陳恩平，杜麗根，邱 健，張 園

（1.龍崗區(qū)第二人民醫(yī)院，深圳 518112;2.廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院，廣州 510010）

急性冠脈綜合征患者IL-35與hs-CRP、IL-18相關(guān)性研究

陳恩平1，杜麗根1，邱 健2*，張 園2

（1.龍崗區(qū)第二人民醫(yī)院，深圳 518112;2.廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院，廣州 510010）

目的 通過對入選患者行IL-35、hs-CRP、IL-18指標的檢測，評價這些指標在急性冠脈綜合征（ACS）患者中的變化及相關(guān)性。方法 對入選的128例行冠脈造影患者，根據(jù)冠脈造影結(jié)果及臨床類型分為對照組、穩(wěn)定心絞痛組（SAP），不穩(wěn)定心絞痛組（UAP）和急性心肌梗死（AMI）組。酶聯(lián)免疫法檢測IL-35、hs-CRP、IL-18指標。結(jié)果 與對照組和SAP組比較，UAP、AMI組IL-35水平明顯下降，hs-CRP、IL-18水平明顯升高;與UAP組比較，AMI組IL-35水平明顯下降，hs-CRP、IL-18明顯升高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。IL-35與Hs-CRP、IL-18進行相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，校正多種危險因素后，ACS組中血漿IL-35表達水平仍與hs-CRP、IL-18呈負相關(guān)（r1'=－0.482，r2'=－0.365＜0.01）。結(jié)論 IL-35與hs-CRP、IL-18密切相關(guān)，提示促炎和抗炎失衡促進了ACS的發(fā)生發(fā)展，聯(lián)合多指標檢測有利于早期對ACS進行危險分層，減少冠脈事件的發(fā)生。

急性冠脈綜合征;白介素-35;超敏C反應(yīng)蛋白;白介素-18

急性冠脈綜合征（acute coronary syndromes，ACS）嚴重威脅人類的健康，炎癥在其發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著重要作用。近年來，抗炎細胞功能失調(diào)、抗炎因子不足在冠心病的發(fā)病機制中成為研究的熱點之一。IL-35是一種新型抗炎因子，Kempe等［1］研究發(fā)現(xiàn)，IL-35在頸動脈的不穩(wěn)定斑塊中強陽性表達，提示IL-35也參與了ACS的發(fā)病過程。超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）是經(jīng)典的炎癥指標，與冠脈事件的發(fā)生密切相關(guān)［2-3］。Ragino Y I等［4］研究發(fā)現(xiàn)IL-18是良好的促炎介質(zhì)，參與了動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展。因此，本文研究的目的是探討IL-35、hs-CRP、IL-18在急性冠脈綜合征患者中的變化及相關(guān)性，旨在探討炎癥和抗炎失衡在急性冠脈綜合征中的發(fā)病機理，為臨床診療提供臨床依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 納入對象是2007年10月—2008年9月在心內(nèi)科行冠脈造影患者128例，平均年齡（62.02±8.96）歲。所有患者在行冠脈造影前均接受hs-CRP、IL-18及IL-35的檢測。根據(jù)冠脈造影的結(jié)果:冠狀動脈狹窄≥50%的患者診斷為冠心病（coronary heart disease，CHD）組;冠脈無狹窄為冠脈對照組。根據(jù)患者臨床表現(xiàn)、連續(xù)心電圖改變、心肌酶譜及冠狀動脈造影結(jié)果，128例患者中不穩(wěn)定型心絞痛（UAP）34例、急性心肌梗死（AMI）32例、穩(wěn)定型心絞痛（SA）32例，冠脈造影正常者30例作為對照組。根據(jù)WHO分型標準，不穩(wěn)定型心絞痛包括以下亞型:初發(fā)勞力型心絞痛，惡化勞力型心絞痛，靜息心絞痛，梗死后心絞痛，變異型心絞痛。急性心肌梗死的診斷標準:1）典型的心肌缺血性胸痛。2）心電圖相鄰2個或多導(dǎo)聯(lián)ST段抬高，在肢體導(dǎo)聯(lián)≥0.1 mV，胸部導(dǎo)聯(lián)≥0.2 mV。3）心肌酶升高。符合上述3個條件中的2個條件，即診斷為急性心肌梗死。穩(wěn)定型心絞痛診斷標準:持續(xù)時間短暫（一般＜30 min），休息或予硝酸酯制劑后緩解，病程穩(wěn)定，慢性穩(wěn)定性心絞痛1個月以上。排除甲狀腺功能異常、自身免疫性及炎癥性疾病、腫瘤、肝腎疾病、急慢性感染、貧血和手術(shù)創(chuàng)傷及其他代謝異常疾病。

1.2 治療方法 詳細收集記錄每一研究對象的臨床資料，包括患者的一般情況，如入院時收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）、脈壓（PP）、年齡、性別、吸煙史、確診的高血壓病史、糖尿病史。高血壓標準為收縮壓≥140 mmHg，或舒張壓≥90 mmHg，或服用降壓藥者;糖尿病標準為空腹血糖≥7.0 mmol/L，或餐后血糖≥11.1 mmol/L，或服用降糖藥物。吸煙史為每天至少吸1支，并持續(xù)1年以上。

1.3 觀察指標 生化指標檢測:所有患者在行冠狀動脈造影前采集空腹血標本，應(yīng)用標準方法測量。血液指標:血糖、三酰甘油（TG）、膽固醇（CHO）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）等。生化標志物指標檢測:入院后第2天清晨空腹抽患者靜脈血2 mL，EDTA抗凝，3 000 r/min離心15 min，－70 ℃保存，ELISA 測定IL-35、hs-CRP、IL-18。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 17.0分析軟件，計數(shù)資料采用χ2檢驗;計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，采用t檢驗或方差分析。各組間差異采用單因素方差分析及多個樣本均數(shù)間的兩兩比較，采用q檢驗。相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)分析，雙側(cè)P＜0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組一般資料比較 見表1。

表1 各組一般資料比較（±s）

表1 各組一般資料比較（±s）

注:與對照組比較，#P＜0.05

項 目 對照組（n=30） SAP（n=32） UA（n=34） AMI（n=32）年齡/歲 60.90 ±8.20 62.13 ±10.23 62.75 ±7.02 62.85 ±7.52吸煙/n（%） 7（22.2） 15（46.8）# 18（52.9）# 18（56.3）#高血壓/n（%） 14（45.7） 17（53.1） 17（50.0） 17（53.1）糖尿病/n（%） 9（30.6） 11（34.4） 12（35.3） 15（46.8）SBP/mmHg 135.42 ±10.21 143.27 ±10.17 146.81 ±11.31 147.80 ±9.25 DMP/mmHg 70.23 ±6.23 74.25 ±12.56 74.21 ±8.65 74.56 ±8.64 TG/（mmol/L） 2.13 ±0.82 2.83 ±1.52 2.93 ±1.03 2.98 ±1.02 CHO/（mmol/L） 3.94 ±1.02 4.58 ±1.25 5.28 ±1.23 5.82 ±1.05 LDL-C/（mmol/L） 3.28 ±0.85 4.28 ±1.12 4.90 ±0.86 5.12 ±0.78 HDL-C/（mmol/L）1.32 ±0.25 1.20 ±0.26 1.07 ±0.18 1.05 ±0.12

2.2 各組生化標志物指標比較 見表2。

表2 各組生化標志物指標比較（±s）

表2 各組生化標志物指標比較（±s）

注:與對照組比較，#P＜0.05;與對照組及SAP組比較，△P＜0.05;與UAP組比較，▲P＜0.05

組 別 例數(shù) IL-35/（mmol/L）hs-CRP/（mg/L） IL-18/（ng/L）對照組 30 108.32 ±31.02 3.26 ±1.05 162.23 ±70.22 SAP 組 32 82.26 ±32.09# 3.53 ±1.12# 229.20 ±82.00#UAP 組 34 64.73 ±31.23#△ 8.76 ±1.23#△ 302.25 ±79.23#△AMI組 32 36.03 ±29.84#△▲ 12.56 ±2.03#△▲ 369.52 ±72.26#△▲

2.3 直線相關(guān)分析 將選入的患者IL-35與hs-CRP、IL-18做直線相關(guān)分析，結(jié)果呈相關(guān)性（R分別為R1= －0.523，R2= －0.415，P ＜0.01）。在控制了吸煙、高血壓病史、糖尿病史等多種動脈粥樣硬化危險因素后，這種相關(guān)性仍然存在（r1'=－0.482，r2'= －0.365，P ＜0.01）。見表3。

表3 IL-35相關(guān)性分析

3 討論

ACS是一種以急性心肌缺血、斑塊的破裂為主要表現(xiàn)的臨床綜合征。Virmani等［5］研究發(fā)現(xiàn):約60%的猝死病人是由于斑塊破裂血栓閉塞血管所引起。目前文獻報道，IL-35［6-7］作為一種新型抗炎因子，參與了ACS的作用機制。本文通過觀察IL-35與hs-CRP、IL-18在不同冠脈病變程度的變化及相關(guān)性，探討炎癥反應(yīng)和抗炎失衡在冠心病的發(fā)病機制，為臨床診療提供依據(jù)。

炎癥反應(yīng)與心血管事件密切相關(guān)，其在心血管診療中的作用日益受到重視［8-9］。Ridker等［10］報道，hs-CRP是新的冠心病獨立的預(yù)測指標，其每增加5 ms/L，發(fā)生ACS概率即增加1.7倍，hs-CRP水平持續(xù)升高且＞200 ms/L者，其AMI后心臟破裂的發(fā)生率非常高。本研究發(fā)現(xiàn)，與對照組和SAP組比較，UAP組和AMI組hs-CRP、IL-18明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，提示hs-CRP、IL-18可能與ACS中斑塊的不穩(wěn)定性密切相關(guān)，促進了易損斑塊的形成與破裂，機制可能是ACS期hs-CRP能激活經(jīng)典的補體途徑，釋放炎癥介質(zhì)，促進炎癥細胞的黏附聚集，同時啟動外源性凝血途徑，加強局部血栓的形成［11］。IL-18是一種重要的促炎介質(zhì)，能促進巨噬細胞產(chǎn)生IL-6、TNF等炎癥因子，同時還能抑制血管內(nèi)皮細胞增殖，誘導(dǎo)細胞間黏附分子表達，介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，促進動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展［12-13］。兩者相互作用，共同參與了ACS的發(fā)生與發(fā)展。

炎癥反應(yīng)中大量炎癥細胞產(chǎn)生，炎癥介質(zhì)的釋放促進了動脈粥樣硬化的發(fā)展，而抗炎細胞數(shù)量減少和抗炎因子水平的下降可能進一步加劇了ACS的進展。IL-35是一種新型的細胞因子，是由一個α鏈（IL-12a）p35和β鏈Ebi 3組成的異源二聚體蛋白，由T細胞（treg細胞）分泌，具有調(diào)節(jié)免疫功能，能抑制IL-17等炎癥因子的表達，抑制炎癥反應(yīng)［14-15］。Lin Y等［16］研究發(fā)現(xiàn)，血漿IL-35水平降低與冠狀動脈疾病的左心室射血分數(shù)密切相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，與對照組和SAP組比較，UAP、AMI組IL-35水平明顯下降;與UAP組比較，AMI組IL-35水平明顯下降，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），結(jié)果提示，IL-35水平的下降，抗炎功能減弱，促進了ACS的發(fā)展。本研究對IL-35與Hs-CRP、IL-18相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，校正多種危險因素后，ACS組中血漿IL-35表達水平仍與hs-CRP、IL-18呈負相關(guān)。提示當(dāng)ACS在各種危險因素作用下，可使血管內(nèi)皮功能受損，單核細胞黏附聚集，吞噬脂質(zhì)，形成泡沫細胞。同時血管內(nèi)單核巨噬細胞等各種炎癥細胞浸潤，可釋放基質(zhì)蛋白酶，降解細胞基質(zhì)，破壞內(nèi)彈力膜，同時降解血管基底膜，加速炎癥細胞的跨膜轉(zhuǎn)移，破壞斑塊的穩(wěn)定性。ACS患者機體內(nèi)大量炎癥因子存在，Treg功能細胞減少，IL-35分泌減少，促炎和抗炎失衡，促進了ACS的進展。

本研究提示，IL-35、hs-CRP、IL-18與ACS關(guān)系密切，聯(lián)合這些指標的檢測，有利于早期發(fā)現(xiàn)ACS及進行危險分層，減少冠脈事件的發(fā)生。本研究樣本量相對較少，有待于更大樣本量進行證實。

:

［1］KEMPE S，HEINZ P，KOKAI E，et al.Epstein-Barr Virus-Induced gene-3 is expressed in human atheroma plaques［J］.A-merican Journal of Pathology，2009，175（1）:440-447.

［2］ASERI Z A，HABIB S S，ALHOMIDA A S，et al.Relationship of high sensitivity C-reactive proteinwith cardiac biomarkers in patients presenting with acute coronary syndrome［J］.Journal of the College of Physicians and Surgeons-Pakistan:JCPSP，2014，24（6）:387-391.

［3］MLAKAR P，SALOBIR B，COBO N，et al.The effect of Short-Term cardiac rehabilitation after acute myocardial infarction on High-Sensitivity C-Reactive protein［J］.Metabolic Syndrome and Related Disorders，2014，12（2）:149-155.

［4］RAGINO Y I，CHERNYAVSKI A M，POLONSKAYA Y V，et al.Activity of the inflammatory process in different types of unstable atherosclerotic plaques［J］.Bulletin of Experimental Biology and Medicine，2012，153（2）:186-189.

［5］VIRAMANI R，KOLODGIE F D，BURKE A P，et al.Lessons from sudden coronary death:a copprehensive morphological classification scheme for atherosclerotic lesions［J］.Arteriosclerosis，Thrombosis，and Vascular Biology，2000，20（5）:1262-1275.

［6］BETTINI M，CASTELLAW A H，LENNON G P，et al.Prevention of autoimmune diabetes by ectopic pancreatic beta-Cell expression of interleukin-35［J］.Diabetes，2012，61（6）:1519-1526.

［7］JIN Erhui，WANG Chenfang，HU Qianqian，et al.The regular distribution and expression pattern of immunosuppressive cytokine IL-35 in mouse uterus during early pregnancy［J］.Romanian Journal of Morphology and Embryology，2014，55（4）:1353-1361.

［8］KATZ P，LEITER L A，MELLBIN L，et al.The clinical burden of type 2 diabetes in patients with acute coronary syndromes:Prognosis and implications for short and long-term management［J］.Diabetes＆ Vascular Disease Research:Official Journal of the International Society of Diabetes and Vascular Disease，2014，11（6）:395-409.

［9］WEHLING M.Non-steroidal anti-inflammatory drug use in chronic pain conditions with special emphasis on the elderly and patients with relevant comorbidities:management and mitigation of risks and adverse effects［J］.European Journal of Clinical Pharmacology，2014，70（10）:1159-1172.

［10］RIDKER P M，HENNEKENS C H，BUFING J E，et al.C-reacllve protein and other nlRrkers of inflammation is the prediction of cardiovascular disease in women［J］.N EngI J Med，2000，342（12）:836-843.

［11］ZHANG Yachen，TANG Yong，CHEN Yu，et al.Oxidized Low-Density lipoprotein and C-Reactive protein have combined utility for better predicting prognosis after acute coronary syndrome［J］.Cell Biochemistry and Biophysics，2014，68（2）:379-385.

［12］SHIMIZU K，SHIMOMURA K，TOKUYAMA Y，et al.Association between Inflammatory Biomarkers and Progression of Intracranial Large Artery Stenosis after Ischemic Stroke［J］.Journal of Stroke ＆ Cerebrovascular Diseases，2013，22（3）:211-217.

［13］KAPOOR D，TRIKHA D，VIJAYVERGIYA R，et al.Conventional therapies fail to target inflammation and immune imbalance in subjects with stable coronary artery disease:A systembased approach［J］.Atherosclerosis，2014，237（2）:623-631.

［14］CHATURVEDI V，COLLISON L W，GUY C S，et al.Cutting edge:Human regulatory T cells require IL-35 to mediate suppression and infectious tolerance［J］.Journal of Immunology，2011，186（12）:6661-6666.

［15］CHEN Chen，DENG Yanhan，CHEN Huilong，et al.Decreased concentration of IL-35 in plasma of patients with asthma and COPD［J］.Asian Pacific Journal of Allergy and Immunology，2014，32（3）:211-217.

［16］LIN Y，HUANG Y，LU ZS，et al.Decreased plasma IL-35 levels are related tothe left entricular ejection fraction in coronary artery diseases［J］.PLoS one，2012，7（12）:e52490.

Correlation Research on the changes of patients with Acute Coronary Syndrome between IL-35，hs-CRP and IL-18

CHEN Enping1，DU Ligen1，QIU Jian2*，ZHANG Yuan2
（1.The Second people's Hospital of Longgang Distric in Shenzhen Department of Cardiology，Shenzhen 518112，China;2.Guanzhou General Hospital of Guangzhou Military Command，Guangzhou 510010，China）

ObjectiveBy investigating the changes of IL-35，hs-CRP，IL-18 in patients with selected patients，to evaluae the changes and correlation of the indexes and discuss the 1mechanism in the development of ACS.MethodsOne hundred and twentty-eight patients given coronary angiography and clinical diagnosis were divided into four groups:control group，stable angina group，unstable angina group and the acute myocardial infarction.detection of IL-35、hs-CRP、IL-18 index were detected by Enzyme linked immunosorbent assay.ResultsThe level of IL-35 were significantly lower than that in control group and SAP group，however，hs-CRP，IL-18were significantly higher.Compared with SAPgroup，The level of the IL-35 were lower in the group of UAPgroup and AMI group.hower，the level of the hs-CRP，IL-18 were higher.The level of the hs-CRP，IL-18 in the AMI group.were higher The differences were statistically significant（P ＜0.05）.Partial correlation analysis adjusted for sex，age，diabetes mellitus，high blood pressure and smoking factors，the expression of IL-35 in plasma in coronary heart disease group level still negative correlated with hs-CRP and IL-18（r1'=－0.482，r2'= －0.365，P ＜0.01）.ConclusionIL-35 and hs-CRP，IL-18 are closely related，suggesting that the imbalance between proinflammatory and anti-inflammatory and promote the occurrence and development of ACS，the joint detection of multiple indicators is beneficial for early risk stratification of ACS，reduce the incidence of coronary events.

acute coronary syndrome;interleukin-35;high sensitivity C reactive protein;interleukin-18

R256.22

A

2095－6258（2015）04－0841－03

10.13463/j.cnki.cczyy.2015.04.069

廣東省科技計劃項目（2012B031800418）;深圳市龍崗區(qū)科技項目（201406083001019）。

陳恩平（1972－），男，副主任醫(yī)師，主要從事冠心病的發(fā)病機制與診療研究。

邱 健，主任醫(yī)師，博士研究生導(dǎo)師，電子信箱－754488242@qq.com

2014－12－31）