沈 軍 俞 蕙 朱啟镕

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·綜述·

2014至2015年流感季節(jié)H7N9的新威脅

沈 軍 俞 蕙 朱啟镕

在H7N9禽流感病毒成功進(jìn)化并開(kāi)始感染人類后，在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的第一波和第二波病毒流行攻擊后[1]，H7N9尚未能獲得在人際傳播的能力，最近的研究發(fā)現(xiàn)，H7N9仍在快速的不斷進(jìn)化中[2～14]，在人類中有較高致病性的H7N9病毒一旦獲得人傳人的能力后，必將在整個(gè)人群中大流行，對(duì)人類造成不可預(yù)測(cè)的沖擊[3,14～20]。

在2003年2月H7N9是第一個(gè)流感季節(jié)，實(shí)驗(yàn)室確診134例。至2014年10月2日，全球有453例人感染H7N9禽流感發(fā)生，死亡175例。WHO匯總數(shù)據(jù)表明，中國(guó)大陸報(bào)告438例，中國(guó)臺(tái)灣報(bào)告4例，中國(guó)香港報(bào)告10例，馬來(lái)西亞報(bào)告1例(中國(guó)大陸輸入病例)。2014年10月29日至2015年1月8日本文成稿時(shí)，中國(guó)大陸又報(bào)告了16例，其中有活禽市場(chǎng)暴露史13例[1]。H7N9被發(fā)現(xiàn)后的22個(gè)月內(nèi)，中國(guó)大陸H7N9感染病死率為38.8%(182/469)，從北方至南方、從東部至西部地區(qū)均有檢出，且在連續(xù)2個(gè)夏秋季節(jié)均呈散發(fā)流行，冬季局部暴發(fā)流行[1]；在剛剛開(kāi)始的2014至2015年流感季節(jié)中，H7N9有可能再次在中國(guó)大陸流行。

1 禽流感、豬流感、人流感及H7N9禽流感病毒

根據(jù)流感病毒核蛋白(NP)和基質(zhì)蛋白(MP)的不同特性分為甲、乙、丙型(或稱A、B、C型)。病毒株的命名按照抗原型別/宿主/發(fā)現(xiàn)地/毒株標(biāo)號(hào)/分離年份/血凝素亞型/神經(jīng)氨酸酶亞型原則，如A/duck/Zhejiang/12/2011(H7N3)。根據(jù)包膜糖蛋白血凝素(HA)和神經(jīng)氨酸酶(NA)抗原性差異，甲型流感病毒可分為若干亞型，目前已經(jīng)公認(rèn)主要有16個(gè)HA亞型(H1～H16)，9個(gè)NA亞型(N1～N9)，HA及NA可任意組合為不同的亞型。根據(jù)宿主不同，甲型流感病毒可分為人流感病毒、禽流感病毒(AIV)、豬流感病毒(SIV)、馬流感病毒及鯨流感病毒等。H17N10 和H18N11在2012年和2013年從蝙蝠中被發(fā)現(xiàn)，未在其他物種中發(fā)現(xiàn)[21,22]。在人類中流行的主要有H1N1、H2N2和H3N2亞型，也是人類季節(jié)性流感的主要流感病毒。在豬中流行的主要有H1N1、H4N6和H9N2亞型，偶爾也感染人，同時(shí)由于豬常能從鳥(niǎo)類、人類等其他物種感染流感病毒，使得豬成為不同病毒進(jìn)行重組的重要載體或者“混合器”，使新的流感病毒產(chǎn)生并感染其他物種[23]。禽類可以感染除了H17N10 和H18N11外的其他HA及NA亞型，尤其是水禽為甲型流感病毒的天然宿主和基因儲(chǔ)存庫(kù)，其中H5N1、H9N2、H7N7、H5N2和H10N7等都有感染人類的報(bào)道。禽類感染流感病毒主要通過(guò)糞口途徑傳播，而哺乳類動(dòng)物則主要通過(guò)呼吸道感染傳播。乙、丙流感病毒主要在人類流行。

2013年2月在中國(guó)上海新發(fā)現(xiàn)的H7N9流感病毒是第1次在人類發(fā)現(xiàn)的新病毒[2]。對(duì)病毒基因序列的分析證明H7N9流感病毒是一種新重組產(chǎn)生的能感染人類、豬和禽類跨物種傳播的病毒。

2013年4月17日， 世界糧農(nóng)組織、世界動(dòng)物衛(wèi)生組織和WHO共同將新發(fā)現(xiàn)的H7N9流感病毒命名為甲型H7N9禽流感病毒。對(duì)不同物種感染這種病毒后采用不同表述，如人感染甲型H7N9禽流感病毒或甲型H7N9禽流感病毒造成的疾病、雞(豬)感染甲型H7N9禽流感病毒或甲型H7N9禽流感病毒造成的雞(豬)發(fā)病。

2 人類流感流行及暴發(fā)

流感病毒持續(xù)的抗原漂移導(dǎo)致人體對(duì)既往感染過(guò)的流感病毒HA及NA產(chǎn)生的中和抗體不能有效避免機(jī)體感染新的病毒，使得人群中持續(xù)存在一定水平的流感病毒流行或者局部地區(qū)的小規(guī)模暴發(fā)流行。當(dāng)病毒包膜糖蛋白NA和HA發(fā)生較大的抗原特性改變即抗原轉(zhuǎn)變時(shí)，導(dǎo)致較大范圍的人群流感流行，甚至全球流感大流行。在人類歷史上，比較明確的甲型流感病毒暴發(fā)流行見(jiàn)表1，真正意義上的全球大流行有7次。

3 流感病毒跨物種傳播

有些流感病毒尤其是甲型流感病毒是人畜共患病原體，但并非所有的動(dòng)物界流感病毒都能傳播至人類。之所以有嚴(yán)格的種屬特異性，在于病毒HA序列受體結(jié)合位點(diǎn)

表1 甲型流感病毒暴發(fā)流行年

能否與宿主上皮細(xì)胞(主要是呼吸道和消化道上皮細(xì)胞)的特異性受體相結(jié)合。人流感病毒能與人類呼吸道上皮細(xì)胞流感病毒受體唾液酸α-2，6半乳糖苷(SA α-2，6-Gal)結(jié)合，禽類流感病毒能與禽類呼吸道上皮細(xì)胞病毒受體唾液酸α-2，3半乳糖苷(SA α-3，6-Gal )結(jié)合，而豬的上呼吸道上皮細(xì)胞同時(shí)存在上述2種受體，故人及禽類流感病毒都能感染豬。2種受體在人類、豬、雞的呼吸道和消化道的分布見(jiàn)圖1。

圖1 SA α-2，6-Gal和SA α-2，3-Gal在人類、豬呼吸道及雞呼吸道和消化道的分布示意圖

注 MAA-Ⅰ/Ⅱ：懷槐凝集素染色-Ⅰ/Ⅱ；星的大小代表富集度(MAA在人類呼吸道和豬鼻腔未進(jìn)行研究；MAA-Ⅰ在雞組織內(nèi)未進(jìn)行研究)。圖片引自文獻(xiàn)[24]，本文作者略有改動(dòng)

流感病毒結(jié)構(gòu)由外而內(nèi)可以分為囊膜、基質(zhì)蛋白及核心三部分。甲型和乙型流感病毒的遺傳物質(zhì)單股負(fù)鏈RNA(ssRNA)由8個(gè)節(jié)段組成，丙型流感病毒由7個(gè)節(jié)段組成。第1～3 節(jié)段編碼的是RNA 聚合酶，負(fù)責(zé)病毒遺傳物質(zhì)RNA 轉(zhuǎn)錄和復(fù)制；第4節(jié)段編碼血凝素蛋白HA，負(fù)責(zé)病毒侵入；第5節(jié)段編碼核蛋白，負(fù)責(zé)與遺傳物質(zhì)RNA組裝；第6節(jié)段編碼神經(jīng)氨酸酶NA，負(fù)責(zé)病毒釋放；第7節(jié)段編碼基質(zhì)蛋白M1和離子通道蛋白M2，負(fù)責(zé)組成病毒的基質(zhì)蛋白層；第8節(jié)段編碼非結(jié)構(gòu)蛋白，與RNA出核和拮抗宿主抗病毒反應(yīng)等有關(guān)。丙型流感病毒缺乏第4節(jié)段，其第6節(jié)段編碼的血凝素酯酶融合蛋白兼具行使病毒侵入和釋放兩種功能。負(fù)責(zé)病毒侵入的HA前體分子HA0裂解為HA1和HA2后，病毒才有感染性，而裂解位點(diǎn)氨基酸的組成，即堿性氨基酸的數(shù)量，決定病毒的毒力；如高致病性禽流感病毒裂解位點(diǎn)至少有4個(gè)堿性氨基酸，而低致病性禽流感可能只有1～2個(gè)堿性氨基酸。

當(dāng)病毒發(fā)生基因突變或者重組，尤其是關(guān)鍵的裂解位點(diǎn)或者受體結(jié)合位點(diǎn)發(fā)生改變后，會(huì)導(dǎo)致病毒的跨種屬傳播。

4 H7N9的可能來(lái)源

根據(jù)對(duì)分離到的H7N9病毒核苷酸序列及同源性分析，H7N9可能是4種不同的禽流感病毒重組后產(chǎn)生的新病毒[2,14～18]，盡管至今為止尚不知這種病毒在何種物種中產(chǎn)生及其主要的宿主、在動(dòng)物界的地理分布及流行病學(xué)特征等。H7N9病毒H7基因序列與中國(guó)大陸地區(qū)的野鴨流感病毒同源性最高，N9基因序列與中國(guó)大陸地區(qū)的野鳥(niǎo)流感病毒同源性最高，6條內(nèi)部基因(多聚酶PB2、PB1、PA基因、核蛋白NP基因、基質(zhì)蛋白M基因、非結(jié)構(gòu)蛋白NS基因)可能來(lái)源于2種不同的中國(guó)大陸地區(qū)家禽H9N2流感病毒。由于大部分實(shí)驗(yàn)室確診的病例有活禽市場(chǎng)接觸史，且在活禽市場(chǎng)的家禽糞便、周圍被污染的環(huán)境等檢測(cè)到H7及N9基因片段，人類被H7N9感染的來(lái)源可能是禽類市場(chǎng)的活禽及污染物，通過(guò)呼吸道或者直接接觸傳播感染[2,25～31]。人際間直接傳播H7N9在已經(jīng)確診的病例中有發(fā)現(xiàn)，但很罕見(jiàn)，提示H7N9目前在人與人之間的傳播能力非常有限[32～37]，也是WHO對(duì)H7N9風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的主要依據(jù)[38]，但H7N9仍在不斷變異中。

5 H7N9可能正在發(fā)生的進(jìn)化變異及帶來(lái)的威脅

H7N9流感病毒出現(xiàn)后，在動(dòng)物界及人類中表現(xiàn)為持續(xù)的流行，并可能持續(xù)變異，變異使病毒更易感染哺乳動(dòng)物[2～16,18]。

在病毒HA受體結(jié)合位點(diǎn)，H7N9在關(guān)鍵氨基酸位點(diǎn)出現(xiàn)了變異，如G186V(即186位氨基酸由甘氨酸G變?yōu)槔i氨酸V)、T160A及Q226L，使病毒更易與人呼吸道上皮細(xì)胞受體SA α-2，6-Gal 結(jié)合。既往對(duì)H5N1的研究發(fā)現(xiàn)，病毒HA蛋白中如果存在158D/224K/226L、110Y/160A/226L/228S和196R/226L/228S這3種突變組合中的一種，就使H5N1能在上呼吸道有效增殖并通過(guò)飛沫在流感病毒動(dòng)物模型雪貂中傳播[39～41]。目前分離到的H7N9病毒尚未有上述3個(gè)組合中的任何一種，但已經(jīng)出現(xiàn)關(guān)鍵位點(diǎn)T160A和Q226L的2個(gè)氨基酸的突變，如果病毒在進(jìn)化中獲得3個(gè)組合中另外2個(gè)關(guān)鍵位點(diǎn)的突變，將獲得在哺乳動(dòng)物之間飛沫傳播的能力，也可導(dǎo)致在人類中的大流行。實(shí)驗(yàn)也證明在雪貂中能復(fù)制H7N9導(dǎo)致的上、下呼吸道感染，但病毒通過(guò)飛沫在雪貂中傳播的能力非常有限[42～45]。

H7N9的NA裂解位點(diǎn)僅有1個(gè)堿性氨基酸為低致病性禽流感病毒(對(duì)鳥(niǎo)類和禽類而言)。其NA蛋白69～73位氨基酸缺失，可能會(huì)增加病毒毒力；部分H7N9分離株出現(xiàn)神經(jīng)氨酸酶活性位點(diǎn)R292K變異，導(dǎo)致病毒對(duì)流感病毒藥物神經(jīng)氨酸酶抑制劑(如奧司他韋、扎納米韋、帕拉米韋) 耐藥[46～49]。

流感病毒的離子通道蛋白M2是離子通道抑制劑金剛烷胺類藥物作用靶點(diǎn)，M2蛋白的耐藥性突變位點(diǎn)主要在26、27、30、31和34位氨基酸，其中任何一個(gè)氨基酸位點(diǎn)發(fā)生突變，都可能導(dǎo)致對(duì)離子通道抑制劑藥物產(chǎn)生耐藥性，目前分離到的所有H7N9都有N31S突變[49]。

此外，H7N9的PB2存在E627K突變，使得病毒在人體內(nèi)更有效地合成蛋白質(zhì)[4～6,50]。離子通道蛋白M1存在N30D與T215A突變，非結(jié)構(gòu)蛋白NS1有P42S突變，可能使H7N9禽流感病毒增加對(duì)人的致病性[46]。

6 人類對(duì)H7N9的風(fēng)險(xiǎn)及準(zhǔn)備

全球?qū)α鞲胁《镜谋O(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)，覆蓋人類及動(dòng)物界，包括了地區(qū)、國(guó)家層面與WHO全球流感監(jiān)測(cè)及反應(yīng)體系。在WHO官網(wǎng)上實(shí)時(shí)更新全球H7N9確認(rèn)病例情況及不定期的專家風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告。在全球，H7N9相應(yīng)的疫苗研制也在進(jìn)行中，但風(fēng)險(xiǎn)因素仍然存在。

H7N9禽流感病毒對(duì)全人類是一種新的病毒，整個(gè)人群對(duì)H7N9普遍易感。中國(guó)學(xué)者對(duì)既往庫(kù)存的人類血清和抗體檢測(cè)，未發(fā)現(xiàn)人類既往大范圍感染H7N9的免疫學(xué)反應(yīng)[51～53]。對(duì)活禽市場(chǎng)的工作人員行抗體檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，部分人體內(nèi)存在抗體反應(yīng)，提在這些人群既往可能感染過(guò)H7N9[54]。由此推測(cè)，H7N9感染后可能表現(xiàn)為輕癥或亞臨床感染，在目前部分實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)的感染病例中確實(shí)發(fā)現(xiàn)部分病例表現(xiàn)為輕癥[55]，而這些患者可能成為重要傳染源。

由于H7N9是一種低致病性禽流感，鳥(niǎo)類和禽類感染后大部分表現(xiàn)為“沉默性感染”，增加了病毒的傳播可能，在合法及非法的禽類交易市場(chǎng)和養(yǎng)殖場(chǎng)，H7N9病毒有大量的機(jī)會(huì)與其他流感病毒共存甚至共感染，從而增加獲得新的重組基因的可能性。

在H7N9檢測(cè)方法上，病毒的培養(yǎng)及核酸檢測(cè)一般僅限于實(shí)驗(yàn)室及科研機(jī)構(gòu)，臨床用于檢測(cè)流感病毒抗原的最常用的快速檢測(cè)法(膠體金法)可能無(wú)法有效檢測(cè)到H7N9，由此導(dǎo)致輕癥病例及第一批重癥病例可能被漏檢。除了加強(qiáng)對(duì)H7N9流行的監(jiān)測(cè)、盡量減少人群對(duì)病毒的暴露機(jī)會(huì)及加強(qiáng)個(gè)人手衛(wèi)生外，接種流感疫苗或許也是有效的預(yù)防措施。WHO 建議北半球2014至2015年流感季(11月至次年4月)和2014年南半球流感季(5月至10月)使用流感疫苗含有以下病毒株：A/California/7/2009(H1N1)類似株、A/Texas/50/2012 (H3N2)類似株、B/Massachusetts/2/2012類似株、B/Brisbane/60/2008類似株，三價(jià)疫苗含有2株A型和1株B型，四價(jià)疫苗含有2株A型和2株B型[55]。中國(guó)的流感疫苗組成遵循WHO建議。由于H7N9與上述疫苗病毒株之間的誘生抗體的交叉免疫保護(hù)還有待于研究，在H7N9流感疫苗上市并獲得大規(guī)模接種前，H7N9對(duì)人類的威脅仍可能非常之大。

7 結(jié)語(yǔ)

H7N9是一種新出現(xiàn)、能跨物種傳播、并在不斷進(jìn)化中的病毒，對(duì)人類可能是一種新的挑戰(zhàn)。從近百年數(shù)次流感大災(zāi)難中人類獲得的經(jīng)驗(yàn)和教訓(xùn)，從SARS及埃博拉病毒流行中獲得借鑒，人類需保持高度警惕，希望H7N9不會(huì)引發(fā)大流行，但人類必須為應(yīng)對(duì)以后必然的但又無(wú)法預(yù)測(cè)的大流行做好充分的準(zhǔn)備。

[1]http://www.who.int/csr/don/archive/year/2014/en/

[2]Gao R,Cao B,Hu Y,et al. Human infection with a novel avian-origin influenza A (H7N9) virus. N Engl J Med,2013,368(20):1888-1897

[3]Zhu W,Shu Y. Genetic tuning of avian influenza A (H7N9) virus promotes viral fitness within different species. Microbes Infect,2015,17(2):118-122

[4]Zhang H, Li X, Guo J, et al. The PB2 E627K mutation contributes to the high polymerase activity and enhanced replication of H7N9 influenza virus. J Gen Virol,2014,95(Pt 4):779-786

[5]Song W, Wang P, Mok BW, et al. The K526R substitution in viral protein PB2 enhances the effects of E627K on influenza virus replication. Nat Commun,2014,5:5509

[6]Kirui J, Bucci MD, Poole DS, et al. Conserved features of the PB2 627 domain impact influenza virus polymerase function and replication. J Virol,2014,88(11):5977-5986

[7]Mok CK, Lee HH, Lestra M, et al. Amino acid substitutions in polymerase basic protein 2 gene contribute to the pathogenicity of the novel A/H7N9 influenza virus in mammalian hosts. J Virol, 2014, 88(6):3568-3576

[8]Liu Q, Zhou B, Ma W et al. Analysis of recombinant H7N9 wild-type and mutant viruses in pigs shows that the Q226L mutation in HA is important for transmission. J Virol,2014,88(14):8153-8165

[9]Danzy S, Studdard LR, Manicassamy B, et al. Mutations to PB2 and NP proteins of an avian influenza virus combine to confer efficient growth in primary human respiratory cells. J Virol,2014,88(22):13436-13446

[10]Morrison J, Josset L, Tchitchek N, et al. H7N9 and other pathogenic avian influenza viruses elicit a three-pronged transcriptomic signature that is reminiscent of 1918 influenza virus and is associated with lethal outcome in mice. J Virol,2014,88(18):10556-10568

[11]Peng J, Yang H, Jiang H, et al. The origin of novel avian influenza A (H7N9) and mutation dynamics for its human-to-human transmissible capacity. PLoS One,2014,9(3):e93094

[12]Xu L, Bao L, Deng W, et al. Rapid adaptation of avian H7N9 virus in pigs. Virology, 2014, 452-453:231-236

[13]Xiong X, Martin SR, Haire LF et al. Receptor binding by an H7N9 influenza virus from humans. Nature, 2013,12(4):1333-1345

[14]To KK, Song W, Lau SY, et al. Unique reassortant of influenza A(H7N9) virus associated with severe disease emerging in Hong Kong. J Infect,2014,69(1):60-68

[15]Husain M.Avian influenza A (H7N9) virus infection in humans: Epidemiology, evolution, and pathogenesis. Infect Genet Evol, 2014, 28:304-312

[16]Gostin LO, Phelan A, Stoto MA, et al. Virus sharing, genetic sequencing, and global health security. Science, 2014,345(6202):1295-1296

[17]Liu D, Shi W, Shi Y, et al. Origin and diversity of novel avian influenza A H7N9 viruses causing human infection: Phylogenetic,structural,and coalescent analyses. Lancet,2013,381(9881):1926-1932

[18]Lam TT, Wang J, Shen Y, et al. The genesis and source of the H7N9 influenza viruses causing human infections in China. Nature,2013,502(7470):241-244

[19]Shi Y, Wu Y, Zhang W et al. Enabling the ′host jump′: structural determinants of receptor-binding specificity in influenza A viruses.Nat Rev Microbiol,2014,12(12): 822-831

[20]Watanabe T, Watanabe S, Maher EA et al. Pandemic potential of avian influenza A (H7N9) viruses. Trends Microbiol,2014,22(11):623-631

[21]Tong S, Li Y, Rivailler P, Conrardy C, et al. A distinct lineage of influenza A virus from bats. Proc Natl Acad Sci U S A, 2012,109(11):4269-4274

[22]Tong S, Zhu X, Li Y, et al. New world bats harbor diverse influenza A viruses. PLoS Pathog,2013,9(10):e1003657

[23]Ma W, Lager KM, Vincent AL,et al. The role of swine in the generation of novel influenza viruses. Zoonoses Public Health,2009,56(6-7):326-337

[24]de Graaf M, Fouchier RA. Role of receptor binding specificity in influenza A virus transmission and pathogenesis. EMBO J,2014,33(8):823-841

[25]Hsieh YH, Wu J, Fang J, Yang Y, Quantification of Bird-to-Bird and Bird-to-Human Infections during 2013 Novel H7N9 Avian Influenza Outbreak in China. PLoS One, 2014,9(12):e111834

[26]Yu X, Jin T, Cui Y, et al. Influenza H7N9 and H9N2 viruses coexistence in poultry linked to human H7N9 infection and genome characteristics. J Virol,2014,88(6):3423-3431

[27]Ke C, Lu J, Wu J et al. Circulation of Reassortant Influenza A(H7N9) Viruses in Poultry and Humans, Guangdong Province, China, 2013. Emerg Infect Dis,2014,20(12):2034-2040

[28]Liu W, Fan H, Raghwani J, et al. Occurrence and reassortment of avian influenza A (H7N9) viruses derived from coinfected birds in China. J Virol,2014 ,88(22):13344-13351

[29]Fan M, Huang B, Wang A, et al. Human influenza A(H7N9) virus infection associated with poultry farm, Northeastern China. Emerg Infect Dis,2014,20(11): 1902-1905

[30]Ma X, Liao Q, Yuan J, et al. Knowledge, attitudes and practices relating to influenza A(H7N9) risk among live poultry traders in Guangzhou City, China. BMC Infect Dis,2014,14:554

[31]Pantin-Jackwood MJ, Miller PJ, et al. Role of poultry in the spread of novel H7N9 influenza virus in China. J Viro,2014,88(10):5381-5390

[32]Ding H, Chen Y, Yu Z, et al. A family cluster of three confirmed cases infected with avian influenza A (H7N9) virus in Zhejiang Province of China. BMC Infect Dis,2014,14(1):3846

[33]Gao HN, Yao HP, Liang WF, et al. Viral genome and antiviral drug sensitivity analysis of two patients from a family cluster caused by the influenza A(H7N9) virus in Zhejiang, China, 2013. Int J Infect Dis,2014,29:254-258

[34]Hu J, Zhu Y, Zhao B, et al. Limited human-to-human transmission of avian influenza A(H7N9) virus, Shanghai, China, March to April 2013. Euro Surveill, 2014,19(25):20838

[35]Xiao XC, Li KB, Chen ZQ, et al. Transmission of avian influenza A(H7N9) virus from father to child: a report of limited person-to-person transmission, Guangzhou, China,January 2014. Euro Surveill,2014,19(25):20837

[36]Liu T, Bi Z, Wang X, et al. One family cluster of avian influenza A(H7N9) virus infection in Shandong, China. BMC Infect Dis,2014,14:98

[37]Song R, Pang X, Yang P, et al. Surveillance of the first case of human avian influenza A (H7N9) virus in Beijing, China. Infection,2014,42(1):127-133

[38]http://www.who.int/influenza/human_animal_interface/influenza_h7n9/Risk_Assessment/en/

[39]Imai M, Watanabe T, Hatta M, et al. Experimental adaptation of an influenza H5 HA confers respiratory droplet transmission to a reassortant H5 HA/H1N1 virus in ferrets. Nature,2012,486(7403):420-428

[40]Russell CA, Fonville JM, Brown AE, et al.The potential for respiratory droplet-transmissible A/H5N1 influenza virus to evolve in a mammalian host. Science,2012,236(6088):1541-1547

[41]Chen LM, Blixt O,Stevens J, et al. In vitro evolution of H5N1 avian influenza virus toward human-type receptor specificity. Virology,2012,422(1):105-113

[42]Richard M, Schrauwen EJ, de Graaf M,,et al. Limited airborne transmission of H7N9 influenza A virus between ferrets. Nature,2013,501(7468):560-563

[43]Zhu H, Wang D, Kelvin DJ, et al. Infectivity, transmission, and pathology of human-isolated H7N9 influenza virus in ferrets and pigs. Science,2013,341(6142):183-186

[44]Belser JA, Gustin KM, Pearce MB, et al. Pathogenesis and transmission of avian influenza A (H7N9) virus in ferrets and mice. Nature,2013,501(7468):556-559

[45]Zhang Q, Shi J, Deng G, et al. H7N9 influenza viruses are transmissible in ferrets by respiratory droplet. Science,2013,341(6144):410-414

[46]Kageyama T, Fujisaki S, Takashita E, et al. Genetic analysis of novel avian A(H7N9) influenza viruses isolated from patients in China, February to April 2013. Euro Surveill,2013,18(15):20453

[47]Hu Y, Lu S, Song Z, et al. Association between adverse clinical outcome in human disease caused by novel influenza A H7N9 virus and sustained viral shedding and emergence of antiviral resistance. Lancet,2013,381(9885):2273-2279

[48]Woods CJ, Malaisree M, Long B, et al. Computational assay of H7N9 influenza neuraminidase reveals R292K mutation reduces drug binding affinity. Sci Rep,2013,3:3561

[49]Yen HL, McKimm-Breschkin JL, Choy KT, , et al. Resistance to neuraminidase inhibitors conferred by an R292K mutation in a human influenza virus H7N9 isolate can be masked by a mixed R/K viral population. MBio,2013,4(4). pii: e00396-13

[50]Danzy S, Studdard LR, Manicassamy B, et al. Mutations to PB2 and NP proteins of an avian influenza virus combine to confer efficient growth in primary human respiratory cells. J Virol,2014,88(22):13436-13446

[51]Ge FF, Ju HB, Yang DQ, et al. Epidemiological situation and genetic analysis of H7N9 influenza viruses in Shanghai in 2013. Arch Virol,2014,159(11):3029-3041

[52]Wang X, Fang S, Lu X, et al. Seroprevalence to avian influenza A(H7N9) virus among poultry workers and the general population in southern China: a longitudinal study. Clin Infect Dis,2014,59(6):76-83

[53]Bai T, Zhou J, Shu Y. Serologic study for influenza A (H7N9) among high-risk groups in China. N Engl J Med,2013,368(24):2339-2340

[54]Chen Z, Li K, Luo L, et al. Detection of avian influenza A(H7N9) virus from live poultry markets in Guangzhou, China: a surveillance report. PLoS One,2014,9(9):e107266

[55]Peng Z,Xie Y,Wang Q, et al. Clinical severity of human infections with avian influenza A(H7N9) virus, China,2013/14. Euro Surveill,2014,19(49). pii: 20984

[56]http://www.who.int/influenza/vaccines/virus/candidates_reagents/home/en/

(本文編輯：張萍)

10.3969/j.issn.1673-5501.2015.01.014

上海市衛(wèi)生系統(tǒng)重點(diǎn)學(xué)科建設(shè)項(xiàng)目基金：08GWZX0102

復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院 上海，201102

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2014-11-07

2015-01-17)