其基本占進入動物機體代謝的碳流量的60%，提供總能量需要量的75%左右。乙酸在6 h時，LC組顯著高于HCF和LCF組（P＜0.05），丙酸在12 h時HC組值達到最高，乙酸/丙酸在3 h時LCF組值都顯著高于其他三組（P＜0.05）；乙酸是由微生物發(fā)酵飼料中的纖維物質生成的，微生物降解纖維素的活性越高其含量越高。由于發(fā)酵后的花生殼其纖維含量降低，所以精料與發(fā)酵后的花生殼按不同比例組成的飼糧其乙酸值低于未發(fā)酵組的乙酸值，比較丙酸值和丁酸值，乙酸/丙酸比值，未發(fā)酵組總體上比較穩(wěn)定而發(fā)酵組卻是相反的，在6 h時出現大波動，說明發(fā)酵的花生殼更有利于微生物的利用，粗纖維過多會抑制微生物的利用。產氣量多少反應瘤胃微生物活性的高低?；ㄉ鷼さ脑黾訒种莆⑸锏幕钚裕瑫r間越長抑制作用會越明顯。美國佐治亞州立大學利用蒸煮花生殼進行發(fā)酵，使蛋白質含量達到18%左右，可消化率達65%以上，是一種具有較高營養(yǎng)價值的飼料。適宜的精粗料比例能夠提高反芻動物消化代謝功能，優(yōu)化瘤胃內環(huán)境，有效提高飼料利用率。發(fā)酵組和未發(fā)酵組比較，發(fā)酵組產氣量明顯低于未發(fā)酵組，說明發(fā)酵花生殼抑制了產氣。在微生物降解過程中會產生大量的CO2和H2，在瘤胃中CO2和H2在甲烷菌的作用下生成CH4，最終以噯氣的形式排出，釋放到大自然中。表明了發(fā)酵的花生殼能顯著降低氣體的排放量。

4 結論

在飼糧中添加花生殼對瘤胃pH值影響較??；在飼糧中添加花生殼對瘤胃中NH3-N濃度影響不顯著；在飼糧中添加發(fā)酵的花生殼更有利于微生物的利用，發(fā)酵花生殼抑制了產氣量，發(fā)酵的花生殼能顯著降低氣體的排放量。試驗證明，HCF相比較其它3組更適合瘤胃體外發(fā)酵。

（參考文獻15篇，刊略，需者可函索）