張勇 王子兵 趙玲娣 李威 付曉敏 王黎 高全立

(鄭州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院 生物治療科 河南 鄭州 450008)

惡性黑色素瘤是來源于黑色素細胞的惡性腫瘤，多發(fā)生于皮膚，惡性程度高，易發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移，預(yù)后差，其中肝轉(zhuǎn)移患者約占20%，生存期僅有4 個月，1年生存率為10%［1－2］。而全身治療包括化療、細胞因子治療效果不佳，有效率僅15%［3］。因此探索黑色素瘤的治療方案，提高患者的生活質(zhì)量、延長生存期具有重要意義。本研究通過回顧性分析，探討CIK 治療黑色素瘤肝轉(zhuǎn)移的臨床療效，以提供臨床依據(jù)。

1 對象與方法

1.1 研究對象 2009年6月至2011年10月在河南省腫瘤醫(yī)院生物治療科治療的10 例黑色素瘤患者。男6 例，女4 例;年齡40 ～64 歲，中位年齡51 歲。原發(fā)腫瘤部位:直腸3 例，胃1 例，頭頸部3 例;指端2例，肘部1 例。CIK 細胞治療1 ～8 周期，中位數(shù)為5周期;中位手術(shù)至肝轉(zhuǎn)移時間為12.5 個月。

納入標(biāo)準(zhǔn)為:①經(jīng)河南省腫瘤醫(yī)院病理證實黑色素瘤;②均經(jīng)過手術(shù)切除，術(shù)后復(fù)發(fā)出現(xiàn)肝臟轉(zhuǎn)移;③CIK細胞治療前具有完整臨床資料進行臨床分期;④CIK細胞治療結(jié)束后進行療效評價;⑤接受CIK 細胞治療聯(lián)合細胞因子治療;⑥患者或家屬簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):①外院病理診斷為黑色素瘤未經(jīng)河南省腫瘤醫(yī)院病理科會診者;②CIK 治療前無肝臟轉(zhuǎn)移者;③CIK 治療前臨床資料不全者;④CIK 治療結(jié)束后無療效評價者;⑤治療方案為CIK 細胞聯(lián)合化療或單獨化療者。

1.2 治療方案及療效評價 患者無治療禁忌，簽署知情同意書后，抽取外周血50 ml，分離出單個核細胞(MNC)，置于含γ－干擾素、白細胞介素－2(IL－2)、抗－CD3 單克隆抗體的無血清培養(yǎng)基中，37℃、5%二氧化碳條件下培養(yǎng)12 ～14 d 后收集細胞進行回輸。回輸后給予IL－2 以及胸腺肽治療5 d(IL－2 200 萬U，靜脈點滴，1 次/d，d1－5;胸腺肽(基泰)1.6 mg，皮下注射，d1和d4)?；剌擟IK 細胞前不給予特殊處理;第1 周期治療結(jié)束后采集第2 周期血進行分離和培養(yǎng)，根據(jù)CIK 細胞培養(yǎng)時間不同15 ～20 d 為1 周期。

治療后每4 周期按照歐美國家腫瘤研究所實體瘤的療效評價標(biāo)準(zhǔn)1.1 版［7］進行療效評價，分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、疾病穩(wěn)定(SD)和疾病進展(PD)。疾病進展時間(TTP)是指從CIK 細胞治療開始至PD 之間的時間間隔。總體生存期(OS)是指從CIK 細胞治療開始至患者死亡之間的時間間隔。客觀有效率(ORR)=(CR +PR)/(CR +PR +SD +PD)×100%，疾病控制率(DCR)=(CR +PR +SD)/(CR +PR+SD+PD)×100%。治療結(jié)束后每3 個月進行隨訪。不良反應(yīng)評價按照歐美國家腫瘤研究所藥物毒副作用判定標(biāo)準(zhǔn)(即NCI－CTC )3.0 版進行。

2 結(jié)果

2.1 近期療效 10 例患者中，無CR 和PR 患者，SD患者8 例，DCR 為80%(8/10)。全組患者中位TTP為3 個月(1 ～11 個月)，SD 患者中位TTP 為3.5 個月(2 ～11 個月)。全組患者TTP 曲線見圖1。

2.2 生存期 中位隨訪時間為4.5 個月(1 ～13 個月)。截止至2012年1月，6 例患者死亡，4 例患者帶瘤生存，其中2 例患者疾病穩(wěn)定，患者中位生存時間為4.5 個月(1 ～13 個月)。患者生存曲線見圖2。

2.3 不良反應(yīng) CIK 細胞治療過程中主要的不良反應(yīng)為發(fā)熱、惡心及食欲下降，均為Ⅰ～Ⅱ度，不需特殊處理。其中發(fā)熱的發(fā)生率為30%(3/10)，惡心及食欲下降的發(fā)生率為20%(2/10)。

圖1 患者TTP 曲線

圖2 患者生存曲線

3 討論

黑色素瘤惡性程度高，常規(guī)放化療療效不佳，嘗試抗腫瘤免疫的生物治療模式進行治療。既往的生物治療包括腫瘤疫苗、白細胞介素、LAK 細胞、干擾素等，均因抗原性差或特異性弱，不能有效誘導(dǎo)或激活宿主腫瘤免疫。CIK 細胞是體外擴增出的以CD3+CD56+、CD3+CD8+為主的異質(zhì)性細胞群，該細胞群是從外周血、骨髓或臍血中分離出的單個核細胞，在多種細胞因子存在的條件下，經(jīng)過一定時間培養(yǎng)而獲得的一種免疫活性細胞，能分泌多種細胞因子，具有強大的腫瘤殺傷活性，研究已表明CIK 細胞對多種腫瘤細胞具有殺傷作用［4－5］。IL－2 是活化T 淋巴細胞或NK 細胞產(chǎn)生的細胞因子，可誘導(dǎo)淋巴因子激活的殺傷細胞和CIK 細胞的增殖，增強其殺傷活性。IL－2 配合免疫治療已成為常規(guī)治療，本研究應(yīng)用IL－2 200 萬U，1 次/d，d1－5靜脈點滴增強CIK 細胞活性，以確保治療的療效。

本研究中10 例術(shù)后復(fù)發(fā)出現(xiàn)肝轉(zhuǎn)移的黑色素瘤患者，采用CIK 細胞為主的生物治療，其中8 例患者獲得SD，DCR 為80%，高于國內(nèi)報道22 例肝轉(zhuǎn)移患者生物化療DCR42.1%［6］，考慮此種差異主要是因為病例數(shù)少所致。治療過程中無嚴(yán)重的、不可耐受的不良反應(yīng)發(fā)生，說明CIK 細胞治療是安全的，少數(shù)患者出現(xiàn)低熱、食欲下降考慮與回輸?shù)腃IK 細胞中含有人血白蛋白和IL－2，或者CIK 細胞回輸后大量細胞因子釋放作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)導(dǎo)致體溫調(diào)定點上調(diào)所致。

本研究中10 例患者中位TTP 為3 個月，中位OS為4.5 個月，與文獻報道相一致［1］。10 例患者中除1例僅存在肝臟轉(zhuǎn)移外，其余9 例合并多處肝外轉(zhuǎn)移，可能是免疫治療療效不佳的原因，也可用來解釋為何10例患者中無CR 和PR 病例，但有延遲OS 的趨勢。

總之，CIK 細胞治療具有肝轉(zhuǎn)移的黑色素瘤患者，不良反應(yīng)小，耐受性好，可明顯改善患者的疾病控制率，OS 有延長趨勢，是一種具有良好前景的治療模式。

［1］Rass K，Diefenbacher M，Tilgen W.Experimental treatment of malignant melanoma and its rationale［J］.Hautarzt，2008，59(6):475－483.

［2］Bedikian A Y，Legha S S，Mavligit G，et al.Treatment of uveal melanoma metastatic to the liver:a review of the M.D.Anderson Cancer Center experience and prognostic factors［J］.Cancer，1997，6(9):1665－1670.

［3］Rastrelli M，Tropea S，Pigozzo J，et al.Melanoma m1:Diagnosis and Therapy［J］.In Vivo，2014，28(3):273－285.

［4］Yu X，Zhao H，Liu L，et al.A randomized phase II study of autologous cytokine－induced killer cells in treatment of hepatocelluar carcinoma［J］.J Clin Immunol，2014，34(2):194－203.

［5］Liu L，Zhang W，Qi X，et al.Randomized study of autologous cytokineinduced killer cell immunotherapy in metastatic renal carcinoma［J］.Clin Cancer Res，2012，18(6):1751－1759.

［6］崔傳亮，遲志宏，袁香慶，等.淋巴細胞刪除性化療聯(lián)合自體CIK細胞回輸治療進展期黑色素瘤肝轉(zhuǎn)移Ⅱ期臨床研究［C］.中國臨床腫瘤學(xué)教育專輯，2007:534－540.