李光福， 朱麗巖, 王曉敏， 韓 萃， 江田田

(中國海洋大學(xué)海洋生命學(xué)院，山東 青島 266003)

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溫度和鹽度對指狀偽鏢水蚤孵化及產(chǎn)糞的影響?

李光福， 朱麗巖??, 王曉敏， 韓 萃， 江田田

(中國海洋大學(xué)海洋生命學(xué)院，山東 青島 266003)

橈足類是海洋浮游動物的重要組成部分，而指狀偽鏢水蚤分布廣泛，生殖掛卵，易于觀察，被選為實驗對象。本研究設(shè)定了一系列溫度、鹽度梯度，對指狀偽鏢水蚤的溫度、鹽度適應(yīng)性進(jìn)行了探討。結(jié)果：溫度對雌性指狀偽鏢水蚤產(chǎn)糞粒數(shù)、卵孵化率及孵化時間均有顯著影響(P<0.05)。在10～35 ℃范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，卵孵化率也隨著升高，在20 ℃時達(dá)到最大，隨后又有所下降；孵化時間呈現(xiàn)出明顯的縮短趨勢；24 h產(chǎn)糞粒數(shù)隨著溫度的升高呈現(xiàn)出先逐漸增加后又略微降低的趨勢。鹽度對雌性指狀偽鏢水蚤卵孵化率、孵化時間及產(chǎn)糞粒數(shù)均有顯著影響(P<0.05)。在鹽度為10～40范圍內(nèi)，隨著鹽度的升高，孵化率逐漸下降，孵化時間逐漸緩慢延長，24 h產(chǎn)糞粒數(shù)總體呈下降趨勢。據(jù)此可以得出：指狀偽鏢水蚤的最適繁育溫度為20 ℃，最適繁育鹽度為10,并且與鹽度相比溫度對其影響更加明顯。

指狀偽鏢水蚤； 溫度； 鹽度； 孵化率； 孵化時間

在海洋中，浮游動物是一類缺乏發(fā)達(dá)的運動器官，隨波逐流，營浮游生活的動物，包括無脊椎動物的大部分門類如原生動物、輪蟲、枝角類和橈足類[1]。作為浮游動物的一員，橈足類的種類多、數(shù)量大和分布廣的特點決定了它們在海洋浮游動物群落中的優(yōu)勢地位，同時橈足類也是重要的食物鏈的傳遞者，其種群動態(tài)變化直接影響著海洋生態(tài)系統(tǒng)的初級生產(chǎn)力的節(jié)律、規(guī)模和歸宿[2]。據(jù)FAO(2000)估計，1999年海洋漁業(yè)產(chǎn)業(yè)中，0.92億t的漁獲量是以天然橈足類餌料生物為食的魚類[3]。橈足類在近岸海域生態(tài)系統(tǒng)中起著承上啟下的作用，其生產(chǎn)力的高低和種群群落的大小，對整個海洋生態(tài)系統(tǒng)的生態(tài)容納量、生物資源補(bǔ)充量都有著十分重要的影響,直接反映生態(tài)環(huán)境質(zhì)量的好壞[4]。

多年以來，水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)多以輪蟲、鹵蟲等作為魚、蝦育苗的開口餌料，但輪蟲、鹵蟲等并非適用于所有經(jīng)濟(jì)魚、蝦幼苗的培育,原因是輪蟲和鹵蟲營養(yǎng)供給不足，缺乏某些必需脂肪酸，特別是廿碳五烯酸(eicosapentaenoic acid, EPA)和廿二碳六烯酸(docosahexaenoic acid, DHA)[5]。Watanabe等曾指出鹵蟲的營養(yǎng)成分極不穩(wěn)定，甚至缺乏EPA和DHA這2種重要的魚類必需脂肪酸，雖然通過在鹵蟲餌料中添加營養(yǎng)成分能使鹵蟲也富含EPA和DHA，但含量極不穩(wěn)定[6]。橈足類個體很小，成體一般僅1～3 mm，無節(jié)幼蟲不超過0.5 mm。而且，橈足類從無節(jié)幼蟲Ⅰ期發(fā)育到成體要經(jīng)過12個發(fā)育期，其整個發(fā)育過程中可為魚、蝦幼體的不同發(fā)育期提供了寬幅餌料。更為重要的是，橈足類富含的EPA和DHA多分布于膜脂中，利于魚蝦幼體的吸收，這不僅對海洋魚蝦類生長、存活和發(fā)育非常有利，而且可以幫助其提高免疫力[7-9]。

然而作為魚類活體餌料，橈足類的生長、繁殖和寄生物的情況都需要細(xì)致的研究。隨著研究的深入，有研究發(fā)現(xiàn)橈足類在幼體和成體期所需的環(huán)境條件是不同的，生長和繁殖所需的條件也有所差別[10-12]。其中溫度和鹽度是影響橈足類生存繁殖的重要因素，對于其物質(zhì)代謝、卵的孵化率和孵化時間都有極其重要的影響[13-14]。在適溫范圍內(nèi)，較高的水溫能促進(jìn)橈足類繁殖，增加懷卵次數(shù)和個數(shù)以及縮短產(chǎn)卵周期與孵化時間，但如果溫度過高，超過適溫范圍，就會使橈足類死亡率增大[15]。過高或過低的鹽度都會引起橈足類原生質(zhì)的變質(zhì)而導(dǎo)致生物的死亡。不同種類，甚至同種的不同發(fā)育期及性別都有一定的適鹽范圍[16]。Cervetto等研究發(fā)現(xiàn)克氏紡錘水蚤(Acartiaclausi)最大耐鹽度為65，最小鹽度為1，最適鹽度為24～30[17]。在對中華哲水蚤(Calanussinicus)、瘦尾胸刺水蚤(Centropagestenuiremis)和特氏歪水蚤(Tortanusderjugini)3種動物研究中觀察到：特氏歪水蚤耐鹽最強(qiáng)，中華哲水蚤最弱，且后者的雄體比雌體更弱。Drillet等指出，溫度的變化可改變橈足類對鹽度的耐受范圍[18]。黃加棋等研究報道了瘦尾胸刺水蚤在高溫下耐高鹽度，在低溫下耐低鹽度，越接近自然海區(qū)鹽度對橈足類越有利，如火腿許水蚤(Schmackeriapoplesia)在接近自然海區(qū)的鹽度中有最大的存活率[19-20]。

指狀偽鏢水蚤(Pseudodiaptomidaeinopinus)隸屬于哲水蚤目(Calanoida)偽鏢水蚤科(Pseudodiaptomidae)，分布于日本、俄羅斯以及中國大陸的廣東、福建、浙江、江蘇、上海、安徽、山東、河北、天津等地，多生活于淡水、咸淡水和低鹽度海水中。指狀偽鏢水蚤豐度主要受chl-a濃度和鹽度條件的影響，在秋季11月份中鹽和高鹽條件下時有最大峰值，而此時的Chl-a濃度全年第二高，春季和秋季時出現(xiàn)大量的掛卵雌體且秋季雌性個體產(chǎn)卵率最高[33-35]。本文擬通過研究溫度和鹽度對指狀偽鏢水蚤產(chǎn)糞粒數(shù)、卵孵化率及卵孵化時間的影響，確定指狀偽鏢水蚤實驗室培養(yǎng)的最佳溫度和鹽度條件，以期為該橈足類的大量連續(xù)培養(yǎng)奠定基礎(chǔ)，同時也為研究指狀偽鏢水蚤作為養(yǎng)殖魚類仔稚魚開口餌料提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 餌料藻的培養(yǎng)

用作餌料的球等鞭金藻(Isochrysisgalbana)取自于中國海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院藻種室，采用不含硅鹽的f/2培養(yǎng)基，其中培養(yǎng)鹽度為30±0.5，溫度為(20±1)℃，光照強(qiáng)度為1 200 lx，光照周期12 hL∶12 hD。用來培養(yǎng)的海水，要經(jīng)過孔徑為0.45和0.22 μm的濾膜分別過濾一遍，然后加入f/2培養(yǎng)基，在高壓滅菌鍋中120 ℃條件下滅菌20 min，待其冷卻至常溫后使用。

1.2 指狀偽鏢水蚤的采集與培養(yǎng)

實驗所用的指狀偽鏢水蚤于2013年11月初采集于山東省青島市嶗山區(qū)南窯蝦池，溫度17 ℃，鹽度15。采集的樣品在2h內(nèi)帶回實驗室，挑出懸浮物和其他雜質(zhì)，然后置于3 000 mL的燒杯中，為保證馴化鹽度條件與采樣時自然環(huán)境條件的一致性，加入充分曝氣的鹽度為15的海水，放入光照培養(yǎng)箱中，溫度為(15±1)℃，光照強(qiáng)度為1 200 lx，馴化2周以上。實驗中所用的海水為新鮮海水經(jīng)孔徑為0.45 μm的濾膜過濾1遍，并充分曝氣。

1.3 實驗方法

實驗前一周挑取健康活潑的成體指狀偽鏢水蚤1 000只置于與實驗環(huán)境相同條件下馴化培養(yǎng)7 d，然后挑取健康活潑的成體指狀偽鏢水蚤約600只，置于2 L燒杯中，讓其自由交配。每隔2 h觀察一次，記錄雌性個體的掛卵時間,并在顯微鏡下計數(shù)每個雌體掛卵的個數(shù)(E)。

溫度實驗中每個平行組挑取30個雌性掛卵個體分別分放于30個盛有10 mL鹽度為15、球等鞭金藻濃度為105ind/mL海水的小燒杯中，然后放入設(shè)定好實驗溫度的不同培養(yǎng)箱中。24 h后將掛卵雌體挑出放入裝有新鮮海水和餌料的小燒杯中，原燒杯置于解剖鏡下計數(shù)24 h內(nèi)的總產(chǎn)糞粒數(shù)。此后每隔2 h觀察1次，記錄雌性掛卵個體卵全部孵化的時間。待卵全部孵化后，將小燒杯中的內(nèi)容物使用魯哥試劑固定，在解剖鏡下觀察并記錄其內(nèi)無節(jié)幼蟲個數(shù)(N)。

鹽度實驗中每個平行組挑取30個雌性掛卵個體分別分放于30個盛有10 mL不同鹽度的、球等鞭金藻濃度為105ind/mL海水的小燒杯中，置于20 ℃培養(yǎng)箱中。24 h后將掛卵雌體挑出放入裝有新鮮海水和餌料的小燒杯中，原燒杯置于解剖鏡下計數(shù)24 h產(chǎn)糞粒數(shù)。此后每隔2 h觀察一次，記錄雌性掛卵個體卵全部孵化時的時間。待卵全部孵化后，將小燒杯中的內(nèi)容物使用魯哥試劑固定，在解剖鏡下觀察并記錄其內(nèi)無節(jié)幼蟲個數(shù)(N)。實驗中鹽度低于30的海水是由過濾海水加蒸餾水獲得，鹽度高于30的海水是由過濾海水加海結(jié)晶獲得。

實驗過程中每24 h更換1/2與原實驗條件相同的加入新鮮藻液的海水，保證海水的清潔和餌料供應(yīng)的充足。每8 h加入充分曝氣的蒸餾水至初始海水體積以彌補(bǔ)由于水分蒸發(fā)造成的損失。

溫度梯度：實驗設(shè)置10、15、20、25、30、35 ℃共6個溫度梯度；鹽度梯度：實驗設(shè)置10、20、25、30、35、40共6個鹽度梯度。每個梯度設(shè)置30個平行組。光照強(qiáng)度為1 200 lx，周期為12 hL∶12 hD。

1.4 計算方法

橈足類孵化率R計算公式為

R=N/E×100%。

式中：N為孵化幼體數(shù)；E為掛卵雌體的帶卵個數(shù)。

1.5 數(shù)據(jù)分析

本實驗的所有數(shù)據(jù)均運用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，方法為One-Way ANOVA，顯著性水平α=0.05。

2 實驗結(jié)果

2.1 溫度對指狀偽鏢水蚤產(chǎn)糞及孵化的影響

2.1.1 溫度對指狀偽鏢水蚤卵孵化率的影響 在10～35 ℃范圍內(nèi)，指狀偽鏢水蚤的孵化率隨溫度的升高呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢。從10 ℃時的73.2%升高到15 ℃時的78.6%，然后在20 ℃時快速升高達(dá)到最大孵化率96.8%，其后在25 ℃時出現(xiàn)較大下降，孵化率只有64.5%，30和35 ℃的孵化率雖略有上升但仍然較低，分別為67.5%和74.5%。

通過SPSS軟件對各組數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)顯示F=6.360，P<0.05，表明溫度對指狀偽鏢水蚤孵化率的影響顯著。通過組間兩兩比較顯示，指狀偽鏢水蚤20 ℃時的卵孵化率與10、15、25、30、35 ℃時的孵化率差異顯著(P<0.05)；10、15、35 ℃分別與25、30 ℃之間的孵化率差異顯著(P<0.05)；其他組之間兩兩進(jìn)行比較，不存在顯著差異(P>0.05)。

(組間上標(biāo)無相同字母表示差異顯著，有相同字母則差異不顯著。The different letters mean there are marked differences between the groups.The same letters mean there are no significant differences.)

圖1 不同溫度下指狀偽鏢水蚤的孵化率
Fig.1 Hatching rate ofP.inopinusat different temperatures

2.1.2 溫度對指狀偽鏢水蚤卵孵化時間的影響 在10～35 ℃范圍內(nèi)，指狀偽鏢水蚤的孵化時間隨著溫度的升高呈現(xiàn)出明顯縮短的趨勢，其中35 ℃時的平均孵化時間略長于30 ℃。溫度為10 ℃時，指狀偽鏢水蚤的平均孵化時間長達(dá)175 h，溫度升高到15 ℃時，平均孵化時間迅速縮短到77.7 h，之后隨著溫度的繼續(xù)升高，孵化時間仍繼續(xù)下降，但相對較緩一些。用最小二乘法擬合的公式顯示，指狀偽鏢水蚤卵的孵化時間隨溫度的變化符合指數(shù)函數(shù)，且R2為0.975 7，擬合度較高。

對各組數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，F(xiàn)=174.504，P<0.05，表明溫度對指狀偽鏢水蚤卵孵化時間的長短影響顯著。其中通過組間兩兩比較顯示，10 ℃組與15、20、25、30、35 ℃組之間差異極顯著(P<0.01)，15℃組與20、25、30、35 ℃之間的差異均顯著(P<0.05)，而20、25、30、35 ℃組之間的孵化時間沒有顯著差異(P>0.05)。

圖2 不同溫度下指狀偽鏢水蚤卵的孵化時間

2.1.3 溫度對指狀偽鏢水蚤24 h產(chǎn)糞粒數(shù)的影響 在10～35 ℃范圍內(nèi)，指狀偽鏢水蚤的24 h產(chǎn)糞粒數(shù)隨著溫度的升高呈現(xiàn)逐漸增加后又降低的趨勢。從10 ℃開始，隨著溫度的升高指狀偽鏢水蚤的24 h產(chǎn)糞粒數(shù)也逐漸升高，在30 ℃時24 h產(chǎn)糞粒數(shù)達(dá)到最大值154.6粒。其后，24 h產(chǎn)糞粒數(shù)又有所下降，在35 ℃時為118粒。

通過SPSS軟件對各組數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)顯示F=17.696，P<0.05，表明溫度對指狀偽鏢水蚤24 h產(chǎn)糞粒數(shù)影響顯著。通過組間兩兩比較顯示，10 ℃組與15、20、25、30、35 ℃組間差異極顯著(P<0.01)，15 ℃組與20、25、30、35 ℃之間的差異均極顯著(P<0.01)，20 ℃組與25、30、35 ℃組之間差異顯著(P<0.05)，30 ℃組與25、35 ℃組之間差異顯著，而25與35 ℃組之間的孵化時間沒有顯著差異(P>0.05)。

(組間上標(biāo)無相同字母表示差異顯著，有相同字母則差異不顯著。The different letters mean there are marked differences between the groups.The same letters mean there are no significant differences.)

圖3 不同溫度下指狀偽鏢水蚤的產(chǎn)糞粒數(shù)
Fig.3 Feces production ofP.inopinusat different temperatures

2.2 鹽度對指狀偽鏢水蚤產(chǎn)糞及孵化的影響

2.2.1 鹽度對指狀偽鏢水蚤卵孵化率的影響 在鹽度為10～40范圍內(nèi)，指狀偽鏢水蚤的卵孵化率隨著鹽度的升高呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢。鹽度10時孵化率最大為75.1%，鹽度15和20時的孵化率略微下降分別為74.4%和69.7%，其后當(dāng)鹽度超過25時孵化率有較大下降，鹽度為25、30和35時的孵化率分別為55%、56.8%和47.5%，在鹽度為40時孵化率為0，說明指狀偽鏢水蚤不能耐受此鹽度。

對各組數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)顯示F=16.359，P<0.05，表明鹽度對指狀偽鏢水蚤孵化率的影響顯著。其中通過組間數(shù)據(jù)兩兩比較顯示，鹽度為40時偽鏢水蚤的孵化率與其他鹽度水平下的孵化率差異極顯著(P<0.01)；鹽度10、15、20分別與25、30、35組間孵化率差異顯著(P<0.05)；其他組之間兩兩進(jìn)行比較，不存在顯著差異(P>0.05)。

(組間上標(biāo)無相同字母表示差異顯著，有相同字母則差異不顯著。The different letters mean there are marked differences between the groups.The same letters mean there are no significant differences.)

圖4 不同鹽度下指狀偽鏢水蚤的孵化率
Fig.4 Hatching rate ofP.inopinusat different salinities

2.2.2 鹽度對指狀偽鏢水蚤卵孵化時間的影響 在鹽度為10～35范圍內(nèi)，指狀偽鏢水蚤的孵化時間隨鹽度的升高逐漸增加。從鹽度為10時的40 h，逐漸增加到鹽度30時的47.8 h，當(dāng)鹽度達(dá)到35時，其孵化時間迅速增加到76.9 h，在鹽度為40時，指狀偽鏢水蚤不能耐受此鹽度，全部死亡。用最小二乘法擬合的公式顯示，指狀偽鏢水蚤卵的孵化時間隨鹽度的變化為一元二次函數(shù)，但是R2為0.875 5，擬合度較差，說明此函數(shù)并不完全適用于鹽度對其孵化時間影響的規(guī)律。

對各組數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)顯示F=8.025，P<0.05，表明鹽度對指狀偽鏢水蚤孵化時間影響顯著。其中通過組間數(shù)據(jù)兩兩比較顯示，鹽度為35時指狀偽鏢水蚤的孵化時間與其他鹽度水平下的孵化時間差異顯著(P<0.05)；其他組之間兩兩進(jìn)行比較，不存在顯著差異(P>0.05)。

圖5 不同鹽度下指狀偽鏢水蚤的孵化時間

2.2.3 鹽度對指狀偽鏢水蚤24 h產(chǎn)糞粒數(shù)的影響 在鹽度為10～40范圍內(nèi)，雌性指狀偽鏢水蚤的24 h產(chǎn)糞粒數(shù)隨鹽度的升高總體上呈下降趨勢。鹽度為10時24 h產(chǎn)糞粒數(shù)最高為150.4粒，當(dāng)鹽度升高到15時產(chǎn)糞粒數(shù)出現(xiàn)小幅下降為98粒，一直到鹽度30時，產(chǎn)糞粒數(shù)都維持在一個比較穩(wěn)定的狀態(tài)，其后當(dāng)鹽度為35時，其24 h產(chǎn)糞粒數(shù)出現(xiàn)較大下降僅為52粒，在鹽度為40時，雌性指狀偽鏢水蚤不能耐受此鹽度，全部死亡，小燒杯中出現(xiàn)極少的糞粒。

對各組數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)顯示F=8.637，P<0.05，表明鹽度對雌性指狀偽鏢水蚤的24 h產(chǎn)糞粒數(shù)有顯著影響。其中通過組間數(shù)據(jù)兩兩比較顯示，鹽度10與鹽度35組之間差異極顯著(P<0.05)；鹽度為10和35實驗組與其他鹽度組的雌性指狀偽鏢水蚤的24 h產(chǎn)糞粒數(shù)差異顯著(P<0.05)；其他組之間兩兩進(jìn)行比較，不存在顯著差異(P>0.05)。

(組間上標(biāo)無相同字母表示差異顯著，有相同字母則差異不顯著。The different letters mean there are marked differences between the groups.The same letters mean there are no significant differences.)

圖6 不同鹽度下指狀偽鏢水蚤的產(chǎn)糞粒數(shù)
Fig.6 Feces production ofP.inopinusat different salinities

3 討論

3.1 溫度對指狀偽鏢水蚤產(chǎn)糞及孵化的影響

溫度實驗中，指狀偽鏢水蚤的孵化率隨溫度的升高呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢。從10 ℃時的73.2%升高到15 ℃時的78.6%，然后在20 ℃時快速升高達(dá)到最大孵化率96.8%，其后出現(xiàn)較大下降，在25～35℃時的孵化率分別只有64.5%、67.5%和74.5%。在陳峰等人的實驗中，溫度對右突歪水蚤(Tortanusdextrilobatus)的產(chǎn)卵率的影響顯著，產(chǎn)卵率隨著溫度的升高也出現(xiàn)先升高再降低的趨勢，當(dāng)溫度為20 ℃時，產(chǎn)卵率最大，當(dāng)溫度繼續(xù)升高時，產(chǎn)卵率下降[21]，雖然所用種不同，但此結(jié)果與本實驗得到的結(jié)果基本是一致的；此外，Santhanam和Perumal的研究表明，(15±1)℃時堅長腹劍水蚤(Oithonarigida)的孵化率低，而最大孵化率99.8%在最適溫度(26±2)℃處獲得[22]；羅曉霞等的研究表明，溫度對雙齒許水蚤的孵化率影響顯著(P<0.05)，其最適溫度為30 ℃，孵化率達(dá)82.7%[23]；鄭重等的研究也表明，橈足類的產(chǎn)卵量隨著溫度升高而加速，但超過最適溫度就開始下降，而最適溫度則因種類而異[24]；Uye對克氏紡錘水蚤(Acartiaclausi)的研究也表明，較高溫度對產(chǎn)卵率有抑制效應(yīng)[25]。綜合以上實驗可以猜測，溫度可能是通過對能量積累或激素分泌速度的控制而起作用[26]。此外，因為指狀偽鏢水蚤春夏兩季數(shù)量不是很多，到初秋，數(shù)量驟增，個體亦較大，帶卵雌體較多，體內(nèi)布滿金黃色的油點，入冬后數(shù)量極少，所以其平時生活水溫一般為10～20 ℃。本實驗的結(jié)果可以推測，當(dāng)溫度大于20 ℃時，其機(jī)體就會不適應(yīng)，對卵的孵化和無節(jié)幼蟲的發(fā)育不利，導(dǎo)致孵化率降低。

指狀偽鏢水蚤的卵孵化時間與溫度的變化具有顯著相關(guān)性，隨著溫度的升高呈現(xiàn)出明顯縮短的趨勢，溫度為10 ℃時，指狀偽鏢水蚤的平均孵化時間長達(dá)175 h，溫度升高到15 ℃時，平均孵化時間迅速縮短到77.7 h，之后隨著溫度的繼續(xù)升高，孵化時間繼續(xù)下降，但相對較緩一些。用最小二乘法擬合的公式顯示，指狀偽鏢水蚤卵的孵化時間隨溫度的變化符合指數(shù)函數(shù)。Yoshida等研究了溫度對馬六甲海峽3種紡錘水蚤刺尾紡錘水蚤(Acartiaspinicauda)、紅紡錘水蚤(A.erythraea)、和太平洋紡錘水蚤(A.pacifica)卵孵化時間的影響，并且得出孵化時間隨溫度的變化均符合指數(shù)函數(shù)[27]。Checkley[28]對小擬哲水蚤(Paracalanusparvus)以及Uye[29]對中華哲水蚤(Calanussinicus)的研究也得到了卵孵化時間隨溫度變化呈現(xiàn)指數(shù)變化規(guī)律。Yoshida等在研究中指出每個物種受地理環(huán)境獨特適應(yīng)性的影響，指數(shù)函數(shù)的表現(xiàn)形式不盡相同，相比較而言，熱帶物種的卵孵化時間對溫度的反應(yīng)要比溫帶和亞極地地區(qū)的要更為敏感。并且卵的孵化溫度和親本的馴化溫度都對卵的孵化時間有顯著影響[27]。Landry[30]發(fā)現(xiàn)對于克氏紡錘水蚤在冬季(8～10 ℃)采集的卵發(fā)育速度顯著快于夏季(15～20 ℃)采集的卵。但是，Uye和Fleming重復(fù)了實驗，沒有成功得到Landry的結(jié)果，而是得出克氏紡錘水蚤全年產(chǎn)卵都具有相似的生理學(xué)特性。這場爭論的核心問題是卵孵化時間是基因決定還是環(huán)境誘導(dǎo)的。

Tester[31]發(fā)現(xiàn)對于湯氏紡錘水蚤親本的馴化溫度和卵的孵化溫度對于卵的孵化時間是加成的，卵孵化時間不僅取決于自身所處環(huán)境溫度，而且受親本馴化溫度的影響。如果親本馴化溫度長期固定，培養(yǎng)溫度變化在86 h到8 d之間能夠充分影響卵孵化時間。他還指出影響卵孵化時間的溫度變化時間取決于溫度變化的方向和程度。本實驗中的孵化實驗進(jìn)行前將親本在各自的實驗溫度條件下馴化了2周的時間，保證了馴化溫度條件的長期穩(wěn)定性，消除了溫度的短時間驟變對親本和卵孵化的不利影響。

指狀偽鏢水蚤的24 h產(chǎn)糞粒數(shù)隨著溫度的升高呈現(xiàn)逐漸增加后又降低的趨勢。從10 ℃開始，隨著溫度的升高指狀偽鏢水蚤的24 h產(chǎn)糞粒數(shù)也逐漸升高，在30 ℃時24 h產(chǎn)糞粒數(shù)達(dá)到最大值154.6粒。其后，在35 ℃時有所下降為118粒。從側(cè)面反映了由于溫度變化造成了指狀偽鏢水蚤攝食和消化代謝的提高，進(jìn)而導(dǎo)致了產(chǎn)糞粒數(shù)的增加。

3.2 鹽度對指狀偽鏢水蚤產(chǎn)糞及孵化的影響

鹽度實驗中，指狀偽鏢水蚤的卵孵化率隨著鹽度的升高呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢。鹽度10時孵化率最大為75.1%，鹽度15和20時的孵化率略微下降，其后當(dāng)鹽度超過25時孵化率有較大下降，在鹽度為40時孵化率為0，說明指狀偽鏢水蚤不能耐受此鹽度。Cortney等認(rèn)為，河口動物適應(yīng)鹽度的變化與滲透壓和離子調(diào)節(jié)機(jī)制密切相關(guān)，當(dāng)鹽度改變時，動物可以通過呼吸和排泄器官的調(diào)節(jié)機(jī)制來調(diào)節(jié)滲透壓和離子濃度[32]。因此可以認(rèn)為鹽度過高，超過了成體的調(diào)節(jié)范圍而導(dǎo)致其死亡。羅曉霞等人對雙齒許水蚤的研究表明，鹽度對雙齒許水蚤的孵化率和孵化時間影響不顯著(P>0.05)。不同鹽度下雙齒許水蚤的孵化時間無明顯差別，均為48 h[23]。而本實驗中指狀偽鏢水蚤的孵化時間隨鹽度的升高逐漸增加。從鹽度為10時的40 h，逐漸增加到鹽度30時的47.8 h，當(dāng)鹽度達(dá)到35時，其孵化時間迅速增加到76.9 h。這是因為雙齒許水蚤是典型的廣鹽性浮游生物，對鹽度的變化具有較強(qiáng)的適應(yīng)能力，而指狀偽鏢水蚤耐鹽性較差，不耐受高鹽度，因此鹽度變化對其卵孵化率和孵化時間均有顯著影響。

雌性指狀偽鏢水蚤的24 h產(chǎn)糞粒數(shù)隨鹽度的升高總體上呈下降趨勢。鹽度為10時24 h產(chǎn)糞粒數(shù)最高為150.4粒，當(dāng)鹽度升高到15時產(chǎn)糞粒數(shù)出現(xiàn)小幅下降，一直到鹽度30時，產(chǎn)糞粒數(shù)都維持在一個比較穩(wěn)定的狀態(tài)，其后當(dāng)鹽度為35時，其24 h產(chǎn)糞粒數(shù)出現(xiàn)較大下降僅為52粒。產(chǎn)糞粒數(shù)的變化反映了指狀偽鏢水蚤對鹽度的低耐受性，低鹽狀態(tài)下生活狀態(tài)更好，產(chǎn)糞粒數(shù)更多。

由于指狀偽鏢水蚤生活于淡水、咸淡水和低鹽度海水中，實驗中低鹽度接近其生活環(huán)境的鹽度，適合其卵的孵化以及成體的代謝，因此其孵化率、產(chǎn)糞粒數(shù)在低鹽度10時最高，且孵化時間也最短。

3.3溫度與鹽度實驗對比

指狀偽鏢水蚤的卵孵化率隨溫度的升高呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢，在20 ℃時達(dá)到最大孵化率96.8%，比最低孵化率高出32.3個百分點，而鹽度實驗中，指狀偽鏢水蚤的卵孵化率隨著鹽度的升高呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢，不僅變化趨勢與溫度實驗不同，且變化幅度比溫度實驗要小。指狀偽鏢水蚤的卵孵化時間隨著溫度的升高呈現(xiàn)出明顯縮短的趨勢，10 ℃時平均孵化時間長達(dá)175 h，15 ℃時迅速縮短到77.7 h，其后小幅降低，二者相關(guān)性顯著符合指數(shù)函數(shù)的特征，而孵化時間隨鹽度的升高逐漸增加，從鹽度10時的40 h，逐漸增加到鹽度30時的47.8 h，鹽度35時孵化時間迅速增加到76.9 h，變化趨勢與溫度實驗相反，且變化幅度要小。指狀偽鏢水蚤24 h產(chǎn)糞粒數(shù)隨著溫度的升高呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢，而隨鹽度的升高總體上呈下降趨勢。通過對溫度實驗和鹽度實驗的對比不難發(fā)現(xiàn)，相較于鹽度，溫度對雌性指狀偽鏢水蚤產(chǎn)糞粒數(shù)、卵孵化率及孵化時間的影響更明顯。溫度是海洋浮游動物橈足類孵化的一個重要影響因子，合理地控制溫度有利于提高孵化率，縮短孵化周期。由于指狀偽鏢水蚤能生活于淡水、咸淡水和低鹽度海水中，其鹽度耐受范圍相對比較寬，因此鹽度對其影響不如溫度明顯，但低鹽度更適合其生長繁殖。

糞粒是影響橈足類培養(yǎng)水質(zhì)的最重要因素,孵化率和孵化時間是衡量橈足類培養(yǎng)效率的重要指標(biāo)。本研究初步揭示了溫度和鹽度對指狀偽鏢水蚤的影響,并得出了其最適培養(yǎng)溫度為20 ℃，最適培養(yǎng)鹽度為10，為其多世代連續(xù)培養(yǎng)提供了技術(shù)資料。

致謝:感謝實驗室同學(xué)們在實驗過程中的幫助。

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責(zé)任編輯 高 蓓

Effects of Temperature and Salinity on the Hatching and Fecal Production ofPseudodiaptomidaeinopinus

LI Guang-Fu, ZHU Li-Yan, WANG Xiao-Min, HAN Cui, JIANG Tian-Tian

(College of Marine Life Sciences, Ocean University of China, Qingdao 266003，China)

Copepods are important components of marine zooplankton.Pseudodiaptomidaeinopinuswas chosen as our experimental subjects for the wide distribution and easy observation of its hanging eggs. The experiment set up a series of temperature and salinity gradients to investigate its temperature and salinity adaptation. The results: Temperature has significant effects on the hatching rate, hatching time and fecal production of the femaleP.inopinus(P<0.05). In the range of 10 ℃ to 35 ℃, as the temperature rises, the hatching rate ofP.inopinusincreases, and the maximum number appears at 20 ℃ before a slightly downing. The hatching time showed a clear trend of shortening, and the number of fecal production in 24 h presented a gradually elevated and slightly lowered trend. Salinity has significant effects on hatching rate, hatching time and fecal production (P<0.05). When the salinity was in the range of 10 to 40, as salinity increased, theP.inopinushatching number decreased gradually, hatching time expended slowly and gradually, and the fecal production in 24 h decreased overall. Based on the experiment, we can conclude that the best culture temperature is 20 ℃ and the best salinity is 10 for eggs hatching. Compared with salinity, it is more susceptible to the influence of temperature.

Pseudodiaptomidaeinopinus; temperature; salinity; hatching rate; hatching time; the number of fecal production

國家自然科學(xué)基金項目(31172412)；國家科技重大專項子課題項目(2012ZX07501-003-06)資助

2014-12-19；

2015-05-11

李光福(1988-)，男，碩士，研究方向為海洋生態(tài)學(xué)。E-mail: 294865452@qq.com

??通訊作者： E-mail: lyzhu@ouc.edu.cn

X171.5

A

1672-5174(2015)11-036-07

10.16441/j.cnki.hdxb.20140419