賈變桃鄒亞飛董豐收張禮生何偉志*（山西農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，太谷 03080；中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，北京 0093）

幾種殺菌劑對(duì)意大利蜜蜂的安全性評(píng)價(jià)

賈變桃1鄒亞飛2董豐收2張禮生2何偉志2*
（1山西農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，太谷 030801；2中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，北京 100193）

為評(píng)價(jià)幾種殺菌劑對(duì)意大利蜜蜂的急性毒性和安全性，測(cè)定了11種殺菌劑對(duì)蜜蜂的急性接觸毒性和15種殺菌劑對(duì)蜜蜂急性經(jīng)口毒性，結(jié)果表明：11種殺菌劑對(duì)蜜蜂的接觸毒性，氟硅唑?yàn)楦叨?，丙環(huán)唑和咪鮮胺為中毒，丙森鋅、苯醚1甲環(huán)唑、石硫合劑、甲基硫菌靈、烯酰嗎啉、氟菌唑、武夷菌素和三環(huán)唑?yàn)榈投荆?5種殺菌劑對(duì)蜜蜂的經(jīng)口毒性，丙環(huán)唑和抑霉唑?yàn)橹卸?，咪鮮胺、丙森鋅、苯醚甲環(huán)唑、石硫合劑、甲基硫菌靈、烯酰嗎啉、氟菌唑、三環(huán)唑、春雷霉素、代森錳鋅、腐霉利、嘧霉胺和烯唑醇為低毒。因此，應(yīng)禁止在蜜蜂活動(dòng)區(qū)域使用高毒殺菌劑氟硅唑，慎重選擇中等毒性殺菌劑丙環(huán)唑、咪鮮胺和抑霉唑，盡量選擇對(duì)蜜蜂低毒殺菌劑，以保護(hù)蜜蜂的安全。

殺菌劑；意大利蜜蜂；安全性評(píng)價(jià)

蜜蜂作為一種傳粉昆蟲(chóng)，對(duì)農(nóng)業(yè)增產(chǎn)增收具有重要作用，同時(shí)還可提供大量蜂蜜、蜂蠟、蜂膠等產(chǎn)品[1]。農(nóng)藥在防治病蟲(chóng)草等有害生物的過(guò)程中，也會(huì)對(duì)非靶標(biāo)有益生物如蜜蜂產(chǎn)生不良影響。自2006年冬以來(lái)，歐美等國(guó)相繼出現(xiàn)蜂群大量減少的現(xiàn)象，科學(xué)家們稱(chēng)之為蜂群崩潰失調(diào)?。╟olony collapse disorder，簡(jiǎn)稱(chēng)CCD）[2-3]。引起蜂群衰退的因素有很多，其中農(nóng)藥的大量使用被認(rèn)為是一個(gè)重要誘因[4]。據(jù)報(bào)道，許多殺蟲(chóng)劑對(duì)蜜蜂表現(xiàn)為高毒[5,6]，而殺菌劑和除草劑的毒性相對(duì)較低，但個(gè)別殺菌劑對(duì)蜜蜂也有較高毒性[6]。為了解不同種類(lèi)殺菌劑對(duì)蜜蜂的毒性及安全性，我們測(cè)定了幾種殺菌劑對(duì)蜜蜂的急性接觸毒性和經(jīng)口毒性，試驗(yàn)方法依據(jù)國(guó)家《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則-蜜蜂急性毒性試驗(yàn)》的要求進(jìn)行，為保護(hù)蜜蜂和安全用藥提供重要參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試蜜蜂及來(lái)源

意大利成年工蜂（Apis melliifera L）；來(lái)源于：北京密云東菜園養(yǎng)蜂場(chǎng)。

1.1.2 供試藥劑

供試藥劑及生產(chǎn)廠(chǎng)家見(jiàn)表1。裝入10 mL小燒杯中，杯內(nèi)浸漬0.4 g脫脂棉，杯口向下倒置于試驗(yàn)籠紗網(wǎng)上，通過(guò)網(wǎng)眼供蜜蜂攝食。試驗(yàn)條件同上。48 h后觀察受試蜜蜂有無(wú)中毒癥狀及死亡數(shù)，記錄死亡蜂數(shù)，用DPS軟件計(jì)算LC50值及95%置信限。

1.2.3 農(nóng)藥對(duì)蜜蜂毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

依據(jù)中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全

表1 供試藥劑

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 蜜蜂急性接觸試驗(yàn)方法

將貯蜂籠內(nèi)的蜜蜂引入500 mL三角瓶?jī)?nèi)，用紗布封口，通入N2氣體將蜜蜂麻醉，麻醉后將蜜蜂置于濾紙上，將配置好的系列濃度藥液用EDP3電動(dòng)移液器分別點(diǎn)滴于蜜蜂前胸背板處，點(diǎn)滴量為1 μL/蜂，待蜂身晾干后轉(zhuǎn)入試驗(yàn)籠中，用脫脂棉浸泡適量蔗糖水供蜜蜂取食。試驗(yàn)在溫度23～27℃，相對(duì)濕度50～70%，微光條件下進(jìn)行。觀察48 h受試蜜蜂有無(wú)中毒癥狀及死亡現(xiàn)象，記錄死亡數(shù)，用DPS軟件計(jì)算LD50值及95%置信限。

1.2.2 蜜蜂急性（經(jīng)口）毒性試驗(yàn)

根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，設(shè)置系列濃度，并設(shè)空白對(duì)照組，每處理10只蜜蜂，對(duì)照組及每一濃度組均設(shè)3個(gè)重復(fù)。將貯蜂籠內(nèi)的蜜蜂引入試驗(yàn)籠中，每個(gè)籠中10只試驗(yàn)用蜂。不同濃度藥液與50%蔗糖水以1:1混勻，評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》，按毒性測(cè)定結(jié)果，將農(nóng)藥對(duì)蜜蜂毒性等級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)分為4個(gè)等級(jí)（見(jiàn)表2）。

表2 農(nóng)藥對(duì)蜜蜂的毒性等級(jí)劃分

2 結(jié)果與分析

2.1 供試殺菌劑對(duì)蜜蜂的接觸毒性

由表3可以看出，11種殺菌劑中，氟硅唑?qū)γ鄯涞慕佑|毒性最高，其LD50值為1.55μg/只，根據(jù)毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)為高毒；其次為丙環(huán)唑和咪鮮胺，LD50值分別為3.80和8.80 μg/只，為中等毒性；丙森鋅和苯醚甲環(huán)唑LD50值分別為25.64和27.36 μg/只，為低毒，其余殺菌劑石硫合劑、甲基硫菌靈、烯酰嗎啉、氟菌唑、武夷菌素和三環(huán)唑，它們的LD50值均大于100μg/只，為低毒。

2.2 供試殺菌劑對(duì)蜜蜂的經(jīng)口毒性

測(cè)定了15種殺菌劑對(duì)意大利蜜蜂的經(jīng)口毒性，結(jié)果表明：丙環(huán)唑和抑霉唑?qū)γ鄯涞慕?jīng)口毒性最高，LC50分別為64.16和91.44 mg/L，根據(jù)農(nóng)藥的蜜蜂的毒性劃分標(biāo)準(zhǔn)，毒性為中毒；其余13種殺菌劑的經(jīng)口LC50均大于200 mg/L，毒性為低毒（表4）。

表3 11種殺菌劑對(duì)蜜蜂急性接觸毒性（48 h）

表4 15種殺菌劑對(duì)蜜蜂急性經(jīng)口毒性(48 h)

3 結(jié)論與討論

接觸法是模擬田間施藥時(shí)藥液與蜜蜂接觸或蜜蜂采蜜時(shí)觸及受農(nóng)藥污染的植株的情況，攝入法則表示農(nóng)田噴藥后，蜜蜂覓食受污染花粉的情況，因此，其結(jié)果可以作為該農(nóng)藥對(duì)蜜蜂安全評(píng)價(jià)的依據(jù)[7]。

本研究測(cè)定的對(duì)蜜蜂中到高毒的殺菌劑中，氟硅唑和丙環(huán)唑?yàn)槿蝾?lèi)脫甲基抑制劑，咪鮮胺和抑霉唑?yàn)檫溥蝾?lèi)脫甲基抑制劑，均屬于甾醇生物合成抑制劑。這一類(lèi)殺菌劑主要抑制麥角甾醇生物合成，破壞真菌細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能，干擾細(xì)胞正常的新陳代謝，導(dǎo)致菌體生長(zhǎng)停滯，繁殖率下降，甚至細(xì)胞死亡[8]。祝小祥等[9]研究認(rèn)為一些三唑類(lèi)殺菌劑對(duì)赤眼蜂具有急性毒性潛力，在防治植物病害時(shí)應(yīng)謹(jǐn)慎使用。遲艷艷等[10]報(bào)道氟硅唑、烯唑醇2種殺菌劑對(duì)家蠶2齡幼蟲(chóng)為中等毒性，具有高風(fēng)險(xiǎn)性；氟環(huán)唑、戊菌唑、丙環(huán)唑、己唑醇、苯醚甲環(huán)唑和戊唑醇6種殺菌劑對(duì)家蠶2齡幼蟲(chóng)為低毒，具有中等風(fēng)險(xiǎn)性?？梢?jiàn)這一類(lèi)殺菌劑對(duì)非靶標(biāo)有益昆蟲(chóng)具有一定的毒性風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)謹(jǐn)慎使用。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，11種殺菌劑對(duì)蜜蜂的接觸毒性，氟硅唑?yàn)楦叨?，丙環(huán)唑和咪鮮胺為中毒，其余藥劑為低毒；15種殺菌劑對(duì)蜜蜂的經(jīng)口毒性，丙環(huán)唑和抑霉唑?yàn)橹卸?，其余藥劑為低毒。因此，?yīng)嚴(yán)格禁止高毒殺菌劑氟硅唑在蜜蜂活動(dòng)區(qū)域使用，慎重選擇中等毒性殺菌劑丙環(huán)唑、咪鮮胺和抑霉唑，盡量選擇對(duì)蜜蜂低毒殺菌劑，以保護(hù)蜜蜂的安全。

[1]王成菊,邱立紅,鄭明奇,等.阿維菌素及其混配制劑對(duì)蜜蜂的安全性評(píng)價(jià)[J].農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào)，2006,25(1):229-231.

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Acute toxicity and safety evaluation of several fungicides to Apis mellifera L.

Jia Biantao1Zou Yafei2Dong Fengshou2Zhang Lisheng2He Weizhi2
(1 College of Agriculture,Shanxi Agricultural University,Taigu Shanxi,030801; 2 The Institute of Plant Protection（IPP）,Chinese Academy of Agricultural Sciences（CAAS）,Beijing,100193)

∶Acute toxicities and safety evaluation of several fungicides to honeybee(Apis mellifera L.)were studied by contact method and oral method.The results showed that among 11 fungicides tested,flusilazole exhibited high contact toxicity,propiconazole and prochloraz exhibited moderate contact toxicities,and propineb and difenoconazole, lime sulphur,thiophanate-methyl,dimethomorph,triflumizole,wuyimycin and tricyclazole exhibited low toxicities. Among 15 fungicides tested,propiconazole and imazalil showed moderate oral toxicities,prochloraz,propineb, difenoconazole,lime sulphur,thiophanate-methyl,dimethomorph,triflumizole,tricyclazole,kasugamycin,mancozeb, procymidone,pyrimethanil and diniconazole exhibited low oral toxicities.Therefore,in order to protect honeybee,we should prohibit flusilazole,carefully use propiconazole,prochloraz and imazalil and try to choose fungicides of low toxicities to honeybee in activity area of honeybee.

∶Fungicides;Apis mellifera;Safety evaluation

S893.3

A

農(nóng)業(yè)部2015年度財(cái)政項(xiàng)目“蜜蜂授粉和綠色防控增產(chǎn)技術(shù)示范”（B3798）

賈變桃（1971-），女，副教授E-mail：jiabtao@foxmail.com

*通訊作者：何偉志（1970-），男，副研究員E-mail：he3255@sina.com.