元淑巧，班麗素，趙 強(qiáng)，張立文蘭州大學(xué)第一醫(yī)院 檢驗(yàn)科，甘肅蘭州 70000；河北省武安市婦幼保健院，河北武安 05600；解放軍總醫(yī)院，北京 0085

泌尿系感染患者病原菌分布及藥物敏感性分析

元淑巧1，班麗素2，趙 強(qiáng)3，張立文31蘭州大學(xué)第一醫(yī)院 檢驗(yàn)科，甘肅蘭州 730000；2河北省武安市婦幼保健院，河北武安 056300；3解放軍總醫(yī)院，北京 100853

目的分析泌尿系感染患者病原菌的分布及藥物敏感性特征，為臨床泌尿系感染的治療提供依據(jù)。方法對(duì)2014年1 -12月就診于解放軍總醫(yī)院腎病科門診的953例泌尿系感染患者的953份尿標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行支原體、細(xì)菌培養(yǎng)鑒定和藥物敏感性試驗(yàn)。結(jié)果953例泌尿系感染患者中，395例支原體培養(yǎng)陽(yáng)性，陽(yáng)性檢出率41.45%，對(duì)美滿霉素和強(qiáng)力霉素敏感率＞90%；154例細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性，陽(yáng)性檢出率16.16%，分離菌株156株，大腸埃希菌71株占首位，其次為草綠色鏈球菌14株、糞腸球菌12株、肺炎克雷伯菌11株、無乳鏈球菌11株等，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性率分別為45.07%和18.18%，未發(fā)現(xiàn)對(duì)亞胺培南、美羅培南耐藥的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌，以及對(duì)萬古霉素、利奈唑胺耐藥的草綠色鏈球菌、糞腸球菌和無乳鏈球菌。結(jié)論泌尿系感染患者病原菌以解脲支原體和大腸埃希菌為主，及時(shí)監(jiān)測(cè)病原菌的種類分布及藥物敏感性特征，對(duì)泌尿系感染疾病的治療有重要意義。

泌尿系感染；病原菌；藥物敏感性；抗菌藥物

泌尿系統(tǒng)感染是臨床常見的感染性疾病，主要表現(xiàn)為尿頻、尿急、尿痛、排尿困難等臨床癥狀，嚴(yán)重者可導(dǎo)致菌血癥甚至腎功能損害[1]。隨著抗生素的廣泛使用，耐藥菌株不斷出現(xiàn)，給泌尿系統(tǒng)感染的治療帶來困難。為了解泌尿系統(tǒng)感染患者病原菌的分布及藥物敏感性情況，為臨床合理用藥提供依據(jù)，對(duì)2014年1 - 12月就診于解放軍總醫(yī)院腎病科門診的泌尿系感染患者晨尿標(biāo)本的細(xì)菌培養(yǎng)、支原體培養(yǎng)與藥物敏感性情況分析如下。

資料和方法

1 標(biāo)本來源 2014年1 - 12月就診于解放軍總醫(yī)院腎病科門診具有尿頻、尿急、尿痛、排尿困難、血尿、蛋白尿、尿白細(xì)胞升高等臨床癥狀的953例泌尿系感染患者晨尿標(biāo)本，進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)、支原體培養(yǎng)及藥物敏感性分析。其中男性182例，年齡14 ～ 83歲；女性771例，年齡12 ～ 88歲。

2 尿細(xì)菌培養(yǎng) 用10μl定量接種環(huán)將尿標(biāo)本接種于血瓊脂平板及中國(guó)藍(lán)平板，35℃培養(yǎng)1 ～2 d，對(duì)培養(yǎng)后菌落計(jì)數(shù)≥104CFU/ml的菌株用VITEK-Ⅱ全自動(dòng)微生物鑒定藥敏分析儀進(jìn)行鑒定，用K-B法或VITEK-Ⅱ藥敏卡進(jìn)行藥敏試驗(yàn)(葡萄球菌、腸球菌、無乳鏈球菌選用AST-GP67，臨床常見需氧革蘭陰性桿菌選用AST-GN14，其他無適宜藥敏卡的細(xì)菌如草綠色鏈球菌、革蘭陽(yáng)性桿菌等選用K-B法，同一種細(xì)菌采用相同方法)，結(jié)果按美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)(CLSI)2011標(biāo)準(zhǔn)判斷，超廣譜β-內(nèi)酰胺酶檢測(cè)按ASTGN14藥敏卡報(bào)告結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。用法國(guó)生物梅里埃ATB FUNGUS 3對(duì)酵母樣真菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，結(jié)果按說明書判斷。質(zhì)控菌株大腸埃希菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC25923、銅綠假單胞菌ATCC27853、白假絲酵母菌ATCC90028由衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心提供。

3 支原體培養(yǎng) 采用珠海麗珠試劑股份有限公司的解脲支原體和人型支原體培養(yǎng)鑒定藥敏試劑盒進(jìn)行支原體培養(yǎng)、鑒定和藥物敏感性試驗(yàn)。按試劑盒說明書進(jìn)行操作：滴加稀釋液2.9 ml于培養(yǎng)基瓶?jī)?nèi)混勻，取50μl培養(yǎng)基加入試劑條空白孔中。將10 ml尿標(biāo)本3 000 r/min離心15 min，取沉渣200 μl加入培養(yǎng)基中混勻，除空白口外試劑條其余各孔加50 μl，每孔滴加1滴石蠟油覆蓋，置(36±1)℃溫箱培養(yǎng)48 h。判斷：空白孔不變色說明試驗(yàn)有效。對(duì)照孔和鑒定孔均不變色為陰性；培養(yǎng)液、試劑條3、4孔在24 h內(nèi)由黃色變成紅色，解脲支原體陽(yáng)性，定量為≥104CCU；5、6孔在48 h由黃色變成紅色為人型支原體陽(yáng)性，定量為≥104CCU。每種抗菌藥物設(shè)高(H)、低(L)兩種濃度孔，兩孔均呈黃色為敏感(S)，H孔呈黃色而L孔呈紅色為中度敏感(I)，兩孔均呈紅色為耐藥(R)。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用CHISS軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料率比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 病原菌檢出總體情況 953例泌尿系感染患者中，500例尿標(biāo)本中有病原菌檢出，陽(yáng)性檢出率52.47%；其中男性65例，陽(yáng)性檢出率35.71%；女性435例，陽(yáng)性檢出率56.42%；女性患者病原菌檢出率明顯高于男性(P＜0.01)。395例支原體培養(yǎng)陽(yáng)性，154例細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性，6例真菌培養(yǎng)陽(yáng)性，其中55例細(xì)菌和支原體同時(shí)培養(yǎng)陽(yáng)性。見表1。

2 支原體檢出及藥物敏感性分析 395例支原體培養(yǎng)陽(yáng)性中，324例解脲支原體(mycoplasma urealytium，Uu)培養(yǎng)陽(yáng)性，陽(yáng)性檢出率34.00%；12例人型支原體(mycoplasma hominis，Mh)培養(yǎng)陽(yáng)性，陽(yáng)性檢出率1.26%；59例解脲支原體和人型支原體培養(yǎng)均陽(yáng)性，陽(yáng)性檢出率6.19%。解脲支原體和人型支原體對(duì)美滿霉素和強(qiáng)力霉素敏感率＞90%，對(duì)氧氟沙星、左旋氧氟沙星、羅紅霉素、司帕沙星敏感率＜50%。見表2。

3 細(xì)菌檢出及藥物敏感性分析 953例泌尿系感染患者中，154例患者細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性，其中2例患者為2種細(xì)菌混合感染，分離菌株156株，分離菌株數(shù)量位居前5位的是大腸埃希菌、草綠色鏈球菌、糞腸球菌、肺炎克雷伯菌、無乳鏈球菌，細(xì)菌種類及構(gòu)成比見表3。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性率分別為45.07%和18.18%，未發(fā)現(xiàn)對(duì)亞胺培南、美羅培南耐藥的大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌，以及對(duì)萬古霉素、利奈唑胺耐藥的草綠色鏈球菌、糞腸球菌和無乳鏈球菌，主要分離菌株的藥物敏感性見表4。

4 真菌檢出情況 6例真菌培養(yǎng)陽(yáng)性中，白假絲酵母菌4株，熱帶假絲酵母菌2株，對(duì)兩性霉素B、氟康唑、伊曲康唑、五氟胞嘧啶、伏立康唑等藥物均敏感。

討 論

泌尿系感染是臨床常見的感染性疾病，尿培養(yǎng)是泌尿系感染疾病常用的診斷方法之一，取經(jīng)尿道排出的中段尿，細(xì)菌數(shù)≤103CFU/ml?；加忻谀蛳蹈腥緯r(shí)，尿中的菌數(shù)＞104～ 105CFU/ml，因而，以此界限作為診斷泌尿系感染的依據(jù)。一般認(rèn)為，尿標(biāo)本中革蘭陰性桿菌菌落計(jì)數(shù)＞105CFU/ ml、革蘭陽(yáng)性球菌計(jì)數(shù)＞104CFU/ml方有診斷意義[2]。但也有觀點(diǎn)認(rèn)為，此界限值在急性尿路感染和未曾應(yīng)用抗菌藥物的病例中有意義，在慢性病例和已用過藥物者中則常常難以判斷，必須與臨床癥狀結(jié)合才可決斷[3]。由于本研究病例均來自腎病科門診，均具有尿頻、尿急、尿痛、排尿困難、血尿、蛋白尿、尿白細(xì)胞升高等較典型的泌尿系感染癥狀，故選用＞104CFU/ml作為進(jìn)行鑒定藥敏試驗(yàn)的界限。尿細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)、陽(yáng)性率較低，僅20%左右[4-5]。本研究通過對(duì)尿標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行支

原體培養(yǎng)和細(xì)菌培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，28.57%男性患者和44.49%女性患者尿標(biāo)本中支原體培養(yǎng)陽(yáng)性，提示支原體感染可能是引起泌尿系感染的重要原因之一。由于支原體無細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，能夠抑制細(xì)胞壁合成的β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物對(duì)其無效，并且對(duì)喹諾酮類藥物表現(xiàn)出較高的耐藥性[6-10]。針對(duì)普通細(xì)菌感染的經(jīng)驗(yàn)性藥物如β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物和喹諾酮類藥物常不能取得較好療效，因此對(duì)泌尿系感染患者及時(shí)進(jìn)行支原體培養(yǎng)、明確病原學(xué)診斷很有必要。

表1 泌尿系感染患者病原微生物檢出總體情況Tab. 1 Overall detection situation of pathogens in patients with urinary tract infection (n, %)

表2 泌尿系感染患者支原體對(duì)抗菌藥物的敏感性Tab. 2 Drug susceptibility of Mycoplasma to antibiotics in patients with urinary tract infection (n, %)

表3 泌尿系感染患者細(xì)菌種類構(gòu)成比Tab. 3 Constituent ratios of pathogens in patients with urinary tract infection

表4 泌尿系感染患者主要分離菌株對(duì)抗菌藥物的敏感性Tab. 4 Drug susceptibility rates of primary pathogens to antibiotics in patients with urinary tract infection (%)

本研究發(fā)現(xiàn)，解放軍總醫(yī)院腎病門診的泌尿系感染患者中，病原菌以大腸埃希菌為主，腸球菌和肺炎克雷伯菌也有很高的分離率，與文獻(xiàn)[4-5,11-15]報(bào)道一致。這些病原菌大多數(shù)來自腸道及陰道的正常菌群，當(dāng)自身免疫力下降時(shí)，不潔的生活習(xí)慣、醫(yī)院交叉感染及侵入性操作均可引起逆行感染[12-13]。藥敏結(jié)果顯示，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性率分別為45.07%和18.18%，對(duì)碳青霉烯類仍高度敏感，對(duì)阿米卡星也有較好的敏感性，對(duì)青霉素類、喹諾酮類、四環(huán)素類和磺胺類藥物敏感性較差，提示臨床醫(yī)師經(jīng)驗(yàn)用藥時(shí)，應(yīng)盡量避免使用青霉素類、喹諾酮類、四環(huán)素類、磺胺類藥物。而腸球菌對(duì)紅霉素、四環(huán)素高度耐藥，對(duì)萬古霉素、利奈唑烷保持較高敏感性，與文獻(xiàn)[4,11]相符。

值得注意的是，由于本研究未納入住院患者，銅綠假單胞菌、鮑曼不動(dòng)桿菌等非發(fā)酵菌及真菌等分離率較低，草綠色鏈球菌和無乳鏈球菌分離率較高。無乳鏈球菌作為人類下消化道及泌尿生殖道寄生菌，當(dāng)免疫能力下降時(shí)，可上行擴(kuò)散感染導(dǎo)致孕婦早產(chǎn)、流產(chǎn)、胎兒發(fā)育不良；也可垂直傳播感染新生兒，引起新生兒肺炎、新生兒敗血癥和腦膜炎等疾??；還能引起子宮內(nèi)膜炎、泌尿道感染等[16-17]。由于其對(duì)青霉素耐藥率很低，美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)推薦臨床無需進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，可經(jīng)驗(yàn)性用青霉素類抗生素治療，本研究也證實(shí)了這一點(diǎn)。而草綠色鏈球菌不僅可以引起心內(nèi)膜炎、手術(shù)后的軟組織感染，還可引起細(xì)菌性前列腺炎，影響精子活力，嚴(yán)重者導(dǎo)致不孕不育[18]。本研究藥敏結(jié)果表明，草綠色鏈球菌對(duì)紅霉素和四環(huán)素已表現(xiàn)出較高耐藥性，應(yīng)避免使用；對(duì)青霉素和頭孢菌素類藥物敏感性較好，可作為首選藥物使用。

綜上，泌尿系感染患者病原微生物種類較多，而不同病原微生物有不同的藥物敏感性特征，所以有明確的病原學(xué)診斷及藥敏試驗(yàn)結(jié)果，及時(shí)監(jiān)測(cè)病原微生物的種類分布及藥物敏感性特征，對(duì)泌尿系感染疾病的治療有重要意義。

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Analysis of drug sensitivity and distribution of pathogens in patients with urinary tract infections

YUAN Shuqiao1, BAN Lisu2, ZHAO Qiang3, ZHANG Liwen3
1Department of Clinical Laboratory, the First Affiliated Hospital of Lanzhou University, Lanzhou 730000, Gansu Province, China;2Wu'an Maternal and Child Health Hospital, Wu'an 056300, Hebei Province, China;3Chinese PLA General Hospital, Beijing 100853, China

ZHANG Liwen. Email: lw7654@126.com

ObjectiveTo analyze the drug sensitivity and distribution of pathogens in patients with urinary tract infections, and provide basis for clinical treatment of urinary tract infection.MethodsFrom January 2014 to December 2014, the identification and drug sensitivity testing were performed simultaneously for Mycoplasma and bacteria were isolated from urine specimens that were obtained from the outpatients of nephropathy department.ResultsOf the 953 patients with urinary tract infection, 395 cases were positive in mycoplasma culture, with the positive rate of 41.45% and the susceptibility rate of more than 90% to Doxycycline and Minocycline; 154 cases were positive in bacterial culture, with the positive rate of 16.16%; 156 strains were isolated, and Escherichia coli was the main pathogen (71 strains, accounting for 45.51%), followed by Streptococcus viridans (14 strains, 8.97%), Enterococcus (12 strains, 7.69%), Klebsiella pneumonia (11 strains, 7.05%), Streptococcus agalactiae (11 strains, 7.05%). ESBL positive rates of Escherichia coli and Klebsiella pneumonia were 45.07% and 18.18%, respectively. No strains of Escherichia coli and Klebsiella pneumonia were found resistant to Imipenem or Meropenem, and no strains of Streptococcus viridans, Enterococcus, Streptococcus agalactiae were found resistant to Vancomycin or Linezolid.ConclusionMycoplasma urealytium and Escherichia coli are the main pathogens in patients with urinary tract infection. Monitoring of species distribution and drug sensitivity characteristics of pathogens is important for the treatment of urinary infection diseases.

urinary tract infection; pathogen; drug susceptibility; anti-bacterial agents

R 446.5

A

2095-5227(2015)06-0599-04

10.3969/j.issn.2095-5227.2015.06.021

時(shí)間：2015-03-10 09:33

http://www.cnki.net/kcms/detail/11.3275.R.20150310.0933.001.html

2014-12-10

元淑巧，女，本科，主管技師。研究方向：檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)。Email: yuanyuanz121@126.com

張立文，男，本科，副主任技師。Email: lw7654@126. com