廖永平
【摘 要】 目的:對(duì)梅毒檢驗(yàn)的假陰性與假陽性原因進(jìn)行分析,以便提高梅毒臨床檢驗(yàn)過程中準(zhǔn)確率。方法:選取檢驗(yàn)出現(xiàn)假陰性與假陽性的臨床資料進(jìn)行分析。結(jié)果:導(dǎo)致梅毒檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)假陰性或者假陽性,主要是實(shí)驗(yàn)操作不當(dāng)、試劑用量及檢驗(yàn)方法等方面的影響。結(jié)論:為有效提高梅毒檢驗(yàn)準(zhǔn)確率,要求患者、實(shí)驗(yàn)室醫(yī)師、臨床醫(yī)師以及家屬之間要緊密配合。
【關(guān)鍵詞】 梅毒;檢驗(yàn);假陰性;假陽性
【中圖分類號(hào)】R275.3 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文章編號(hào)】1007-8517(2015)13-0149-01
臨床中診斷梅毒主要采取血清學(xué)檢測(cè),常用的檢測(cè)方法是梅毒螺旋體抗體明膠凝集試驗(yàn)法和酶聯(lián)免疫試驗(yàn)法,均具有較高的敏感性[1]。但在實(shí)際工作中,易出現(xiàn)假陰性、假陽性的情況,給臨床工作帶來較大影響。為有效提高梅毒檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,筆者對(duì)梅毒檢驗(yàn)的假陰性與假陽性原因進(jìn)行探討,現(xiàn)報(bào)道如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料 選取2010年5月至2013年5月在我院門診實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢驗(yàn)的8萬例患者作為研究對(duì)象。其中,男性患者和女性患者的比例為1∶1,年齡0~82歲。
1.2 方法 對(duì)進(jìn)行檢驗(yàn)的8萬例患者中出現(xiàn)假陰性與假陽性結(jié)果的臨床情況進(jìn)行分析,并探討原因。主要采用血漿反應(yīng)素試驗(yàn)法(RPR)和梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)法進(jìn)行檢測(cè)(TPPA)。操作時(shí),嚴(yán)格根據(jù)試劑盒說明書進(jìn)行操作。其中,TPPA測(cè)定:首先對(duì)待驗(yàn)的血清進(jìn)行稀釋處理,然后將其加入到非致敏粒子與致敏粒子中,運(yùn)用平板混合器混合半分鐘后,將其放置到15~30℃的室溫下靜置,兩小時(shí)后觀察結(jié)果。RPR滴度測(cè)定:在紙卡圓圈內(nèi)放置50μl梅毒陽性對(duì)照、陰性對(duì)照以及待檢血清,使用專用滴管將1滴RPR試劑加入到紙卡圓圈內(nèi),按照100r/min的速度搖動(dòng),8min后觀察結(jié)果。
2 結(jié)果
對(duì)8萬例患者檢驗(yàn)檢查結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì),共出現(xiàn)1024例錯(cuò)誤結(jié)果,占檢驗(yàn)患者的1.28%。其中,假陽性492例,占錯(cuò)誤率的48.0%,假陰性532例,占錯(cuò)誤率的52.0%。
3 討論
臨床中,部分患者患有疾病,但血清學(xué)試驗(yàn)后結(jié)果顯示為陰性,而部分正常人群,經(jīng)血清學(xué)試驗(yàn)后顯示為陽性,大大加大了臨床診斷難度,給臨床工作帶來較大麻煩。因此,對(duì)檢驗(yàn)的陰性、陽性結(jié)果進(jìn)行仔細(xì)分析十分重要。以下對(duì)梅毒假陽性和假陰性的影響因素進(jìn)行探討:
3.1 假陽性的影響因素分析 臨床對(duì)梅毒的檢測(cè)主要采取血清學(xué)試驗(yàn),而酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)與梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)法為最常用的檢測(cè)方法。其中,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法主要具備高敏感性、高特異性、檢測(cè)費(fèi)用少的優(yōu)點(diǎn),在采供血單位和醫(yī)療單位中應(yīng)用廣泛[2]。但均存在不同程度的假陽性。通過對(duì)梅毒假陽性發(fā)生的原因進(jìn)行分析,主要包括以下因素:①基礎(chǔ)疾病因素:肺癌、腸癌、子宮內(nèi)膜癌、腹腔內(nèi)膜癌等癌癥,肺結(jié)核、血液病、自身免疫性疾病等患者因自身免疫環(huán)境改變,導(dǎo)致出現(xiàn)誤診。其中,腫瘤患者具有高抗體滴度的特點(diǎn),炎癥、老年人則具有低滴度的特點(diǎn)。因此,對(duì)炎癥、老年人患者進(jìn)行診斷時(shí),可將檢測(cè)滴度小于1∶9的情況排除梅毒,但癌癥患者具有高滴度特點(diǎn),易導(dǎo)致發(fā)生誤診的情況。②標(biāo)本因素:導(dǎo)致的假陽性主要包括血液標(biāo)本離心處理不徹底、發(fā)生溶血以及細(xì)菌污染等因素。其中,血液標(biāo)本溶血后,血細(xì)胞被破壞,細(xì)胞內(nèi)液中的活性酶以及其具有酶樣活性的物質(zhì)能夠和底物非特異性結(jié)合;血紅蛋白具備的類過氧化物酶活性,效應(yīng)類似于辣根過氧化物酶,發(fā)生溶血后,孔非特異性會(huì)吸附Hb,催化產(chǎn)物會(huì)產(chǎn)生顯色,進(jìn)而升高本底A值,導(dǎo)致為假陽性。如血標(biāo)本內(nèi)纖維蛋白析出不完全,容易在板孔內(nèi)形成絮狀物或者纖維蛋白薄膜,并殘留于相應(yīng)孔內(nèi),進(jìn)而提高吸光度值,導(dǎo)致假陽性。血液標(biāo)本被細(xì)菌污染后,細(xì)菌體內(nèi)會(huì)出現(xiàn)內(nèi)源性辣根過氧化物酶,進(jìn)而影響相應(yīng)酶的測(cè)定方法產(chǎn)生影響,出現(xiàn)非特異性干擾,最終導(dǎo)致出現(xiàn)假陽性。
3.2 假陰性的原因分析 梅毒出現(xiàn)假陰性主要受到以下幾個(gè)因素影響:①技術(shù)因素:受到部分檢驗(yàn)人員自身技術(shù)因素影響,對(duì)實(shí)驗(yàn)條件比較模糊,存在不嚴(yán)格按照操作標(biāo)準(zhǔn)加入抗原量、隨意改變?cè)噭┝康那闆r,進(jìn)而降低實(shí)驗(yàn)靈敏度和抗體滴度,導(dǎo)致發(fā)生假陰性。②檢測(cè)方法學(xué):梅毒患者早期血清內(nèi)的反應(yīng)素含量較少;或部分患者體內(nèi)含有的血清反應(yīng)素量較高,導(dǎo)致假陰性出現(xiàn)。③其他方面的因素:主要包括患者就診率增高、濫用抗生素等[3]。
為有效提高早期梅毒確診準(zhǔn)確率,降低假陰性發(fā)生率,實(shí)驗(yàn)室工作人員要對(duì)試驗(yàn)中的儀器、試劑等進(jìn)行嚴(yán)格監(jiān)測(cè),嚴(yán)格按照規(guī)范流程進(jìn)行操作,最大程度減少操作因素帶來的誤差。另外,做好稀釋試驗(yàn),有效避免前滯現(xiàn)象導(dǎo)致發(fā)生的假陰性;臨床醫(yī)師在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢查前,詳細(xì)詢問患者病史,了解患者服藥情況,囑咐患者積極配合醫(yī)師進(jìn)行檢查,如檢查前保持空腹、停止服用其他藥物等。此外,在條件允許的情況下,可應(yīng)用特異性和敏感性的檢查法?;颊摺⑴R床醫(yī)生以及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)之間的緊密配合,能夠?yàn)樘岣吲R床診斷正確率提供重要依據(jù)。
綜上所述,梅毒患者檢驗(yàn)結(jié)果會(huì)出現(xiàn)假陰性和假陽性,為有效提高梅毒檢驗(yàn)準(zhǔn)確率,要求患者、實(shí)驗(yàn)室醫(yī)師、臨床醫(yī)師之間要緊密配合。
參考文獻(xiàn)
[1] 武強(qiáng),章雙虎,柯文才,等.化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)梅毒特異性抗體進(jìn)行梅毒篩查的可行性評(píng)價(jià)[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2014,24(3):769-771.
[2] 謝昭寧.多種不同梅毒檢驗(yàn)方法檢測(cè)梅毒螺旋體的結(jié)果準(zhǔn)確率比較[J].安徽醫(yī)藥,2013,17(5):797-799.
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(收稿日期:2015.03.06)