李運(yùn)喜等

摘要：為明確SPF雞糞菌移植與發(fā)酵床養(yǎng)殖模式下肉雞的生產(chǎn)性能和抗藥性，與傳統(tǒng)普通地面平養(yǎng)模式相比較，測(cè)定肉雞的增重、成活率，免疫器官、消化器官的發(fā)育，大腸桿菌抗藥性。結(jié)果表明，SPF雞糞菌移植與發(fā)酵床養(yǎng)殖模式下肉雞生產(chǎn)性能和發(fā)育性能均高于傳統(tǒng)普通地面平養(yǎng)模式，大腸桿菌抗藥性有降低趨勢(shì)。

關(guān)鍵詞：抗藥性；發(fā)酵床；性能

中圖分類號(hào)：S831.4文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A文章編號(hào)：1001-4942（2015）05-0096-04

Study on Production Performance and Bacterial Resistance of Broilers with

Specific Pathogen Free Fecal Microbiota Transplantation on Fermentation Bed

Li Yunxi1， Luo Yanbo2， Song Minxun3， Feng Minyan3， Lin Shuqian3，

Liu Junwei4， Guo Wenlong4， Liu Yuqing1，2*， Liu Huanqi1*

（1.College of Animal Science and Technology， Qingdao Agricultural University， Qingdao 266109， China； 2. Institute of Animal

Science and Veterinary Medicine， Shandong Academy of Agricultural Sciences， Jinan 250100， China； 3.Poultry Institute， Shandong

Academy of Agricultural Sciences， Jinan 250023， China； 4. Qingdao Runda Biotechnology Co.， Ltd.， Qingdao 266109， China）

AbstractTo make clear the production performance and bacterial resistance of broilers with specific pathogen free （SPF） fecal microbiota transplantation on the fermentation bed， the weight gain， survival rate， immune organs， digestive organs， and the E.coli resistance were determined and compared with the traditional floor-rearing. The results indicated that the growth and production performances of the former were both superior to those of the traditional floor-rearing， and the E.coli resistance had a tendency to reduce.

Key wordsBacterial resistance； Fermentation bed ； Performance

隨著《畜禽養(yǎng)殖污染防治條例》和《獸用處方藥和非處方藥管理辦法》的頒布實(shí)施，肉雞養(yǎng)殖面臨著糞污處理和限制抗生素濫用的雙重壓力。SPF雞糞菌移植和發(fā)酵床可能是較好的技術(shù)出路。發(fā)酵床養(yǎng)殖技術(shù)不需要大的工程投資，在雞舍內(nèi)原位發(fā)酵不需要額外場(chǎng)地，通過(guò)高溫發(fā)酵和菌群演替能起到較為徹底的生物消毒作用，減少抗生素使用和糞便污染，是一種安全、環(huán)保、有效的生態(tài)養(yǎng)殖模式。

畜牧業(yè)普遍從歐美引進(jìn)良種，主客不匹配和抗生素的影響更為嚴(yán)重。種雞場(chǎng)集中種蛋、統(tǒng)一孵化，完全切斷了雞苗與母體的聯(lián)系，無(wú)法繼承母體完整的微生態(tài)菌群。養(yǎng)殖場(chǎng)采取全進(jìn)全出制，盡管徹底清洗消毒雞舍，但剛出殼雛雞的消化道幾乎無(wú)菌，最大可能還是從雞舍殘留糞粒獲得菌群。這時(shí)普遍采用廣譜“開(kāi)口藥”清腸，企圖阻止外來(lái)菌群定殖，但阻礙的是正常菌群的定殖和腸道發(fā)育。之后用抗生素維持預(yù)防，嚴(yán)重影響消化道菌群結(jié)構(gòu)，提高了抗藥性水平，到休藥期又面臨一次菌群劇變的考驗(yàn)。

總之，集中孵化模式切斷了母雛菌群傳遞，造成了菌群外侵感染，但也從根本上為重建雛雞良好的菌群提供了難得的條件。理想方法是直接為雛雞接種一個(gè)自然的、抗藥性水平低的、無(wú)規(guī)定病原微生物（SPF）的完整SPF雞糞菌，保證其盡快定殖，對(duì)病原菌形成競(jìng)爭(zhēng)排除（competitive exclusion，CE），結(jié)合發(fā)酵床生物消毒，改善環(huán)境，減少抗生素使用量。實(shí)際上，瑞典、芬蘭等國(guó)家早已推行過(guò)這種模式。

本研究?jī)?yōu)化發(fā)酵床技術(shù)和工藝，在中糧集團(tuán)標(biāo)準(zhǔn)化雞場(chǎng)中比較SPF雞糞菌移植與發(fā)酵床養(yǎng)殖模式和傳統(tǒng)的平養(yǎng)模式的肉雞生產(chǎn)性能、發(fā)育程度和糞便大腸桿菌抗藥性，探索一種適合中小型肉雞飼養(yǎng)企業(yè)高生產(chǎn)性能、低大腸桿菌抗藥性的環(huán)境友好型飼養(yǎng)模式，為降低大腸桿菌抗藥性奠定基礎(chǔ)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

試驗(yàn)雞舍：中糧集團(tuán)標(biāo)準(zhǔn)化的8棟商品肉雞養(yǎng)殖場(chǎng)，每棟面積為120 m×12 m。

試驗(yàn)雞品種：AA+商品肉雞。

發(fā)酵床墊料：稻殼、新鮮雞糞、發(fā)酵菌株（蠟樣芽孢桿菌）。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1發(fā)酵床的制作

① 發(fā)酵場(chǎng)地：選在雞舍內(nèi)部地面，原位發(fā)酵，不向外界散播病原菌。endprint

② 發(fā)酵床墊料的配制：發(fā)酵床雞舍每棟按照20 cm厚度購(gòu)置稻殼300 m3，混合新鮮雞糞20～40 m3后，用稻殼稀釋發(fā)酵菌株（蠟樣芽孢桿菌）3～20 kg，均勻撒入發(fā)酵床，并調(diào)節(jié)含水量達(dá)到55%左右，用手緊握墊料能成團(tuán)，手指縫隙濕潤(rùn)，但不至于滴水，松手墊料自動(dòng)散開(kāi)為宜。

③ 墊料發(fā)酵過(guò)程：將已翻拌均勻的墊料堆成兩壟，每壟高度1.2 m以上，堆積過(guò)程中注意噴水調(diào)節(jié)水分。發(fā)酵4 d后，將兩壟墊料合并成一壟，再發(fā)酵3 d，主要目的是充分發(fā)酵側(cè)面的墊料，此次稱為二次發(fā)酵。墊料經(jīng)過(guò)兩次發(fā)酵，就可制成發(fā)酵床的有機(jī)墊料。雞苗進(jìn)舍前，將表面墊料平攤，使其散熱。

1.2.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)試驗(yàn)設(shè)對(duì)照組和試驗(yàn)組：試驗(yàn)組為發(fā)酵床墊料平養(yǎng)+正常管理，雛雞1日齡噴霧接種SPF雞糞菌，1～12日齡不用抗生素，12～40日齡使用抗生素；對(duì)照組為常規(guī)墊料平養(yǎng)+正常用藥，飼養(yǎng)管理同上。

1、2、3周末，統(tǒng)計(jì)成活率。

1、2、3周末每組雞舍內(nèi)隨機(jī)取6筐雞，每筐隨機(jī)抓取6只雞，稱重，計(jì)算每只雞的平均體重。根據(jù)平均體重，每組抓取4只能代表本組體重的肉雞，剖解，稱取免疫器官、消化器官的重量，計(jì)算其平均重量或長(zhǎng)度。

1、2、3周末分別在對(duì)照組和試驗(yàn)組隨機(jī)采集5只健康肉雞肛拭子，分離大腸桿菌，做96點(diǎn)陣藥敏試驗(yàn)，比較其對(duì)各種抗生素的抗藥性差異變化。

2結(jié)果與分析

2.1生產(chǎn)性能

如表1所示，試驗(yàn)組平均體重和平均成活率較對(duì)照組高，但差異不顯著。

2.2免疫、消化器官發(fā)育

如表2所示，T為試驗(yàn)組，C為對(duì)照組。試驗(yàn)組的免疫器官和消化器官的發(fā)育先慢后快，3周齡末高于對(duì)照組。

2.3大腸桿菌抗藥性差異

如圖1所示，受試藥物有硫酸黏菌素、環(huán)丙沙星、丁胺卡那霉素、磷霉素、慶大霉素、頭孢噻呋鈉、多西環(huán)素、左氧氟沙星、氟苯尼考、硫酸新霉素。對(duì)照組全程用藥，抗藥性水平均較高；試驗(yàn)組前12天抗藥性水平較低，表現(xiàn)出SPF雞菌群的敏感特點(diǎn)，這顯示了糞菌移植的明顯替換效果；12日齡后使用抗生素則抗藥性顯著提高，表明移植菌群與原有菌群的競(jìng)爭(zhēng)不是一次糞菌移植就能完全改觀。

注：10種抗生素各自設(shè)置8個(gè)梯度：16、8、4、2、1、1/2、1/4、1/8 R，R表示耐藥的藥物濃度，如上圖自左至右，

黑色塊表示細(xì)菌在此濃度抗生素作用下生長(zhǎng)；第一行為SPF雞，最低抑菌濃度（MIC）大部分低于設(shè)定的1/8 R；

試驗(yàn)組抗藥性12日齡前顯著低于12日齡用藥后及對(duì)照組全程用藥。

3討論與結(jié)論

墊料發(fā)酵床養(yǎng)殖是一套“零排放、無(wú)污染、高產(chǎn)出”的良性循環(huán)生態(tài)養(yǎng)殖體系。已有文獻(xiàn)表明，發(fā)酵床中有益微生物利用糞便產(chǎn)生菌體蛋白，提高飼料轉(zhuǎn)化率，降低料肉比。微生物發(fā)酵床方式飼養(yǎng)肉雞，雞日增重高于傳統(tǒng)普通地面平養(yǎng)方式的肉雞，料肉比地面平養(yǎng)降低17.6%（P<0.05）。微生物發(fā)酵床養(yǎng)殖能夠提高肉雞成活率、增重（P<0.5）、采食量和降低料重比，改善飼料轉(zhuǎn)化率。與此同時(shí)，發(fā)酵床中的微生物能刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)，提高免疫力及機(jī)體抗氧化機(jī)能。微生物發(fā)酵床養(yǎng)雞，雞血清免疫球蛋白、總蛋白、球蛋白和白球比，均有所提高，發(fā)酵床能明顯提高雞體的抵抗力。

本試驗(yàn)中，3周齡末，發(fā)酵床養(yǎng)殖模式下，肉雞胸腺、脾臟、法氏囊、腺胃、肌胃和腸道長(zhǎng)度比傳統(tǒng)地面平養(yǎng)模式分別增加1.6、0.5、0.7、2.9、5.5 g和7.2 cm。肉雞平均體重比傳統(tǒng)地面平養(yǎng)肉雞重105 g，成活率提高0.35個(gè)百分點(diǎn)。墊料發(fā)酵床養(yǎng)殖模式下肉雞增重和成活率均高于傳統(tǒng)地面平養(yǎng)模式；肉雞免疫器官胸腺、脾臟法氏囊和消化器官腺胃、肌胃、腸道的發(fā)育情況均好于地面平養(yǎng)模式。

抗藥性由于臨床病原菌的治療失敗而受到重視，但實(shí)際上抗藥性基因廣泛存在于各種環(huán)境微生物中，抗藥性基因和菌株是流動(dòng)的庫(kù)，在大規(guī)模使用抗生素時(shí)被誘導(dǎo)和篩選出來(lái)，其中包括抗藥性病原菌。SPF雞和商品肉雞的腸道都存在抗藥性基因庫(kù)，豐度不同取決于抗生素的使用數(shù)量和頻率。試驗(yàn)組用藥前后的差異充分說(shuō)明這一點(diǎn)，也提示經(jīng)過(guò)多次SPF雞的糞菌移植，可能扭轉(zhuǎn)雞腸道菌群高抗藥性的局面，當(dāng)抗藥性降低到一定敏感程度，可以通過(guò)藥敏試驗(yàn)控制其不再升高，用藥典規(guī)定的劑量即可達(dá)到理想療效。

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