■陳國(guó)旺 黃大鵬

（黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)，黑龍江大慶 163319）

抗生素作為畜禽抗病促長(zhǎng)添加劑所帶來(lái)的畜禽產(chǎn)品質(zhì)量安全問(wèn)題一直為消費(fèi)者所詬病，替代抗生素的安全低毒飼料添加劑研究正成為動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究的熱點(diǎn)問(wèn)題。谷氨酰胺(Gln)和功能性寡糖均因具有促進(jìn)動(dòng)物腸道免疫細(xì)胞的增殖，以及維持腸道結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定和家畜腸道菌群平衡作用而被認(rèn)為是抗生素的較好替代品。肖英平等[1]研究發(fā)現(xiàn)，在28日齡斷奶仔豬飼糧中添加Gln(10 g/kg)能顯著提高仔豬生長(zhǎng)性能和腸道健康因子的表達(dá)量。車(chē)向榮等[2]報(bào)道，異麥芽低聚糖能增強(qiáng)斷奶仔豬的免疫功能，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收效率。而Gln和IMO的互作效應(yīng)對(duì)斷奶仔豬的影響未見(jiàn)報(bào)道，本試驗(yàn)通過(guò)在斷奶仔豬日糧中添加不同劑量的Gln和IMO，研究二者的互作效應(yīng)對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能及腸道微生物的影響，為其能否替代抗生素提供理論依據(jù)。

1 材料方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)采用兩因素三水平析因設(shè)計(jì)，選擇日齡相近，體重在(8.12±0.47)kg健康的杜大長(zhǎng)三元斷奶仔豬81頭，隨機(jī)分為9個(gè)處理，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)3頭，1個(gè)對(duì)照組不添加Gln和 IMO，8個(gè)試驗(yàn)組分別飼喂含不同劑量Gln和IMO的日糧。試驗(yàn)設(shè)計(jì)與分組見(jiàn)表1。試驗(yàn)預(yù)飼期7 d，試驗(yàn)期28 d。

表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與分組

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)管理與試驗(yàn)日糧

試驗(yàn)仔豬采用高床網(wǎng)上飼養(yǎng)，每個(gè)處理一欄。試驗(yàn)前對(duì)豬舍進(jìn)行徹底清洗消毒，試驗(yàn)豬采用自動(dòng)料槽給料，自動(dòng)飲水供水。保證豬舍清潔，按時(shí)消毒和嚴(yán)格執(zhí)行豬場(chǎng)免疫程序。每天觀察豬群的采食和健康狀況。

試驗(yàn)豬日糧參照中華人民共和國(guó)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T 65—2004）需要配制，制成顆粒料飼喂，基礎(chǔ)日糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表2。

表2 基礎(chǔ)日糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平

1.3 測(cè)定指標(biāo)及測(cè)定方法

1.3.1 生長(zhǎng)性能的測(cè)定

分別于試驗(yàn)開(kāi)始后第0、第14 d和第28 d，仔豬空腹稱(chēng)重，詳細(xì)記錄各處理組采食量，計(jì)算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)以及料重比(F/G)。

1.3.2 腸道微生物的測(cè)定

在試驗(yàn)期開(kāi)始后第7 d，每組選取體重相近的3頭仔豬屠宰，分別取空腸、回腸和盲腸內(nèi)容物，分別裝入相應(yīng)的塑封袋中，放到4℃冰箱中，短時(shí)間保存，待屠宰完后，帶回實(shí)驗(yàn)室立即進(jìn)行微生物的測(cè)定，分別測(cè)定斷奶仔豬回腸、空腸和盲腸中大腸桿菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌的數(shù)量。采用平板涂布法計(jì)數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)過(guò)Excel 2007整理后，采用SPSS 21.0軟件中ANOVA模塊進(jìn)行兩因素有重復(fù)方差分析，用Duncan's法進(jìn)行多重比較。試驗(yàn)結(jié)果采用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”。

2 結(jié)果

2.1 IMO和Gln的互作效應(yīng)對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響（見(jiàn)表3）

從表3可以看出，試驗(yàn)0～14 d，試驗(yàn)Ⅰ～Ⅳ組平均日增重與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)，而試驗(yàn)Ⅴ～Ⅷ組顯著高于對(duì)照組和其它四組(P＜0.05)，添加Gln和IMO能顯著提高斷奶仔豬的日增重水平(P＜0.05)；日糧添加Gln和IMO均極顯著提高豬只日采食量(P＜0.01)，且試驗(yàn)Ⅴ～Ⅷ組顯著高于試驗(yàn)Ⅰ～Ⅳ組(P＜0.05)，添加Gln與IMO的互作效應(yīng)極顯著影響平均日采食量(P＜0.01)；添加Gln和IMO或其互作效應(yīng)均對(duì)料重比沒(méi)有顯著差異(P＞0.05)；試驗(yàn)Ⅴ組平均日采食量和平均日增重最高。試驗(yàn)15～28日齡，各試驗(yàn)組平均日增重差異不顯著(P＞0.05)，試驗(yàn)Ⅴ～Ⅶ組日采食量差異不顯著(P＞0.05)，Gln×IMO平均日增重差異不顯著(P＞0.05)。

2.2 IMO和Gln互作效應(yīng)對(duì)斷奶仔豬腸道微生物的影響（見(jiàn)表4）

2.2.1 IMO和Gln互作效應(yīng)對(duì)斷奶仔豬盲腸微生物的影響

由表4可見(jiàn)，大腸桿菌方面，試驗(yàn)Ⅰ～Ⅱ組、試驗(yàn)Ⅲ～Ⅴ組和試驗(yàn)Ⅵ～Ⅷ組之間差異顯著(P＜0.05)，且均顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)，單獨(dú)添加 IMO和Gln均能降低斷奶后仔豬盲腸中大腸桿菌數(shù)量(P＜0.05)，其互作效應(yīng)明顯(P＜0.05)；乳酸菌方面，試驗(yàn)Ⅴ組與其他各組相比差異顯著(P＜0.05)，其他試驗(yàn)組之間差異均不顯著(P＞0.05)，且均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)；雙歧桿菌方面，試驗(yàn)Ⅳ～Ⅷ組與試驗(yàn)Ⅰ～Ⅲ組相比差異顯著(P＜0.05)，且均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)；單獨(dú)添加IMO對(duì)乳酸桿菌影響不顯著(P＞0.05)，二者互作效應(yīng)對(duì)其影響顯著(P＜0.05)。

表3 日糧中不同添加量Gln和IMO對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

表4 日糧添加Gln和IMO對(duì)斷奶仔豬各腸段微生物的影響(log cfu)

2.2.2 IMO和Gln互作效應(yīng)對(duì)斷奶仔豬空腸微生物的影響

表4結(jié)果顯示，大腸桿菌方面，試驗(yàn)Ⅱ組和試驗(yàn)Ⅰ組與其他組相比差異顯著(P＜0.05)，其他各試驗(yàn)組之間差異均不顯著(P＞0.05)，單獨(dú)添加Gln和IMO對(duì)抑制大腸桿菌繁殖均有作用(P＜0.05)，添加Gln的抑制作用更明顯；乳酸桿菌方面，各試驗(yàn)組顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，試驗(yàn)Ⅲ～Ⅷ組間差異均不顯著(P＞0.05)，單獨(dú)添加 Gln 達(dá) 15 g/kg的效果顯著(P＜0.05)，Gln和IMO的互作效應(yīng)對(duì)其影響顯著(P＜0.05)；雙歧桿菌方面，試驗(yàn)Ⅲ～Ⅴ組與試驗(yàn)Ⅵ組和試驗(yàn)Ⅶ組相比差異顯著(P＜0.05)，單獨(dú)添加Gln對(duì)雙歧桿菌的增值有極顯著的促進(jìn)作用(P＜0.01)，二者的互作效應(yīng)影響極顯著(P＜0.01)。

2.2.3 IMO和Gln互作效應(yīng)對(duì)斷奶仔豬回腸微生物的影響

由表4可知，大腸桿菌方面，各試驗(yàn)組與對(duì)照組相比差異顯著(P＜0.05)，試驗(yàn)Ⅲ～Ⅷ組之間差異不顯著(P＞0.05)，單獨(dú)添加Gln和IMO對(duì)抑制大腸桿菌繁殖均有作用(P＜0.05)，二者的互作效應(yīng)影響不顯著(P＞0.05)；乳酸桿菌方面，試驗(yàn)Ⅵ～Ⅶ組與試驗(yàn)Ⅲ～Ⅴ組相比差異顯著(P＜0.05)，試驗(yàn)Ⅵ～Ⅶ組之間差異不顯著(P＞0.05)，單獨(dú)添加Gln組乳酸桿菌差異不顯著(P＞0.05)；雙歧桿菌方面，試驗(yàn)Ⅵ組和試驗(yàn)Ⅷ組與其他各組相比差異顯著，且均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，單獨(dú)添加Gln和IMO均有顯著效果(P＜0.05)，二者的互作效應(yīng)影響顯著(P＜0.05)。

3 討論

3.1 IMO和Gln互作效應(yīng)對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能影響

仔豬早期斷奶時(shí)，由于仔豬胃腸功能發(fā)育不健全，機(jī)體會(huì)產(chǎn)生明顯應(yīng)激現(xiàn)象，在此過(guò)程中，仔豬會(huì)出現(xiàn)腹瀉和采食量下降等反應(yīng)，此時(shí)，則需要仔豬通過(guò)分解自身的貯存營(yíng)養(yǎng)轉(zhuǎn)化來(lái)維持機(jī)體的營(yíng)養(yǎng)平衡。而隨著仔豬對(duì)環(huán)境的逐漸適應(yīng)，會(huì)使仔豬的平均日采食量和平均日增重均增加[1]。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，仔豬在斷奶早期時(shí)，平均日增重和平均日采食量較低，而隨著日齡的不斷增加，其平均日增重和平均日采食量也顯著提高，這與肖英平[1]提出的觀點(diǎn)一致。添加不同水平的Gln會(huì)提高斷奶仔豬的平均日增重和平均日采食量，徐衛(wèi)丹等[3]試驗(yàn)結(jié)果表明，21～35日齡的仔豬日糧中添加1%Gln能顯著提高日采食量和平均日增重。本試驗(yàn)表明，在日糧中添加1%和1.5%的Gln會(huì)提高仔豬的生長(zhǎng)性能，這與徐衛(wèi)丹等(2005)[3]報(bào)道一致。低聚異麥芽糖作為低聚寡糖被添加到飼糧中，因?yàn)樗芴岣唢暭Z的適口性，從而間接的提高斷奶仔豬的采食量。羅麗萍等[4]研究表明，在斷奶仔豬日糧中添加0.2%、0.4%和0.8%IMO，保育豬的日增重變化是0.4%IMO＞0.2%IMO＞0.8%IMO。在日采食量方面，保育豬的日采食量的變化0.2%IMO＞0.4%IMO＞0.8%IMO。在保育豬日糧中添加0.2%IMO和0.4%IMO可以提高仔豬的日采食量和日增重。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在飼糧中添加6 g/kg和10 g/kg的低聚異麥芽糖可以提高斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能，本試驗(yàn)結(jié)果與羅麗萍等結(jié)果有差異，這種差異可能來(lái)自豬種、飼養(yǎng)區(qū)域的差異，還可能是IMO的純度差異。

3.2 IMO和Gln對(duì)斷奶仔豬腸道微生物的影響

健康動(dòng)物的腸道中有害菌和有益菌應(yīng)該處于一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，當(dāng)機(jī)體處于應(yīng)激狀態(tài)時(shí)（斷奶、氣候變化等），各段腸道內(nèi)有害菌量就會(huì)增加，有益菌量會(huì)降低。因此，控制好腸道菌群平衡是很關(guān)鍵的[5]。低聚糖對(duì)有害菌起到抑制作用，對(duì)有益菌（雙歧桿菌和乳酸菌）起到促進(jìn)作用[5]。研究表明，斷奶仔豬日糧中添加Gln也能夠促進(jìn)有益菌和有害菌的增長(zhǎng)。

雙歧桿菌在腸道中的代謝產(chǎn)物可以抑制腸道內(nèi)致病菌，加速腸蠕動(dòng)，有利于腸道內(nèi)致病菌的排出，可以維持腸道菌群平衡[6]。低聚異麥芽糖有助于腸道雙歧桿菌生長(zhǎng)。趙玉蓉等[7]發(fā)現(xiàn)，在日糧添加1%的Gln可以使斷奶仔豬各段腸中大腸桿菌的數(shù)量顯著降低，同時(shí)會(huì)使各段腸中有益菌(雙歧桿菌和乳酸菌)數(shù)量明顯增加。劉婷婷等[8]研究表明，日糧中添加谷氨酰胺和丁酸梭菌，會(huì)顯著提高斷奶后7日齡和14日齡仔豬盲腸中的乳酸菌和雙歧桿菌的數(shù)量，降低盲腸中大腸桿菌的數(shù)量。張宏福等[9]研究也表明，日糧中添加低聚異麥芽糖可以抑制大腸桿菌的增長(zhǎng)，同時(shí)，能促進(jìn)雙歧桿菌和乳酸菌的增長(zhǎng)。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在日糧中添加10 g/kgIMO會(huì)顯著降低斷奶仔豬盲腸、空腸和回腸中大腸桿菌數(shù)量。日糧中添加10 g/kgGln顯著提高斷奶仔豬盲腸和空腸的雙歧桿菌和乳酸菌的數(shù)量，日糧中添加15 g/kgGln顯著提高仔豬空腸和回腸中雙歧桿菌和乳酸菌的數(shù)量。

4 結(jié)論

①在日糧中添加Gln(10 g/kg或15 g/kg)和IMO(10 g/kg)顯著提高斷奶仔豬的平均日增重和平均日采食量，Gln(10 g/kg)和IMO(10 g/kg)的組合時(shí)對(duì)斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能提高更加顯著。

②在日糧中添加Gln(10 g/kg或15 g/kg)和IMO(10 g/kg)能顯著提高斷奶仔豬的盲腸、空腸和回腸內(nèi)容物中乳酸菌和雙歧桿菌的數(shù)量，降低大腸桿菌的數(shù)量。