羅超　李東明　玉晉武　李旺　林彩娟　俸詩瀚　陳少科　鄭陳光

[摘 要] 目的：了解南寧市新生兒α地貧篩查情況。方法：使用全自動(dòng)毛細(xì)管電泳儀對(duì)18005例新生兒血樣進(jìn)行篩查，篩查出Hb Barts>0者召回進(jìn)行基因確診。結(jié)果：檢出Hb Barts>0 共1932例，檢出率為10.73%；其中靜止型（0.2%～0.9%）608例，標(biāo)準(zhǔn)型（1%～6%）1259例，HbH?。?%～30%）53例。共召回647例陽性患兒進(jìn)行基因檢測(cè)，確診622例，確診率96.14%。結(jié)論：通過新生兒足跟血可以準(zhǔn)確快速地篩查出α地貧，為臨床提供參考。

[關(guān)鍵詞] 新生兒疾病篩查；α地中海貧血；全自動(dòng)毛細(xì)管電泳儀

中圖分類號(hào)：R729 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：2095-5200（2015）02-029-02

地中海貧血（簡(jiǎn)稱地貧）是廣西地區(qū)常見遺傳性疾病[1]。α地貧是由于α珠蛋白鏈缺失或合成不足導(dǎo)致的一種溶血性貧血，臨床上按照癥狀輕重不同分為：靜止型、標(biāo)準(zhǔn)型、HbH病和HbBarts水腫胎[2]。新生兒α地貧篩查意義在于及時(shí)發(fā)現(xiàn)HbH病地貧患兒，早發(fā)現(xiàn)早治療，提高地貧患兒生活質(zhì)量，同時(shí)也為下次妊娠提供資料。本研究對(duì)廣西南寧18005例新生兒α地貧篩查結(jié)果進(jìn)行分析，為臨床提供參考。

1 對(duì)象和方法

1.1 對(duì)象

2013年1月1日至2014年5月31日在廣西區(qū)婦幼保健院、婦產(chǎn)醫(yī)院、兒童醫(yī)院出生及就診的新生兒疾病篩查血樣[3]18005例。血樣采集自出生72h后，經(jīng)充分哺乳6次以上新生兒的足跟血。每個(gè)新生兒采集3個(gè)血斑，滴于S&S 903濾紙上，每個(gè)血斑直徑需>8 mm，室溫下自然晾干后，24h內(nèi)送至廣西新生兒疾病篩查實(shí)驗(yàn)室。

1.2 篩查方法與判斷標(biāo)準(zhǔn)

篩查所用儀器為法國(guó)Sebia Capillarys 2 neonat fast全自動(dòng)毛細(xì)管電泳儀，所用試劑均為該公司配套的新生兒地中海貧血檢驗(yàn)試劑盒，儀器維護(hù)及實(shí)驗(yàn)操作均嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行。

以毛細(xì)管電泳法Hb Barts的含量將α地貧分為正常（無Hb Barts帶），靜止型（0.2%～0.9%），標(biāo)準(zhǔn)型（1%～6%），HbH?。?%～30%），Barts水腫胎（>60%）。對(duì)于非正常的電泳結(jié)果的新生兒召回進(jìn)行基因確診。

1.3 確診方法與判斷標(biāo)準(zhǔn)

確診采用gap-PCR基因診斷技術(shù)，基因診斷試劑盒為深圳益生堂生物公司提供，實(shí)驗(yàn)操作、質(zhì)量控制及結(jié)果判斷均嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行。對(duì)3種常見的缺失型α地貧血基因 （ --SEA/-α3.7和-α4.2） 和HbCS（CD142TAA→CAA）、HbQS（125CTG→CCG）及HbWS（CD122CAA→CAG）進(jìn)行突變檢測(cè)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采用x±s表示。

2 結(jié)果

18005例地貧篩查樣本中，檢出Hb Barts>0 共1932例，檢出率為10.73%；其中靜止型（0.2%～0.9%）608例，標(biāo)準(zhǔn)型（1%～6%）1259例，HbH?。?%～30%）53例，未發(fā)現(xiàn)Barts水腫胎（>60%）患兒。共召回647例陽性患兒進(jìn)行基因檢測(cè)，確診622例，確診率96.14%。其中靜止型召回205例，確診193例，確診率94.15%；標(biāo)準(zhǔn)型召回423例，確診412例，確診率97.40%；HbH病召回18例，確診17例，確診率94.44%（見表1）。根據(jù)基因型對(duì)應(yīng)毛細(xì)管電泳篩查數(shù)據(jù)，得出靜止型、標(biāo)準(zhǔn)型、HbH病HbBarts平均含量分別為0.55±0.35、2.4±0.89、12.48±4.15。

3 討論

目前對(duì)于地中海貧血確診的主要方法是PCR基因診斷[4]，該技術(shù)由于其費(fèi)用較高，操作方法繁瑣等原因不適合用于常規(guī)的新生兒疾病篩查，因此，毛細(xì)管電泳技術(shù)很好彌補(bǔ)了這一缺陷。目前常用的新生兒地貧篩查樣本是臍帶血[5-6]，很少見到使用足跟血篩查的報(bào)道，因此本研究可以為毛細(xì)管電泳與基因檢測(cè)的符合率方面提供參考。

18005例新生兒血樣中，α地貧初篩陽性1932例，檢出率為10.73%，高于北海、柳州、玉林等[7-9]地區(qū)的新生兒血樣篩查結(jié)果。基因檢測(cè)與毛細(xì)管電泳篩查的α地貧符合率為96.14%，高于廣州、中山等[10-11]地區(qū)的新生兒臍血地貧篩查符合率，這可能與樣本類型、儀器情況等有關(guān)。有研究指出新生兒α地貧符合率較成人高[12]，這是由于Hb Barts只特異的存在于新生兒時(shí)期，隨著年齡的增大該峰自然消失，因此可以說Hb Barts是新生兒α地貧篩查的金標(biāo)準(zhǔn)。本研究顯示南寧市α地貧患兒主要以標(biāo)準(zhǔn)型為主，未檢測(cè)到重型α地貧患兒，可以反映出南寧市產(chǎn)前地貧篩查的成效。Hb Barts水平與α-珠蛋白基因缺失數(shù)目成正相關(guān)，Hb Barts水平越高α地貧的情況越嚴(yán)重。然而本研究中還是存在結(jié)果不符合的情況，因此需要根據(jù)臨床表型重新計(jì)算Hb Barts水平，經(jīng)計(jì)算靜止型、標(biāo)準(zhǔn)型、HbH病Hb Barts水平分別為：0.2%～0.9%、1.51%～3.29%、8.33%～16.63%。這個(gè)切值與之前新生兒臍血篩查地貧的研究結(jié)果[13-14]稍微有些出入，這可能與樣本類型、實(shí)驗(yàn)人群、篩查方法等有關(guān)[15]，因此每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)建立自己的α地貧篩查切值。

參 考 文 獻(xiàn)

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