■鄭榮輝 左建軍 龔俊勇

（1.華南農(nóng)業(yè)大學，廣東廣州 510642；2.深圳綠微康動物營養(yǎng)有限公司，廣東深圳 518055）

脂類是畜禽動物和水產(chǎn)魚類必需的一類營養(yǎng)物質，飼料中添加脂類具有營養(yǎng)性和非營養(yǎng)性作用，能夠提高飼料能量濃度、提供必需脂肪酸，發(fā)揮營養(yǎng)效應（張克英，2011）。研究表明，在生理條件下脂類含能是碳水化合物的2.25倍，是動物體內(nèi)重要的功能貯能物質；同時，脂類參與動物多種重要體組織的構成，在動物營養(yǎng)生理中發(fā)揮重要作用?，F(xiàn)代飼料生產(chǎn)中，為了滿足動物快速生長對高能量的需求，往往通過額外添加油脂提高飼料能值。然而實踐表明，幼齡畜禽利用脂肪的效果并不明顯，成年畜禽飼糧中添加大量的脂肪也達不到預期效果，分析可能的原因在于幼齡動物本身消化機能還未完善，體內(nèi)脂肪酶分泌量不足；而成年動物，其正常分泌的脂肪酶已經(jīng)不能滿足需求，不能有效分解吸收飼料中過量添加的能量營養(yǎng)脂肪，造成養(yǎng)分消化率下降；同時動物還可能因為脂肪過剩而導致腹瀉、生長緩慢等現(xiàn)象的發(fā)生（劉桂武等，2011）。因此可考慮在飼糧中添加外源脂肪酶，以補充幼齡動物內(nèi)源脂肪酶分泌的不足，提高動物對高能量飼糧的需求，提高飼料轉化率，增加和改進飼料的香味和風味，使原料的能量利用率最大化，滿足動物對高能飼糧的需求，提高飼料轉化率，減少動物因脂肪消化不良而造成的營養(yǎng)性腹瀉，促進動物生長。在養(yǎng)豬生產(chǎn)中，有研究顯示適量添加的脂肪酶，能夠調(diào)節(jié)腸道微生物，減少仔豬的腹瀉發(fā)生；但另有研究表明，除改善養(yǎng)分消化率之外，對仔豬腹瀉率沒有影響（時本利等，2010；周詳?shù)龋?012；Dierick等,2002）。蘇繼影（2006）研究添加0.02%脂肪酶和0.4%卵磷脂到脂肪源為豆油、椰子油、棕櫚油的基礎飼糧中，結果顯示：添加脂肪酶組與對照組和0.4%卵磷脂組相比，日增重分別提高47.27%和30.08%，采食量分別提高36.35%和24.77%。目前，針對脂肪酶在乳豬中的應用研究相對較少，而結論也有所不一致。本試驗通過在乳豬基礎飼糧中添加脂肪酶，探討其對乳豬生長性能、飼料養(yǎng)分利用率及血清生化指標的影響，為脂肪酶在乳豬上的合理應用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

酶活定義：在一定條件下（溫度36℃和pH值9.4），水解甘油三酯每分鐘生成1 μmol脂肪酸的酶量，即為一個活力單位，以U/g或者U/ml表示。

脂肪酶由深圳綠微康動物營養(yǎng)有限公司提供，酶活為85 000 U/g。

1.2 試驗地點

試驗在廣州花都區(qū)花東鎮(zhèn)莘田養(yǎng)豬場進行。

1.3 試驗設計

試驗選取120頭健康、體況相近的28日齡杜×（長×大）斷奶仔豬，按平均體重相近的原則，隨機分為3個處理組，其中第1組為對照組，第2、3組為試驗組，每個處理組4個重復，每個重復10頭仔豬，各重復間差異不顯著。試驗2、3組為基礎日糧中分別添加100、150 g/t脂肪酶。試驗期共28 d。豬舍為半封閉式，高床漏縫地板。試驗期仔豬自由采食，免疫和其他管理按照豬場正常生產(chǎn)管理程序進行操作。

1.4 飼糧配方及營養(yǎng)水平

試驗日糧配方參照美國NRC(2012)豬營養(yǎng)需要量設計，采用玉米-豆粕型基礎日糧(見表1)。

表1 基礎日糧配方及營養(yǎng)水平

1.5 測定指標及方法

1.5.1 生長性能

試驗期間詳細記錄每組試驗豬的初始重、末重、日采食量（ADFI），計算日增重（ADG）、料重比（FCR）、腹瀉率（DR）等指標。

1.5.2 表觀消化率的測定

日糧和糞樣中干物質(DM)參照GB/T 6435—2006的方法測定；粗蛋白（CP）參照GB/T 6432—1994的方法進行前處理，然后使用FOSS Kjeltec-2300全自動凱氏定氮儀進行測定；粗脂肪（EE）參照GB/T 6433—2006，使用上海纖檢SZC-C型脂肪測定儀進行測定；總能（GE）使用IKAC2000熱量儀進行測定。

1.5.3 血清生化指標的測定

血清樣采集在消化試驗結束后進行。消化試驗結束后的第1 d開始繼續(xù)提供每個處理組的試驗料，自由采食。在第4 d早上8：00喂料前，對每頭豬進行前腔靜脈采血20 ml，室溫陰涼處傾斜靜置，待有血清析出時，3 000 r/min離心10 min，取上層血清分裝，置冰盒預冷后放-80℃保存待測。采用試劑盒（購自南京建成）檢測血清高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、總膽固醇（TC）和游離脂肪酸（NEFA），并計算高密度脂蛋白和低密度脂蛋白比。

1.6 數(shù)據(jù)處理及分析方法

試驗數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel 2010進行整理，SPSS（19.0）統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析，鄧肯式新復極差法進行多重比較，試驗數(shù)據(jù)采用“平均數(shù)±標準誤（M±S.E.）”表示，置信區(qū)間95%。

2 結果與分析

2.1 脂肪酶對斷奶仔豬生長性能的影響（見表2）

表2 飼糧中添加脂肪酶對斷奶仔豬生長性能的影響

由表2可知，與對照組比較，試驗2組末重增加5.80%，差異不顯著（P＞0.05）；日增重方面，試驗2組比對照組增加10.40%，差異顯著（P＜0.05）；與試驗1組比較，差異顯著（P＜0.05）；日采食量試驗1、2組分別增加7.15%、11.21%，極顯著高于對照組（P＜0.01），各組間差異極顯著（P＜0.01）；料重比和腹瀉率3個組無顯著差異（P＞0.05）。

2.2 脂肪酶對斷奶仔豬飼料表觀消化率的影響（見表3）

表3 飼糧中添加脂肪酶對斷奶仔豬飼料表觀消化率的影響

由表3可知，與對照組比較，試驗1、2組干物質、蛋白質、粗脂肪、總能和表觀消化率均有不同程度提高，但差異不顯著（P＞0.05）。其中，與對照組比較，試驗1、2組干物質表觀消化率分別提高0.95%、1.48%；粗蛋白表觀消化率分別提高0.36%、2.90%；粗脂肪表觀消化率分別提高2.20%、1.33%；總能表觀消化率分別提高0.84%、1.73%；表觀消化能分別提高0.82%、1.64%。

2.3 脂肪酶對斷奶仔豬血清生化指標的影響(見表4)

由表4可知，游離脂肪酸試驗1、2組與對照組比較，分別降低12.90%、25.81%，差異不顯著（P＞0.05）；高密度脂蛋白試驗1組與2組比較，增加30.26%，差異顯著（P＜0.05），與對照組比較差異不顯著（P＞0.05）；低密度脂蛋白和HDL/LDL各組間差異不顯著（P＞0.05）。

表4 飼糧中添加脂肪酶對斷奶仔豬血清生化指標的影響

3 討論

3.1 脂肪酶對斷奶仔豬生長性能的影響

近年來，隨著對脂肪酶研究的持續(xù)深入和對其生產(chǎn)工藝技術的不斷推進，飼料業(yè)對脂肪酶的接受程度越來越高。添加脂肪酶可作為內(nèi)源脂肪酶不足時的補充，用以促進油脂消化，提高動物機體生長性能。幼齡畜禽的消化機能發(fā)育還不完善，本身分泌的內(nèi)源酶就不足，加之生產(chǎn)上難以避免的應激——如仔豬斷奶，會造成內(nèi)源酶分泌的突然減少；而成年畜禽同樣難免處于病理、應激狀態(tài)時內(nèi)源酶的分泌發(fā)生障礙或減少（Choct等,1992）。

張勇等（1999）研究表明，在32日齡斷奶仔豬日糧中添加0.1%由淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等組合成的酶制劑可促進斷奶仔豬生長。Kpoxuha等(1998)研究指出：復合酶制劑中添加蛋白酶和脂肪酶對仔豬的增重和它們對配合飼料的利用帶來有益的影響。Tan等（1994）研究結果顯示：在含高油玉米、全脂米糠、干苜蓿粉、餅粕等的基礎日糧中添加脂肪酶，可以補充幼齡動物內(nèi)源脂肪酶的分泌不足，同時可提高飼料表觀消化能5%～11%，提高畜禽增長速度4%～10%，提高飼料利用率2%～7%。時本利等（2010）選擇28日齡斷奶仔豬為試驗對象，在日糧中添加200 g/t脂肪酶，結果表明：與對照組比，飼料中添加200 g/t脂肪酶顯著提高平均日增重，且脂肪酶添加對仔豬腹瀉沒有影響。藍海恩等（2011）選擇健康、體重相近[(13.50±0.50)kg]大約克去勢公豬進行試驗，結果表明：與對照組相比，在日糧添加250 g/t脂肪酶，可提高斷奶仔豬的平均日增重（13.95%）、降低料重比（15.48%），且均差異顯著（P＜0.05）。周詳?shù)龋?012）選擇體況相近、體重7.00 kg左右的三元雜交（杜長大）保育仔豬進行試驗，結果表明：與對照組相比，添加200 g/t和400 g/t脂肪酶處理組的平均日增重分別提高7.68%（P＞0.05）和12.19%（P＜0.05）；日均采食量分別提高了3.45%和6.89%，差異均不顯著（P＞0.05）；料重比分別降低了3.75%（P＞0.05）、5.63%（P＜0.05）。這些研究表明，在日糧中添加脂肪酶可提高乳仔豬生產(chǎn)性能的作用。此外，Dierick等（2002）研究表明，適量添加脂肪酶能對一些消化道有害微生物的生長具有顯著的抑制作用，起到類似抗生素的作用，并由此推測脂肪酶的部分分解產(chǎn)物可起到抑制有害微生物、殺滅病毒，同時降低飼料中抗生素的使用。

本試驗結果顯示：與對照組比較，試驗2組末重增加5.80%，差異不顯著（P＞0.05）；日增重方面，試驗2組比對照組增加10.40%，差異顯著（P＜0.05），且與試驗1組比較，差異顯著（P＜0.05）；日采食量試驗1、2組分別比對照組增加7.15%、11.21%，差異極顯著（P＜0.01），組間差異極顯著（P＜0.01）。以上結果與前人研究結果基本一致，添加脂肪酶對斷奶仔豬日采食量和平均日增重均有一定提高，可達到提高生長性能的效果。

3.2 脂肪酶對斷奶仔豬飼料表觀利用率的影響

乳仔豬對飼料的消化率受多方面因素的影響，比如豬只的品種、性別、健康狀況、生長階段、飼糧營養(yǎng)水平、添加劑等。近年來，養(yǎng)殖業(yè)的飼料原料價格不斷上漲，飼料的消化率在很大程度上決定著對養(yǎng)豬的經(jīng)濟效益。大量研究證實，日糧中適量添加脂肪酶可提高畜禽對營養(yǎng)物質的消化率和消化酶活性，從而使動物的生長性能得到提高。Dierick等（2004）研究結果顯示，在豬動物油脂源日糧中添加0.05%的脂肪酶，能顯著提高飼料干物質、粗蛋白質、粗灰分和消化能的表觀消化率（P＜0.05）。Polin等（1980）將0.1%的脂肪酶添加到含4%動物油的玉米型白萊航公雞基礎日糧中，結果顯示：脂肪酶能明顯改善脂肪的吸收（P＜0.05），提高干物質的消化率。楊新文（2010）研究表明，添加100、300 g/t脂肪酶可顯著提高南方鲇的粗脂肪消化率（P＜0.05），對蛋白質消化率影響不顯著（P＞0.05），但隨著脂肪酶的增加而明顯增加。何前等（2010）研究表明，脂肪酶可顯著提高嶺南黃公雞的粗脂肪表觀利用率（P＜0.05），粗蛋白質消化率也隨著脂肪酶添加量的增加而升高的趨勢（P＞0.05）。谷金皇（2010）研究發(fā)現(xiàn)，脂肪酶能顯著提高瓦氏黃顙魚的粗脂肪消化率（P＜0.05），高濃度脂肪酶對粗蛋白質消化率影響顯著（P＜0.05），低濃度差異不顯著（P＞0.05）。

本試驗結果顯示：仔豬日糧中添加脂肪酶對斷奶仔豬的各養(yǎng)分利用率的影響不顯著（P＞0.05），但有提高的趨勢。表明日糧中添加脂肪酶可提高斷奶仔豬對飼料表觀利用率，促進各營養(yǎng)物質的吸收。

3.3 脂肪酶對斷奶仔豬血清生化指標的影響

仔豬的血液與機體的代謝、營養(yǎng)狀況和疾病有著密切的聯(lián)系，當仔豬受到外界因子的影響而產(chǎn)生生理變化時，會迅速的反映在血液指標中（陳琨飛，2012）。仔豬血液中游離脂肪酸、甘油三酯和膽固醇等是反映脂類代謝變化的重要指標（張冬梅等，2009），這三者來源均為機體合成和腸道消化吸收。其變化反映了仔豬對體內(nèi)脂類代謝能力和對飼料中脂類消化吸收能力的大小。目前，關于脂肪酶對血脂指標影響的文獻報道，在乳仔豬的研究中還不多，散見于對家禽的研究中。雷建平（2012）研究發(fā)現(xiàn)，添加脂肪酶能夠改善家禽脂肪吸收，且降低總膽固醇，提高血脂轉運和減少脂質在血管壁沉積。高峰等（2003）研究指出，在小麥基礎日糧中添加酶制劑，可顯著提高斷奶仔豬的生長性能，同時仔豬血清中血糖濃度也呈上升趨勢。龔俊勇等（2015）研究結果顯示：在白羽肉雞日糧中添加100 g/t脂肪酶可提高高密度脂蛋白含量，同時降低甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白含量，達到改善肉雞血清生化指標的結果。

本試驗結果顯示：游離脂肪酸試驗1、2組與對照組比較，分別降低12.90%、25.81%，差異不顯著（P＞0.05）；高密度脂蛋白試驗1與2組比較，增加30.26%，差異顯著（P＜0.05），與對照組比較差異不顯著（P＞0.05）。此研究結果與前人研究結果基本相似，添加脂肪酶可降低仔豬血清中游離脂肪酸含量，即表明脂肪酶在提高飼糧中脂類養(yǎng)分的消化率的同時，促進了脂類水解產(chǎn)物游離脂肪酸在仔豬體內(nèi)的沉積。

4 結論

日糧中添加脂肪酶可達到提高斷奶仔豬的日增重和日采食量；同時可提高斷奶仔豬對飼料中粗脂肪、粗蛋白和總能的表觀消化率，降低游離脂肪酸含量，提高高密度脂蛋白含量。