梁 真劉鋼濤藍柏釗曾冬娟沈 震劉旭東

（1.廣西中醫(yī)藥大學，廣西 南寧 530001；2.湖北中醫(yī)院，湖北 黃石 435000；3.廣西中醫(yī)藥大學附屬瑞康醫(yī)院，廣西 南寧 530011）

乙肝相關(guān)肝纖維化發(fā)病機制研究新進展

梁 真1劉鋼濤1藍柏釗1曾冬娟1沈 震2劉旭東3

（1.廣西中醫(yī)藥大學，廣西 南寧 530001；2.湖北中醫(yī)院，湖北 黃石 435000；3.廣西中醫(yī)藥大學附屬瑞康醫(yī)院，廣西 南寧 530011）

肝纖維化是各種慢性肝病進展為肝硬化的早期病理改變，早期發(fā)現(xiàn)并積極干預對能否扭轉(zhuǎn)肝纖維化至關(guān)重要。乙肝病毒感染及多種細胞因子對肝纖維化甚至肝硬化的發(fā)生起著舉足輕重的作用，其致病機制復雜，文章就常見相關(guān)因素致使肝纖維化機制做一綜述。

乙肝；肝纖維化；發(fā)病機制；綜述

一直以來，國內(nèi)外的學者普遍認為肝纖維化的本質(zhì)是各種致病因素導致肝星狀細胞的激活，并通過其自分泌和旁分泌的機制促進了炎癥介質(zhì)的釋放和細胞外基質(zhì)的大量沉積的病理改變，最終將形成肝硬化[1]。乙型肝炎病毒(Hepatitis b virus,HBV)感染是導致肝纖維化的主要病因之一，而肝纖維化也是慢性乙型肝炎發(fā)展為肝硬化的重要中間環(huán)節(jié)，最近的流行病學調(diào)查表明,我國有近2000萬的乙肝感染者，每年因乙肝病毒感染所致的肝損傷包括肝衰竭、肝硬化以及肝細胞癌而死亡的約有100萬[2]。因此，延緩或逆轉(zhuǎn)肝纖維化進程是目前治療乙型肝炎防治肝硬化的關(guān)鍵[3]。肝纖維化的發(fā)病的確切機制至今尚未完全明了，本文就近年來有關(guān)乙肝相關(guān)肝纖維化的發(fā)病機制研究新進展進行了綜述。

1 乙型肝炎病毒可間接或直接促進肝纖維化

慢乙肝患者HBsAg水平并不隨著肝纖維化加重的程度而升高，這可能是人體的機體免疫作用在清除體內(nèi)的HBV病毒的同時，也不可避免地對正常肝細胞產(chǎn)生免疫性損傷，進而引發(fā)肝纖維化甚至肝硬化[4]。段惠春等[5]則認為感染機體的HBV是通過誘導機體的免疫反應間接損傷肝細胞的。包雙寶[6]也發(fā)現(xiàn)乙肝肝硬化患者中血清肝纖四項水平高低與血清所含HBVDNA無關(guān)。在細胞免疫引起的肝損傷發(fā)病機理中，肝細胞膜上HBcAg 是細胞免疫攻擊的靶抗原,HBcAg表達狀態(tài)與慢性乙肝肝纖維化的發(fā)生、發(fā)展也有重要關(guān)系[5、7]。而乙肝病毒誘導的免疫反應也可能導致肝臟單核細胞升高，從而引發(fā)炎癥反應[8]。

雖然大量文獻表明，HBV并不會直接導致肝細胞的損傷和肝纖維化的發(fā)生。但最近的研究也發(fā)現(xiàn)，HBV也可能直接作用于HSC促進肝纖維化的發(fā)生[9]，盡管在HBeAb陽性的乙肝病毒攜帶者，他們的肝臟仍然檢測出低水平的膠原蛋白分泌，而且表現(xiàn)為肝損傷和纖維化活動[10]。劉旭東等[11]探討乙肝表面蛋白HBs能否直接或者間接刺激肝星狀細胞分泌表達Ⅰ型膠原蛋白和α-SMA，通過體外共培養(yǎng)LX-2與HBs，MTT結(jié)果顯示HBs (10-50 ng/ml)與LX-2共培養(yǎng)能抑制LX-2增殖，而低濃度的HBs（0.5-5 ng/ml）對LX-2增殖沒有影響。ELISA檢測LX-2/ HepG2與HBs共培養(yǎng)的Ⅰ型膠原蛋白和α-SMA，兩組結(jié)果無差異，但是LX-2、HepG2及HBs共培養(yǎng)的Ⅰ型膠原蛋白明顯增高，因此認為HBs能夠直接刺激LX-2增殖，并且通過肝細胞HepG2產(chǎn)生TGF-β1的作用，產(chǎn)生Ⅰ型膠原蛋白，這或許解釋了乙肝相關(guān)蛋白在乙肝肝纖維化進程的機制。

2 細胞因子與乙肝相關(guān)肝纖維化的關(guān)系

2.1轉(zhuǎn)化生長因子

TGF-β1是目前為止致使纖維化最強的細胞因子，在肝纖維化過程中的生物活性主要表現(xiàn)在以下幾點：（1）促進ECM 的合成和抑制 ECM 降解；（2）對 HSC 的激活；（3）調(diào)節(jié)細胞周期[12]。孫書書等[13]采用ELISA檢測 62 例慢性乙型肝炎及肝硬化患者血清中 TGF-β1與四項肝纖維化指標水平，結(jié)果表明，與正常對照組相比，TGFβ1在CHB 組、LC組高表達，且TGF－β1與 PCⅢ、Ⅳ－C、LN、HA 水平均呈正相關(guān)，P＜0. 05( r值分別為0.89、0.81、0.84、0.92)。劉蓮等[14]對120 例慢性乙型肝炎患者進行肝穿刺組織活檢，并進行半定量分析肝組織中 TGF－β1和 Leptin表達水平，研究結(jié)果可以看出肝組織損傷時可引起TGF-β1分泌增加，分泌的TGF-β1通過TGF-β1/Smad途徑進一步激活HSC，促進HSC表型向肌成纖維樣母細胞轉(zhuǎn)化，從而刺激ECM的合成與沉積。此外，TGF-β1產(chǎn)生的量可能與基因調(diào)控有關(guān)，在氣滯血瘀組中 TGFβ1密碼子 10LeuLeu基因型頻率為47.5%，相對而言，非肝硬化組和對照組LeuLeu基因型分別為25%和20%，氣滯血瘀組與其余兩組LeuLeu分布有統(tǒng)計學意義（P＜0.01），肝纖維化氣滯血瘀型密碼子 10基因型以LeuLeu為主可能更易發(fā)展成肝硬化[15]。

2.2堿性成纖維細胞生長因子

堿性成纖維細胞生長因子（b-FGF）在由HBV 感染引發(fā)的肝纖維化進程中的作用日益受到關(guān)注，可以調(diào)節(jié)多種細胞的生長分化、遷移及凋亡,促進HSC的活化，進而促進ECM合成增加，導致肝纖維化的發(fā)生及進展[16、17]。研究表明[18],b-FGF水平的升高參與 ECG的產(chǎn)生。楊靜[19]等研究乙肝患者 TGF-β及 b-FGF 水平與肝纖維化程度相關(guān)性分析，結(jié)果顯示隨著慢性乙型肝炎的進展，各組b-FGF、TGF-β1、HA、LN均呈現(xiàn)出顯著增高的趨勢，（P＜0.05），LN 與 ALT、AST及 b-FGF、TGF-β1 呈相關(guān)性（P＜0.05）。

2.3血小板衍生生長因子-BB

HSC在各種慢性肝病演變?yōu)楦卫w維化的過程中同樣發(fā)揮著重要作用，而最近的研究表明，血小板衍生生長因子-BB(PDGF-BB)對HSC有強烈的趨化作用，是肝星狀細胞活化標志之一，肝臟受到刺激發(fā)生炎癥后，浸潤的炎性細胞分泌PDGF-BB，介導肝臟完成損傷-修復反應，促進纖維化[20]。CHB患者血清PDGF-BB水平與肝功能、血清肝纖維化指標均顯著相關(guān)（P＜0.01），血清PDGF-BB水平隨著肝功能損害程度和纖維化程度而加重而升高[21]。血小板同樣參與了肝纖維化的形成過程，當肝細胞壞死時，激活壞死區(qū)聚集的血小板，釋放TGF-β1[22]。

2.4IP10

CXCR3是目前發(fā)現(xiàn)的IP10的唯一受體，兩者的相互作用在CHB免疫病理損傷的發(fā)生發(fā)展中起重要作用[23]。乙肝病毒致使肝臟被大量炎癥細胞浸潤，使得CXCR3和IP 10較高水平表達[24、25]，CHB患者肝組織高表達的 IP10可通過趨化激活的單核細胞淋巴細胞等向肝臟組織定向遷移，在感染局部發(fā)揮輔助CTL及活化其他免疫細胞作用，同時活化細胞又分泌更多趨化因子，進一步介導淋巴細胞在肝臟內(nèi)聚集，通過分泌損害肝臟的炎癥遞質(zhì)造成組織損傷，參與肝臟炎性反應及慢性化[23]。

2.5白細胞介素

乙肝病毒感染的免疫機制中，促進免疫活化和誘導免疫耐受的因子共同作用。目前普遍認為HBV不直接對肝臟進行損傷，而主要是通過細胞免疫清除，參與免疫應答的免疫細胞會釋放多種炎癥因子，不間斷地刺激肝臟。IL-17作為是重要的促炎癥細胞因子，可能參與慢性HBV感染尤其是肝纖維化的發(fā)生過程,可通過激活多種免疫細胞釋放的炎癥介質(zhì)，作用于肝臟致使其發(fā)生反復炎癥損傷，最終肝臟功能下降[26-28]。陳捷等[29]采用酶聯(lián)免疫吸附法，檢測慢性HBV感染者血清中的IL-17、IL-23、TGF-β及IL-10水平，結(jié)果慢性乙型肝炎組與健康對照組相比，IL-17、IL-23、TGF-β無明顯差異，而IL-10顯著增高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），并且高病毒載量組（HBV-DNA＞1×105）和高轉(zhuǎn)氨酶（ALT、AST＞40U/L）組的IL-10分別顯著高于低病毒載量組（HBV-DNA＜1×105)和低轉(zhuǎn)氨酶（ALT、AST≤40U/L）差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），IL-10水平與HBV-DNA、AST、ALT和CCT均成正相關(guān)，說明在乙肝患者長期慢性感染中 IL-17和 IL-23 等細胞因子并沒有起主要作用，而IL-10這類負性的信號調(diào)節(jié)分子，在乙肝慢性化以及疾病進展中起著關(guān)鍵作用。

3 其他相關(guān)因素

GLT25D1是以可溶性蛋白的形式定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔的人類膠原β(1-O)半乳糖基轉(zhuǎn)移酶，最早由Schegg等通過親和層析和串聯(lián)質(zhì)譜法鑒定出的糖基轉(zhuǎn)移酶GT25家庭的成員之一，張仁雯等通過以GLT25D1為抗原進行ELISA雙抗體夾心檢測其在 HBV 感染患者不同階段的表達差異，發(fā)現(xiàn)在HBV感染的肝病的進展過程中，血清中GLT25D1的表達量與正常人相比有著顯著的變化（P＜0.0001），并且隨著肝纖維化程度的加重，血清GLT25D1的表達量亦隨之增加(P=0.0434)，它催化細胞外膠原的糖基化修飾該基因編碼蛋白的血清學水平與慢性HBV感染過程中纖維化程度有一定的相關(guān)性[30-32]。此外，邱秀芹等[33]采用放射免疫法及比色法探討慢性乙型肝炎致肝纖維化進程中血清抗氧化水平的變化情況，結(jié)果肝硬化患者血清肝纖維化指標均顯著高于正常健康人（P＜0.05），其中HA、LN、CⅣ也顯著高于慢性乙肝患者（P＜0.05）。肝病患者血清 GSH-Px、SOD、MDA、VE、VC 與健康人比較差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；肝硬化組血清 GSH-Px、SOD、MDA、VE與慢性乙肝組比較差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），這在一定程度上說明了肝病患者發(fā)生肝損傷及肝纖維化與其體內(nèi)氧化與抗氧化劑的平衡失調(diào)有關(guān)。

4 小結(jié)與展望

綜上所述，乙肝相關(guān)性的肝纖維化是肝臟在HBV刺激下發(fā)生炎癥損傷-修復反應，肝星狀細胞激活后導致炎癥細胞的聚集以及多種細胞因子的分泌最終導致細胞外基質(zhì)過多沉積，進而形成肝纖維化或肝硬化。目前認為肝纖維化是可以逆轉(zhuǎn)的，而預防和延緩乙肝患者發(fā)展為肝纖維化甚至肝硬化除了積極抗病毒病因治療之外，進一步深入探討HBV直接或間接激活肝星狀細胞以及相關(guān)的細胞因子的分子機制，可以為開發(fā)多位點靶向治療肝纖維化指明方向。

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New progress in the pathogenesis of hepatitis B related liver fibrosis

Liver fibrosis is a chronic liver disease progression to cirrhosis of the early pathological changes, early detection and active intervention of liver fibrosis is essential. Infection of hepatitis B virus and many kinds of cytokines play an important role in the pathogenesis of hepatic fibrosis and cirrhosis.

Hepatitis B; liver fibrosis; pathogenesis; summary

R512.6

A

1008-1151(2015)10-0078-03

2015-09-12

梁真（1989－），女（壯族），廣西中醫(yī)藥大學研究生，研究方向為肝病防治。

劉旭東，供職于廣西中醫(yī)藥大學附屬瑞康醫(yī)院。