細胞生物學
用于細胞核鈣成像的新型鈣指示劑的構建與鑒定
齊特,楊華乾,范雪新,等
細胞核鈣離子是基因轉錄等細胞核反應過程重要的調控因子.然而,細胞核內鈣離子信號的調控機制尚不清楚.缺乏穩(wěn)定的、敏感的細胞核鈣指示劑,是導致其調控機制難以研究的重要原因之一.針對這一問題,設計了能夠在細胞核內特異性表達的、具有核定位功能的鈣指示劑.以基因編碼鈣指示劑(GECIs)家族成員GCaMP6為模板,首先融合了對鈣離子不敏感的紅色熒光蛋白tdTomato來對局部的鈣信號進行量化,其次融合了核定位信號(NLS),使GCaMP6能夠特異定位于細胞核中.結果表明,NLS-GCaMP6-tdTomato能夠在細胞核中有效發(fā)揮作用,并且在鈣敏感性與動力學上,也與GCaMP6相當.這一新型細胞核鈣指示劑將為研究細胞核鈣離子的功能及其調控機制提供新的方法與途徑.
細胞核鈣離子;鈣成像;基因編碼鈣指示劑
來源出版物:中國生物化學與分子生物學報,2015,31(6): 592-598
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