胡羽鵬　顧浩威

摘 要：建立了同時(shí)測(cè)定紡織纖維中分散藍(lán)1和分散黃3的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析方法。紡織品材料經(jīng)甲醇超聲提取后，以C18色譜柱分離，乙腈（A）-5mmol/L乙酸銨（B）作流動(dòng)相，進(jìn)行HPLC-MS/MS在MRM模式下的定性及定量分析。分散藍(lán)1和分散黃3在0.1-0.8μg/mL范圍內(nèi)有很好的線性，r2可達(dá)0.99，分散藍(lán)1的檢出限為5.0μg/mL，分散黃3的檢出限為2.5μg/mL。樣品加標(biāo)實(shí)驗(yàn)中，分散藍(lán)1和分散黃3的加標(biāo)回收率為85.9%-103.6%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為1.59%-5.39%。該方法準(zhǔn)確、快速、靈敏度高，適用于紡織品中分散藍(lán)1和分散黃3含量的定性、定量測(cè)定。

關(guān)鍵詞：液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜；紡織品；分散藍(lán)1；分散黃3

隨著電視、互聯(lián)網(wǎng)的傳播，犯罪分子的反偵查能力越來越強(qiáng)，傳統(tǒng)的指紋、足跡的痕跡物證通常會(huì)被破壞，而在犯罪案件現(xiàn)場(chǎng)中常常保留有各種紡織纖維的微量物證，而分析檢驗(yàn)這些微量物證可以為案件指明方向并提供直接證據(jù)。紡織纖維中的分散藍(lán)1和分散黃3是紡織纖維中的致敏染料，常常會(huì)引起人體或動(dòng)物的過敏。染色過程中，染料分子通過吸附、擴(kuò)散等多重處理，從而使染液轉(zhuǎn)移到被染物上[2]。通過對(duì)致敏染料的檢驗(yàn)分析，可以為案件偵破提供方向和證據(jù)。

對(duì)分散藍(lán)1和分散黃3檢測(cè)的方法有很多種，王明泰[2]等采用了氣相色譜-質(zhì)譜法、陳美娟[3]、胡奇志[4]等采用液相色譜法對(duì)分散藍(lán)1和分散黃3進(jìn)行了測(cè)定，但是前處理都相對(duì)繁瑣，靈敏度不高。文章采用甲醇超聲提取后用LC-MS-MS測(cè)定，方法簡(jiǎn)單快速、靈敏度高。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

標(biāo)準(zhǔn)品購置：分散藍(lán)1（99%）和分散黃3（99%），購于美國(guó)Dr Ehrenstorser GmbH公司；甲醇、乙腈均為色譜純。

LC-MS-MS系統(tǒng)：API 4000（ESI）配 LC-30液相系統(tǒng)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液配制

標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱取分散藍(lán)1、分散黃3固體標(biāo)準(zhǔn)品各0.01g（精確到0.001g），用甲醇配制成濃度為0.1mg/mL的分散藍(lán)1和分散黃3儲(chǔ)備液，4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 樣品的制備

取紡織纖維混合均勻，準(zhǔn)確稱取紡織纖維1.0g（精確至0.001g）于50mL比色管中，再加入10mL甲醇，放于70℃恒溫震蕩水浴中20min。然后再70℃恒溫超聲提取10min。取有機(jī)相。殘?jiān)屑尤?0mL甲醇，再次提取2次，合并有機(jī)相。有機(jī)相吹氮濃縮、用甲醇定容至1mL，最后用0.45μm濾膜過濾，備用。

1.2.3測(cè)定條件。

（1）液相色譜條件

色譜柱：ZORBAXExtendC18柱（4.6×150mm×3.5μm）；流動(dòng)相：乙腈（A）-5mmol/L乙酸銨（B），梯度洗脫（程序見表1）；柱溫為40℃；進(jìn)樣量為2μL。

（2）質(zhì)譜條件

電噴霧離子源，噴霧電壓（IS）為5500V，離子源溫度（TEM）為600℃；碰撞氣為6psi；氣簾氣為24psi；霧化氣為60psi。多反應(yīng)監(jiān)測(cè)各離子對(duì)及各優(yōu)化參數(shù)見表2。

2 結(jié)果與討論

2.1 提取溶劑的選擇

分散藍(lán)1和分散黃3較易溶于醇、酮等多種有機(jī)溶劑。選取常用有機(jī)溶劑乙酸乙酯、甲醇、正己烷和丙酮為提取試劑進(jìn)行了加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)表明，用甲醇提取時(shí)，分散藍(lán)1和分散黃3的回收率都能達(dá)到85%以上，并且提取的干擾雜質(zhì)少，所以最終選定甲醇作為提取溶劑。

2.2 色譜條件的優(yōu)化

2.2.1 色譜柱的選擇

本實(shí)驗(yàn)采用規(guī)格為4.6×150mm×3.5μm的AgilentZORBAXExtend色譜柱為分離柱。

采用乙腈和5mmol/L乙酸銨水溶液為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，2種目標(biāo)物均分離良好，峰型尖銳對(duì)稱，且目標(biāo)峰沒有基質(zhì)干擾，如圖1所示。

2.3 質(zhì)譜條件的選擇和優(yōu)化

首先采用0.8μg/mL分散藍(lán)1和分散黃3標(biāo)準(zhǔn)溶液，采用蠕動(dòng)泵樣方式進(jìn)樣，在ESP+全掃描模式下找出母離子，經(jīng)確定為分子離子，然后對(duì)其子離子進(jìn)行全掃描，最后選取豐度較強(qiáng)的2個(gè)子離子，優(yōu)化其錐孔電壓、碰撞能量等質(zhì)譜參數(shù)。選取豐度較大并且響應(yīng)穩(wěn)定的來做定量離子。

2.4 校準(zhǔn)曲線、線性范圍及檢出限

取分散藍(lán)1和分散黃3混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定，其濃度分別為：0.0，0.05，0.1，0.2，0.4，0.8，1.2μg/mL，以峰面積（Y）對(duì)濃度（X，μg/mL）進(jìn)行線性回歸，得到校準(zhǔn)曲線，結(jié)果見表3。結(jié)果表明：分散藍(lán)1和分散黃在0.1～0.8μg/mL范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)均可達(dá)到0.99以上、線性關(guān)系良好。

采用信噪比S/N=3的計(jì)算方式測(cè)算檢出限，分散藍(lán)1的檢出限為5.0μg/kg，分散黃3的檢出限為2.5μg/kg。

2.5 回收率、變異系數(shù)

在紡織纖維樣品中添加濃度為0.4μg/mL的分散藍(lán)1和分散黃3混合標(biāo)液，經(jīng)上述方法進(jìn)行測(cè)定，樣品空白和加標(biāo)的色譜圖和質(zhì)譜圖如圖2所示，結(jié)果表明：在此色譜條件下能很好的將這2種目標(biāo)物質(zhì)分離。

分散藍(lán)1和分散黃3的加標(biāo)回收率及5次重復(fù)測(cè)定的變異系數(shù)結(jié)果見表4。結(jié)果表明：分散藍(lán)1和分散黃3的平均回收率在85.9%-103.6%之間，變異系數(shù)（RSD）在1.59%-5.39%之間。

3 結(jié)束語

采用HPLC-MS/MS同時(shí)測(cè)定紡織纖維中分散藍(lán)1和分散黃3，方法準(zhǔn)確、快速、靈敏度高，適用于紡織品中分散藍(lán)1和分散黃3含量的定性、定量測(cè)定。

參考文獻(xiàn)

[1]何瑾馨.染料化學(xué)[M].北京：中國(guó)紡織出版社，2009：11.

[2]王明泰，牟峻，周曉，等.氣相色譜/質(zhì)譜（GC/MS）聯(lián)用技術(shù)在紡織品安全檢測(cè)中的應(yīng)用[J].檢驗(yàn)檢疫科學(xué)，2007，17：105-108.

[3]陳美娟，李亞明，張蓉，等.高效液相色譜法測(cè)定紡織品上的致敏性分散染料[J].染料與染色，2006，43（4）：51-52.

[4]胡奇志，黎宏彥，李少冥.反相高效液相色譜法測(cè)定偶氮分散染料混合物的研究[J].分析化學(xué)，1994，22（4）：429.

[5]李懿睿，郭衛(wèi)榮.液相色譜-質(zhì)譜法快速測(cè)定紡織品中6種致敏性分散染料[J].實(shí)驗(yàn)室研究與探索，2010，29（2）：11-13.

[6]馬強(qiáng)，白樺，王超，等.超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定玩具中的16種致癌和致敏染料[J].分析化學(xué)，2010，38（1）：51-56.