李欽潘　王偉　韓永升　汪煒民　毛玉強(qiáng)　郭鐵　韓峰群

（安徽中醫(yī)藥大學(xué)神經(jīng)病學(xué)研究所附屬醫(yī)院，安徽合肥230061）

·研究報(bào)告·

“醒腦開(kāi)竅”針刺法對(duì)腦缺血再灌注大鼠模型早期運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)及SYN表達(dá)影響的研究*

李欽潘王偉韓永升△汪煒民毛玉強(qiáng)郭鐵韓峰群

（安徽中醫(yī)藥大學(xué)神經(jīng)病學(xué)研究所附屬醫(yī)院，安徽合肥230061）

目的觀(guān)察“醒腦開(kāi)竅”針刺法對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠模型早期運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)和腦內(nèi)突觸囊泡蛋白（SYN）表達(dá)的影響。方法健康成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、電針組和電針對(duì)照組，每組40只。采用線(xiàn)栓法制作大鼠大腦中動(dòng)脈缺血再灌注模型。電針組和電針對(duì)照組針刺雙側(cè)內(nèi)關(guān)、水溝、三陰交、百會(huì)，行電針治療30 min。首次針刺在動(dòng)物造模成功后24 h內(nèi)進(jìn)行，其后每日上午針刺1次，每7日為1療程（針刺6 d，休息1 d）。假手術(shù)組、模型組常規(guī)飼養(yǎng)于籠內(nèi)，不進(jìn)行任何干預(yù)治療。各組大鼠在7、14 d兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)亞組隨機(jī)取20只進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)估，然后隨機(jī)各取10只進(jìn)行腦梗死體積的比較和免疫組化SP法檢測(cè)SYN的表達(dá)。結(jié)果電針對(duì)照組和假手術(shù)組大鼠無(wú)神經(jīng)功能缺損癥狀，7、14 d時(shí)電針組大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)明顯優(yōu)于模型組。TTC法染色后電針對(duì)照組和假手術(shù)組未見(jiàn)腦梗死灶，電針組腦梗死體積明顯小于模型組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。免疫組化SP法檢測(cè)電針對(duì)照組和假手術(shù)組可見(jiàn)少量SYN的表達(dá)，模型組大鼠腦梗死后兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)腦缺血周?chē)霈F(xiàn)SYN表達(dá)增多，與假手術(shù)組比較均有極顯著差異（P＜0.01），電針組SYN表達(dá)在兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)較模型組增加更明顯（P＜0.05）。結(jié)論“醒腦開(kāi)竅”針刺法能促進(jìn)大鼠局灶性腦梗死后的神經(jīng)運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)，其機(jī)制可能與促進(jìn)腦局灶性缺血再灌注大鼠腦內(nèi)SYN的表達(dá)，提高神經(jīng)可塑性有關(guān)。

“醒腦開(kāi)竅”針刺法腦缺血再灌注運(yùn)動(dòng)功能SYN神經(jīng)可塑性

缺血性腦血管病由于其高發(fā)病率、患病率、致殘率、復(fù)發(fā)率和死亡率，已經(jīng)成為威脅人類(lèi)健康的重大疾病［1］。因此進(jìn)一步加大防治力度，預(yù)防腦血管病的并發(fā)癥，改善腦血管病的預(yù)后，提高腦血管病的療效已成為當(dāng)前一項(xiàng)刻不容緩的重務(wù)。目前關(guān)于缺血性心血管?。↖CVD）的治療僅有t-PA具有循證醫(yī)學(xué)的證據(jù)，而且迄今為止僅有3%～5%的急性缺血性腦卒中患者得到t-PA的治療［2］。在溶栓治療方面，也使用神經(jīng)保護(hù)劑來(lái)保護(hù)腦組織免受或減輕再灌注損傷，但尚無(wú)一種神經(jīng)元保護(hù)藥物讓臨床ICVD患者從中獲益［3］。而研究證實(shí)針刺在ICVD的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)獨(dú)特［4］，已經(jīng)成為中風(fēng)的常規(guī)治療方法［5］。本研究主要通過(guò)針刺干預(yù)腦缺血再灌注大鼠模型，從神經(jīng)可塑性探討大鼠運(yùn)動(dòng)功能的恢復(fù)，為針刺治療缺血性腦血管病提供新的理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1動(dòng)物分組選擇18月齡，雄性老年，體質(zhì)量250～300 g的SD大鼠160只（購(gòu)自合肥白湖博源實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁殖中心），飼養(yǎng)于安徽中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。喂養(yǎng)鼠用清潔級(jí)顆粒飼料，動(dòng)物自由取水，視墊料的清潔度更換墊料。飼料、墊料均購(gòu)自于合肥白湖博源實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁殖中心，飼養(yǎng)環(huán)境溫度24～28℃，相對(duì)濕度45%～65%，光照12 h，通風(fēng)良好。動(dòng)物隨機(jī)分為假手術(shù)組（只做血管分離）、模型組、電針組、電針對(duì)照組，每組40只。根據(jù)治療天數(shù)7 d、14 d，隨機(jī)又分為2個(gè)亞組，每亞組各20只。

1.2儀器與試劑G6805電針儀（蘇州醫(yī)療用品廠(chǎng)有限公司）；TB-71SS生物組織自動(dòng)包埋機(jī)（湖北孝感市泰維電子設(shè)備有限公司）；2135切片機(jī)（德國(guó)Leica）；HPX-9052數(shù)顯電熱培養(yǎng)箱（上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備）；DP70數(shù)碼圖像裝置（日本奧林巴斯）；捷達(dá)JD801圖像分析系統(tǒng)（江蘇捷達(dá)科技有限公司）；Synaptophysin Polyclonal Antibody（批號(hào)17785-1-AP，美國(guó)GBI公司）；照相機(jī)（日本尼康）；PBS（北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司）；2，3，5-氯化三苯基四氯唑（TTC）（Sigma公司）

1.3模型制備在室溫22℃條件下，SD大鼠稱(chēng)質(zhì)量后，參考Zea Longa方法［6］，制備急性缺血性腦血管病動(dòng)物模型。電針對(duì)照組不進(jìn)行任何手術(shù)處理，假手術(shù)組只分離動(dòng)脈，不結(jié)扎、插線(xiàn)。大鼠蘇醒后參照Z(yǔ)ea Longa［6］方法評(píng)分：0分為無(wú)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀；1分為不能完全伸展對(duì)側(cè)前爪；2分為爬行時(shí)轉(zhuǎn)圈；3分為向?qū)?cè)傾倒；4分為不能自行行走，意識(shí)喪失。達(dá)到1～3分為造模成功。因本實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ统晒β实?，?dòng)物死亡率又高，采用差額補(bǔ)充的方法以保證每組的實(shí)驗(yàn)例數(shù)。

1.4干預(yù)方法電針組：造模成功后用自制鼠夾固定，不麻醉。根據(jù)華興邦等［7］制定的大鼠針灸穴位圖譜，主穴雙側(cè)內(nèi)關(guān)、水溝、雙側(cè)三陰交、百會(huì)。采用蘇州生產(chǎn)的華佗牌毫針，規(guī)格為直徑0.2 mm，針身0.5寸。選用“醒腦開(kāi)竅”針刺法進(jìn)行針刺：先直刺雙側(cè)內(nèi)關(guān)1 mm至筋間，用捻轉(zhuǎn)提插結(jié)合的瀉法，持續(xù)1 min留針30min；繼刺水溝，在鼻中隔下部向上斜刺水溝1mm，施雀啄法強(qiáng)刺激1 min，其次刺三陰交，直刺5 mm，采用提插補(bǔ)法刺激1 min；最后向前或向后斜刺百會(huì)穴2 mm，并采用平補(bǔ)平瀉的捻轉(zhuǎn)手法，轉(zhuǎn)角度180°左右，施手法1 min，留針30 min，留針期間將內(nèi)關(guān)、三陰交穴位針刺針柄分別連接至G6805電針儀，施以疏密波，頻率2/100 Hz，電壓2～4 V，強(qiáng)度逐漸加大到模型鼠針刺部位輕微抖動(dòng)為度。首次針刺在造模成功后24 h內(nèi)進(jìn)行，其后每天上午針刺1次，每7日為1療程（針刺6 d，休息1 d）。電針對(duì)照組：不進(jìn)行任何手術(shù)，抓取、固定方法、針刺穴位、方法、頻率、電針刺激參數(shù)等同電針組。假手術(shù)組和模型組：常規(guī)飼養(yǎng)于籠內(nèi)，不進(jìn)行任何干預(yù)治療。

1.5標(biāo)本采集各組大鼠分別于7 d、14 d，兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)各亞組隨機(jī)取10只。用10%水合氯醛腹腔內(nèi)注射麻醉后固定于手術(shù)臺(tái)，剪開(kāi)胸腔，暴露心臟，用9號(hào)針頭插入左心室，待右心耳膨起剪開(kāi)右心耳讓血液流出，灌注4℃生理鹽水，至大鼠口中流出無(wú)色液體時(shí)開(kāi)始用4%的多聚甲醛灌注固定，灌注過(guò)程中會(huì)發(fā)現(xiàn)甲醛滴速由快變慢，大概灌注30 min左右時(shí)大鼠身體及內(nèi)臟基本僵硬，然后立即剖顱取出完整大腦，取出的腦組織放置于冰的生理鹽水中洗去殘余的血水（以減少殘余血水對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響），然后放置于4%的多聚甲醛中保存（6～24 h）備用，行免疫組化檢測(cè)。每個(gè)亞組剩下的10只剖顱取腦后，從視交叉處切開(kāi)，冠狀切取2 mm包括梗死灶區(qū)域和左右半球的腦組織，然后放置于冰箱中冷凍15 min左右，基本變硬后切片行氯化三苯基四氯唑（TTC）染色。注意試驗(yàn)過(guò)程中要嚴(yán)格無(wú)菌消毒，取腦組織時(shí)動(dòng)作要輕柔、迅速，切勿強(qiáng)行牽拉而破壞腦組織的完整性。

1.6指標(biāo)檢測(cè)

1.6.1神經(jīng)功能評(píng)定參照Z(yǔ)ea Longa［6］神經(jīng)功能評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分。在模型制作成功第7、14日分別進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分，觀(guān)察其運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)的情況。

1.6.2腦組織HE病理染色大鼠腦組織石蠟包埋固定、切片，切片厚度4 μm，切片常規(guī)用二甲苯脫蠟，經(jīng)各級(jí)乙醇至水洗，然后將切片置于蘇木素輕度復(fù)染8 min，自來(lái)水沖洗去多余染料，1%鹽酸乙醇分化數(shù)秒，水洗1 min，然后置于PBS溶液中藍(lán)化，至細(xì)胞核變藍(lán)，再置于1%伊紅水溶液中浸泡2 min，梯度酒精脫水、二甲苯透明，最后用中性塑膠封片，晾干后，用OLYMPUSDP70數(shù)碼圖像裝置拍攝10×40倍鏡下選取的同張片子的5個(gè)不同視野的圖片，最后采用捷達(dá)JD801圖像分析系統(tǒng)分析。

1.6.3TTC染色后計(jì)算實(shí)驗(yàn)SD大鼠腦組織梗死體積從冰箱中取出腦組織，置于體積分?jǐn)?shù)2%的2.3.5-TTC中，組織要完全被TTC液覆蓋，在37℃下避光染色30 min，期間15 min后翻動(dòng)1次，以便組織兩面都能完全著色。正常腦組織被染成紅色，壞死組織不著色。再用體積分?jǐn)?shù)4%的多聚甲醛固定后使用1000萬(wàn)像素以上數(shù)碼相機(jī)照相，使用捷達(dá)JD801圖像分析系統(tǒng)計(jì)算腦梗死體積，采用梗死率表示梗死體積：梗死率（100%）=微梗死體/總體積×100%=（S1+S2+S3+…+Sn）H/（S1總+S2總+S3總+…+Sn總）H，S表示每片的梗死面積，H表示每片厚度。

1.6.4免疫組化檢測(cè)突觸囊泡蛋白（SYN）在大鼠腦組織的表達(dá)：（1）腦組織石蠟包埋，經(jīng)常規(guī)切片、60℃水中攤片、粘片、65℃烘片6 h后脫蠟脫水，然后經(jīng)各級(jí)乙醇至水洗；（2）熱修復(fù)抗原：微波爐中以最大微波火力加熱110 s，然后以最小微波火力加熱8 min，室溫自然冷卻；（3）置于3%H2O2去離子水20 mL孵育6 min，以消除內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，自來(lái)水洗2 min；（4）將玻片鋪于濕盒內(nèi)，PBS沖洗兩遍，甩干，在組織周?chē)谩癝UPER PAP PEN”畫(huà)一圈，將一抗（1∶50稀釋?zhuān)┑斡诮M織上覆蓋組織，然后在濕盒內(nèi)加水蓋蓋，4℃冰箱過(guò)夜；（5）取出濕盒復(fù)溫30 min，PBS沖洗兩遍，甩干，然后滴加DAB顯色液，顯微鏡下觀(guān)察2～5 min，顯色后，自來(lái)水洗滌終止反應(yīng)，水洗2 min；（6）蘇木素輕度復(fù)染4 min，水洗去多余的染料，1%鹽酸乙醇溶液中分化數(shù)秒，水洗1 min，然后置于PBS溶液中藍(lán)化；（7）梯度酒精脫水、二甲苯透明、中性樹(shù)膠封片；（8）OLYMPUSDP70數(shù)碼圖像裝置下觀(guān)察、攝片，捷達(dá)JD801圖像分析系統(tǒng)對(duì)SYN表達(dá)進(jìn)行分析。

1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以（±s）表示，多組間比較采用one way ANOVA分析，方差齊性采用LSD法兩兩比較，不齊時(shí)采用Dunnett′s法。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1各組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分比較見(jiàn)表1。電針對(duì)照組和假手術(shù)組大鼠未見(jiàn)神經(jīng)功能缺損癥狀。模型組和電針組比較，造模成功后7 d、14 d時(shí)，電針組大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)明顯優(yōu)于模型組（P＜0.05）。

表1　各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)功能評(píng)分比較（分，±s）

表1　各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)功能評(píng)分比較（分，±s）

與假手術(shù)組比較，*P＜0.01；與模型組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。下同。

組別n14 d 24 h7 d電針對(duì)照組200假手術(shù)組200模型組201.61±0.36*0 0 0 0 2.75±0.50*2.26±0.61*電針組201.08±0.29*△△2.32±0.57*△1.57±0.57*△△

圖1　各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)腦組織病理學(xué)圖（HE染色，×40）

2.2HE染色腦組織病理學(xué)改變見(jiàn)圖1。電針對(duì)照組和假手術(shù)組細(xì)胞排列整齊，形態(tài)正常，結(jié)構(gòu)完整。模型組可見(jiàn)神經(jīng)元細(xì)胞大部分消失，現(xiàn)存的細(xì)胞失去完整結(jié)構(gòu)，胞體縮小，核固縮，核碎裂明顯，隨著缺血時(shí)間的延長(zhǎng)，神經(jīng)細(xì)胞損傷減輕，細(xì)胞結(jié)構(gòu)逐漸恢復(fù)，后期出現(xiàn)膠質(zhì)細(xì)胞增生。電針組可見(jiàn)對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)細(xì)胞損傷較模型組輕，膠質(zhì)細(xì)胞增生明顯，血管內(nèi)皮細(xì)胞長(zhǎng)入。

2.3TTC染色后大鼠腦組織梗死體積比較見(jiàn)表2。電針對(duì)照組和假手術(shù)組未出現(xiàn)明顯的梗死灶，模型組及電針組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均出現(xiàn)不同程度的梗死灶，電針組不同時(shí)間點(diǎn)腦梗死體積均小于模型組，術(shù)后7 d差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），術(shù)后21 d差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

表2　各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)腦梗死率（%，±s）

表2　各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)腦梗死率（%，±s）

組別n7 d14 d電針對(duì)照組1000假手術(shù)組1000模型組1039.07±0.88*31.47±2.34*電針組1038.35±1.21*△△21.43±1.06*△△

圖2　各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)SYN的蛋白表達(dá)（×40）

2.4各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)SYN的蛋白表達(dá)分析與比較見(jiàn)圖2，表3。鏡下顯示SYN在電針對(duì)照組和假手術(shù)組表達(dá)弱。腦缺血后在血腫周?chē)鷧^(qū)、皮質(zhì)區(qū)見(jiàn)有棕黃色的陽(yáng)性表達(dá)，主要表現(xiàn)為細(xì)胞漿表達(dá)，細(xì)胞形態(tài)多為卵圓形，細(xì)胞體積增大，核仁明顯，隨著缺血時(shí)間的延長(zhǎng)，細(xì)胞表達(dá)逐漸增強(qiáng)，有的甚至出現(xiàn)雙核；電針組與模型組比較陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)更多，多呈散在的或聚集分布，著色逐漸加深，表達(dá)更明顯。從統(tǒng)計(jì)學(xué)分析陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)（以積分光密度表示）：2個(gè)時(shí)間點(diǎn)假手術(shù)組和電針對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），模型組表達(dá)較假手術(shù)組增多，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），電針組表達(dá)比模型組更明顯（P＜0.05）。

表3　各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)SYN的蛋白表達(dá)量（±s）

表3　各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)SYN的蛋白表達(dá)量（±s）

組別n14 d 7 d電針對(duì)照組101.31±0.29假手術(shù)組101.29±0.28模型組104.46±0.89*1.26±0.13 1.28±0.12 2.75±0.72*電針組105.13±0.96△3.47±1.04△

3　討論

相關(guān)研究表明急性期腦梗死的運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)和中樞神經(jīng)可塑性密切相關(guān)，而神經(jīng)可塑性的研究是目前亟待解決的問(wèn)題之一［8］。新近研究發(fā)現(xiàn)，SYN的表達(dá)在促進(jìn)神經(jīng)結(jié)構(gòu)與功能重建、神經(jīng)生長(zhǎng)發(fā)育等方面起著關(guān)鍵作用［9］。

SYN分子量為38 kda，為糖蛋白，定位于各種神經(jīng)末梢的突觸前囊泡上，可作為突觸前膜的特異性標(biāo)志，它與突觸的形成有關(guān)，其含量高低可準(zhǔn)確反映突觸數(shù)目的多少，因此SYN等與神經(jīng)可塑性密切相關(guān)，其基因表達(dá)與蛋白含量的變化可直接影響到相互聯(lián)系的神經(jīng)元數(shù)目、突觸數(shù)量，被認(rèn)為是神經(jīng)可塑性的標(biāo)志蛋白［10-11］。突觸素通過(guò)其磷酸化作用參與并調(diào)節(jié)谷氨酸、乙酰膽堿等神經(jīng)遞質(zhì)的釋放和通過(guò)突觸素結(jié)構(gòu)作用來(lái)影響著神經(jīng)可塑性。腦缺血損傷后，SYN參與Ca2+依賴(lài)性神經(jīng)遞質(zhì)釋放，介導(dǎo)突觸小泡與突觸前膜融合，同時(shí)與突觸前小泡膜上的多種蛋白質(zhì)相互作用，如與ATP酶組成復(fù)合體，形成突觸小泡的“質(zhì)子泵”，參與突觸的外排、內(nèi)吞循環(huán)，使突觸再生和構(gòu)建新的突觸連結(jié)，并協(xié)助細(xì)胞骨架蛋白運(yùn)輸神經(jīng)遞質(zhì)，從而對(duì)受損區(qū)的功能進(jìn)行代償。SYN作為突觸前膜的標(biāo)志，它的定位和定量能夠準(zhǔn)確反映突觸的密度和分布，因此在局灶性腦缺血的梗死區(qū)周邊表達(dá)增高，成為評(píng)價(jià)突觸重建的重要指標(biāo)［12-13］。Stroemer等［14］觀(guān)察發(fā)現(xiàn)局灶性腦皮質(zhì)梗死后，隨著時(shí)間的推移，病灶淺層皮質(zhì)與對(duì)側(cè)相應(yīng)區(qū)域SYN的表達(dá)隨著時(shí)間的推移明顯增加，而且神經(jīng)行為功能的恢復(fù)和SYN的表達(dá)也呈正相關(guān)。曾進(jìn)勝等［15］研究發(fā)現(xiàn)，腦梗死早期，SYN在同側(cè)紋狀體、丘腦腹后外側(cè)核和對(duì)側(cè)脊髓前角明顯增多，大鼠神經(jīng)功能出現(xiàn)自發(fā)性改善。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示假手術(shù)組和電針對(duì)照組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)之間SYN表達(dá)無(wú)顯著差異。提示大鼠大腦未損傷的情況下并不表現(xiàn)明顯的突觸可塑性；模型組和電針組在對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)SYN表達(dá)逐漸增強(qiáng)，而且電針組表達(dá)增強(qiáng)更明顯，說(shuō)明腦梗死后，不論有無(wú)針刺，腦組織均會(huì)發(fā)生一定程度的可塑性變化，但針刺能更強(qiáng)地促進(jìn)缺血后突觸的功能增強(qiáng)，促進(jìn)腦的可塑性增強(qiáng)。

本實(shí)驗(yàn)大鼠針刺采用天津中醫(yī)藥大學(xué)石學(xué)敏院士創(chuàng)立的“醒腦開(kāi)竅”針刺法。該法取穴中百會(huì)、水溝穴歸屬于督脈，位于頭部正中依“腧穴所在，主治所在”故可以治療腦病，達(dá)到升提清陽(yáng)，醒腦調(diào)神，開(kāi)竅啟閉的作用；相關(guān)實(shí)驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)它們對(duì)腦卒中偏癱患者大腦皮層的中樞生物電有良好的調(diào)節(jié)作用［16］；內(nèi)關(guān)可調(diào)節(jié)心的輸出量，改善腦循環(huán)。三陰交屬足太陰脾經(jīng)，為足三陰經(jīng)交會(huì)之處，統(tǒng)治脾、肝、腎三陰經(jīng)所主疾病，為治血之要穴。對(duì)于該法臨床治療數(shù)十萬(wàn)例，通過(guò)對(duì)9005例腦卒中患者進(jìn)行總結(jié)，總有效率達(dá)到98.56%［17］。對(duì)于電針，是在毫針基礎(chǔ)上在針刺頻率、波型波寬、電流強(qiáng)度、刺激時(shí)間等給予量化，以便定量分析提高療效。

本實(shí)驗(yàn)中大鼠腦梗死體積的縮小和運(yùn)動(dòng)功能的恢復(fù)與SYN的表達(dá)呈正相關(guān)，至于它們之間的具體關(guān)系，由于樣本量小，觀(guān)察時(shí)間較短，后期尚待進(jìn)一歩研究證實(shí)。

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Effect of Experimental Study of Xingnaokaiqiao Acupuncture Therapy on the Recovery of Motor Function and the Expression of SYN on Cerebral Ischemia Reperfusion Rat Model at Early Stage

LI Qinpan，WANG Wei，HAN Yongsheng，et al.Affiliated Hospital of Institute Neurology，Anhui University of Traditional Chinese Medicine，Anhui，Hefei 230061，China

Objective：To restore the effect of the Xingnaokaiqiao acupuncture therapy on the recovery of motor function and the expression of SYN after focal cerebral ischemia reperfusion in rats at the early stage.Methods：Healthy adult male SD rats were randomly divided into sham operation group，model group，electro acupuncture group and the electroacupuncture group，with 40 rats in each group.They were established to middle cerebral ischemia reperfusion model by suture method.Electroacupuncture were performed in the electro acupuncture group and the electroacupuncture group at acupoints of two Neiguan（PC06），shuigou（DU26），Sanyinjiao（SP06），Baihui（DU20），for 30 minutes.The first acupuncture in animal model after the success of 24 h，followed by acupuncture once a day every morning，every 7 days for a course of treatment（acupuncture for 6 days to rest 1 days）.The sham operation group，model group were conventionally fed on the cage，without any intervention therapy.20 Rats of each group were assessed with longa，s score，and taked 10 rats to Compare the volume of cerebral infarction and detect the expression of SYN with the method of immunohistochemical SP in 7 d and 14 d.Results：Electro acupuncture control group and sham operation group rats without neurological deficit，the nerve functional recovery in rats with electro acupuncture group was better than that of the model group in 7 d and 14 d.Electroacupuncture control group and sham operation group had no infarction after being stained with the method of TTC，the volume of cerebral infarction about the electroacupuncture group was obviously less than that in model group，the difference was statistically significant（P＜0.05）.A small amount expression of SYN with immunohistochemical SP method for detection of electro acupuncture control group and sham operation group，the increasedexpression of SYN around cerebral ischemia the rats in the model group at the two time points，compared with the sham operation group was significant（P＜0.01）.Expression of SYN about electroacupuncture group compared to the model group increased significantly（P＜0.05）at two time points.Conclusion：The Xingnaokaiqiao acupuncture therapy can promote the recovery of neurological function after focal cerebral infarction in the rats.The mechanism may be related to promoting the expression of SYN and improving neural plasticity after the focal cerebral ischemia reperfusion in rats

Xingnaokaiqiao acupuncture method；Cerebral ischemia reperfusion；Motor function；SYN；Neural plasticity

R285.5

A

1004-745X（2015）01-0019-05

10.3969/j.issn.1004-745X.2015.01.007

2014-09-23）

安徽省自然科學(xué)基金項(xiàng)目（1308085MH140）

（電子郵箱：hyssp@126.com）