何源委，伍興甲，何懿平

（江永縣農(nóng)業(yè)局，湖南江永425400）

柑桔黃龍病及其控防對策

何源委，伍興甲，何懿平

（江永縣農(nóng)業(yè)局，湖南江永425400）

柑桔黃龍病是柑桔生產(chǎn)中危害最重、威脅最大的一種毀滅性病害。文章在分別對柑桔黃龍病的病名、危害與分布、病原的認識過程、診斷技術、病原侵染來源、病原脫除等進行綜述的前提下，提出嚴格實施檢疫、重病園成片更新、應用無病毒苗木、及時挖除病株、大面積聯(lián)防聯(lián)治、嚴格防治柑桔木虱等柑桔黃龍病的防控對策。

柑桔；黃龍?。桓探勰臼?；病原；診斷；防控

柑桔黃龍病是柑桔生產(chǎn)中危害最重、威脅最大的一種毀滅性病害，是世界柑橘產(chǎn)區(qū)的重要檢疫性細菌病害之一[1]，俗稱柑桔上的癌癥。病菌至今還不能人工培養(yǎng)，給該病的研究造成了極大的難度。病菌主要通過帶病苗木、帶病接穗及蟲媒-木虱進行傳播，目前對染病樹體還沒有合適的藥物能夠治療，只能采取挖除焚燒的措施解決。

1 病名

柑桔黃龍病（Huanglongbing,HLB）又稱黃梢病、黃枯病、青果病，最早在我國廣東省的潮汕地區(qū)開始發(fā)現(xiàn)，至今已有100 a以上的歷史。廣東潮州語新梢稱“龍”，意為新梢發(fā)黃，因此而得名。臺灣根據(jù)感染此病的寬皮柑桔和甜橙的衰弱和枯死現(xiàn)象稱其為立枯病；南非根據(jù)感染該病的病樹果實到成熟時仍保持綠色和黃梢等現(xiàn)象稱其為青果病（Creening）或黃枝病(Yellow branch)；印度稱之為柑桔枯死病（Dieback）；印度尼西亞稱為葉韌皮部退化病（Vein-phloern degeneration)；菲律賓稱其為葉斑駁病(Leafmotting)。1995年11月在福州，Bove提議并得到與會者一致同意，統(tǒng)一將該病名稱定為黃龍病(huanglongbing,HLB)[2]。

2 危害與分布

柑桔黃龍病主要發(fā)生在亞洲、非洲、美洲的50多個國家和地區(qū)，對柑橘生產(chǎn)危害嚴重。幼樹染病后經(jīng)過2～3 a即死亡，掛果樹染病后經(jīng)3～5 a或死亡或失去經(jīng)濟栽培價值。20世紀30年代黃龍病在我國廣東、福建等地己經(jīng)普遍發(fā)生；近幾年廣東肇慶、四會、云浮及廣西的梧州等地都有因柑桔黃龍病危害嚴重導致成片桔園被毀的慘劇，如2013年信豐等贛南臍橙產(chǎn)區(qū)因黃龍病侵染，500萬株柑桔樹被毀。柑桔黃龍病在產(chǎn)區(qū)造成了巨大的經(jīng)濟損失，嚴重制約了這些地方柑桔產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。

早在60年前巴西就有亞洲柑桔木虱分布，2004年3月巴西柑桔主產(chǎn)區(qū)-圣保羅洲發(fā)現(xiàn)該??；2005年9月美國柑桔主產(chǎn)區(qū)佛羅里達洲邁阿密的戴德縣（M iam i-dade-County）報道有該病發(fā)生，而該洲早于1998年首次發(fā)現(xiàn)有亞洲木虱。現(xiàn)在我國廣東、廣西和福建的柑桔產(chǎn)業(yè)受到了該病的嚴重危害，四川、云南、貴州、湖南、江西、浙江、臺灣等省的局部地區(qū)也有發(fā)生，成為制約這些地區(qū)柑桔業(yè)發(fā)展的重要因素[3]。目前在我國因柑桔黃龍病侵染已累計摧毀柑橘園7萬hm2以上。

3 病原的認識過程

柑桔黃龍病是高度的?；圆『Γ阎秩靖探蹖?、枳屬和金柑屬植物。枳耐病而不免疫。最初認為是缺素（南非）、水害（印度）、線蟲（中國臺灣）等引起。20世紀50年代認為是病毒，70年代認為是類支原體、類立克次體，90年代，利用PCR方法對黃龍病菌的16SrDNA進行擴增，在克隆和序列測定的基礎上，通過與基因庫中其他細菌16SrDNA序列的分析比較后認為，柑桔黃龍病菌應該歸為革蘭氏陰性桿菌屬真細菌，并建議命名為韌皮部桿菌（Candidatus Liberibacter spp.）。根據(jù)病原對熱的反應、流行區(qū)域、蟲媒種類等以及抗血清反應、克隆的DNA片段的序列分析等特征，將黃龍病菌分為三個種，亞洲種（Cadidatus Liberibacter asiaticus，Las）、 非 洲 種（Candidatus Liberibacter africanus，Laf）、美 洲 種（Candidatus Liberibacter americus，Lam）,到現(xiàn)在為止，我國只檢測到了亞洲種。有效控制柑桔黃龍病，重點在于防控，快速而準確地檢測柑橘黃龍病菌是防控工作的關鍵。

4 鑒定與診斷

4.1 指示植物鑒定

綜合國內(nèi)外相關專家的意見，建議選擇伏令夏橙、奧蘭多桔柚、椪柑等作為指示植物。采用芽枝接，一般于10月到次年4月從病株上采集材料接種，發(fā)病率高。芽枝長3～5 cm，每株接2枝，接5株，設正負對照2株。剪頂促成1個頂枝長出。亞洲黃龍病接后放于25～32℃，非洲黃龍病放于20～25℃環(huán)境條件下。椪柑接后8～12周，葉片出現(xiàn)斑駁黃化。另外通過菟絲子（Cuscuta campestis）和C.australis從病株接種到長春化（Catharanthus rosens），3月后，在成熟葉片上，表現(xiàn)鮮黃色斑駁的現(xiàn)象也可鑒定。

4.2 田間診斷

柑桔樹發(fā)病初期典型癥狀是在濃綠的樹冠中出現(xiàn)一至幾條發(fā)黃枝梢，即斑駁型黃化，在柑桔春梢、夏梢和秋梢病枝上均有發(fā)生，無論是初期病樹或中晚期病樹上都能看到。以葉脈為中心，從葉片的葉柄一端或葉片的四周逐漸黃化擴展成黃綠相間的斑駁狀。斑駁型黃化是田間根據(jù)枝葉特征判斷黃龍病的主要癥狀。斑駁型黃化和柑桔環(huán)割或腳腐病危害引起的柑桔葉片黃化很相似，其主要不同點有三：⑴環(huán)割或腳腐病危害引起的柑桔葉片黃化一般主脈首先黃化且主脈黃化顏色比附近葉肉顏色更深，而黃龍病引起的黃化主脈黃化顏色比附近葉肉淺；⑵環(huán)割或腳腐病引起的柑桔葉片黃化其顏色一般為深黃色，而黃龍病引起的黃化其顏色為淺黃色；⑶環(huán)割引起的葉脈黃化不擴散，而斑駁型黃化的葉脈黃化擴散成黃綠相間的斑駁，以葉片基部的葉脈黃化擴散最明顯[4]。

另外枝葉癥狀還有均勻黃化型：一般只有開始發(fā)病時的病樹、染病的幼齡樹及病樹的夏秋梢才有這種癥狀發(fā)生，具體表現(xiàn)為新抽發(fā)的嫩梢老化后不完全轉綠，只呈現(xiàn)均勻的淡黃綠色，以椪柑、蕉柑的夏秋梢表現(xiàn)較為突出，可作為田間診斷的參考。缺素狀黃化：因感病植株的葉脈附近呈現(xiàn)綠色，而葉脈中間的葉肉呈現(xiàn)黃色，極象柑桔缺鐵、缺錳、缺鋅等缺素癥狀，果農(nóng)也形象地稱其為花葉，這類葉片一般出現(xiàn)在中、晚期病樹上，往往在有均勻黃化葉或斑駁狀黃化葉的枝條上抽發(fā)的新梢葉片才呈缺素狀。不能作為田間判斷的主要癥狀。

此外黃龍病病枝表現(xiàn)癥狀還有以下特征：葉片無光澤，落葉枯枝，病樹樹冠稀疏，植株矮小，枝條短弱，葉片小，葉質較硬而直立，春季比健樹早萌芽現(xiàn)蕾，開化早，花量大，落花嚴重，落果多。

病樹果實小，有的表現(xiàn)畸形，果內(nèi)中心柱彎曲，果小而硬，有的果實種子退化，有的品種果實在正常成熟期還保持綠色。而椪柑等品種的果實果肩凸起，成熟時暗紅色，而其余部分果皮顏色為青綠色。通常普通的果農(nóng)或柑桔收購商在田間也將這種果實癥狀作為識別柑桔黃龍病的主要依據(jù)，并形象地稱其為“紅鼻子果”或“青果”。但是，這種癥狀只有在結果樹上有，因柑桔樹上掛有果實的時間有限，所以在一年中相當一段時間看不到這種癥狀。而且，沒有黃龍病發(fā)生的地區(qū)，因嚴重的柑桔腳腐病的為害而引起的重度衰退樹，也可能結紅鼻子果；但輕度的腳腐病危害植株，未見紅鼻果。柚、甜橙、和蕉柑等寄主植物的紅鼻子果癥狀也不突出。

染病初期的病樹根部正常，到后期病樹須根表現(xiàn)腐爛。因此，具體到大田診斷時應綜合應用受害植株枝葉典型癥狀和受害植株果實癥狀綜合分析進行判定。

4.3 快速檢測

電子顯微鏡觀察容易造成漏檢，血清學方法檢測范圍窄，PCR技術不僅可定性，而且可定量。對采穗母本和苗木若需快速鑒定，一般可采用PCR技術。但是，病菌在柑桔韌皮部內(nèi)的空間分布隨意性極大，即使是大田表現(xiàn)明顯的帶病植株中的病原擁有量有時也少到不足以被常規(guī)的PCR檢測出。Nested PCR技術比常規(guī)PCR技術靈敏度要得多高，可以檢測到單頭木虱中的病原菌[3]和分辯出帶病但無明顯癥狀的樣品。

基于目前在國內(nèi)PCR技術的應用僅限于高等院校及科研機構，Nested PCR技術應用更少，具體的生產(chǎn)實踐中鑒定柑桔黃龍病還是采用田間診斷和指示植物鑒定的較多。

5 病原侵染來源

田間病株和帶菌的柑橘木虱是主要侵染源。汁液摩擦和土壤均不傳染。研究表明黃龍病癥狀潛伏期的長短與柑桔栽培品種、樹齡、媒介昆蟲數(shù)量等因素有關[5]。遠距離的傳播主要通過帶病的接穗和苗木調運，因此，在新區(qū)或新果園病害主要來自帶病的接穗及苗木。田間近距離的傳播是由帶菌的木虱引起的，病原菌在木虱體內(nèi)的循回期一般為1個月左右，短的只有1～2 d；在柑桔體內(nèi)的潛育期一般為1～8個月，長的可達4～5 a，桔園一旦發(fā)病，如防治不力，3～4 a內(nèi)發(fā)病率可高達70%～100%。

柑桔種類品種間，蕉柑、椪柑、茶枝柑、年桔和福桔等最不耐病，溫州蜜柑、甜橙、柚和檸檬等耐病力較強，而枳耐病但不免疫，在田間無明顯癥狀表現(xiàn)。其它蕓香科植物如月桂屬的九里香（Murrayapeniculata）表現(xiàn)矮化、小葉和黃化。毫殼刺（Atalantiam issionis）和菲律賓木桔（Suinglea glutinosa）也表現(xiàn)矮化，亦是木虱的好寄主，但無黃龍病原存在于這此寄主的證據(jù)。九里香全年抽梢，是亞洲木虱最喜好的寄主。柑桔砧木對柑桔樹體的耐病力影響不明顯。

6 病原脫除

Schwarz等報道，采用熱水浴51℃條件下1h；49℃條件下2 h；47℃條件下4 h，可脫除黃龍病病原。林孔湘報道，采用濕熱空氣48～51℃處理45～65 s可脫除黃龍病病原。駱學海等提出，黃龍病病苗采用49℃濕熱空氣處理50～60 s，或用50℃濕熱空氣處理50 s，都可以使帶病苗木恢復健康。蘇鴻基等及蔣元暉等報道，采用莖尖嫁接可脫除黃龍病病原[2]。

7 防控措施

柑桔黃龍病傳播速度極快，且感病性對現(xiàn)有柑桔栽培品種全覆蓋，在防控策略上必須綜合運用各種有效的防控手段，發(fā)現(xiàn)抗、耐病砧木或品種是發(fā)展長期可持續(xù)柑桔產(chǎn)業(yè)必不可少的手段[6]。如南非在甜橙雜種和Tahili來檬上試驗證明其具有抗性，以及眾所周知的枳，其耐病能力強，田間不表現(xiàn)癥狀等，這些都是很好的柑桔育種材料。

7.1 嚴格實施檢疫

嚴格禁止病區(qū)的苗木及接穗引入新區(qū)和無病區(qū)。新區(qū)外出引種，首先應了解當?shù)夭∠x害發(fā)生情況，最好選擇無黃龍病的區(qū)域引種苗木或接穗。如到病區(qū)育苗，則應按照《柑桔無病毒苗木繁育規(guī)程》和《柑桔苗木檢疫規(guī)程》的要求進行，并經(jīng)有關專業(yè)人員驗收合格，才能作為無病苗出售。實行自選、自繁、自育苗木是減少黃龍病病源和傳播速度的重要措施。

7.2 重病園成片更新

當較大范圍柑桔園黃龍病病株超過30%時要全部挖除，并種植其它作物2～3 a后再選用無病毒苗木定植，重新建園。

7.3 應用無病苗木

按照《柑桔無病毒苗木繁育規(guī)程》的要求，建立、健全國家、柑桔主產(chǎn)省、柑桔主產(chǎn)縣三級無病毒良種柑桔苗木繁育體系，擴大無病毒良種柑桔苗木生產(chǎn)規(guī)模，迅速形成柑桔新植園無病毒良種苗木全覆蓋的能力。柑桔黃龍病主要是通過帶病苗木及接穗等遠距離傳播,因此要從接穗、砧木抓起，每個環(huán)節(jié)都要做到無毒和脫毒。規(guī)范果苗生產(chǎn)和市場監(jiān)管，是防治柑桔黃龍病及其媒介必不可少的環(huán)節(jié)。強化柑桔苗木定向產(chǎn)銷，建立銷售檔案，完善質量追究制度。加大對生產(chǎn)和銷售假、冒、偽、劣柑桔苗木的查處和打擊力度。

鑒于我國現(xiàn)階段柑桔無病毒苗木生產(chǎn)能力嚴重不足的現(xiàn)實，必須加快建設無病毒良種柑桔苗木繁育體系。病區(qū)柑桔苗木繁育場所，可考慮選擇附近500m以上無柑桔類植物的地方；接穗可在發(fā)病率低于10%的柑桔園中相對健康的結果樹上采，接穗采好后放在1 000mg/L的鹽酸四環(huán)素液中浸2 h然后用清水沖洗涼干待用；也可連續(xù)3 d每天用47℃的溫水泡10m后涼干待用。育苗地全部用40目防蟲網(wǎng)覆蓋，防止柑桔木虱進入。同時加強苗圃巡查，發(fā)現(xiàn)病苗或疑似病苗一律剔除燒毀。

7.4 及時燒毀帶病植株

目前全世界范圍內(nèi)還沒有治療柑桔黃龍病的有效藥劑，田間的每一株帶病植株都是病原。而感染了柑桔黃龍病的柑桔植株抽梢次數(shù)多且不整齊，樹冠枝葉稀疏，容易引誘大量柑桔木虱聚集取食和產(chǎn)孵，從而使帶病木虱數(shù)量激增。因此，經(jīng)常巡園，及時發(fā)現(xiàn)、燒毀柑桔黃龍病樹非常重要，不僅可減少病源，同時也減少了木虱蟲口。培訓生產(chǎn)者、育苗者和城市果樹所有者，及時檢查和治理黃龍病及其媒介是關鍵因素[6]。黃龍病病樹以每年9～12月，柑桔樹上有成熟或將要成熟的果實，葉片斑駁型癥狀也較明顯時較易田間鑒別，大面積的柑桔黃龍病普查及挖除行動宜在此時進行標記，待采果后挖除。另外挖除病株行動，應在較大范圍內(nèi)依據(jù)《植物檢疫條例》，采取一定的行政手段和強制措施，集中統(tǒng)一行動，并特別注意對無主柑桔園、以占地為目的的柑桔園及失管柑桔園的清理，不留死角。挖除病樹前要噴藥以殺死木虱，并注意不留樁，以免病樹樹樁、樹根萌芽，通過木虱吸食再度傳病。

7.5 大面積聯(lián)防聯(lián)治嚴格防治柑桔木虱

防治柑橘木虱是控制病情蔓延的關鍵性措施，也是在疫區(qū)現(xiàn)有柑桔園將損失降到最低的最直接最有效的手段。因為現(xiàn)有木虱的體內(nèi)就帶有大量的病原菌，木虱的存在與韌皮部桿菌的傳播有著緊密聯(lián)系，木虱不同蟲態(tài)對HLB美洲種和亞洲種感染率的研究表明，若蟲比成蟲感染率高[5]。

柑桔木虱喜棲息于柑橘樹冠外圍及頂部的新芽、嫩梢上。在本地正常年份每年發(fā)生7代，幼蟲的3個發(fā)生高峰期依次為5月上旬、7月上旬和9月份上旬，分別與柑桔的春梢、夏梢和秋梢抽發(fā)高峰期相吻合。10～12月都有若蟲產(chǎn)生。據(jù)研究，柑桔木虱可安全越冬的緯度范圍幾乎與柑桔的經(jīng)濟栽培緯度范圍一致，柑桔木虱春季（19.6℃）成蟲壽命平均 40 d，最長98 d，卵期15 d，若蟲25 d，雌成蟲產(chǎn)卵前期13～19 d，每世代歷期56 d左右。

取食了帶病植株汁液的成蟲，如在不帶病植株上剌吸24 h就可將病菌傳播給不帶病植株，以100～200m的近距離較易傳播，需及時防控。每年柑桔春、夏、秋梢抽發(fā)期，應統(tǒng)一抹芽放梢，并于新梢長1～3 cm時，統(tǒng)一噴藥。有效藥劑有：10%吡蟲啉可濕性粉劑1 500～2 000倍液或5%啶蟲脒乳油2500倍液或1.8%阿維菌素乳油2500倍液或20%甲氰菊酯乳油2 000倍液等，以上藥劑可交替使用。木虱防治工作要群防群治，全面聯(lián)動，做到不漏村、不漏園、不漏株。柑桔晚秋梢和冬梢抽發(fā)數(shù)量較少，而大部分柑桔木虱成蟲、若蟲集中在晚秋梢和冬梢上棲息取食，此時各進行一次統(tǒng)一藥劑防治，可起到事半功倍的效果。噴藥后，再抹除晚秋梢和冬梢，減少越冬蟲源。

8 帶病果園減損措施

利用柑桔木虱成蟲喜空曠透光的習性，新建柑桔園，適當密植，加強肥水管理，促速生快長，可降低柑桔木虱的為害率，減少感染柑桔黃龍病的機會。在病區(qū)，大豐產(chǎn)后的柑桔園，若栽培管理跟不上，導致柑桔樹勢減弱，抗病力下降，次年就很容易發(fā)病或迅速衰退枯死。對盛產(chǎn)期柑桔園科學培管，量樹定產(chǎn)，維持中庸樹勢，提高樹體抵抗力，延長帶病柑桔樹的結果年限，降低因病造成的損失也有重要作用。

20世紀70年代廣東、廣西在感染黃龍病的7～8年生甜橙樹上每株加壓注射1 000mg/L鹽酸四環(huán)素2 L，病樹得以逐漸恢復正常，但在恢復結果1～2 a后柑桔黃龍病再度復發(fā)。中國臺灣在文旦柚樹上注射四環(huán)素取得好效果，每年注射，雖出現(xiàn)一些毒害，癥狀仍存在，但產(chǎn)量達到正常。

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（責任編輯：吳 婷）

S432

A

1006-060X（2015）01-0034-03

10.16498/j.cnki.hnnykx.2015.01.013

2014-11-24

何源委（1969-），男（瑤族），湖南江永縣人，農(nóng)藝師，主要從事農(nóng)業(yè)技術推廣工作。

伍興甲