蔣輝祿

摘要：為研究黃曲霉毒素G1對雛鴨肝臟抗氧化能力的影響，將60只1日齡櫻桃谷肉鴨隨機(jī)分為2組，分別為對照日糧（AFG1 0 mg/kg）和AFG1日糧（AFG1 0.1 mg/kg）。采用生化試劑盒檢測肝臟組織中MDA的含量，GSH-Px，SOD及T-AOC的活性。結(jié)果表明，在14、21、28日齡時，AFG1組MDA的含量顯著或極顯著高于對照組（P<0.05或P<0.01）；與對照組相比，在7、14、21和28日齡時，AFG1組雛鴨的肝臟組織中GSH-Px、SOD及T-AOC的活性顯著或極顯著下降（P<0.05或P<0.01）。表明攝食0.1 mg/kg AFG1日糧可引起肝臟抗氧化能力下降。

關(guān)鍵詞：黃曲霉毒素G1；氧化損傷；肝臟；雛鴨

中圖分類號：S858.32 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B 文章編號：1007-273X（2015）10-0034-02

黃曲霉毒素G1（Aflatoxin G1， AFG1）是毒性僅次于黃曲霉毒素B1（Aflatoxin B1， AFB1）的霉菌毒素，主要是由黃曲霉菌、寄生曲霉菌產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物[1，2]。糧食、食品及飼料的真菌毒素污染中，AFG1是最為常見，危害嚴(yán)重的霉菌毒素之一。每年給糧食生產(chǎn)、飼料加工及畜禽養(yǎng)殖行業(yè)帶來巨額經(jīng)濟(jì)損失。研究表明，AFG1具有極強(qiáng)的肝癌毒性，氧化損傷是其毒性的重要機(jī)制，長期攝氏低劑量的AFG1是誘發(fā)肝細(xì)胞癌的重要原因[3-5]。雛鴨作為對黃曲霉毒素較為敏感的家禽之一，攝氏少量AFG1常會引起生產(chǎn)性能下降，料肉比增加，免疫功能下降，肝腎功能受損等[6]。采用1日齡櫻桃谷肉鴨為研究對象，探究不同劑量AFG1對雛鴨肝臟抗氧化能力的影響，旨在為AFG1對肝損傷的機(jī)理的進(jìn)一步研究提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物與日糧

本試驗選用60只1日齡櫻桃谷肉鴨，隨機(jī)分為2組，每組30只，分別飼喂基礎(chǔ)日糧和AFG1Ⅰ（0， 0.1 mg/kg）日糧。飼養(yǎng)管理與常規(guī)育雛一致，自由飲水與采食，試驗期28 d。

1.2 肝臟抗氧化能力的檢測

在 7、14、21和28 日齡時每組隨機(jī)抽取6只雛鴨，經(jīng)頸靜脈放血處死后立即取肝臟置于-20 ℃冰箱保存。隨后勻漿器制備10%的組織勻漿，采用生化試劑盒對肝臟中丙二醛（MDA）谷胱甘肽（GSH）的含量，谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽還原酶（GR）和過氧化氫酶（CAT）活性進(jìn)行測定，所用試劑均購于南京建成生物工程研究所，檢測方法的具體步驟參照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)均經(jīng)SPSS16.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計。用單因素方差分析法分析試驗組與對照組間的差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

從圖1中可知，在14、21、28日齡時，AFG1組雛鴨的肝臟組織中脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA的含量顯著或極顯著高于對照組（P<0.05或P<0.01）；與對照組相比，在7、14、21、和28日齡時，AFG1組雛鴨的肝臟組織中GSH-Px、SOD及T-AOC的活性顯著或極顯著下降。

3 小結(jié)與討論

肝臟作為人畜體內(nèi)最大的消化腺，重要的解毒器官同時多種有毒有害物質(zhì)的靶器官。其抗氧化能力的強(qiáng)弱常作為判斷肝臟氧化損傷程度及氧自由基清除能力。作為AFG1的主要靶器官，AFG1在肝內(nèi)代謝可產(chǎn)生大量的生物活性氧和自由基等[7]。MDA為一種重要的脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物，GSH-Px具有催化GSH參與過氧化反應(yīng)，清除在細(xì)胞呼吸代謝過程中產(chǎn)生的過氧化物和羥自由基，從而減輕細(xì)胞膜多不飽和脂肪酸的過氧化作用[8]。SOD是機(jī)體首要的氧自由基清除超氧化物酶，T-AOC是反映機(jī)體總抗氧化能力的重要指標(biāo)。本試驗結(jié)果顯示，在14、21、28日齡時AFG1組雛鴨肝臟MDA含量顯著升高，提示肝細(xì)胞脂質(zhì)過氧化破壞增強(qiáng)[9]。GSH-Px、SOD和T-AOC能力顯著降低，該研究結(jié)果與Baertschi等[10]人用AFG1處理人體肝細(xì)胞的研究報道相一致。GSH-Px，SOD及總抗氧化能力的下降可能與AFG1引起動物體內(nèi)大量氧自由基，增加的氧自由基過多的消耗體內(nèi)抗氧化酶；抑制體內(nèi)編碼酶蛋白基因的轉(zhuǎn)錄與翻譯有關(guān)[11]。

參考文獻(xiàn)：

[1] 李書國， 陳 輝， 李雪梅， 等. 糧油食品中黃曲霉毒素檢測方法綜述 [J]. 糧油食品科技， 2009， 17（2）： 62-65.

[2] GOLDBLATT L. Aflatoxin： scientific background， control， and implications [M]. Nederland：Elsevier， 2012.

[3] CLIFFORD J I， REES K， STEVENS M E M. The effect of the aflatoxins B 1， G 1 and G 2 on protein and nucleic acid synthesis in rat liver [J]. Biochem J， 1967， 103，258-261.

[4] SHEN H， LIU J， WANG Y， et al. Aflatoxin G 1-induced oxidative stress causes DNA damage and triggers apoptosis through MAPK signaling pathway in A549 cells [J]. Food Chem Toxicol， 2013， 62，661-669.

[5] LIJINSKY W， BUTLER W H. Purification and Toxicity of Aflatoxin Gl [J]. Exp Biol Med， 1966， 123（1）： 151-154.

[6] 蔡雙雙， 楊雪麗， 谷長勤，等. 雛鴨黃曲霉毒素中毒與曲霉菌病并發(fā)病例的病理學(xué)診斷[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2007， 35（34）： 1107-1107.

[7] YU J， CHANG P-K， EHRLICH K C， et al. Characterization of the Critical Amino Acids of anAspergillus parasiticus Cytochrome P-450 Monooxygenase Encoded by ordA That Is Involved in the Biosynthesis of Aflatoxins B1， G1， B2， and G2 [J]. Appl Environ Microbiol， 1998， 64（12）： 4834-4841.

[8]馬 森. 谷胱甘肽過氧化物酶和谷胱甘肽轉(zhuǎn)硫酶研究進(jìn)展[J]. 動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展， 2008， 29（10）： 53-56.

[9] GAWE？覵 S， WARDAS M， NIEDWOROK E， et al. [Malondialdehyde （MDA） as a lipid peroxidation marker] [J]. Wiadomosci lekarskie （Warsaw， Poland： 1960）， 2003， 57（9-10）： 453-455.

[10] BAERTSCHI S W， RANEY K D， SHIMADA T， et al. Comparison of rates of enzymic oxidation of aflatoxin B1， aflatoxin G1， and sterigmatocystin and activities of the epoxides in forming guanyl-N7 adducts and inducing different genetic responses [J]. Chem Res Toxicol， 1989， 2（2）： 114-122.

[11] BERNABUCCI U， COLAVECCHIA L， DANIELI P P， et al. Aflatoxin B 1 and fumonisin B 1 affect the oxidative status of bovine peripheral blood mononuclear cells [J]. Toxicol In Vitro， 2011， 25（3）： 684-691.