李圓圓，付旭鋒,2，趙亞嫻，蘇紅巧，秦占芬,*

1. 中國科學院生態(tài)環(huán)境研究中心 環(huán)境化學與生態(tài)毒理學國家重點實驗室，北京 100085 2. 云南大學生命科學學院，昆明 650091

雙酚A與其替代品對黑斑蛙急性毒性的比較

李圓圓1，付旭鋒1,2，趙亞嫻1，蘇紅巧1，秦占芬1,*

1. 中國科學院生態(tài)環(huán)境研究中心 環(huán)境化學與生態(tài)毒理學國家重點實驗室，北京 100085 2. 云南大學生命科學學院，昆明 650091

雙酚F(BPF)和雙酚S(BPS)作為雙酚A(BPA)替代品廣泛使用，然而有關BPF和BPS的毒性數據非常有限。采用系列濃度的BPA、BPF、BPS溶液，暴露黑斑蛙胚胎和蝌蚪96 h，通過半致死濃度(LC50)、最小生長抑制濃度(MCIG)和致畸率等指標比較3種化合物的急性毒性。結果顯示：100 mg·L-1BPS未導致黑斑蛙胚胎及蝌蚪畸形和死亡。BPA和BPF對黑斑蛙胚胎的96 h-LC50分別為7.68 mg·L-1和7.99 mg·L-1，MCIG分別為4.47 mg·L-1和4.77 mg·L-1，最大致畸率為33.33%；對蝌蚪的96 h-LC50分別為9.00 mg·L-1和9.52 mg·L-1。依據《化學農藥環(huán)境安全評價準則》的毒性分級標準，判定BPA和BPF的毒性等級為中毒，BPS的毒性等級為低毒。表明BPF急性毒性與BPA相當，BPS急性毒性低于BPA。本研究數據可為BPF、BPS作為BPA替代品的生產和使用以及相應的環(huán)境管理提供毒理學參考。

雙酚A；雙酚F；雙酚S；黑斑蛙；胚胎；蝌蚪；急性毒性

鑒于雙酚A(bisphenol A, BPA)廣泛的生物毒性和人體暴露風險[1]，一些國家和政府相繼對BPA的使用做出限制[2-4]。結構和功能與BPA相似的一些雙酚類化合物開始作為其替代品使用，其中雙酚S(bisphenol S, BPS)和雙酚F(bisphenol F, BPF)使用較多。BPS和BPF的結構與BPA類似，含有以碳原子或者硫原子連接的2個酚狀結構(圖1)。BPF主要用于制備環(huán)氧樹脂和聚碳酸酯，制造清漆、涂料、襯墊、粘合劑、管道等產品，此外在口腔修復設備和食品包裝等日常用品中也有應用[5-6]。BPS除用于制備耐高溫熱塑性環(huán)氧樹脂、碳酸酯單體和磺化物外，還用于農藥、皮革鞣劑、染料分散劑和纖維添加劑[7]。文獻報道多種環(huán)境介質(如水體，底泥，室內空氣，土壤)和生活用品(如罐裝食品，紙制品)中均檢測到BPF和BPS的污染[8-9]。近期研究證實，普通人群廣泛暴露于BPF和BPS中，人體尿液中可檢測到這2種污染物的存在[10]。隨著環(huán)境污染水平和人體暴露風險的增加，BPF、BPS的毒性開始受到關注。體外試驗得出BPS和BPF可能具有與BPA類似的雌激素活性[11]。資料顯示，BPF對大鼠經口暴露的半數致死劑量(LD50)為4 950 mg·kg-1[12-13]；BPS對大鼠、小鼠、兔的經口暴露LD50分別為4 556 mg·kg-1、1 600 mg·kg-1、4 700 mg·kg-1[13-14]，化學品數據庫缺少BPF、BPS對水生生物的急性毒性數據。文獻報道BPF和BPS對大型溞的半數效應濃度(EC50)分別為56 mg·L-1和55 mg·L-1[15]。總體來看，

目前有關BPF和BPS對水生生物的毒性數據還很缺乏，有必要開展更多的毒理學研究。

兩棲動物胚胎和蝌蚪急性毒性試驗，是評價化學品急性毒性的方法之一[16-17]。本實驗室研究表明，我國本土物種黑斑蛙(Pelophylax nigromaculatus)適合作為急性毒性的材料，用于化學品的毒性測試[18]。本文比較研究了BPA、BPF和BPS對黑斑蛙胚胎和蝌蚪的急性毒性，從毒理學角度分析BPF和BPS的生態(tài)風險。

1 材料與方法 (Materials and methods)

1.1 儀器與試劑

儀器和設備：兩棲動物誘導繁育設備(本實驗室研發(fā))；體視顯微鏡XTL0745型(重慶光電儀器有限公司，重慶)；脫色搖床TS-1型(海林市其林貝爾儀器制造有限公司，江蘇)；500 mL燒杯和90 mm培養(yǎng)皿(北京玻璃集團臺州博美玻璃儀器廠，北京)；巴斯德吸管(海門市如意橡塑制品廠，江蘇)。

試劑：雙酚A(CAS NO. 80-05-7; 97%，ACROS ORGANICS)；雙酚F(CAS NO. 620-92-8; >99%，東京化成工業(yè))；雙酚S(CAS NO. 80-09-1; >98%，東京化成工業(yè))；人絨毛膜促性腺激素(HCG，煙臺北方制藥有限公司)；注射用促黃體素釋放激素(LHRH，Sigma)；半胱氨酸(分析純，北京索萊寶科技有限公司)；二甲基亞砜(DMSO，Sigma-Alorich公司)；氯化鈉和氫氧化鈉(分析純，北京化學試劑公司)；MS-222 (分析純，Sigma)。

圖1 雙酚A、雙酚F和雙酚S的化學結構Fig. 1 Chemical structures of bisphenol A, bisphenol F and bisphenol S

1.2 試驗生物

黑斑蛙成蛙飼養(yǎng)在實驗室營造水陸兩棲環(huán)境的玻璃缸中，水溫(24±1) °C，明暗光周期12 h∶12 h。每天傍晚給黑斑蛙喂食活體面包蟲，次日清洗飼養(yǎng)缸。

成年雌蛙雄蛙各注射20 μg LHRH(以0.6%的生理鹽水配制)和HCG(雌蛙300 IU，雄蛙200 IU)(以0.6%的生理鹽水配制)，放入兩棲動物誘導繁育設備中，誘導其抱對產卵。

黑斑蛙胚胎：黑斑蛙排卵后，立即檢查卵的受精率和質量，受精率應大于75%。產卵結束后，立即用2%半胱氨酸(pH 7.0～8.0)脫膜。參照Gosner[19]的階段劃分描述，篩選卵裂正常的8～10階段胚胎進行試驗。

黑斑蛙蝌蚪：在水溫(24±1) °C，明暗光周期12 h∶12 h的條件下，胚胎發(fā)育至Gosner 26階段的蝌蚪，用于急性毒性試驗。

1.3 試驗方法

BPA、BPF、BPS用助溶劑DMSO分別配成100 g·L-1、 100 g·L-1、250 g·L-1的儲備液。設置溶劑對照組，其中溶劑的濃度與最高濃度處理組溶劑濃度相同，溶劑的體積濃度不超過1‰，暴露試驗時用除氯自來水稀釋至相應濃度。

1.3.1 胚胎急性毒性試驗

《化學農藥環(huán)境安全評價試驗準則》[20]規(guī)定，如果受試化學品的最大水溶解度大于或等于100 mg·L-1，以100 mg·L-1濃度進行限度試驗。限度濃度下96 h暴露，胚胎沒有出現死亡和畸形，則不再進行下一步試驗，認為該受試化學品的96 h半數致死濃度(LC50)和96 h半數致畸濃度(TC50)大于限度濃度。根據文獻[21]和限度試驗濃度上限，BPS、BPA、BPF分別以100 mg·L-1、9.00 mg·L-1、11.50 mg·L-1為最高濃度，1.15為公比，8個濃度梯度進行預試驗。BPS各濃度組96 h胚胎無死亡和畸形，9.00 mg·L-1BPA暴露組96 h胚胎未全部死亡，進行第2次預試驗，設置BPA最高濃度11 mg·L-1。根據預試驗結果，設置BPA和BPF的濃度范圍分別為：11.00 mg·L-1～3.88 mg·L-1和10.00 mg·L-1～4.77 mg·L-1進行正式試驗；BPS以100 mg·L-1進行限度試驗。隨機選取25只胚胎放于加入40 mL暴露液的培養(yǎng)皿中，設置2個平行，將其置于25 ℃的恒溫箱中，明暗光周期為12 h∶12 h，每隔24 h換液，清除死亡個體并記錄死亡數，試驗持續(xù)96 h。96 h后，將所有胚胎取出，用10%福爾馬林固定，體視顯微鏡下觀察形態(tài)，測量胚胎體長。

1.3.2 蝌蚪急性毒性試驗

根據胚胎試驗結果，設置BPS以100 mg·L-1濃度進行限度試驗，BPA、BPF暴露濃度為14.00 mg·L-1～4.82 mg·L-1，1.15為公比，8個梯度進行預試驗。隨機取10只蝌蚪放于盛有300 mL暴露液的燒杯中，設置3個平行，每隔24 h換液，清除死亡個體并記錄死亡數，試驗持續(xù)96 h。根據預試驗結果，得到BPA和BPF正式試驗的濃度范圍分別為：12.00 mg·L-1～6.94 mg·L-1和12 mg·L-1～4.82 mg·L-1，每個處理組3個平行。

1.4 統(tǒng)計分析

詳細記錄每個培養(yǎng)皿中胚胎死亡、畸形、生長情況和每個燒杯中蝌蚪死亡數。以受試化學品的對數值為自變量(x)，以相應濃度下胚胎或蝌蚪死亡的機率為因變量(y)，采用SPSS 16數據處理軟件，使用Probit進行回歸分析，建立“劑量-效應”線性方程，并計算LC50值及其95%置信限。黑斑蛙胚胎體長數據，通過One-Way ANOVA統(tǒng)計分析其最小抑制生長濃度(MCIG)。

2 結果(Results)

2.1 胚胎急性毒性

胚胎急性毒性試驗，溶劑對照組無死亡，致畸率為2.56%，符合質量控制要求。BPS限度試驗結果，100 mg·L-1BPS暴露胚胎96 h無死亡，無畸形，認為BPS的96 h-LC50和96 h-TC50大于100 mg·L-1。BPA和BPF暴露的胚胎在48 h、72 h、96 h的死亡率如圖2所示。96 h后觀察畸形胚胎(圖3)，統(tǒng)計致畸率(圖4)。測量96 h胚胎體長，統(tǒng)計各劑量與對照是否有顯著性差異(表2、表3)，確定有差異的最小濃度即MCIG(表1)。

表1 BPA和BPF對黑斑蛙胚胎的LC50和MCIGTable 1 LC50 and MCIG values of BPA and BPF for Pelophylax nigromaculatus embryos

注：MCIG為通過One-Way ANOVA統(tǒng)計分析得到的最小抑制生長濃度。

Note:MCIG represents minimal concentration to inhibit growth by One-Way ANOVA method.

圖2 BPA和BPF暴露后黑斑蛙胚胎的死亡率Fig. 2 Lethal rates of Pelophylax nigromaculatus embryos after exposure to BPA and BPF

黑斑蛙胚胎經BPA、BPF暴露48 h后，各暴露組沒有或者僅有少量胚胎死亡；72 h，11.00 mg·L-1BPA暴露組胚胎全部死亡；96 h，10 mg·L-1BPF暴露組胚胎全部死亡(圖2)。經統(tǒng)計分析，BPA的96 h-LC50為7.68 mg·L-1；BPF的96 h-LC50為7.99 mg·L-1(表1)。

對照組胚胎發(fā)育正常，96 h后達到Gonser 25階段，蝌蚪體表光滑，脊柱正直，尾無彎曲，游泳活躍(圖3A)。BPA和BPF暴露96 h，胚胎出現尾彎曲(B)，脊椎彎曲(C)，軸縮短(D)，頭面部、心臟、腹部水腫(E)，面部水皰(F)，腹部水皰(G)，頭部發(fā)育不全、腦未發(fā)育(H)，眼睛無色素(I)等現象。統(tǒng)計96 h后各暴露組畸形數量(活體)，計算致畸率，BPA和BPF最高的致畸率均未達到50%(圖4)，因此未能計算它們的半數致畸濃度(TC50)。

測量胚胎體長，溶劑對照組體長范圍為7.5～8.5 mm；BPA和BPF暴露組體長范圍均為5.0～8.5 mm。BPA和BPF暴露組胚胎的平均體長隨劑量

增加而減小，呈現劑量-效應關系。統(tǒng)計結果顯示，BPA和BPF均抑制胚胎的生長發(fā)育：暴露濃度4.47 mg·L-1的BPA(表2)和4.77 mg·L-1的BPF對胚胎體長有明顯抑制作用(表3)；BPA的MCIG為4.47 mg·L-1，BPF的MCIG小于最低暴露劑量4.77 mg·L-1(表1)。

圖3 BPA和BPF暴露96 h導致的黑斑蛙胚胎的各種畸形注：箭頭所指為典型畸形部位。Fig. 3 Malformations of Pelophylax nigromaculatus embryos caused by 96 h-exposure of BPA and BPFNote: The arrow shows the malformed part.

圖4 BPA和BPF暴露96 h對黑斑蛙胚胎的致畸率Fig. 4 Teratogenic rates of Pelophylax nigromaculatus embryos after 96 h-exposure to BPA and BPF

表2 BPA對黑斑蛙胚胎體長的影響Table 2 Effects of BPA on body length of Pelophylax nigromaculatus embryos

注：*表示與對照組相比存在顯著性差異(P<0.05)。

Note: * indicate significant difference compared with the control group (P<0.05).

表3 BPF對黑斑蛙胚胎體長的影響Table 3 Effects of BPF on body length of Pelophylax nigromaculatus embryos

注：*表示與對照組相比存在顯著性差異(P<0.05)。

Note: * indicate significant difference compared with the control group (P<0.05).

2.2 蝌蚪急性毒性

溶劑對照組蝌蚪無死亡，表明質量控制良好。100 mg·L-1BPS暴露蝌蚪96 h無死亡，認為BPS的96 h-LC50大于100 mg·L-1。BPA和BPF暴露黑斑蛙蝌蚪24 h，最高劑量12 mg·L-1濃度下蝌蚪全部死亡。48 h，10.00 mg·L-1BPA暴露組蝌蚪死亡率上升20%。72 h，BPF的6.94 mg·L-1暴露組開始出現死亡，BPA的9.09 mg·L-1和10.00 mg·L-1暴露組死亡率略微升高。96 h暴露終點，BPA和BPF最低濃度暴露組蝌蚪無死亡(圖5)。經統(tǒng)計分析得到BPA和BPF對蝌蚪的48 h-LC50分別為9.34 mg·L-1和10.12 mg·L-1；72 h-LC50分別為9.13 mg·L-1和10.10 mg·L-1；96 h-LC50分別為9.00 mg·L-1和9.52 mg·L-1(表4)。

表4 BPA和BPF對黑斑蛙蝌蚪的LC50,95%置信 區(qū)間和回歸方程Table 4 LC50, 95% confidence interval and regression equations of BPA and BPF to Pelophylax nigromaculatus tadpoles

注：LC50及其95%置信區(qū)間的單位為mg·L-1。

Note: The unit of LC50and its 95% confidence interval is mg·L-1.

圖5 BPA和BPF對黑斑蛙蝌蚪的致死率Fig. 5 Lethal rates of Pelophylax nigromaculatus tadpoles after exposure to BPA and BPF

3 討論(Discussion)

BPS、BPF作為BPA的替代品，具有類似結構及功能，其對兩棲動物的急性毒性及生態(tài)風險值得探討。BPS對黑斑蛙蝌蚪及胚胎的96 h-LC50>100 mg·L-1，按農業(yè)部《化學農藥環(huán)境安全評價準則》[20]的分級標準，BPS對黑斑蛙的毒性等級為低毒。按世界衛(wèi)生組織(WHO)建議的分類準則[22]，BPS對大鼠、小鼠、兔的急性毒性等級為低毒[13-14]，與BPS對黑斑蛙的毒性等級一致。BPA對胚胎和蝌蚪的96 h-LC50分別為7.68 mg·L-1和9.00 mg·L-1，BPF對胚胎和蝌蚪的96 h-LC50分別為7.99 mg·L-1和9.52 mg·L-1，比較2種化學品對胚胎和蝌蚪96 h-LC50，發(fā)現胚胎比蝌蚪更敏感。胚胎體長的統(tǒng)計結果表明BPF與BPA對胚胎的生長抑制作用無顯著差異。另外，BPA、BPF暴露的胚胎在最低劑量出現畸形且癥狀相似，意味著二者對黑斑蛙胚胎有相似的致畸作用。綜合考慮胚胎急性毒性試驗的96 h-LC50、MCIG、致畸率等指標，認為BPF與BPA對胚胎的發(fā)育毒性相當。根據農業(yè)部[20]和WHO的化學品分類準則[21]，BPF對黑斑蛙的毒性等級為中毒，對大鼠的毒性為低毒[12-13]；BPA對黑斑蛙、黑頭呆魚、斑馬魚的毒性等級均為中毒[21,23]，對大鼠、小鼠的毒性為低毒[13,24]?？梢夿PF對黑斑蛙的毒性高于對大鼠的毒性；BPA對黑斑蛙和魚類的毒性相同，高于對鼠類的毒性。研究顯示，某些化學品對鼠類低毒，但是對兩棲動物或其它水生生物有更高的毒性，BPA和BPF具有此特征[25-26]。因此，使用兩棲動物測試化學品的毒性對于全面認識化學品的生態(tài)安全是必要的。

文獻報道，BPF和BPS在水體中濃度一般略低于BPA，環(huán)境濃度在幾個ng·L-1至幾個μg·L-1[27-28]。但是在某些水體中BPF的濃度與BPA相當，西班牙某污水處理廠進水中BPA與BPF濃度分別為(1.36±0.08) μg·L-1和(1.43±0.03) μg·L-1[27]。本研究結果，BPA和BPF對黑斑蛙的急性毒性高于報道的環(huán)境濃度，但是BPA和BPF在環(huán)境水體及其他介質中廣泛檢出提示著，環(huán)境濃度下的長期暴露，其毒性作用不容忽視。雖然BPS的急性毒性低于BPA和BPF，但是有研究表明BPS在水體中很難降解，具有持久性[29]，因此BPS在水體中的累積濃度和其對水中生物的長期影響，仍值得關注。

綜上所述，本文首次報道了BPS、BPF對兩棲動物的急性毒性，并且比較了BPA及其替代品BPS、BPF對黑斑蛙的毒性大?。築PF與BPA相當，均為中毒化學品；BPS毒性低于BPA。鑒于不同物種得到的毒性數據存在差異，BPF、BPS仍需要開展多方面的毒理學研究。本研究所得數據可為BPF、BPS作為BPA替代品的生產和使用以及相應的環(huán)境管理提供毒理學參考。

[1] Calafat A M, Ye X, Wong L Y, et al. Exposure of the US population to bisphenol A and 4-tertiary-octylphenol: 2003-2004 [J]. Environmental Health Perspectives, 2008, 116(1): 39-44

[2] Health Canada. Health risk assessment of bisphenol A from food packaging [R/OL]. (2008-08-01) [2014-04-28]. http://www.hc-sc.gc.ca/fn-an/securit/packag-emball/bpa/bpa_hra-ers-eng.php

[3] European Commission. Bisphenol A: EU ban on baby bottles [R/OL]. (2011-01-28) [2014-04-28]. http://eur-lex.europa.eu/lexuriserv/lexuriserv.do?uri=oj:l:2011:026:0011:0014:en:pdf

[4] U.S. Environmental Protection Agency. Bisphenol A action plan [R/OL]. (2010-03-29) [2014-04-28]. http://www.epa.gov/oppt/existingchemicals/pubs/actionplans/bpa_action_plan.pdf

[5] Jana S K, Okamoto T, Kugita T, et al. Selective synthesis of bisphenol F catalyzed by microporous H-beta zeolite [J]. Applied Catalysis A: General, 2005, 288(1): 80-85

[6] Perez P, Pulgar R, Olea-Serrano F, et al. The estrogenicity of bisphenol A -related diphenylalkanes with various substituents at the central carbon and the hydroxy groups [J]. Environmental Health Perspectives, 1998, 106(3): 167-174

[7] Molina-Molina J M, Amaya E, Grimaldi M, et al. In vitro study on the agonistic and antagonistic activities of bisphenol-S and other bisphenol-A congeners and derivatives via nuclear receptors [J]. Toxicology and Applied Pharmacology, 2013, 272(1): 127-136

[8] Liao C, Liu F, Guo Y, et al. Occurrence of eight bisphenol analogues in indoor dust from the United States and several Asian countries: Implications for human exposure [J]. Environmental Science & Technology, 2012, 46(16): 9138-9145

[9] Goodson A, Summerfield W, Cooper I. Survey of bisphenol A and bisphenol F in canned foods [J]. Food Additives & Contaminants, 2002, 19(8): 796-802

[10] Zhou X, Kramer J P, Calafat A M, et al. Automated on-line column-switching high performance liquid chromatography isotope dilution tandem mass spectrometry method for the quantification of bisphenol A, bisphenol F, bisphenol S, and 11 other phenols in urine [J]. Journal of Chromatography B, 2014, 944: 152-156

[11] René V, Watson C S. Bisphenol S disrupts estradiol-induced nongenomic signaling in a rat pituitary cell line: Effects on cell functions [J]. Environmental Health Perspectives, 2013, 121(3): 352-358

[12] NIH U.S. national library of medicine and toxlcology data network, 4, 4'-Methylenebis(phenol) [EB/OL]. [2014-04-28]. http://chem.sis.nlm.nih.gov/chemidplus/ProxyServlet?objectHandle=DBMaint&action Handle=default&nextPage=jsp/chemidlite/ResultScreen.jsp&TXTSUPERLISTID=0000620928

[13] U.S. Environmental Protection Agency substance registry services [EB/OL]. [2014-04-28]. http://ofmpub.epa.gov/sor_internet/registry/substreg/searchandretrieve/advancedsearch/search.do?details=displayDetails

[14] NIH U.S. national library of medicine and toxlcology data network, Bisphenol S [EB/OL]. [2014-04-28]. http://chem.sis.nlm.nih.gov/chemidplus/ProxyServlet?objectHandle=DBMaint&actionHandle=default&next Page=jsp/chemidlite/ResultScreen.jsp&TXTSUPERLI STID=0000080091

[15] Chen M Y, Ike M, Fujita M. Acute toxicity, mutagenicity, and estrogenicity of bisphenol-A and other bisphenols [J]. Environmental Toxicology, 2002, 17(1): 80-86

[16] ASTM. ASTM standards on aquatic toxicology and hazard evaluation [M]. Philadelphia: ASTM, 1993: 102-121

[17] Perkins P J, Boermans H J, Stephenson G R. Toxicity of glyphosate and triclopyr using the frog embryo teratogenesis assay-Xenopus [J]. Environmental Toxicology and Chemistry, 2000, 19(4): 940-945

[18] 蘇紅巧, 張銀鳳, 秦占芬, 等. 黑斑蛙與非洲爪蟾蝌蚪急性毒性試驗方法敏感性的比較[J]. 生態(tài)毒理學報, 2013, 8(5): 785-790

Su H Q, Zhang Y F, Qin Z F, et al. Comparison of Rana nigromaculata with Xenopus laevis in sensitivity and repeatability in tadpole acute toxicity test [J]. Asian Journal of Ecotoxicology, 2013, 8(5): 785-790 (in Chinese)

[19] Gosner K L. A simplified table for staging anuran embryos and larvae with notes on identification [J] Herpetologica, 1960, 16: 183-190

[20] 中國農業(yè)部. 化學農藥環(huán)境安全評價試驗準則(2008年報批稿)[S]. 北京: 中國農業(yè)部, 2008: 97-100

[21] 劉紅玲, 劉曉華, 王曉祎, 等. 雙酚A和四溴雙酚A對大型溞和斑馬魚的毒性[J]. 環(huán)境科學, 2007, 28(8): 1784-1787

Liu H L, Liu X H, Wang X Y, et al. Toxicity of BPA and TBBPA to Daphnia magna and zebrafish Brachydanio rerio [J]. Environmental Scinece, 2007, 28(8): 1784-1787 (in Chinese)

[22] World Health Organization. The WHO recommended classification of pesticides by hazard and guidelines to classification 2009 [S]. World Health Organization, 2010

[23] Alexander H C, Dill D C, Smith L W, et al. Bisphenol A: Acute aquatic toxicity [J]. Environmental Toxicology and Chemistry, 1988, 7(1): 19-26

[24] U.S. NIH. national library of medicine and toxlcology data network, Bisphenol A [EB/OL]. [2014-04-28]. http://chem.sis.nlm.nih.gov/chemidplus/ProxyServlet?objectHandle=DBMaint&actionHandle=default&nextPage=jsp/chemidlite/ResultScreen.jsp&TXTSUPERLISTID=0000080057

[25] 付旭鋒, 李圓圓, 蘇紅巧. 異噻唑啉酮類殺菌劑對黑斑蛙胚胎和蝌蚪的急性毒性[J]. 生態(tài)毒理學報, 2014, 9(6): 1097-1103

Fu X F, Li Y Y, Su H Q. Acute toxicity of isothiazolinone biocides to Rana nigromaculata embryos and tadpoles [J]. Asian Journal of Ecotoxicology, 2014, 9(6): 1097-1103 (in Chinese)

[26] 魏風華, 李文新. 黃果茄植物提取物的滅螺效果及對魚類和大鼠急性毒性試驗研究[J]. 中國地方病學雜志, 2001, 20(6): 419-421

Wei F H, Li W X. Study on the effect of killing snail and acute toxicity test of fish and mouse with extraction of Solanum xanthocarpum [J]. Chinese Journal of Endemiology, 2001, 20(6): 419-421 (in Chinese)

[27] Yang Y, Lu L, Zhang J, et al. Simultaneous determination of seven bisphenols in environmental water and solid samples by liquid chromatography-electrospray tandem mass spectrometry [J]. Journal of Chromatography A, 2014, 1328: 26-34

[28] Hermann F, Thomas K, Thomas O, et al. Occurrence of phthalates and bisphenol A and F in the environment [J]. Water Research, 2002, 36(6): 1429-1438

[29] Danzl E, Sei K, Soda S, et al. Biodegradation of bisphenol A, bisphenol F and bisphenol S in seawater [J]. International Journal of Environmental Research and Public Health, 2009, 6(4): 1472-1484

◆

Comparison on Acute Toxicity of Bisphenol A with Its Substitutes toPelophylaxnigromaculatus

Li Yuanyuan1, Fu Xufeng1,2, Zhao Yaxian1, Su Hongqiao1, Qin Zhanfen1,*

1. State Key Laboratory of Environmental Chemistry and Ecological Toxicology, Research Center for Eco-Environmental Sciences, Chinese Academy of Sciences, Beijing 10085, China 2. School of Life Science, Yunnan University, Kunming 650091, China

13 May 2014 accepted 20 May 2014

Little is known about toxic effects of bisphenol F (BPF) and bisphenol S (BPS), although they have been used widely as BPA substitutes. To compare acute toxicity between BPF/BPS and BPA, the lethal concentrations 50% (LC50), minimum concentration to inhibit growth (MCIG) and teratogenic rate were measured for Pelophylax nigromaculatus embryos and tadpoles. It was found that 96 h-exposure to 100 mg·L-1BPS caused no malformation and death of P. nigromaculatus embryos and tadpoles. The 96 h-LC50values of BPA and BPF for embryos were 7.68 mg·L-1and 7.99 mg·L-1, with 4.47 mg·L-1and 4.77 mg·L-1for the MCIG values, respectively. The maximum teratogenic rates both are 33.33%. The 96 h-LC50values of BPA and BPF for tadpoles are 9.00 mg·L-1and 9.52 mg·L-1, respectively. The results showed that BPF was comparable to BPA in term of acute toxicity, while acute toxicity of BPS was considerably lower than that of BPA. According to toxicity grading standards of Guidelines on Environmental Safety Assessment for Chemical Pesticides, BPA and BPF are determined as medium toxic chemicals to P. nigromaculatus embryos and tadpoles, with BPS as a low toxic chemical. Our study can provide a helpful reference for the production and use of BPF and BPS, and also the corresponding environmental management.

bisphenol A; bisphenol F; bisphenol S; Pelophylax nigromaculatus; embryo; tadpole; acute toxicity

環(huán)保公益性行業(yè)科研專項項目(201109048)；國家自然科學基金項目(21377153)

李圓圓(1988-)，女，碩士，研究方向為毒理學，E-mail: liyuaner2012@126.com；

*通訊作者(Corresponding author)， E-mail: qinzhanfen@rcees.ac.cn

10.7524/AJE.1673-5897.20140513002

2014-05-13 錄用日期：2014-05-20

1673-5897(2015)2-251-07

X171.5

A

秦占芬(1971-)，女，環(huán)境科學博士，研究員，主要研究方向為新型POPs的生殖和發(fā)育毒性，以及基于兩棲動物的化學品毒性評價方法。

李圓圓, 付旭鋒, 趙亞嫻, 等. 雙酚A與其替代品對黑斑蛙急性毒性的比較[J]. 生態(tài)毒理學報, 2015, 10(2): 251-257

Li Y Y, Fu X F, Zhao Y X, et al. Comparison on acute toxicity of bisphenol A with its substitutes to Pelophylax nigromaculatus [J]. Asian Journal of Ecotoxicology, 2015, 10(2): 251-257 (in Chinese)