何 芳,周望平

（湖南省畜牧獸醫(yī)研究所,湖南長沙410131）

豬瘟是當前生豬的一類重大疫病，從2008年開始列為動物疫病強制免疫項目，但仍對我國生豬養(yǎng)殖業(yè)構成很大的威脅。據(jù)相關報道及監(jiān)測數(shù)據(jù)資料統(tǒng)計，我國的病死豬中有30%與豬瘟有關。近幾十年，豬瘟的流行情況及臨床、病理發(fā)病特點等方面發(fā)生了很大變化，以非典型性型豬瘟為主，臨床表現(xiàn)為母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎及新生仔豬死亡，且經(jīng)常發(fā)生于免疫豬群；很多豬場即使將疫苗接種劑量加大數(shù)倍，更換不同的免疫程序，仍不能完全控制疫情，這給豬瘟的診斷和防制帶來了新的困惑。筆者從2014年起對湖南省部分規(guī)模生豬養(yǎng)殖場開展豬瘟病原及抗體監(jiān)測，并對監(jiān)測情況進行綜合分析，以期探尋豬瘟的發(fā)生動態(tài)和流行規(guī)律，為指導和制定豬瘟防控政策和措施提供參考。

1 材料與方法

1.1血清與組織樣品

樣品采集時間為2014年5～12月，血清共計1 613份，其中經(jīng)產(chǎn)母豬血清樣品899份，后備母豬422份，公豬292份。組織樣品85份。采集于我省部分規(guī)模化豬場。

1.2采樣方法

樣品采用隨機采樣方法，分別采集公豬、經(jīng)產(chǎn)母豬、后備母豬的血液，分離血清，于湖南省畜牧獸醫(yī)研究所獸醫(yī)獸藥實驗室檢測。根據(jù)豬場的生產(chǎn)實際，公豬全采，母豬臨產(chǎn)前15天不采血。

1.3檢測試劑盒

豬瘟抗體的測定采用IDEXX的ELISA試劑盒，批號為：99-43220D191/C945。

1.4 ELISA操作方法

ELISA操作方法以及結果判定參照試劑盒說明書進行，試驗成立條件：只有陰性對照的平均OD450大于0.50，陽性對照的陰斷率大于50%，該檢測結果才能有效。若試驗不成立，有可能是實驗操作失誤造成，應重讀說明書，再操作一次。被檢樣本的阻斷率大于或等于40%，該樣本就可以判定為陽性（有CSFV抗體存在）；被檢樣本的阻斷率小于或等于30%，該樣本就可以判定為陰性（無抗CSFV抗體存在）；被檢樣本的阻斷率在30%～40%之間，就應在數(shù)日后再對該動物進行重測；重測結果仍為可疑，就應用血清中和實驗方法鑒定。

1.5病原檢測方法

豬瘟病原檢測采取兩步法RT-PCR技術，引物擴增片段長度508bp，上游引物 CSFVF:5'-GCTCCTGGTTGGTAACCTCGG-3'， 位 于 基 因組的 5 076～5 096位；下 游引物 CSFVR:5'-TGATGCTGTCACACAGGTGAA-3'，位于基因組的5 584～5 564位。疫苗作為陽性對照能擴增出1條約508 bp的特異性條帶，而陰性對照是空白，CSFV病料若也擴增出約508 bp的特異性條帶，則判定為結果陽性；空白或是其他長度的條帶，則為陰性。

2 檢測結果

2.1豬瘟病原的檢測結果

共對我省21個規(guī)模豬場采集的85份病料進行了豬瘟的病原檢測，其中6個豬場共9份病料中豬瘟核酸陽性（RT-PCR方法），陽性場中5個豬場為中小型豬場，1個為種豬場。豬場的豬瘟陽性檢出率為28.6%，病料的豬瘟陽性檢出率為10.6%。

2.2豬瘟抗體監(jiān)測結果

共對我省9個規(guī)模豬場采集的1 613份血清進行了豬瘟的抗體檢測，結果顯示經(jīng)產(chǎn)母豬豬瘟抗體陽性率82%，合格率64%；后備母豬豬瘟抗體陽性率80%，合格率60%；公豬豬瘟抗體陽性率93%，合格率 86%（ 表 1）。

表1 種豬群豬瘟抗體檢測結果

3 結果分析

3.1從豬瘟的病原的檢測結果來看：2014年21個規(guī)模豬場豬瘟核酸陽性豬場的檢出率為28.6%（ 6/21），病料的豬瘟檢出率為 10.6%（ 9/85），較 2013年11個規(guī)模豬場豬瘟核酸陽性豬場的檢出率為36%，病料的豬瘟檢出率為23%，2014年規(guī)模豬場的豬瘟發(fā)病數(shù)有了一定的下降。

3.2從豬瘟抗體水平監(jiān)測來看：自全面實施豬瘟強制免疫以來，我省規(guī)模豬場的豬瘟抗體整體水平有了很大的提升。目前，我省規(guī)模豬場的豬瘟抗體水平維持在：經(jīng)產(chǎn)母豬群的豬瘟抗體陽性率在67%以上，平均陽性率在82%，合格率在50%以上，平均合格率在64%；后備母豬群的豬瘟抗體陽性率在42%以上，平均陽性率在80%，合格率在19%以上，平均合格率在60%；公豬群的豬瘟抗體陽性率在57%以上，平均陽性率在93%，合格率在40%以上，平均合格率在86%。

4 討論

4.1 豬瘟免疫效果效果不佳的原因

我省規(guī)模豬場普遍存在豬瘟抗體水平偏低，整齊度不好的現(xiàn)象。引起豬瘟免疫效果不好的問題，是一個綜合性的問題，要根據(jù)各個豬場的實際進行分析，主要問題存在于：一是豬群自身的健康狀況不佳，對免疫應答的反應不強，這主要體現(xiàn)在一些經(jīng)產(chǎn)老母豬或自身感染病毒影響免疫應答的豬，這部分豬最好采用豬瘟監(jiān)測及逐步淘汰的方法來改善整個生產(chǎn)母豬群健康狀況。二是免疫的時機不對，主要是針對仔豬免疫后效果不佳，這個問題要借助豬瘟抗體水平的系統(tǒng)全面的檢測和跟蹤來確定各個豬場的免疫時間，減少母源抗體對仔豬免疫的干擾，制訂豬場個性化的免疫計劃。三是免疫操作不當，這個問題在管理不規(guī)范的豬場時有發(fā)生，所以要針對關鍵環(huán)節(jié)進行關鍵管理，減少人為因素帶來的影響。四是豬場的過度藥物保健，部分藥物對免疫應答的影響已經(jīng)被業(yè)界證實，過度或不適宜的藥物保健會對免疫應答產(chǎn)生負面影響，在注射疫苗前后，要對保健藥物進行選擇或不用藥。

4.2 提高預防意識

豬瘟的發(fā)生現(xiàn)主要以散發(fā)的形式存在，且多發(fā)生管理不規(guī)范、衛(wèi)生條件較差的飼養(yǎng)條件下，這與養(yǎng)殖戶對豬瘟的認識、生物安全意識等有很大的關系，發(fā)病的豬場有很大一部分都忽視疫苗的作用，采取不打苗或打次苗。所以，對于這種現(xiàn)象，應該是提高養(yǎng)殖戶對疾病的認識，加強衛(wèi)生和生物安全意識。