黃美松，劉　鵬，陳立兵，胡陽黔△(十堰市中西醫(yī)結合醫(yī)院內分泌科，湖北十堰440;湖北醫(yī)藥學院附屬東風醫(yī)院消化內科，湖北十堰44008)

?

高血壓與2型糖尿病協(xié)同作用導致小鼠心功能障礙和心肌重塑

黃美松1，劉鵬2，陳立兵1，胡陽黔2△
(1十堰市中西醫(yī)結合醫(yī)院內分泌科，湖北十堰442011;2湖北醫(yī)藥學院附屬東風醫(yī)院消化內科，湖北十堰442008)

［摘要］目的:研究高血壓與2型糖尿病聯(lián)合作用是否能導致小鼠心功能障礙和心肌重塑。方法:將14周齡的2型糖尿病和非糖尿病小鼠經血管緊張素II(Ang II)給藥4周誘導小鼠形成輕度高血壓。運用超聲波心動描記術和多巴酚丁胺負荷試驗評價小鼠左心室功能; HE染色分析左心室心肌細胞的肥大作用; Western blotting測定心肌組織中磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)的表達水平。結果:與非糖尿病小鼠比較，糖尿病小鼠(DM 組)的心臟功能和心肌結構無明顯變化; Ang II給藥不影響2型糖尿病小鼠和非糖尿病小鼠的體重和血糖含量，但血壓明顯增高;左心室重量和心肌細胞表面積結果分析顯示，Ang II誘導2型糖尿病小鼠的左心室肥大程度顯著大于Ang II組; Ang II給藥的2型糖尿病小鼠左心室的縮短分數和射血分數顯著降低，而Ang II組小鼠無明顯變化; Western blotting結果顯示Ang II組、DM組和DM+ Ang II組小鼠左心室組織中p-AMPK的表達量顯著降低。結論: 2型糖尿病小鼠心臟功能和心肌結構無明顯變化，當高血壓存在時2型糖尿病小鼠容易發(fā)生心臟功能障礙和心肌重塑，提示高血壓是2型糖尿病小鼠心臟功能障礙和心肌重塑的關鍵因子。

［關鍵詞］2型糖尿病;心功能障礙;心肌重塑;心肌肥大;血管緊張素II

［修回日期］2014-12-08

Synergistic effect of hypertension and type 2 diabetes on cardiac dysfunction and myocardial remodeling in mice

HUANG Mei-song1，LIU Peng2，CHEN Li-bing1，HU Yang-qian2
(1Department of Endocrinology，Shiyan Hospital of Integrated Traditional and Western Medicine，Shiyan 442011，China;2Department of Gastroenterology，The Affiliated Dongfeng Hospital，Hubei University of Medicine，Shiyan 442008，China.E-mail: huyangqian999@163.com)

［ABSTRACT］AIM: To investigate whether the effect of hypertension combined with diabetic can lead to cardiac dysfunction and myocardial remodeling in mice.METHODS: The diabetic mice and non-diabetic mice of 14 weeks old were administered with PBS or angiotensin II (Ang II) for 4 weeks to induce mild hypertension.The left ventricular (LV) function was assessed by echocardiography and dobutamine stress test.The LV tissues were subjected to HE staining to assess cardiac hypertrophy.The phospharylated adenosine monophosphate-activated protein kinase (p-AMPK) levels in the LV tissues were determined by Western blotting.RESULTS: Compared with control group，diabetic mice (DM group) neither displayed marked cardiac dysfunction nor myocardial remodeling.Ang II treatment did not affect body weight and glucose level，but the blood pressure was increased in the diabetic and control mice.Ang II-induced LV hypertrophy in diabetic mice was significantly higher than that in control mice as assessed by LV masses and cardiomyocyte sizes.Moreover，Ang II-treatment reduced LV fractional shortening and contractility in the diabetic mice，but not in the control mice.The p-AMPK levels were significantly reduced in Ang II group，DM group and DM+ Ang II group.CONCLUSION: The cardiac function and cardiac structure of type 2 diabetic mice did not obviously change.Cardiac dysfunction and myocardial remodeling were easily induced in type 2 diabetic mice when hypertension happened，suggesting that hypertension is a critical factor of cardiac dysfunction and myocardial remodeling in type 2 diabetic mice.

［KEY WORDS］Type 2 diabetes; Cardiac dysfunction; Myocardial remodeling; Cardiac hypertrophy; Angiotensin II

糖尿病(diabetes mellitus，DM)、高血壓、血脂異常以及肥胖都是心血管疾病發(fā)生之前的相對獨立的風險評估因子，其中高血壓是最常用的風險因子［1-2］。臨床研究發(fā)現糖尿病患者一般會伴隨著高血壓和冠狀動脈疾病的發(fā)生，從而導致患者心臟功能的衰竭和心臟結構的改變，后一種情況通常稱為糖尿病心肌重塑［3-5］。使用的動物模型、動物的年齡以及動物患糖尿病類型(1型糖尿病和2型糖尿病)的不同可能得出不同的研究結果。因此，導致糖尿病動物心臟功能衰竭和心肌重塑的主要原因目前仍沒有一致的定論。研究顯示，患有2型糖尿病的小鼠心臟功能和結構沒有發(fā)生明顯異常［6-7］，這一結果提示我們單個風險因子如2型糖尿病、高血壓或血脂異常不能單獨導致心臟功能異常。因此，我們推測2種或2種以上的風險因子同時存在可能是2型糖尿病小鼠心臟功能衰竭和心肌重塑的原因。其次，目前糖尿病動物心臟功能衰竭和心肌重塑的研究僅限于1型糖尿病與高血壓之間的關系［8-11］。因此，本研究以2型糖尿病小鼠為研究對象，通過注射低劑量的血管緊張素II(angiotensin II，Ang II)建立2型糖尿病/高血壓小鼠，觀察和測定2型糖尿病/高血壓小鼠心臟左心室功能的改變和心肌重塑;通過測定心臟組織中腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase，AMPK)的活性，初步探討2型糖尿病/高血壓小鼠發(fā)生心肌重塑潛在的分子機制，為2型糖尿病患者心臟功能衰竭和心肌重塑的臨床治療提供理論依據。

材料和方法

1材料和試劑

非糖尿病BKS-db/+小鼠(以下簡稱db/+ )和2型糖尿病BKS-db/db小鼠(以下簡稱db/db)購自南京大學模式動物研究所;血管緊張素II購自Alexis;鹽酸多巴酚丁胺購自Sigma;磷酸化AMPK (p-AMPK)單克隆抗體和AMPK單克隆抗體購自Cell Signaling;β-actin抗體購自武漢三鷹生物技術有限公司;生物素酶標記的II抗IgG購自北京中杉金橋生物技術有限公司;血管生成素樣蛋白4(angiopoietinlike protein 4，Angptl4)和解偶聯(lián)蛋白3(uncoupling protein 3，UCP3)的ELISA試劑盒購自武漢華美生物技術公司。

2方法

2.1動物實驗分組實驗動物分為4組，分別為: Ang II組(注射Ang II的db/+小鼠) ; DM+ Ang II 組(Ang II的db/db小鼠) ; control組(注射PBS的db/+小鼠) ; DM組(注射PBS的db/db小鼠)。Ang II溶解于無菌PBS中，通過皮下注射給藥(1 mg · kg－1·d－1)。每組10只小鼠，飼養(yǎng)溫度控制在22～ 25℃之間，相對濕度控制在50%～60%之間;每日12 h交替光照，晝夜循環(huán)，自由進食、飲水。

14周齡的小鼠在注射Ang II的前后運用尾袖測量法測定大鼠在清醒狀態(tài)下的尾動脈收縮壓和舒張壓。注射Ang II后每隔1周從每組中隨機挑選2只小鼠，從隱靜脈中收集血液樣本，運用血糖測量儀測量血糖水平;第18周結束后，所有的小鼠經麻醉后通過多巴酚丁胺負荷試驗評估它們的左心室功能;隨后小鼠被處死，取出各器官用于后續(xù)實驗。

2.2超聲心動描記術檢測心功能將14、16和18周的小鼠經2%異氟醚麻醉，運用超聲心動描記術測定小鼠的心臟大小和功能，在心臟舒張和收縮過程中測定左心室壁厚、左心室內徑、左心室的長度和面積以及心率。針對這些參數計算并比較左心室整體功能指標，包括左心室縮短分數(fractional shortening，FS)、射血分數(ejection fraction，EF)、舒張末期容量(end-diastolic volume，EDV)、收縮末期容量(end-systolic volume，ESV)以及心輸出量(CO)。同時，運用聲波多普勒效應測定舒張早期二尖瓣血流速度(E)和舒張晚期二尖瓣血流速度(A)的比值(E/A)來評價心室的舒張功能。

2.3多巴酚丁胺負荷試驗Ang II給藥第4周，通過測定多巴酚丁胺注射前后心臟收縮壓和舒張壓來評估心臟所承受的工作負荷［7］。將8道生理記錄壓力傳感器與動脈導管連接，小鼠用尿烷(2.5 mg/g)麻醉后將導管經右頸動脈插入左心室空腔中，將另一根導管插入頸靜脈后注射不同劑量的多巴酚丁胺(0、100、200、300、400、500 ng/min，2 min/次)，測定注射前后心臟的最大正壓(pPmax)和最大負壓(nPmax)。

2.4 HE染色多巴酚丁胺誘導心臟壓力測試完成之后，麻醉的小鼠立刻經腹主動脈放血致死，分離心臟、肝、肺和腎，稱重后用于后續(xù)實驗。運用游標卡尺測量其脛骨長度，將心房、右心室(right ventricle，RV)和左心室(left ventricle，LV)從心臟中分離出來。為了測定心肌細胞的表面積，一部分LV經4%多聚甲醛固定24 h，石蠟包埋和切片。獲得的組織切片經固定、脫蠟、脫水、HE染色，隨機選擇3個視野進行拍照。運用全自動形態(tài)測量儀測量左心室心肌細胞表面積，每張片測量5次并計算其平均值。

2.5 Western blotting和ELISA檢測左心室組織置于預冷的含有蛋白酶抑制劑(0.5 mmol/L PMSF，1 mg/L亮抑蛋白酶肽，1 mg/L胃酶抑素)的裂解緩沖液中勻漿，4℃12 000 r/min離心10 min，收集上清，按照BCA試劑盒說明書測定蛋白濃度。將總蛋白50 μg進行SDS-PAGE，轉移到硝酸纖維素膜上，5%脫脂奶粉室溫封閉1 h，孵育I抗(p-AMPK抗體1∶500; AMPK抗體1∶1 000;β-actin抗體1∶1 000)，4℃過夜。TBST洗膜，加入生物素標記的兔抗鼠IgG(1∶2 000)室溫孵育1 h。膜經ECL發(fā)光后掃描，蛋白表達灰度值經Quanity One軟件分析。同時利用ELISA檢測試劑盒檢測各組左心室組織勻漿上清總蛋白中Angptl 4和UCP3的表達。

3統(tǒng)計學處理

運用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行相關數據分析，結果用平均值±標準差(mean±SD)表示，組間差異采用單因素方差分析，兩組間比較采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

結果

1小鼠形態(tài)特征

與非糖尿病小鼠比較，14、16和18周的2型糖尿病小鼠的體重和血糖含量顯著增加(P＜0.05)，Ang II對db/+和db/db小鼠的體重和血糖含量無明顯影響;與control組比較，DM組的脛骨長度稍微縮短，但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，而肝臟重量顯著增加(P＜0.01)，見表1。當用Ang II給藥4周后，與DM組小鼠比較，DM+ Ang II組小鼠的肝臟重量明顯增加(P＜0.01)，而腎臟重量明顯降低(P＜0.05) ;此時，db/db小鼠的體重、脛骨、肝臟重量和血糖含量無顯著變化，提示Ang II不影響db/db小鼠體重且與糖尿病嚴重程度無關，見圖1、表1。

2心臟功能

Control組和DM組小鼠的血壓無明顯變化; Ang II給藥之后Ang II和DM+ Ang II小鼠的血壓顯著升高(P＜0.05)，且升高的趨勢基本相同; AngII對14周的小鼠血壓無明顯變化。Ang II給藥4周時，db/+小鼠的左心室功能不受影響;與control組小鼠比較，Ang II小鼠的心率、射血分數、縮短分數、左心室舒張末期容量、左心室收縮末期容量、心搏量以及心輸出量無明顯變化，見圖1、表2。

Ang II給藥4周時，DM小鼠的左心室縮短分數顯著高于control小鼠(P＜0.05)，Ang II對db/+小鼠的左心室縮短分數無影響;但是，DM+ Ang II小鼠的左心室縮短分數明顯低于DM小鼠(P＜0.05)。無論db/+小鼠還是db/db小鼠，這4組小鼠之間的射血分數不存在顯著差異，見圖2。

Figure 1.The effects of Ang II treatment on body weight，blood glucose level and blood pressure of diabetic and nondiabetic mice.Mean±SD.n=6.*P＜0.05，＊＊P＜0.01 vs control group;#P＜0.05 vs Ang II group;△P＜0.05 vs DM group.圖1 Ang II對糖尿病和非糖尿病小鼠體重、血糖含量和血壓的影響

表1　非糖尿病小鼠和2型糖尿病小鼠經Ang II給藥4周后的形態(tài)特征Table 1.Morphometric characteristics of non-diabetic and diabetic mice treated with Ang II for 4 weeks (Mean±SD.n=6)

表2　非糖尿病小鼠和II型糖尿病小鼠經Ang II給藥后心臟大小和功能的變化Table 2.The changes of cardiac dimensions and functions in non-diabetic and diabetic mice treated with Ang II (Mean±SD.n=6)

Figure 2.The effects of Ang II treatment on left ventricular fractional shortening and ejection fraction of diabetic and non-diabetic mice.Mean±SD.n=6.＊＊P＜0.01 vs control group;##P＜0.01 vs Ang II group;△△P＜0.01 vs DM group.圖2 Ang II對糖尿病和非糖尿病小鼠左心室的縮短分數和射血分數的影響

隨著多巴酚丁胺濃度的增加，4組小鼠心率和左心室收縮壓增加的幅度基本相同，無顯著差異(P＞0.05)。pPmax和nPmax隨著多巴酚丁胺濃度的增加逐漸升高，但是DM+ Ang II組小鼠的pPmax增高的趨勢比DM組小鼠弱。暴露低劑量的多巴酚丁胺后，Ang II組、DM組和DM+ Ang II組小鼠的nPmax顯著低于control組小鼠(P＜0.05)，提示糖尿病和高血壓對減緩小鼠心臟收縮具有相同的功能。但是，高劑量的多巴酚丁胺對4組小鼠的nPmax變化無明顯影響，見圖3。

3心肌重塑

DM組和control組小鼠心臟和左心室的重量無明顯變化;但是Ang II作用后DM+ Ang II組和Ang II組小鼠心臟和左心室的重量明顯增加，且DM+ Ang II組小鼠心臟和左心室重量的增加值大于Ang II組小鼠(表1) ; DM+ Ang II組小鼠左心室重量與脛骨長度的比值顯著大于Ang II組小鼠(圖4)。超聲心動描記術結果分析顯示，Ang II給藥第16周和18周時，DM+ Ang II組小鼠的舒張期左心室壁厚度顯著增加，Ang II組小鼠的舒張期左心室壁厚度與control組比較無顯著差異(P＞0.05)，見圖4、表2。此外，與Ang II組小鼠比較，DM+ Ang II組小鼠心肌細胞的表面積顯著增加，見圖4。

4 Angptl4和UCP3蛋白表達變化

ELISA結果發(fā)現糖尿病小鼠心臟中的Angptl4 和UCP3的表達水平明顯高于非糖尿病小鼠，當Ang II給藥后，2型糖尿病小鼠心臟中的Angptl4和UCP3的表達水平增高。然而，Angptl4和UCP3在非糖尿病小鼠心臟中的表達變化無顯著差異，見表3。

Western blotting結果顯示，DM組和DM+ Ang II組小鼠心臟中p-AMPK的水平顯著低于control組和Ang II組小鼠，Ang II組小鼠心臟中p-AMPK的水平較control組低，但差異無統(tǒng)計學意義，見圖5。

討論

Figure 3.The effects of dobutamine stimulation on left ventricular functions of non-diabetic and diabetic mice treated with Ang II.Mean±SD.n=6.*P＜0.05，＊＊P＜0.01 vs control group;#P＜0.05 vs Ang II group;△△P＜0.01 vs DM group.圖3糖尿病和非糖尿病小鼠經AngII處理后多巴酚丁胺注射對其左心室功能的影響

Figure 4.AngII-induced hypertension triggered cardiac hypertrophy in diabetic mice.Mean±SD.n=6.*P＜0.05 vs control group;#P＜0.05 vs AngⅡgroup;△△P＜0.01 vs DM group.圖4 Ang II誘導的糖尿病小鼠高血壓導致小鼠心肌肥大

本文以14～18周齡的2型糖尿病小鼠為研究對象，通過Ang II給藥后建立2型糖尿病/高血壓小鼠，研究2型糖尿病和高血壓2種心血管疾病風險因子對小鼠的心臟功能和結構的影響。結果顯示2型糖尿病小鼠的心臟功能和結構無明顯變化，但是2型糖尿病小鼠發(fā)生心肌肥大進而引起小鼠血壓小幅度升高，而2型糖尿病小鼠在高血壓存在的條件下其心臟功能和結構發(fā)生了顯著變化。有研究表明1型糖尿病和高血壓是心血管疾病診斷過程中相對獨立的風險因子，但兩者在心肌肥大、心臟功能障礙和心肌纖維化過程中具有協(xié)同作用［8-11］。Falco-Pires等［9］以1型糖尿病/高血壓小鼠為模型研究其心臟功能的變化，發(fā)現1型糖尿病能導致小鼠左心室硬化，而高血壓引起心肌細胞肥大，兩者共同作用最終導致心臟舒張功能不全。我們的研究結果顯示2型糖尿病對小鼠心臟功能無明顯變化，但2型糖尿病和AngII共同作用卻能加速小鼠的心肌重塑。

2型糖尿病小鼠和2型糖尿病患者有著共同的病理特征，例如肥胖、血脂異常、胰島素抗性和高血糖［7，12-13］。研究發(fā)現血壓正常的2型糖尿病小鼠其左心室縮短分數偏高，與高血壓2型糖尿病比較，血壓正常的2型糖尿病小鼠心臟收縮功能沒有下降［14］。另有研究發(fā)現，長期患有2型糖尿病的小鼠發(fā)生低程度的心肌纖維化，而心臟功能正常和無心肌肥大效應［6］。這一研究結果表明2型糖尿病不能導致小鼠心臟功能異常和心肌重塑，因此，本研究采用2型糖尿病和高血壓同時存在下觀察小鼠心臟功能和心肌重塑的變化情況。結果顯示，2型糖尿病小鼠經Ang II作用后血壓明顯升高，心肌細胞肥大顯著;非糖尿病小鼠經Ang II注射后其血壓和心臟功能不發(fā)生明顯變化，提示2型糖尿病和高血壓協(xié)同作用導致小鼠心臟功能的異常和心肌重塑。本研究運用多個指標來評價心肌肥大的程度(左心室的重量、超聲波心動描記術和HE染色)，我們的結果顯示2型糖尿病本身不能導致小鼠心肌肥大。但是，Ang II誘導2型糖尿病小鼠形成高血壓后，2型糖尿病/高血壓小鼠容易發(fā)生心肌肥大，而2型糖尿病/高血壓小鼠容易導致心肌肥大的原因仍需深入研究。

表3　 ELISA檢測Ang II對糖尿病和非糖尿病小鼠心臟中AngPtl4和UCP3蛋白表達的影響Table 3.The effects of Ang II on heart AngPtl4 and UCP3 protein expression in non-diabetic and diabetic mice detected by ELISA (ng/L.Mean±SD.n=6)

Figure 5.Western blotting determined the effect of Ang II on cardiac p-AMPK levels in non-diabetic and diabetic mice.Mean±SD.n=3.＊＊P＜0.01 vs control group;##P＜0.01 vs AngⅡgroup;△△P＜0.01 vs DM group.圖5 Western blotting測定Ang II對糖尿病和非糖尿病小鼠心肌組織中p-AMPK水平的變化

Angptl4和UCP3是與心臟代謝相關的重要蛋白，研究表明其分泌含量變化能夠直接影響生物體心臟功能，而糖尿病個體心肌組織中Angptl4和UCP3表達水平會顯著升高［7，15］。本研究中Ang II給藥對照組心肌組織中Angptl4和UCP3表達水平變化不明顯，但Ang II給藥糖尿病組小鼠心肌組織中Angptl4和UCP3表達水平均顯著上升，再次說明高血壓因素和糖尿病因素協(xié)同作用時會影響小鼠心肌功能。有研究表明AMPK活性在心肌肥大過程中有著重要作用［16-17］。因此，本文探討了心肌重塑與心臟代謝相關蛋白表達之間的關系，尤其是心肌組織中AMPK的活性對心肌重塑的影響。我們的研究結果顯示，Ang II給藥后，糖尿病小鼠心肌組織中AMPK的磷酸化程度降低，即AMPK的活性下降。最新的研究發(fā)現AMPK的活性在瘦素和LDL受體表達缺失的小鼠以及代謝綜合癥小鼠的心肌重塑中發(fā)揮重要作用［18］。這些研究結果提示，降低AMPK的活性增加糖尿病患者心臟對高血壓誘導的心肌膨脹的敏感性，從而抑制了心肌肥大的發(fā)生。

綜上所述，本研究在對2型糖尿病小鼠的研究中發(fā)現，單獨的2型糖尿病不能導致小鼠心功能障礙和心肌重塑，但是當其與高血壓聯(lián)合作用時，2型糖尿病小鼠容易導致心功能障礙和心肌重塑。研究還發(fā)現2型糖尿病/高血壓小鼠心肌組織中AMPK的磷酸化程度顯著降低，提示心肌組織中AMPK的活性變化是糖尿病小鼠發(fā)生心肌肥大的主要原因，其具體的分子機制仍需進一步研究。

［參考文獻］

［1］申虎威，李燕，邢莉，等.血糖波動與糖尿病大血管病變的相關研究［J］.中國病理生理雜志，2010，26 (7) : 1311-1315.

［2］Kaplan NM，Opie LH.Controversies in hypertension［J］.Lancet，2006，367(1) :168-176.

［3］Boudina S，Abel ED.Diabetic cardiomyopathy revisited ［J］.Circulation，2007，115(2) :3213-3223.

［4］Fang ZY，Prins JB，Marwick TH.Diabetic cardiomyopathy: evidence，mechanisms，and therapeutic implications ［J］.Endocr Rev，2004，25(4) :543-567.

［5］裴漢軍，宋光遠，吳永健，等.糖尿病在糖尿病大鼠心肌梗死后心力衰竭形成中的效應［J］.中國病理生理雜志，2009，25(6) : 1051-1058.

［6］Daniels A，Linz D，van Bilsen M，et al.Long-term severe diabetes only leads to mild cardiac diastolic dysfunction in Zucker diabetic fatty rats［J］.Eur J Heart Fail，2012，14 (2) :193-201.

［7］Daniels A，van Bilsen M，Janssen BJ，et al.Impaired cardiac functional reserve in type 2 diabetic db/db mice is associated with metabolic，but not structural，remodeling ［J］.Acta Physiol (Oxf)，2010，200(1) :11-22.

［8］Ares-Carrasco S，Picatoste B，Benito-Martin A，et al.Myocardial fibrosis and apoptosis，but not inflammation，are present in long term experimental diabetes［J］.Am J Physiol Heart Circ Physiol，2009，297(6) :H2109-H2119.

［10］Fein FS，Zola BE，Malhotra A，et al.Hypertensive diabetic cardiomyopathy in rats［J］.Am J Physiol，1990，258(1) :793-805.

［11］Kelly DJ，Zhang Y，Connelly K，et al.Tranilast attenuates diastolic dysfunction and structural injury in experimental diabetic cardiomyopathy［J］.Am J Physiol Heart Circ Physiol，2007，293(5) : H2860-H2869.

［12］王祥，李長運，曾秋棠，等.大鼠2型糖尿病心肌病模型的建立方法［J］.中國病理生理雜志，2006，22 (9) : 1868-1870.

［13］Yue P，Arai T，Terashima M，et al.Magnetic resonance imaging of progressive cardiomyopathic changes in the db/db mouse［J］.Am J Physiol Heart Circ Physiol，2007，292(5) : H2106-H2118.

［14］Reyes M，Steinhelper ME，Alvarez JA，et al.Impact of physiological variables and genetic background on myocardial frequency-resistivity relations in the intact beating murine heart［J］.Am J Physiol Heart Circ Physiol，2006，291(4) : H1659-H1669.

［15］Berry DC，Noy N.All-trans-retinoic acid represses obesity and insulin resistance by activating both peroxisome proliferation-activated receptor β/δ and retinoic acid receptor ［J］.Mol Cell Biol，2009，29(12) : 3286-3296.

［16］Chan AY，Soltys CL，Young ME，et al.Activation of AMP-activated protein kinase inhibits protein synthesis associated with hypertrophy in the cardiac myocyte［J］.J Biol Chem，2004，279(31) :32771-32779.

［17］Zhang P，Hu X，Xu X，et al.AMPK activated protein kinase-alpha 2 deficiency exacerbates pressure-overload-induced left ventricular hypertrophy and dysfunction in mice ［J］.Hypertension，2008，52(5) :918-924.

［18］Hermida N，Markl A，Hamelet J，et al.HMGCoA reductase inhibition reverses myocardial fibrosis and diastolic dysfunction through AMP-activated protein kinase activation in a mouse model of metabolic syndrome［J］.Cardiovasc Res，2013，99(1) :44-54.

通訊作者△Tel: 0719-8272546; E-mail: huyangqian999@163.com

*［基金項目］湖北省教育廳指導項目(No.B2014054)

［收稿日期］2014-11-18

［文章編號］1000-4718(2015)06-0988-07

［中圖分類號］R363.1+4

［文獻標志碼］A

doi:10.3969/j.issn.1000-4718.2015.06.005