孫永平　曹榮祥　郭成寶等

摘要： 研究了南京地區(qū)主栽兔眼系列藍(lán)莓品種燦爛、粉藍(lán)、頂峰、梯夫藍(lán)、園藍(lán)的外植體啟動(dòng)培養(yǎng)，優(yōu)化了WPM基礎(chǔ)培養(yǎng)基適合硬度的瓊脂含量和酸度，基本W(wǎng)PM培養(yǎng)基的瓊脂濃度為12 mg/L，加壓滅菌后pH值為5.8；新發(fā)枝條的后端粗莖段萌發(fā)率可以達(dá)到95%，接種50 d后大多成小植株；篩選出適合外植體萌發(fā)的培養(yǎng)基WPM+1.0 mg/L6-BA +1.5 mg/L ZT ，在此培養(yǎng)基上不同品種兔眼藍(lán)莓萌發(fā)率較高。

關(guān)鍵詞： 兔眼藍(lán)莓；組織培養(yǎng)；外植體；啟動(dòng)培養(yǎng)

中圖分類(lèi)號(hào)： S663.904+.3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號(hào)：1002-1302（2015）08-0045-01

藍(lán)莓（Vaccinium spp.）作為一種新興果樹(shù)，是近年來(lái)許多國(guó)家發(fā)展十分迅速的優(yōu)良果樹(shù)之一，尤其是歐美國(guó)家。英國(guó)權(quán)威營(yíng)養(yǎng)學(xué)家將藍(lán)莓列為 15 種健康食品之首，聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織也將藍(lán)莓列為人類(lèi)五大健康食品之一 [1]。藍(lán)莓進(jìn)行商業(yè)化栽培時(shí)間不足百年，但發(fā)展迅速。中國(guó)科學(xué)院南京植物所于 1987 年開(kāi)始藍(lán)莓栽培研究，并篩選出適合中國(guó)南方地區(qū)栽培的優(yōu)良品種 [2]，南京溧水白馬地區(qū)種植藍(lán)莓20余年，育苗、生產(chǎn)上都形成了較大的規(guī)模，在帶動(dòng)農(nóng)民致富上作用顯著。

目前，生產(chǎn)上農(nóng)戶(hù)藍(lán)莓繁苗大多通過(guò)扦插繁殖，常規(guī)繁殖存在速度慢、品種容易退化的缺點(diǎn)，利用組培快繁技術(shù)既可加快繁殖速度又能保持品種的種性 [3]。本試驗(yàn)進(jìn)行了本地區(qū)主栽兔眼藍(lán)莓組培外植體啟動(dòng)培養(yǎng)研究，以期為藍(lán)莓工廠化育苗奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

材料為兔眼藍(lán)莓品種燦爛、粉藍(lán)、頂峰、梯夫藍(lán)、園藍(lán)新生綠枝，于2014年6月取于南京市農(nóng)科所金陵綠谷現(xiàn)代園藝科技示范園。

1.2 試驗(yàn)方法

將健壯的植株上剪取的新生嫩綠枝條分為前端莖段、中端莖段和后端粗莖段3部分，每部分枝條剪成帶2個(gè)腋芽枝段作為1個(gè)莖段進(jìn)行后繼消毒處理。莖段用流水沖洗 120 min，之后先用50%的84消毒液浸泡消毒30 min，再用無(wú)菌水沖洗30 min，后用75%的乙醇浸泡60 s，然后用0.1% HgCl2處理15～30 min，最后用無(wú)菌水沖洗5～6次。在超凈工作臺(tái)上將腋芽朝上，接入誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基中。以WPM為基本培養(yǎng)基，加蔗糖30 g/L，瓊脂8、10、12、14、16、18 g/L，用0.5 mol/L H2SO4調(diào)整pH值到6.5。培養(yǎng)室溫度為 （25±1） ℃，光照度1 500～2 000 lx，光照時(shí)間8 h/d，誘導(dǎo)培養(yǎng)基為WPM+1.0～3.0 mg/L BA+0.5～4.5 mg/L ZT，分別于50 d對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

2 結(jié)果與分析

2.1 WPM基礎(chǔ)培養(yǎng)基硬度和酸度的優(yōu)化

由表1可知，在高溫加壓之前，WPM培養(yǎng)基pH值在6.5左右，高溫加壓滅菌后，降低到5.8左右，在藍(lán)莓合適生長(zhǎng)的酸度范圍。從培養(yǎng)基硬度看，滅菌前瓊脂含量在8～10 mg/L時(shí)硬度適合，而滅菌后瓊脂含量在12 mg/L時(shí)基本培養(yǎng)基的硬度合適。因此優(yōu)化出藍(lán)莓基本W(wǎng)PM培養(yǎng)基的瓊脂濃度應(yīng)在12 mg/L，加壓滅菌前調(diào)整pH值在6.5。

2.2 藍(lán)莓嫩枝不同部位莖段萌發(fā)率的差異

由表2可知，藍(lán)莓嫩枝不同部位莖段萌發(fā)率存在一定差異，新發(fā)枝條的后端粗莖段腋芽的萌發(fā)率最高，達(dá)到95%，而中端和前端莖段萌發(fā)率只有20%。接種50 d后，芽大多已經(jīng)長(zhǎng)成小植株。

2.3 不同激素濃度對(duì)兔眼藍(lán)莓不同品種萌發(fā)率的影響

由表3可知，不同品種在不同激素配比下，萌發(fā)率差異較大，頂峰在較低濃度下（1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L ZT）萌發(fā)率最高，達(dá)到91%，而園藍(lán)、燦爛在這一濃度配比下萌發(fā)率為0。綜合比較供試5個(gè)品種萌發(fā)率，發(fā)現(xiàn)1.0 mg/L 6-BA 和1.5 mg/L ZT配比下不同品種兔眼藍(lán)莓都有萌發(fā)且萌發(fā)率較高。因此，選擇WPM+1.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L ZT培養(yǎng)基作為兔眼藍(lán)莓啟動(dòng)培養(yǎng)的優(yōu)化培養(yǎng)基。

3 小結(jié)

本試驗(yàn)對(duì)南京地區(qū)主栽兔眼藍(lán)莓組培外植體啟動(dòng)培養(yǎng)進(jìn)行了研究，燦爛、梯夫藍(lán)、頂峰是適宜鮮食品種，園藍(lán)和粉藍(lán)是適于加工的品種 [4]。優(yōu)化了WPM基礎(chǔ)培養(yǎng)基的適合硬度的瓊脂含量和酸度，WPM培養(yǎng)基的瓊脂濃度在12 mg/L，加壓滅菌前調(diào)整pH值為 6.5，可獲得適于藍(lán)莓培養(yǎng)的培養(yǎng)基硬度和酸度。新發(fā)枝條的后端粗莖段的萌發(fā)率可以達(dá)到95%，接種50 d后大多成小植株；篩選出適合外植體萌發(fā)的激素配比培養(yǎng)基WPM+1.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L ZT，不同品種兔眼系列藍(lán)莓燦爛、粉藍(lán)、頂峰、梯夫藍(lán)、園藍(lán)萌發(fā)率較高。

參考文獻(xiàn)：

[1] 李亞?wèn)|. 藍(lán)莓優(yōu)質(zhì)豐產(chǎn)栽培技術(shù)[M]. 北京：中國(guó)三峽出版社，2007.

[2]黃國(guó)輝，姚 平. 藍(lán)莓組培苗瓶外生根的研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（4）：227-228.

[3]王淑珍，來(lái)文國(guó)，周歷萍，等. 南高叢藍(lán)莓組培再生技術(shù)研究[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2011（21）：119-120.

[4]聶 飛，文光琴，方品武. 5個(gè)兔眼藍(lán)莓品種在黔中地區(qū)的表現(xiàn)及栽培評(píng)價(jià)[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，40（8）：126-128.