楊 喆,萬 山,張喬會,寧亞萍,董施彬,王建中

(北京林業(yè)大學(xué) 林業(yè)食品加工與安全北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100083)

大孔樹脂純化山杏核殼總黃酮的工藝優(yōu)化

楊 喆,萬 山,張喬會,寧亞萍,董施彬,王建中*

(北京林業(yè)大學(xué) 林業(yè)食品加工與安全北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100083)

以山杏核殼為原料，采用大孔樹脂純化山杏核殼提取液中的總黃酮，利用單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)優(yōu)化D101大孔樹脂純化山杏核殼總黃酮的工藝條件。結(jié)果表明:在上樣溶液質(zhì)量濃度0.3 mg/mL、pH 2、流速2 mL/min的條件下進(jìn)行純化實(shí)驗(yàn)，大孔樹脂對山杏核殼總黃酮的平均吸附率為75.20%。山杏核殼總黃酮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)可達(dá)51.63%，表明D101大孔樹脂對山杏核殼總黃酮有較好的純化效果，且工藝重復(fù)性和穩(wěn)定性良好。

山杏核殼；總黃酮；大孔樹脂；純化

山杏（Prunus armeniaca）屬薔薇目、薔薇科、杏屬植物，是亞洲特有的生態(tài)經(jīng)濟(jì)性樹種，主要分布在我國黑龍江、吉林、遼寧、內(nèi)蒙古、甘肅、河北、山西等地，資源蘊(yùn)藏量大[1-2]。山杏核殼約占杏核質(zhì)量的60%，據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國每年山杏產(chǎn)量達(dá)250萬 t，加工過程約產(chǎn)生山杏核殼150萬 t[3-6]。這些核殼在加工利用過程中作為廢料被大量丟棄，造成極大的資源浪費(fèi)?？傸S酮化合物在植物中分布廣泛，是植物的次級代謝產(chǎn)物。研究[7-8]表明，黃酮類化合物是一類具有生物活性的物質(zhì)，在延緩衰老、防治心腦血管疾病等方面具有積極作用，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品等領(lǐng)域。目前對山杏核殼的利用研究主要是黑色素提取[9]、活性炭制備[10]及其總黃酮提取工藝[11]方面的報(bào)道，還未見采用大孔樹脂對其黃酮類物質(zhì)純化的報(bào)道。大孔樹脂是20世紀(jì)70年代逐漸發(fā)展起來的一類具有多孔結(jié)構(gòu)的有機(jī)高分子聚合物吸附劑[12-14]。大孔樹脂具有性質(zhì)穩(wěn)定、吸附容量大、選擇性好、吸附速度快等優(yōu)點(diǎn)，因而被廣泛應(yīng)用于天然產(chǎn)物的純化[15]。本實(shí)驗(yàn)選取4 種不同類型的大孔樹脂，通過靜態(tài)吸附與解吸篩選出相對較優(yōu)的大孔樹脂，通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)優(yōu)化山杏核殼總黃酮的純化工藝條件，實(shí)驗(yàn)結(jié)果能為山杏核殼資源綜合利用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

山杏核殼購自北京延慶。

蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品 國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；大孔樹脂D101、AB-8、D001、HPD400 科百奧生物技術(shù)有限公司；無水乙醇、鹽酸、亞硝酸鈉、氫氧化鈉、硝酸鋁均為分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

FA2004電子天平 上海上平儀器有限公司；TD5A臺式低速離心機(jī) 湖南赫西儀器裝備有限公司；DZF真空干燥箱 上海龍躍儀器設(shè)備有限公司；SHZ-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵 上海知信實(shí)驗(yàn)儀器技術(shù)有限公司；R-210旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海申順生物科技有限公司；SHA-BA水浴恒溫振蕩器 金壇市榮華儀器制造有限公司；T6新世紀(jì)型紫外分光光度計(jì) 北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；BS-100A自動(dòng)部分收集器 上海滬西分析儀器廠有限公司。

1.3 方法

1.3.1 山杏核殼提取液的制備

將山杏核殼用粉碎機(jī)粉碎，過60 目篩，制成山杏核殼粉。稱取一定量山杏核殼粉末，按液料比12∶1(mL/g)加入60%乙醇溶液，用閃式提取器閃提4 min，多次提取合并濾液，將所得濾液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸餾濃縮后，采用真空干燥箱干燥，再將干品用蒸餾水溶解，備用。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

[16]，蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品10 mg，用70%乙醇溶液溶解，定容至50 mL，搖勻，得到質(zhì)量濃度為0.2 mg/mL的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品溶液。采用亞硝酸鈉-硝酸鋁-氫氧化鈉顯色法，通過紫外分光光度計(jì)在509 nm波長處測定上述樣品的吸光度，以各樣品中蘆丁質(zhì)量濃度（ρ，mg/mL）為橫坐標(biāo)，以蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液吸光度A為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。經(jīng)線性回歸的回歸方程和相關(guān)系數(shù)為: ρ = 12.393A-0.031 3，R2= 0.999 2。

1.3.3 山杏核殼提取液總黃酮質(zhì)量濃度測定

取1 mL山杏核殼提取液于25 mL容量瓶中，以制備標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法，即亞硝酸鈉-硝酸鋁-氫氧化鈉顯色法顯色，采用紫外分光光度計(jì)在509 nm波長處測定吸光度，并利用回歸方程計(jì)算提取液中總黃酮質(zhì)量濃度，并按公式(1)計(jì)算山杏核殼提取液總黃酮含量。

式中:ρ為提取液中總黃酮質(zhì)量濃度/（mg/mL）；n為提取液的稀釋倍數(shù)。

1.3.4 大孔樹脂的預(yù)處理

按參考文獻(xiàn)[17-18]，將D101、HPD400、D001、AB-8 4 種大孔樹脂用無水乙醇進(jìn)行洗滌，并不斷攪拌，以除去氣泡，靜置24 h，充分溶脹。以乙醇濕法裝柱，用93%乙醇溶液在柱上流動(dòng)淋洗，后用蒸餾水沖洗樹脂至無醇味。再分用2% NaOH溶液和5%鹽酸溶液洗滌，最后用蒸餾水洗至中性，備用。

1.3.5 大孔樹脂的篩選

按參考文獻(xiàn)[19-22]，通過靜態(tài)吸附與解吸及靜態(tài)吸附動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)，對大孔樹脂進(jìn)行篩選。

1.3.5.1 不同大孔樹脂對山杏核殼黃酮的靜態(tài)吸附與解吸

精密稱取4 種預(yù)處理過的大孔樹脂1.5 g分別置于50 mL錐形瓶中，準(zhǔn)確加入已知黃酮質(zhì)量濃度樣品溶液30 mL，于30 ℃恒溫水浴振蕩2 h，取出后靜置24 h，使4 種大孔樹脂達(dá)到飽和吸附，吸取上層清液測定黃酮質(zhì)量濃度。充分洗滌后過濾得到上述達(dá)到飽和吸附的4 種大孔樹脂，分別加入95%乙醇溶液30 mL進(jìn)行解吸，每隔10 min振蕩20 s，持續(xù)2 h，吸取上層清液測定黃酮質(zhì)量濃度，按照式（2）～（4）分別計(jì)算4種大孔樹脂對山杏核殼總黃酮的吸附量、吸附率及解吸率。

式（2）～（4）中:ρ0為上樣溶液初始黃酮質(zhì)量濃度/（mg/mL）；V0上樣溶液體積/mL；ρ1為過柱液和水洗液中黃酮質(zhì)量濃度/（mg/mL）；V1為過柱液和水洗液總體積/mL；ρ2為洗脫液中黃酮質(zhì)量濃度/（mg/mL）；V2為洗脫液體積/mL；m為大孔樹脂質(zhì)量/g。

1.3.5.2 大孔樹脂靜態(tài)吸附動(dòng)力學(xué)特征

吸附動(dòng)力學(xué)特征反映隨時(shí)間的延長大孔樹脂對樣品分子吸附量的變化趨勢。由于大孔樹脂的吸附動(dòng)力學(xué)特征與生產(chǎn)率密切相關(guān)，因此取吸附和解吸效果相對較優(yōu)的D101、HPD400、AB-8 3 種大孔樹脂進(jìn)行動(dòng)力學(xué)特性測定。精密稱取3 種大孔樹脂2 g，置于50 mL錐形瓶中，準(zhǔn)確加入已知總黃酮質(zhì)量濃度的樣品溶液30 mL，于30 ℃恒溫水浴振蕩吸附，后靜置24 h，使其達(dá)到飽和吸附，期間每隔一定時(shí)間吸取上層清液測定總黃酮質(zhì)量濃度，計(jì)算其吸附量，以大孔樹脂的吸附量為縱坐標(biāo)，時(shí)間為橫坐標(biāo)，繪制3 種大孔樹脂靜態(tài)吸附動(dòng)力學(xué)曲線。

1.3.6 大孔樹脂動(dòng)態(tài)吸附單因素試驗(yàn)及正交試驗(yàn)

按參考文獻(xiàn)[23-25]，以上樣溶液質(zhì)量濃度、pH值、流速3 個(gè)因素為研究對象，以大孔樹脂對山杏核殼黃酮類化合物的吸附率為指標(biāo)，進(jìn)行單因素試驗(yàn)，并通過正交試驗(yàn)選取最優(yōu)條件。通過公式（5）計(jì)算大孔樹脂動(dòng)態(tài)吸附率:

式中:ρ0為上樣溶液黃酮質(zhì)量濃度/（mg/mL）；V0上樣溶液體積/mL；ρ1為過柱液和水洗液中黃酮質(zhì)量濃度/（mg/mL）；V1為過柱液和水洗液總體積/mL。

1.3.7 樣品中總黃酮含量的計(jì)算

準(zhǔn)確稱取一定質(zhì)量干樣品，用溶劑溶解成樣品溶液，利用紫外分光光度計(jì)測其吸光度，并通過1.3.2節(jié)中回歸方程得到總黃酮質(zhì)量濃度，通過公式（6）計(jì)算樣品質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)算:

式中:ρ為分光光度計(jì)測定樣品的總黃酮質(zhì)量濃度/（mg/mL）；n為樣品溶液稀釋倍數(shù)；V為樣品溶液體積/mL；m為干樣品質(zhì)量/mg。

2 結(jié)果與分析

2.1 大孔樹脂的選擇

取一定量D101、AB-8、HPD400、D001 4 種大孔樹脂，按1.3.5節(jié)方法進(jìn)行靜態(tài)吸附和解吸實(shí)驗(yàn)，考察4 種大孔樹脂對總黃酮的吸附與解吸性能，結(jié)果如表1所示。

從表1可以看出，D101、AB-8、HPD400 3 種大孔樹脂對樣品吸附量和吸附率均較高，說明這3 種大孔樹脂對樣品有較好的吸附作用，均適合用來純化樣品，而D001大孔樹脂對樣品吸附量和吸附率均非常低，說明其對樣品吸附作用不好，不適合用來純化樣品，因此只選取D101、AB-8、HPD400 3 種大孔樹脂進(jìn)行靜態(tài)吸附動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)。

如圖1所示，3 種大孔樹脂對山杏核殼黃酮類物質(zhì)的吸附均為快速平衡型，靜態(tài)吸附2 h后基本達(dá)到吸附平衡，之后無明顯變化。綜合比較靜態(tài)吸附、解吸實(shí)驗(yàn)與靜態(tài)吸附動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，D101大孔樹脂對山杏核殼總黃酮吸附率和解吸率均比其他樹脂高，且具有良好的靜態(tài)吸附動(dòng)力學(xué)特征，因此最終選取D101大孔樹脂對山杏核殼總黃酮進(jìn)行純化，并進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸附的研究。

2.2 動(dòng)態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)結(jié)果

大孔樹脂實(shí)際純化過程是一個(gè)動(dòng)態(tài)過程，因此不能完全通過靜態(tài)吸附、解吸過程來直接分析大孔樹脂對樣品的吸附、解吸能力和結(jié)果，有必要進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸附、解吸實(shí)驗(yàn)。對通過上述實(shí)驗(yàn)篩選出來的D101大孔樹脂進(jìn)行濕法裝柱，柱床體積為20 mL，分別就影響吸附、解吸的各個(gè)因素進(jìn)行動(dòng)態(tài)實(shí)驗(yàn)，并分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，選擇最優(yōu)純化工藝。

2.2.1 上樣溶液質(zhì)量濃度的選擇

為了考察上樣溶液質(zhì)量濃度對動(dòng)態(tài)吸附的影響，分別配制黃酮質(zhì)量濃度為0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg/mL的上樣溶液，各取50 mL，在pH 5的條件下上樣，控制流速為3 mL/min，結(jié)果見圖2。結(jié)果表明，隨著上樣溶液質(zhì)量濃度的增大，D101大孔樹脂對山杏核殼總黃酮的動(dòng)態(tài)吸附率逐漸上升，當(dāng)質(zhì)量濃度達(dá)到0.3 mg/mL時(shí)，吸附率最大，隨后吸附率下降，這可能是由于上樣溶液質(zhì)量濃度過大，雜質(zhì)過多造成層析柱濾膜及大孔樹脂表面的堵塞，從而影響吸附效果。因此，選擇上樣溶液質(zhì)量濃度為0.3 mg/mL。

2.2.2 上樣溶液pH值的選擇

為了考察上樣溶液pH值對動(dòng)態(tài)吸附的影響，取50 mL黃酮質(zhì)量濃度為0.3 mg/mL的上樣溶液，分別在pH值為1、2、3、4、5的條件下上柱，控制流速為3 mL/min，結(jié)果見圖3。結(jié)果表明，隨著上樣溶液pH值的增大，D101大孔樹脂對山杏核殼總黃酮的動(dòng)態(tài)吸附率上升，在pH 2時(shí)達(dá)最大值，隨后不斷減小。這是因?yàn)榇蟛糠贮S酮類化合物為多羥基酚類，呈弱酸性，溶質(zhì)在酸性條件下溶解度降低，從而有利于大孔樹脂的吸附。當(dāng)pH 1的時(shí)候吸附率又明顯下降，這可能是由于酸性過強(qiáng)會有沉淀析出，從而影響吸附，導(dǎo)致吸附率明顯下降。因此，選擇上樣溶液pH值為2。

2.2.3 上樣溶液流速的選擇

為了考察上樣溶液流速對動(dòng)態(tài)吸附的影響，取50 mL黃酮質(zhì)量濃度為0.3 mg/mL的上樣溶液，在pH 2的條件下上柱，控制流速分別為1、2、3、4、5 mL/min，結(jié)果見圖4。結(jié)果表明，隨著上樣溶液流速的增大，D101大孔樹脂對山杏核殼總黃酮的動(dòng)態(tài)吸附率逐漸下降，這是因?yàn)樯蠘尤芤旱牧魉僭叫∨c大孔樹脂接觸就更充分，能夠充分地被吸附在其表面，而流速越大，其泄漏量就隨之增大，從而影響吸附率。在上樣溶液流速分別為1 mL/min和2 mL/min時(shí)，大孔樹脂對樣品中總黃酮的吸附率相差很小，但過柱速度卻相差一倍，因此，綜合考慮吸附率與過柱速度，選擇上樣溶液流速為2 mL/min。

2.2.4 正交試驗(yàn)結(jié)果

根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，選取上樣溶液質(zhì)量濃度0.3 mg/mL、pH 2、流速2 mL/min 3 個(gè)因素，設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)因素水平，設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)表，并進(jìn)行方差分析。正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見表2。

根據(jù)表2試驗(yàn)數(shù)據(jù)，進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，列出方差分析表，結(jié)果見表3。

表2直觀分析和表3方差分析結(jié)果表明，影響D101大孔樹脂對山杏核殼總黃酮吸附能力的各個(gè)因素影響力大小為B＞A＞C，上樣液的pH值對吸附效果影響顯著（P＜0.05），上樣液的質(zhì)量濃度和流速對吸附效果影響不顯著。結(jié)果顯示，D101大孔樹脂吸附山杏核殼總黃酮的最優(yōu)工藝條件為A2B2C2，即上樣液黃酮質(zhì)量濃度0.3 mg/mL、pH 2、控制流速2 mL/min。

2.2.5 最優(yōu)吸附工藝的驗(yàn)證

正交試驗(yàn)優(yōu)化得到D101大孔樹脂吸附山杏核殼總黃酮的最優(yōu)工藝條件A2B2C2，在上述實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行組合驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，平行實(shí)驗(yàn)3 次取平均值，得到總黃酮吸附率平均值為75.20%，大于或等于正交試驗(yàn)中各條件下的結(jié)果，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.55%，該工藝條件可靠。

2.3 大孔樹脂重復(fù)利用檢驗(yàn)

一般情況大孔樹脂在多次使用后，由于不可逆吸附了一些雜質(zhì)而導(dǎo)致吸附能力降低，圖5為D101大孔樹脂重復(fù)多次使用后的吸附能力檢驗(yàn)情況。

圖5結(jié)果表明，大孔吸附樹脂在經(jīng)過7 次重復(fù)使用后，吸附能力稍有降低，但變化并不明顯，運(yùn)用SPSS分析，通過方差齊性檢驗(yàn)和方差分析得到，隨著吸附次數(shù)的增加，吸附率變化不顯著，說明D101大孔樹脂適合該工藝下的山杏核殼總黃酮的重復(fù)純化。

2.4 純化前后樣品總黃酮含量對比

分別準(zhǔn)確稱取一定量純化前與純化后干品，用60%乙醇溶液溶解，利用紫外分光光度計(jì)分別測其總黃酮含量，結(jié)果顯示，純化前樣品中山杏核殼總黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)為36.20%，經(jīng)大孔樹脂純化后的樣品中山杏核殼總黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)為51.63%。說明上述純化工藝效果明顯，具有實(shí)際應(yīng)用性。

3 結(jié) 論

本實(shí)驗(yàn)采用大孔樹脂對山杏核殼提取物中的總黃酮進(jìn)行純化。通過靜態(tài)吸附、解吸以及動(dòng)力學(xué)特征分析，選擇D101大孔樹脂作為理想樹脂，對山杏核殼總黃酮進(jìn)行純化。通過動(dòng)態(tài)吸附，得到最優(yōu)純化工藝條件為:上樣液質(zhì)量濃度0.3 mg/mL、pH 2、控制流速2 mL/min。在此條件下，大孔樹脂對山杏核殼總黃酮的平均吸附率為75.20%。

經(jīng)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)表明，本純化工藝穩(wěn)定可靠，此條件下大孔樹脂純化后的山杏核殼總黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)為51.63%，相比于純化前質(zhì)量分?jǐn)?shù)36.20%有較大提高，說明用D101大孔樹脂對純化山杏核殼總黃酮的方法是可行且有效的。D101大孔樹脂經(jīng)過多次重復(fù)吸附，效果依然良好，重復(fù)利用性好，適合工業(yè)化生產(chǎn)。

參考文獻(xiàn)：

[1] 楊慶仙. 我國山杏種質(zhì)資源研究現(xiàn)狀[J]. 北方園藝, 2008(2): 44-47.

[2] 崔潔, 顧欣, 黃昆, 等. 山杏果肉可溶性膳食纖維的抗氧化活性與紅外光譜分析[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè), 2012, 38(1): 123-127.

[3] 李明, 趙忠, 楊吉安. 黃土高原山杏種質(zhì)資源分類研究[J]. 西北林學(xué)院學(xué)報(bào), 2011, 26(1): 8-12.

[4] 佟漢林. 山杏的經(jīng)濟(jì)價(jià)值及良種造林關(guān)鍵技術(shù)[J]. 現(xiàn)代園藝, 2014(2): 31-31.

[5] 張加延, 張釗. 中國果樹志·杏卷[M]. 北京: 中國林業(yè)出版社, 2003.

[6] 王利兵. 山杏開發(fā)與利用研究進(jìn)展[J]. 浙江林業(yè)科技, 2008, 28(6): 76-80.

[7] ERCISLI S. Chemical composition of fruits in some rose (Rosa spp.) species[J]. Food Chemistry, 2007, 104(4): 1379-1384.

[8] CHUNG H S, CHANG L C, LEE S K, et al. Flavonoid constituents of Chorizanthe diffusa with potential cancer chemopreventive activity[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 1999, 47(1): 36-41.

[9] 齊高強(qiáng), 趙忠, 馬希漢, 等. 山杏殼制備活性炭的最佳工藝研究[J].林業(yè)實(shí)用技術(shù), 2013(4): 49-52.

[10] 李軍, 張喬會, 藍(lán)晶晶, 等. 響應(yīng)面法對山杏核殼黑色素提取工藝的研究[J]. 食品工業(yè)科技, 2012, 33(2): 295-299.

[11] 楊喆, 萬山, 張喬會, 等. 響應(yīng)面法優(yōu)化山杏核殼總黃酮提取工藝及其抗氧化性研究[J]. 食品工業(yè)科技, 2015, 36(6): 279-284.

[12] 周桃英, 羅登宏, 李國慶, 等. AB-8 大孔樹脂純化荷葉總黃酮的工藝研究[J]. 中國食品添加劑, 2009(5): 113-119.

[13] 馬榮鍇. 大孔樹脂純化菥蓂水提物黃酮的研究[D]. 南寧: 廣西大學(xué), 2012.

[14] SANNOMIYA M, RODRIGUES C M, COELHO R G, et al. Application of preparative high-speed counter-current chromatography for the separation of flavonoids from the leaves of Byrsonima crassa Niedenzu (IK)[J]. Journal of Chromatography A, 2004, 1035(1): 47-51.

[15] IGNAT I, VOLF I, POPA V I. A critical review of methods for characterisation of polyphenolic compounds in fruits and vegetables[J]. Food Chemistry, 2011, 126(4): 1821-1835.

[16] 田建平, 李娟玲, 胡遠(yuǎn)艷, 等. 冬青屬苦丁茶葉總黃酮含量測定與資源評價(jià)[J]. 食品科技, 2014, 39(1): 278-281.

[17] 李春美, 鐘朝輝, 竇宏亮, 等. 大孔樹脂分離純化柚皮黃酮的研究[J].農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào), 2006, 22(3): 153-157.

[18] 高梓淳. 藍(lán)莓花色苷提取與純化工藝初探[D]. 杭州: 浙江大學(xué), 2014.

[19] 馬偉雄, 郭育暉, 呂濤, 等. AB-8大孔吸附樹脂純化苦檻藍(lán)黃酮的工藝研究[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué), 2014, 41(7): 97-100.

[20] 李穎暢, 孟憲軍, 李小紅. 大孔樹脂純化藍(lán)莓葉總黃酮的工藝研究[J].食品與發(fā)酵工業(yè), 2008, 34(1): 133-137.

[21] MOURA S C S R, ROCHA TAVARES P E, GERMER S P M, et al. Degradation kinetics of anthocyanin of traditional and low-sugar blackberry jam[J]. Food and Bioprocess Technology, 2012, 5(6): 2488-2496.

[22] CAO Shaoqian, LIU Liang, LU Qi, et al. Integrated effects of ascorbic acid, flavonoids and sugars on thermal degradation of anthocyanins in blood orange juice[J]. European Food Research and Technology, 2009, 228(6): 975-983.

[23] 李淑珍, 李進(jìn), 楊志江, 等. 大孔樹脂分離純化黑果枸杞總黃酮的研究[J]. 食品科學(xué), 2009, 30(1): 19-24.

[24] 李明瑾, 林松毅, 王二雷. 篤斯越橘花青素的分離純化研究[J]. 食品科學(xué), 2007, 28(11): 139-141.

[25] LIU W, ZHANG S, ZU Y G, et al. Preliminary enrichment and separation of genistein and apigenin from extracts of pigeon pea roots by macroporous resins[J]. Bioresource Technology, 2010, 101(12): 4667-4675.

Purification of Total Flavonoids from Shells of Wild Apricot with Macroreticular Resin

YANG Zhe, WAN Shan, ZHANG Qiaohui, NING Yaping, DONG Shibin, WANG Jianzhong*
(Beijing Key Laboratory of Forest Food Processing and Safety, Beijing Forestry University, Beijing 100083, China)

The purification of total flavonoids extracted from the shells of wild apricot using D101 macroreticular resin was optimized using combination of single factor and orthogonal array experiments. The results showed that the optimum purification conditions were determined as follows: sample concentration, 0.3 mg/mL; pH 2; flow rate for elution, 2 mL/min. With these parameters, the purity of total flavonoids was 51.63%. Therefore, D101 macroreticular resin was effective in purifying total flavonoids from the shells of wild apricot with good stability and repetition.

shells of wild apricot; total flavonoids; macroreticular resin; purification

TS201.1

A

10.7506/spkx1002-6630-201510008

2014-10-14

林業(yè)公益性行業(yè)科研專項(xiàng)(201004081)

楊喆(1990—),男,碩士研究生,研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物提取。E-mail：yangz0719@163.com

*通信作者：王建中(1951—),男,教授,碩士,研究方向?yàn)榱之a(chǎn)品加工利用。E-mail：w62338221@163.com