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一株降解甲醇微生物的篩選及其培養(yǎng)

2015-12-25 00:41:43沈壽國張媚紫方超林葉勁松
安徽農(nóng)學(xué)通報 2015年23期
關(guān)鍵詞:篩選培養(yǎng)

沈壽國++張媚紫++方超林++葉勁松

摘 要:該文以甲醇作為唯一碳源,從甲醇馴化的土壤中分離到一株甲醇降解菌,對其形態(tài)特征及培養(yǎng)條件進(jìn)行了研究。結(jié)果表明,該菌菌落為乳白色,菌體為短桿狀,革蘭氏陰性,其生長最佳條件為:氮源(NH4)2SO4,pH值7.5,溫度30℃,甲醇濃度為1.5%。

關(guān)鍵詞:甲醇降解菌;篩選;培養(yǎng)

中圖分類號 X703 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-7731(2015)23-26-02

1引言

甲醇作為一類重要的有機(jī)化工原料,是制造各種藥品、染料、農(nóng)藥、噴漆等的原料,同時也是一種重要的污染物,廣泛存在于石油化工、有機(jī)合成及塑料等生產(chǎn)廢水中。隨著工業(yè)的迅猛發(fā)展,工廠所排放的廢氣、廢水中的甲醇含量明顯增多,危害著人類健康[1-2]。由于甲醇的生物可降解性很強(qiáng),其生物處理方法有著較為廣闊的應(yīng)用前景,不僅能在治理污染的同時節(jié)約能源,還能在代謝后轉(zhuǎn)化出抗菌素、氨基酸、蛋白質(zhì)等有用的代謝產(chǎn)物,產(chǎn)生多重效益[3-4]。

2 材料與方法

2.1 甲醇降解微生物的篩選

2.1.1 培養(yǎng)基的配制 稱取2g(NH4)2SO4,0.5gMgSO4,0.5gK2HPO4,0.01gCoCl2,0.01gMnSO4,0.01gCuSO4,0.01g FeSO4,溶于1 000mLH2O中,即為實驗基礎(chǔ)培養(yǎng)基。再加入18g瓊脂,于121℃滅菌20min,待其冷卻至50℃,加入15mLCH3OH,搖勻后倒平板,即為實驗篩選培養(yǎng)基。

2.1.2 菌種篩選 將甲醇馴化土壤采取倍倍稀釋法,制取不同濃度菌懸液,取0.1mL不同稀釋倍數(shù)菌懸液分別涂布于篩選培養(yǎng)基上于32℃恒溫培養(yǎng)觀察;對菌落形態(tài)拍照,并對其進(jìn)行革蘭氏染色觀察。將純化菌種接種斜面。

2.2 甲醇降解微生物培養(yǎng)條件優(yōu)化

2.2.1 制備菌體懸浮液 將純化菌種斜面加入10mL無菌水,并用移液槍吹吸均勻,即為該實驗菌懸液。

2.2.2 不同氮源下培養(yǎng) 吸取1mL菌懸液,加入體積為100mL含有以甲醇(1%)為碳源,分別含有0.2%(w/v)硝酸鉀、硫酸銨、尿素、蛋白胨為氮源無菌培養(yǎng)基,于32℃、160r下培養(yǎng)觀察,并拍照記錄。

2.2.3 不同培養(yǎng)溫度下培養(yǎng) 吸取1mL菌懸液,分別加入含有優(yōu)化氮源的100mL無菌液體培養(yǎng)基,優(yōu)化轉(zhuǎn)速下,分別置于22℃、24℃、26℃、28℃、30℃、32℃、34℃溫度下,于160r下培養(yǎng)5d,取培養(yǎng)液在OD600nm測其吸光度。

2.2.4 不同pH下培養(yǎng) 吸取1mL菌懸液,分別加入含有優(yōu)化氮源的100mL無菌液體培養(yǎng)基,將pH分別調(diào)整為5.5、6、0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5,于28℃、160r/min培養(yǎng)5d,取培養(yǎng)液在OD600nm測其吸光度。

2.2.5 不同甲醇濃度條件下培養(yǎng) 吸取1mL菌懸液,分別加入到含有0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%、1.5%、2.0%、3.0%(V/V)甲醇的100mL選擇培養(yǎng)基中,置搖床160r下中培養(yǎng)5d,取培養(yǎng)液測OD600nm。

3 結(jié)果與分析

3.1 菌落的形態(tài)特征 在以甲醇為唯一碳源的培養(yǎng)基上,37℃培養(yǎng)7d,可以觀察到甲醇降解菌的菌落如圖1所示,菌落呈微白色,表面光滑。經(jīng)革蘭氏染色后菌體呈紅色,短桿狀。因此鑒定該菌株為革蘭氏陰性菌。

注:圖A為菌落的形態(tài)特征,圖B為顯微觀察拍照。

3.2 不同氮源對甲醇降解菌生長的影響 氮源是合成菌體蛋白質(zhì)、核酸等含氮物質(zhì)的重要組成成分;由于微生物多樣性,微生物在不同的氮源培養(yǎng)基中生長狀況是有差別的[25]。從圖2可以看出,該菌株以蛋白胨為氮源的生長狀況最好,硫酸銨為氮源的生長狀況次之,在硝酸鉀中不生長。

注:氮源分別為硫酸銨、尿素、蛋白胨、硝酸鉀。

3.3 溫度對甲醇降解菌生長的影響 從圖3可以看出,隨著當(dāng)溫度較低時基本不生長,當(dāng)溫度達(dá)到28℃微生物生長活躍,當(dāng)溫度為30℃時,微生物生長最好;之后隨后隨溫度的升高,微生物生長變慢,該菌最適生長溫度為30℃。

圖5 甲醇含量對菌株生長的影響

4 討論與結(jié)論

多數(shù)甲醇降解菌菌落紅色,屬于甲基桿菌類[5-6],該菌為革蘭氏陰性短桿菌,菌落白色,不屬于甲基桿菌類。該菌對蛋白胨利用最好,有機(jī)氮源通常會降低微生物對有害炭氮源的利用[7-8],因而選擇硫酸銨作為該菌處理甲醇最佳氮源。合適的溫度和pH有利于菌體的生長代謝,過高或過低都會影響菌體的生長,從而影響甲醇降解。甲醇濃度較低時,生長所需能源碳源均不足,生長緩慢,甲醇濃度過高對菌體造成毒害,生長不利。由本次研究可知:該實驗菌株在處理甲醇廢水選擇條件為氮源硫酸銨,溫度30℃、pH7.5,甲醇濃度為1.5%。

參考文獻(xiàn)

[1]宋志文,陳冠雄,馬放,等.微生物固定化處理甲醇廢水的實驗研究[J].微生物學(xué)雜志,2000,20(4):30-31.

[2]左雅慧,蔣德群.一株高效處理甲醇廢水細(xì)菌的研究[J].微生物學(xué)雜志,2002,22(2):58-59.

[3]林伯荃,汪景幫,黨平,等.甲醇細(xì)菌的研究[J].微生物學(xué)通報,1983,10(6):248-251.

[4]朱相遠(yuǎn),劉寶順,董建忠.嗜甲醇酵母的研究[J].微生物學(xué)通報,1986,13(3):110-113.

[5]李寶慶,鹿秀云,李社增,等.甲醇降解菌的篩選、鑒定及其特性研究[J].農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報2007,26(增刊):410-413.

[6]Owen Jenkins,David Byrom,Dorothy Jones.Methylophilus:a New Genus of Methanol-Utilizing Bacteria,Interational Journal of Systematic Bacteriology,1987:446-448.

[7]Melike Balk,Jan Weijma,Alfons JM Stams.Therm otoga lettingaesp.nov.,a novel thermophilic,methanol-degrading bacterium isolated from a thermophilic anaerobic reactor[J].International Journalof of Systematic and Evolutionary M -icrobiology,2002,52:1361-1368.

[8]Wander W Sprenger,Martine C van Belzen,Jorg Rosenberg,etal.Methanom-icrococcus blatticola gen.nov.,sp.nov.,a methanol-and ethylamine-reducing methanogen from the hindgut of the cockroach Perip laneta Americana[J].International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology,2000,50:1989-1999.

(責(zé)編:張宏民)

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