羅 丹， 李小芳， 余 琳， 羅麗佳， 冉茂蓮， 李 平， 李培培

（成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院中藥材標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室中藥資源系統(tǒng)研究與開(kāi)發(fā)利用省部共建國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，四川　成都　610075）

液固壓縮技術(shù)增溶制劑中的葛根總黃酮

羅 丹， 李小芳*， 余 琳， 羅麗佳， 冉茂蓮， 李 平， 李培培

（成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院中藥材標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室中藥資源系統(tǒng)研究與開(kāi)發(fā)利用省部共建國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，四川成都610075）

目的 運(yùn)用液固壓縮技術(shù)增加葛根總黃酮的溶出度，優(yōu)選最佳處方。方法 篩選液體賦形劑和載體，制備藥液比為1∶4，R值為20的葛根總黃酮液固壓縮片，將其與原料藥和市售片的溶出度進(jìn)行比較，通過(guò)差示掃描量熱分析考察藥物的晶型轉(zhuǎn)化。結(jié)果 液固壓縮片較原料藥和市售片的溶出度大幅度提高。優(yōu)選的最佳處方LS-3，以吐溫-80做液體賦形劑，微晶纖維素做載體，溶出50%時(shí)，僅需42.6s。差示掃描量熱分析表明液固壓縮片中主藥的特征峰消失。結(jié)論 液固壓縮技術(shù)可改善葛根總黃酮的溶出，快速釋藥，并將藥物從結(jié)晶狀態(tài)轉(zhuǎn)化為分子或無(wú)定形狀態(tài)。

液固壓縮技術(shù)；葛根總黃酮；溶出度；差示掃描量熱分析

液固壓縮技術(shù)（Liquisolid technique）又名溶液粉末化技術(shù)，將難溶性藥物懸浮或溶解在非揮發(fā)性液體賦形劑中，再與適宜的載體和涂層材料混合均勻轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂蟹丘ば?、良好流?dòng)性和可壓性的干燥粉末［1］。目前，液固壓縮技術(shù)已運(yùn)用于法莫替丁、厄貝沙坦［2］、格列吡嗪［3］等西藥，對(duì)α-細(xì)辛腦［4］、熊果酸［5］等中藥難溶性有效成分液固壓縮片的研究也相繼有文獻(xiàn)報(bào)道。

葛根總黃酮為葛根的主要成分，包括葛根素、羥基葛根素、甲氧基葛根素、大豆苷等，主要用于治療心腦血管類疾病，如高血壓、高血脂、偏頭痛、冠心病、心肌梗塞、心絞痛、視網(wǎng)膜動(dòng)脈阻塞、視網(wǎng)膜靜脈阻塞和突發(fā)性耳聾等癥［6］。然而，葛根總黃酮的主要成分葛根素的水溶性差，限制了其口服吸收，生物利用度低［7］。本實(shí)驗(yàn)擬制備葛根總黃酮液固壓縮片，增加葛根總黃酮的溶出度，并探討其增溶速釋機(jī)制。

1　儀器與試藥

1.1儀器 BP61型十萬(wàn)分之一電子天平（德國(guó)Satorius公司）；DP-I型單沖壓片機(jī)（上海中藥機(jī)械廠）；ZRS-8G智能溶出試驗(yàn)儀（天大天發(fā)科技有限公司），UV-6000型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海美譜達(dá)儀器有限公司）；SB-5200DT型超聲儀（功率200W，工作頻率40 kHz；寧波新芝生物科技股份有限公司）；DSC差示掃描量熱儀（北京恒久科學(xué)儀器廠）等。

1.2試藥 葛根總黃酮（總黃酮純度80.85%，西安飛達(dá)生物技術(shù)有限公司，批號(hào)FD20130912）；葛根素對(duì)照品（純度為98.0%，中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)110752-200912）；1，2-丙二醇（PG，成都市科龍化工試劑廠）；聚乙二醇400（PEG400，成都市科龍化工試劑廠）；吐溫-80（成都市科龍化工試劑廠）；微晶纖維素PH-101（MCC，成都市科龍化工試劑廠）；乳糖（分析純，成都市科龍化工試劑廠）；可溶性淀粉（分析純，成都市科龍化工試劑廠）；微粉硅膠?200（成都市科龍化工試劑廠）；羧甲基淀粉鈉（成都市科龍化工試劑廠）；蒸餾水等。

2　方法與結(jié)果

2.1液固壓縮片的制備

2.1.1液固壓縮系統(tǒng)的數(shù)學(xué)模型［8］通過(guò)R值和藥液比兩個(gè)參數(shù)可計(jì)算出液固壓縮系統(tǒng)最佳的載體和涂層材料的用量，載體（Q）和涂層材料（q）能吸收一定的液體賦形劑，將載體材料（Q）吸收液體賦形劑（W）的最大量定義為液體負(fù)載因子（Lf）。載體材料和涂層材料的質(zhì)量比稱為R值，即：

φCA為載體對(duì)液體賦形劑的最大保留勢(shì)能，φCO為涂層材料對(duì)液體賦形劑的最大保留勢(shì)能，Lf又可由以下公式表示

φCA和φCO值為輔料的固有性質(zhì)，本實(shí)驗(yàn)取PG、PEG400和吐溫-80的φCA、φCO值分別為0.16、3.31、0.005、3.26、0.0741、1.958［9-10］。

2.1.2液固壓縮片的處方 本實(shí)驗(yàn)取葛根總黃酮10 mg，液體賦形劑40 mg，微粉硅膠?200作為涂層材料，選擇藥液比為1∶4，R值為20，篩選不同的液體賦形劑和載體。根據(jù)公式（1～3）分別計(jì)算出各個(gè)處方的Lf、Q、q值及崩解劑的用量及片質(zhì)量，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1　葛根總黃酮液固壓縮片的處方參數(shù)值Tab.1 Excipients in liquisolid tabletsw ith total flavone from Puerariae Radix

2.1.3液固壓縮片的制備方法［11］精密稱取表1中的處方量，將葛根總黃酮于60℃下磁力攪拌加入液體賦形劑中，待藥物完全溶解在液體賦形劑中再連續(xù)加入載體，研缽研勻轉(zhuǎn)化為濕顆粒，再加入微粉硅膠?200，研勻得干燥粉末，最后加入5%的羧甲基淀粉鈉混勻，于干燥器中放置1 d，以單沖壓片機(jī)，直接粉末壓片，硬度控制在30～40 N。

2.2壓縮前評(píng)價(jià)［12-13］粉末的流動(dòng)性和可壓性是影響液固粉末系統(tǒng)壓片的重要因素，可通過(guò)休止角、卡爾指數(shù)和豪斯納比對(duì)壓縮前的粉末流動(dòng)性進(jìn)行評(píng)估。休止角體現(xiàn)粉末粒子間的摩擦和內(nèi)聚的特性，而卡爾指數(shù)和豪斯納比涉及粉末粒子間的摩擦，一般，休止角小于40°，卡爾指數(shù)小于25%，豪斯納比小于1.25，說(shuō)明粉末流動(dòng)性好。

2.2.1休止角的測(cè)定 采用固定漏斗法，將漏斗固定于水平放置的繪圖紙上方一定距離，漏斗下口距繪圖紙高度為H，均速將粉末倒入漏斗中，直到漏斗下形成的圓錐體尖端接觸到漏斗下口為止，測(cè)定圓錐體的直徑2R。計(jì)算休止角θ，每個(gè)樣品測(cè)3次，取平均值。

2.2.2卡爾指數(shù)和豪斯納比的測(cè)定 分別測(cè)定每個(gè)處方粉末的松裝密度ρa(bǔ)和振實(shí)密度ρp，根據(jù)公式（4）、（5）

分別計(jì)算其卡爾指數(shù)和豪斯納比，每個(gè)樣品測(cè)3次，取平均值，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2　葛根總黃酮液固粉末系統(tǒng)的流動(dòng)性（±s）Tab.2 Fluidity of total flavone from Puerariae Radix liquisolid tablets（±s）

表2　葛根總黃酮液固粉末系統(tǒng)的流動(dòng)性（±s）Tab.2 Fluidity of total flavone from Puerariae Radix liquisolid tablets（±s）

處方θ/（°）卡爾指數(shù)/%豪斯納比LS-1 39.8±0.10 21.33±0.58 1.27±0.01 LS-2 42.6±0.79 31.32±1.15 1.46±0.02 LS-3 42.7±1.10 33.33±1.16 1.50±0.03 LS-4 43.9±0.17 39.35±0.56 1.65±0.02 LS-5 49.4±0.66 47.64±0.56 1.91±0.02

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：LS-1、LS-2、LS-3相對(duì)于LS-4、LS-5的休止角、卡爾指數(shù)和豪斯納比較小，為了得到流動(dòng)性、可壓性好的粉末，故選擇MCC作載體。

2.3壓縮后評(píng)價(jià)［5］

2.3.1片質(zhì)量差異 根據(jù)《中國(guó)藥典》2010年版附錄ⅠD片劑［14］的方法進(jìn)行測(cè)定。取各片劑20片，分別精密稱定每片的質(zhì)量。每片質(zhì)量與標(biāo)示片質(zhì)量比較，標(biāo)示片質(zhì)量0.3 g以下的重量差異限度為±7.5%，0.3g以上限度為±5%，結(jié)果見(jiàn)表3。

2.3.2崩解時(shí)限 根據(jù)《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄ⅫA崩解時(shí)限檢查法［14］中的片劑方法進(jìn)行測(cè)定。溫度37℃，取藥片6片分別置于吊籃的玻璃管內(nèi)，啟動(dòng)崩解進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果見(jiàn)表3。

表3　葛根總黃酮液固壓縮片的質(zhì)量評(píng)價(jià)Tab.3 Quality evaluation on liquisolid tablets w ith total flavone from Puerariae Radix

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：LS-4、LS-5黏沖，不利于壓片，片質(zhì)量差異不合格，而LS-1、LS-2、LS-3片質(zhì)量差異合格，片面光潔，故選擇MCC做載體。

2.4溶出度測(cè)定［15］

2.4.1對(duì)照品溶液的制備 取葛根素對(duì)照品適量，精密稱定，加蒸餾水超聲充分溶解，定容于50 mL量瓶中，制成每1 mL含0.245 4 mg葛根素的對(duì)照品溶液。

2.4.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 分別精密量取葛根素對(duì)照品溶液0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45、0.5 mL，置10 mL量瓶中，加蒸餾水定容，充分搖勻，在250 nm波長(zhǎng)處測(cè)吸光度。以葛根素質(zhì)量濃度（ρ）為橫坐標(biāo)，吸光度（A）為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性方程A=0.075 4ρ-0.008 2，r=0.999 5。結(jié)果表明，葛根素在4.908～12.27 μg/mL內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.4.3溶出度測(cè)定方法 采用《中國(guó)藥典》2010年版二部附錄ⅩC溶出度測(cè)定法［14］中的漿法對(duì)LS-1、LS-2、LS-3、原料藥和市售片（愈風(fēng)寧心片）的溶出度進(jìn)行測(cè)定。轉(zhuǎn)速為100 r/min，溫度為37℃，以900 mL超聲脫氣蒸餾水作溶出介質(zhì)。取片劑各6片投入溶出杯內(nèi)，分別于1、3、5、10、20、30、60 min取樣10 mL，經(jīng)孔徑0.8μm濾膜過(guò)濾，取續(xù)濾液，得樣品溶液。同時(shí)補(bǔ)充等體積等溫度的新鮮介質(zhì)，操作在30 s內(nèi)完成。根據(jù)“2.4.2”項(xiàng)下方法測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)圖1。將液固壓縮片、原料藥及市售片的溶出時(shí)間數(shù)據(jù)分別進(jìn)行威布爾函數(shù)擬合，計(jì)算溶出參數(shù)Td和T50，結(jié)果見(jiàn)表4。

圖1　藥物的溶出曲線Fig.1 Drug's dissolution curve

表4　體外溶出W eibull函數(shù)擬合參數(shù)Tab.4 W eibu ll fitting of in vitro dissolution

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，葛根總黃酮液固壓縮片的溶出度明顯優(yōu)于原料藥和市售片，其中液固壓縮片LS-3的溶出度明顯優(yōu)于LS-1、LS-2，故選擇吐溫-80作液體賦形劑。

2.5差式掃描量熱分析（DSC）［16］分別取葛根素、液固粉末系統(tǒng)、物理混合物和液固空白輔料為樣品，以10℃/min的掃描速率，在掃描范圍25～350℃溫度內(nèi)掃描，進(jìn)樣量分別為葛根素5.000 mg，液固粉末系統(tǒng)3.100 mg，物理混合物5.100 mg，液固空白輔料5.2 mg，結(jié)果見(jiàn)圖2。

由圖2A可知葛根素分別在209.2℃和230.5℃有兩個(gè)尖銳的特征峰，表明葛根素以結(jié)晶的狀態(tài)存在。圖2B中在209.2℃和230.5℃處無(wú)特征峰，表明液固空白輔料對(duì)主藥無(wú)干擾。圖2C中受輔料量的影響，葛根素峰有所下降，但仍在209.2℃和230.5℃處有其特征峰，說(shuō)明藥物仍以結(jié)晶的狀態(tài)存在。由圖2D和圖2A可知，在液固粉末系統(tǒng)中葛根素的特征峰消失，說(shuō)明藥物在液固壓縮片中以分子或者無(wú)定形狀態(tài)存在。

3　討論

液固壓縮技術(shù)是一種有前途的、能提高難溶性藥物溶出度的新技術(shù)，可很好地提高葛根總黃酮的溶出度。優(yōu)選的LS-3液固壓縮片中，葛根總黃酮快速釋放，溶出50%時(shí)，液固壓縮片僅需42.6 s，而原料藥和市售片需9.4 min和15.89 min。

圖2　差示掃描量熱分析曲線Fig.2 Curves from differential scanning calorimeter

液固壓縮技術(shù)增溶的機(jī)制可能是液體賦形劑增加了藥物的溶解度。液固壓縮片中所選的液體賦形劑均為良好的助溶劑，其中葛根總黃酮在吐溫-80中的溶解度最大［17］，能很好地降低表面張力，提高藥物粒子的潤(rùn)濕性，使水分子借助毛細(xì)管作用深入到片劑的內(nèi)部，使其快速崩解。

液固壓縮技術(shù)增溶的機(jī)制也可能是載體和涂層材料增加了藥物溶出有效表面積。由DSC圖可知液固壓縮技術(shù)能使藥物從結(jié)晶狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榉肿踊蛘邿o(wú)定形狀態(tài)。因?yàn)檩d體和涂層材料為多孔材料，具有很強(qiáng)的吸附性，能充分吸附呈分子分散于吐溫-80中的藥物。當(dāng)液固壓縮片崩解時(shí)，增大了溶出有效表面積，使得藥物快速釋放。

液固壓縮技術(shù)增溶的機(jī)制還有可能是增加了藥物粒子潤(rùn)濕性。由崩解時(shí)限結(jié)果可知，LS-3的崩解僅需要1.28 min，這可能與吐溫-80改善藥物粒子的潤(rùn)濕性有關(guān)。

［1］ 李麗然，王成港，郭 紅.液固壓縮技術(shù)在藥劑學(xué)中的應(yīng)用［J］.現(xiàn)代藥物與臨床床，2012，27（3）：283-286.

［2］ Rikisha B，Anuradha P，Hetal D，et al.Formulation and evalution of irbesartan liquisolid tablets［J］.Int J Pharm Sci Reυ Res，2011，9（2）：32-37.

［3］ Patel V P，Patel N M.Dissolution enhancement of glipizide using liquisolid tablet technology［J］.Indian Drugs，2008，45（4）：318-323.

［4］ 趙許杰，閆雪生，徐新剛，等.液固壓縮技術(shù)速釋?duì)?細(xì)辛腦的機(jī)制探討［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，32（11）：641-643.

［5］ 趙許杰，閆雪生，徐新剛，等.液固壓縮技術(shù)在熊果酸制劑工藝中的應(yīng)用探討［J］.中成藥，2013，35（10）：2141-2143.

［6］ 方士英，吳 虹，徐茂紅，等.葛根黃酮對(duì)心腦血管系統(tǒng)作用及臨床應(yīng)用的研究進(jìn)展［J］.醫(yī)學(xué)前沿，2011（23）：193-194.

［7］ 周 臻.葛根素分散片的處方篩選及其溶出度測(cè)定［J］.廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，27（6）：1-2.

［8］ Kavitha K，Kotha L，Raju N S，Ganesh N S，et al.Effect of dissolution rate by liquisolid compact approach：An overview［J］.Der Pharmacia Lett，2011，3（1）：71-83.

［9］ 趙許杰，閆雪生，袁 敏，等.液固壓縮技術(shù)在水飛薊素制劑方面的應(yīng)用［J］.藥學(xué)研究，2013，79（1）：262-269.

［10］ Nokhodchia A，Aliakbara R，Desaia S，et al.Liquisolid compacts：The effect of cosolvent and HPMC on the ophylline release［J］.Biointerfaces，2010，79（1）：262-269.

［11］ Bindu M B，Kusum B，David B，Novel strategies for poorly water soluble drugs.［J］.Int J Pharm Sci ReυRes，2010，4（3）：76-84.

［12］ Rania F H，Mohammed K A.Enhancement of famotidine dissolution rate through liquisolid tablets formulation：Inυitro and inυiυo evaluation［J］.Eur J Pharm Biopharm 2008，69（8）：993-1003.

［13］ 章 波，馮 怡，徐德生，等.粉體流動(dòng)性的研究及其在中藥制劑中的應(yīng)用［J］.中成藥，2008，30（6）：904-907.

［14］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典：2010年版一部［S］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄XC.

［15］ 張嘉家，易荊麗，周毅生，等.葛根總黃酮分散片的處方工藝研究及溶出度測(cè)定［J］.廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)，2012，28（6）：2-5.

［16］ 謝 捷，潘玲燕，朱興一，等.磷脂和羥丙基—環(huán)糊精對(duì)葛根素溶解度的影響［J］.中成藥，2013，35（10）：2130-2133.

［17］ 崔升淼，趙春順，何仲貴.葛根黃酮自微乳化軟膠囊的制備和溶出度的考察［J］.中成藥，2007，29（7）：993-996.

Liquisolid technique solubilizes the total flavone from Puerariae Radix preparations

LUO Dan， LIXiao-fang*， YU Lin， LUO Li-jia， RAN Mao-lian， LIPin， LIPei-pei
（School of Pharmacy，Chengdu Uniυersity of Traditional Chinese Medicine；Key Laboratory of the Ministry of Education for Standardization of Chinese Herbal Medicine；State Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research，Deυelopment and Utilization of Chinese Medicine Resources，Chengdu 611137，China）

liquisolid technique；total flavone from Puerariae Radix；dissolution；differential scanning calorimeter

R944

A

1001-1528（2015）03-0522-04

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.03.013

2014-05-24

四川省教育廳重點(diǎn)項(xiàng)目（12ZA042）；成都中醫(yī)藥大學(xué)科技發(fā)展基金（ZRMS201240）

羅 丹（1989—），女，碩士生，研究方向?yàn)橹兴幮聞┬图靶录夹g(shù)。Tel：13438024307，E-mail：929145900@qq.com

李小芳（1964—），女，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向?yàn)橹兴幮聞┬图靶录夹g(shù)。Tel：13808195110，E-mail：lixiaofang918 @163.com