楊 麗，董 偉,周 堃,王月德,劉曉芳,葉艷青

(云南民族大學(xué) 民族藥資源化學(xué)國家民委-教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650500)

火焰原子吸收法測定傣藥人面果樹莖皮中7種微量元素的含量

楊 麗，董 偉,周 堃,王月德,劉曉芳,葉艷青

(云南民族大學(xué) 民族藥資源化學(xué)國家民委-教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650500)

采用傳統(tǒng)消解法對傣藥人面果樹莖皮進(jìn)行消解,并在火焰原子吸收分光光度計最佳工作條件下,用外標(biāo)法測定藥中鋅、銅、錳、鈷、鐵、鉛、鎘7種微量元素的含量,并計算其溶出率.結(jié)果顯示,7種元素在原藥及湯劑中的含量不同,其含量順序?yàn)镕e>Cu>Mn>Zn>Pb>Co>Cd.它們的溶出率也有一定差異,Cd的溶出率最大,Zn的溶出率最小.實(shí)驗(yàn)檢出限均小于 0.003 8 μg/mL,加標(biāo)回收率在93.25%～109.6%之間,相對偏差RSD≤2.90%,測定的結(jié)果精密度和準(zhǔn)確度令人滿意,可為傣藥人面果樹的有效成分研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù).

原子吸收;人面果樹;微量元素;溶出率

藤黃屬(Garciniagenus)植物隸屬于藤黃科,亦稱山竹子屬,約有450種,多為喬木或灌木,主要分布于東半球熱帶地區(qū),生長在溫暖多濕的熱帶密林中.我國有21種,主要分布于云南、廣西、廣東、海南、臺灣和西藏及沿海部分地區(qū)[1].人面果(garciniaxanthoymus)高達(dá)10～20 m,是我國傳統(tǒng)傣藥之一,生于海拔100～1 000 m的溝谷、丘陵、潮濕的密林中,主要分布在云南南部和西南部.人面果作為藤黃科植物,大葉藤黃,其莖、葉、漿汁、莖皮和種子,具有驅(qū)蟲、清火退熱、解食物中毒之功效.研究表明人面果還具有較廣泛的生物活性,如抗癌、抗細(xì)胞毒素、抗HIV病毒等,也可以用于治療腹瀉,痢疾及肝膽疾病[2].

無機(jī)元素是人體必不可少的,缺少無機(jī)元素會引起人體不適[3],而無機(jī)元素中的微量元素更是關(guān)鍵,近年來人們對中成藥、藥食同源食品的微量元素的研究與探討日漸深入[4],得到了醫(yī)學(xué)界和營養(yǎng)學(xué)家的高度重視[5].現(xiàn)代醫(yī)學(xué)已證明,微量元素與人體健康、疾病防治有著密切的關(guān)系[6],對中藥中微量元素含量及溶出率的研究,不僅能了解微量元素的含量及其存在狀態(tài),而且對于中藥質(zhì)量的評價和指導(dǎo)臨床合理用藥都具有重要的現(xiàn)實(shí)意義[7].本研究對人面果中7種元素的含量及溶出率進(jìn)行了測定,旨在為探討人面果中微量元素與藥效的關(guān)系提供科學(xué)依據(jù).

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑及材料

濃硝酸,濃鹽酸,30% H2O2均為分析純;人面果樹莖皮原藥,購于云南省西雙版納傣族自治州民族醫(yī)藥研究所;多種元素標(biāo)準(zhǔn)儲備液購于國家鋼鐵材料測試中心,質(zhì)量濃度均為 1 000 μg/mL.

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

AA-6300型原子吸收分光光度計(日本島津公司);電子天平(奧豪斯儀器上海有限公司)；101-電熱恒溫干燥箱(上海儀器廠有限公司);DB-3自動恒溫不銹鋼電熱板(常州國華儀器有限公司);WL-200高速中藥粉碎機(jī)(瑞安市威力制藥機(jī)械廠);EPED-20TH實(shí)驗(yàn)超純水器(南京易普易達(dá)科技發(fā)展有限公司).

火焰原子吸收分光光度計工作條件如表1.

表1 火焰原子吸收分光光度計工作條件

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 繪制各元素標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍如表2.

表2 各元素配制質(zhì)量濃度的線性范圍

對試樣空白測定12次,計算其標(biāo)準(zhǔn)偏差,以3倍空白值的標(biāo)準(zhǔn)偏差比上標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率作為檢出限.各種元素的檢出限,線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)見表3.

表3 線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)

1.3.2 樣品處理

人面果樹莖皮原藥用自來水快速沖洗干凈后,用蒸餾水洗2～3次,再用超純水洗凈,置于60～65 ℃烘箱中烘干,取出后粉碎,過0.441 nm的篩,將篩好的粉末置于密封袋中備用.

準(zhǔn)確稱取粉碎的人面果樹莖皮藥用樣品4份,每份5 g(精確至 0.000 1 g)于100 mL燒杯中,加20.00 mL的濃硝酸浸泡過夜,次日加入高氯酸5.00 mL,蓋上表面皿,于電熱板上加熱消解,將溶液消解至2 mL左右,加入5～6滴30% H2O2,直至消解液澄清透明后冷卻,冷卻后移至25 mL容量瓶中,用超純水定容至刻度,待測.隨即在給定的條件下用火焰原子吸收法測量原生藥中各元素的含量.

準(zhǔn)確稱取粉碎的人面果樹莖皮藥用樣品4份,每份5 g(精確至 0.000 1 g)放入100 mL燒杯中,加入60.00 mL超純水,在電爐中用大火加熱至沸騰后改文火慢煎,將其維持微沸40 min后冷卻過濾;濾渣再加60.00 mL超純水同法煎煮,過濾;濾渣再加70.00 mL超純水依上法得水煎液.合并3次濾液,文火濃縮至20 mL,冷卻,依上法消解,定容至25 mL,待測.隨即在給定的條件下用火焰原子吸收法測量湯劑中各元素的含量.

1.3.3 消化試劑及消化條件的選擇

消解試劑使用最廣泛的酸是HNO3、HCl、HF、HClO4等,其中HNO3是一種強(qiáng)氧化劑,廣泛地用來釋放生物樣品中的痕量元素.為了完全破壞復(fù)雜的有機(jī)基體往往需要120 ℃以上的溫度,或加其它氧化劑,如H2O2和HClO4.本實(shí)驗(yàn)選擇HNO3和HClO4的混酸體積比(4∶1)作為消解試劑,采用逐步升溫的方法(120～160 ℃),當(dāng)消化液呈淺黃色后加入5～6滴30% H2O2即可完全消解.

2 結(jié)果與分析

2.1 樣品測定結(jié)果

由表4中測定結(jié)果可知,人面果樹莖皮中所測各元素的溶出率相差不大,都在50%左右.

表4 樣品測定結(jié)果(n=4)

2.2 回收率實(shí)驗(yàn)

為了考察方法的可靠性,做了加標(biāo)回收試驗(yàn),結(jié)果見表5.

表5 回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=4)

由表5可知,該方法測定人面果樹莖皮中鋅、銅、錳、鈷、鐵、鉛、鎘均有較好的回收率.

3 結(jié)果與討論

1) 本次實(shí)驗(yàn)用電熱板從120～160 ℃逐步升溫消解法處理人面果樹莖皮藥材,具有設(shè)備簡單安全、操作簡便、消解完全等特點(diǎn),實(shí)驗(yàn)得出的數(shù)據(jù)表明精密度和準(zhǔn)確度良好；

2) 人面果樹莖皮中富含鐵元素,鐵是血紅蛋白的組成元素[8],人體缺鐵會導(dǎo)致貧血[9],較嚴(yán)重的還影響智力和體格的發(fā)育,導(dǎo)致消化功能障礙并影響營養(yǎng)物質(zhì)吸收,影響免疫功能[10]；

3) 不同地區(qū)地殼表面所含無機(jī)礦物質(zhì)各不相同,因此,同種物種中元素的含量差異也很大.中藥多以水煎液服用,由于各種微量元素在中藥中的存在形態(tài)不同,他們在水煎液中的溶出率也不同,因此,我們對水煎液中微量元素的溶出率進(jìn)行測定,有助于對中藥湯藥及其藥效的進(jìn)一步研究.

[1] 鐘芳芳,梅之南,楊光忠,等.傣藥人面果化學(xué)成分研究[J].中國民族醫(yī)藥雜志,2008(2):46-47.

[2] 鐘芳芳,趙應(yīng)紅,陳玉,等.人面果樹皮中新酚性成分的研究[C]//第九屆全國中藥和天然藥物學(xué)術(shù)研討會大會報告及論文集.南昌,2007:600-602.

[3] 羅雯,馬金晶,張龍旺,等.微波消解-ICP-MS測定傣藥嘎哩啰樹皮中的11種無機(jī)元素[J].光譜學(xué)與光譜分析,2012,32(9):2562-2565.

[4] 李加林,吳素珍,李銀保,等.中藥槐米和遠(yuǎn)志中微量元素的測定[J].時珍國醫(yī)國藥,2008,19(2):332-333.

[5] 韓麗琴,董順福,劉建華.治療呼吸系統(tǒng)疾病中草藥微量元素含量測定[J].光譜學(xué)與光譜分析,2008,28(2):453-455.

[6] 張辰露,李崇勇.中藥娑羅子中微量元素的光譜分析[J].時珍國醫(yī)國藥,2010,21(5):1171-1172.

[7] 侯洪波,徐娟,楊保海,等.火焰原子吸收法測定中草藥云南黃花稔中微量元素含量[J].微量元素與健康研究,2013(4):19-20.

[8] 李鴻舉.關(guān)于人類記憶思維存在于線粒體(生物鐵氧體)的推論[J].醫(yī)藥前沿,2013,7(19):46-47.

[9] 丁天凌,陳勤奮.輸血依賴性鐵過載的評估及治療進(jìn)展[J].中國輸血雜志,2010,23(6):421-423.[10] 許琳,李蕤,余庭華.高血壓患者血尿酸和血脂水平的相關(guān)探討[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2011,32(11):1261-1262.

(責(zé)任編輯 莊紅林)

Study on the contents and the dissolution rate of the seven microelements in the stem ofGarciniaxanthochymus

YANG Li,DONG Wei,ZHOU Kun,WANG Yue-de,LIU Xiao-fang,YE Yan-qing

(Key Laboratory of Chemistry in Ethnic Medicinal Resources,State Ethnic Affairs Commission and Ministry of Education of China,Yunnan Minzu University,Kunming 650031,China)

This research aims to determine the dissolution rate of seven microelements in the stem of Garcinia xanthochymus by the traditional method of wet digestion. The metal ions (Zn,Cu,Mn,Co,Fe,Pb,Cd) in the digested samples are determined by the Flame Atomic Absorption Spectrometry. The result shows that the contents of the seven microelements in the crude drug and its decoction are different. The contents of these seven elements rank as the following: Fe>Cu>Mn>Zn>Pb>Co>Cd. The dissolution rate of Cd is the highest,while that of Zn is the lowest. The result shows that the detection limits are all below 0. 003 8 μg/mL,the addition standard recoveries are in the range of 93. 25%—109.6%,and the relative standard deviations are less than 2.90%. The result is satisfactory,and it can offer some basic data for the further study of active components in Garcinia xanthochymus.

atomic absorption;Garciniaxanthoymus; microelement; dissolution rate

2014-11-27.

國家自然科學(xué)基金(51062018);云南民族大學(xué)化學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院SRT創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(2013HXSRTY04); 云南民族大學(xué)研究生創(chuàng)新基金科研項(xiàng)目(2014YJY72).

楊麗(1982-),女,碩士研究生，講師.主要研究方向:分離分析科學(xué).

葉艷青(1967-),女,碩士,教授,碩士生導(dǎo)師.主要研究方向:分離分析科學(xué).

R284.1

A

1672-8513(2015)02-0129-03