李　穎，許秀舉，鄧　洋（包頭醫(yī)學(xué)院營養(yǎng)研究所，內(nèi)蒙古包頭014060）

苦蕎茶對(duì)衰老小鼠肝組織SOD和MDA影響的研究

李穎，許秀舉*，鄧洋
（包頭醫(yī)學(xué)院營養(yǎng)研究所，內(nèi)蒙古包頭014060）

摘要：研究苦蕎茶對(duì)衰老小鼠肝組織SOD、MDA是否有影響。采用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的方法對(duì)造模衰老小鼠的SOD和MDA酶進(jìn)行研究?？嗍w茶低、中、高劑量組小鼠的肝組織SOD含量高于衰老小鼠模型組，低于空白對(duì)照組；苦蕎茶低、中、高劑量組小鼠的肝組織MDA含量低于衰老小鼠模型組?？嗍w茶能有效地降低衰老對(duì)小鼠的肝組織SOD和MDA的影響。

關(guān)鍵詞：苦蕎茶；衰老；SOD；MDA

黃酮類化合物是一種很強(qiáng)的抗氧化劑，可有效清除體內(nèi)的氧自由基，這種抗氧化作用可以阻止細(xì)胞的退化、衰老，也可阻止癌癥的發(fā)生[1-3]。研究發(fā)現(xiàn)，苦蕎茶中含有黃酮類物質(zhì)，其主要成分為蘆丁[4]。蘆丁含量占苦蕎總黃酮的70%～90%，具有降低毛細(xì)血管脆性，改善微循環(huán)的作用，現(xiàn)在臨床上主要用于糖尿病、高血壓的輔助治療。本試驗(yàn)通過對(duì)衰老模型小鼠的肝組織SOD和MDA酶的研究，探討苦蕎茶對(duì)抗氧化及抗衰老的作用。

1　對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象

昆明種小鼠，均為雄性，體重（20.89±2.62）g，由內(nèi)蒙古大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，為清潔級(jí)動(dòng)物。合格證號(hào)：SCX（蒙）2002-0001。

1.2主要儀器及試劑

1.2.1儀器

TGL-16B高速臺(tái)式離心機(jī)：上海分析儀器廠；儀表恒溫水浴鍋：北京金北德工貿(mào)有限公司；S-Z型快速混勻器：江蘇金壇市金城國勝實(shí)驗(yàn)儀器廠；T6新悅分光光度計(jì)：北京普析通用儀器有限公司；HC.TP11B.5架盤藥物天平：北京醫(yī)用天平廠；TG328A電光分析天平：上海天平儀器廠。

1.2.2試劑

D-半乳糖（批號(hào)060227）：美國Amresco公司；超氧化物歧化酶（SOD）檢測(cè)試劑盒（批號(hào)20130205）、丙二醛（MDA）檢測(cè)試劑盒（批號(hào)20130205）、考馬斯亮蘭蛋白測(cè)定試劑盒（批號(hào)20130104）：南京建成生物工程研究所；苦蕎茶（批號(hào)2012-11-03）：包頭市娜其格爾食品有限公司。

1.3研究方法

本研究采用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行，試劑采用南京建成研究所提供試劑盒的方法測(cè)定超氧化物歧化酶，采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件分析試驗(yàn)結(jié)果。

動(dòng)物分組及處理：將60只健康昆明種雄性小鼠，隨機(jī)分為5組，每組12只，分別為空白對(duì)照組、衰老模型組、低劑量苦蕎茶組、中劑量苦蕎茶組和高劑量苦蕎茶組。其中苦蕎茶低、中和高劑量組分別按苦蕎茶2.5、5、10 g/kg的劑量給予。試驗(yàn)期間空白對(duì)照組每天腹腔注射生理鹽水120 mg/kg，其余4組每天腹腔注射D-半乳糖生理鹽水溶液120 mg/kg，連續(xù)42 d，適應(yīng)性喂養(yǎng)4 d開始灌胃，空白對(duì)照組和衰老模型組每天灌胃涼白開水（5 g/kg），其余各組按相應(yīng)的苦蕎茶劑量進(jìn)行灌胃，連續(xù)42 d。在試驗(yàn)期間，每周稱一次體重，觀察小鼠的一般情況。第42天時(shí)斷頭處死小鼠，稱體重、肝重量，取肝組織測(cè)定SOD和MDA的含量。

2　結(jié)果

2.1小鼠體重變化情況

小鼠體重變化情況見表1。

表1　各組小鼠每周平均體重值Table 1　The weekly average weight of each groups

如表1所示，在試驗(yàn)進(jìn)程中各組小鼠體重逐漸增加，空白對(duì)照組與3個(gè)劑量組之間平均體重?zé)o顯著性差異（P＞0.05），而衰老模型組與其它4組之間的平均體重有顯著性差異（P<0.01），說明D-半乳糖對(duì)小鼠體重增長有明顯影響。

2.2肝組織SOD檢測(cè)情況

各試驗(yàn)組小鼠肝SOD的含量見表2。

表2　各試驗(yàn)組小鼠肝SOD的含量Table 2　The SOD in the liver tissue of the experimental group

方差齊性檢驗(yàn)顯示5組動(dòng)物SOD含量方差齊。采用單因素方差分析，結(jié)果顯示空白對(duì)照組與衰老模型組和苦蕎茶低劑量組相比較，結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）；衰老模型組與苦蕎茶低、中、高劑量組相比較，結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。提示苦蕎茶對(duì)衰老小鼠肝組織SOD酶的降低有一定的保護(hù)作用。

2.3肝組織MDA檢測(cè)情況

方差齊性檢驗(yàn)顯示5組動(dòng)物MDA含量方差齊。采用單因素方差分析，結(jié)果顯示空白對(duì)照組與衰老模型組和苦蕎茶高劑量組相比較，結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01），與苦蕎茶低、中劑量組相比較，結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）；衰老模型組與苦蕎茶低、中、高劑量組比較均有顯著性差異（P<0.01）；苦蕎茶高劑量組與低、中劑量組比較均有顯著性差異（P<0.01）；苦蕎茶中劑量組和低劑量組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。提示苦蕎茶對(duì)衰老小鼠肝組織MDA酶的升高有一定的抑制作用。結(jié)果見表3。

表3　各試驗(yàn)組小鼠肝組織MDA測(cè)定結(jié)果比較Table 3　The comparison of mouse liver tissue MDA of each experimental groups

3　討論

機(jī)體代謝過程中會(huì)產(chǎn)生氧自由基（包括·O2-、·OH、1O2、H2O2），生理正常情況下，能夠被體內(nèi)的抗氧化酶（如SOD、GSH-Px等）或抗氧化劑迅速清除，使體內(nèi)自由基的產(chǎn)生和清除處于平衡狀態(tài)，一般不會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷作用。隨著年齡的增長，機(jī)體內(nèi)抗氧化酶的活性會(huì)下降，使體內(nèi)清除自由基的能力下降。當(dāng)氧自由基活性會(huì)下降，使體內(nèi)清除自由基的能力下降。當(dāng)氧自由基與生物膜中的不飽和脂肪酸發(fā)生過氧化反應(yīng)時(shí)，生物膜的結(jié)構(gòu)和功能被破壞，從而引起細(xì)胞的衰老和死亡[5]。

衰老模型的建立是評(píng)價(jià)抗衰老藥物以及研究抗衰老機(jī)制的關(guān)鍵，本試驗(yàn)所使用的是D-半乳糖所致衰老模型小鼠。一段時(shí)間內(nèi)，連續(xù)對(duì)小鼠進(jìn)行腹腔注射大量的D-半乳糖，而D-半乳糖在還原酶作用下生成的半乳糖醇不能被細(xì)胞代謝，而沉積在細(xì)胞內(nèi)，會(huì)增大細(xì)胞滲透壓，破壞細(xì)胞的正常代謝，最終導(dǎo)致衰老的發(fā)生[6-7]。

研究顯示，小鼠在42 d喂飼苦蕎茶，腹腔注射D-半乳糖造模后，空白對(duì)照組與衰老模型組相比較，結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05），提示造模成功。衰老模型組與苦蕎茶低、中、高劑量組相比較，飲用苦蕎茶可顯著減少肝組織由于衰老引起的SOD酶的降低（P<0.05），降低肝組織由于衰老引起的MDA酶的升高（P<0.01）。提示苦蕎茶可通過抗氧化作用，從而對(duì)衰老導(dǎo)致的肝組織SOD酶的下降起到保護(hù)作用，對(duì)衰老小鼠肝組織MDA酶的升高有一定的抑制作用。

參考文獻(xiàn)：

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DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2015.18.011

收稿日期：2014-03-30

作者簡介：李穎（1989—），女（漢），在讀研究生，研究方向：營養(yǎng)保健與食品衛(wèi)生安全。

Study the Effect of Buckwheat Tea on Liver Tissue SOD and MDA of Aging Mice

LI Ying，XU Xiu-ju*，DENG Yang
（Nutrition Research Institute，Baotou Medical College，Baotou 014060，Inner Mongolia，China）

Abstract：Studying the effect of buckwheat tea on aging mice liver tissue related enzymes.Studying the molding aging mice liver tissue related enzymes through animal experimental method.Low，medium and high dose of the buckwheat tea groups of mice liver tissue SOD content was higher than that of aging mice model group，lower than the normal control group.And the Low，medium and high dose of the buckwheat tea groups of mice liver tissue MDA content was higher than that of aging mice model group，lower than the normal control group. Buckwheat tea can effectively reduce the damage to the aging mice liver tissue SOD and MDA.

Key words：buckwheat tea；aging；SOD；MDA