魯娜　高金秋　尹晶

摘 要 本試驗以1628向日葵品種的子葉、胚軸為外植體，接種于不同生長調(diào)節(jié)劑濃度、不同pH值、不同蔗糖濃度配比的MS培養(yǎng)基上進(jìn)行組織培養(yǎng)，以研究不同培養(yǎng)基對耐鹽向日葵組織培養(yǎng)的影響。試驗結(jié)果表明：向日葵胚軸在6-BA 為0.1mg/L，IAA為0.07 mg/L，蔗糖濃度為3%，pH值為5.5，培養(yǎng)溫度為25 ℃時分化效果最好。

關(guān)鍵詞 向日葵；耐鹽品種；組織培養(yǎng)；正交設(shè)計

中圖分類號：S567.239 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B 文章編號：1673-890X（2014）12-0-2

向日葵（Helianthus annuus）亦稱葵花。菊科，向日葵屬，一年生草本植物。向日葵是我國北方地區(qū)的主要油料作物，其經(jīng)濟(jì)效益一直被受重視。白城處于吉林西部，為中國鹽堿地比較嚴(yán)重的地區(qū)，土壤以蘇打為主，比較難治理。向日葵不僅具有較強的耐鹽堿能力，而且還兼有吸鹽性能，是土壤改良的首選植物。

本試驗旨在篩選出適合向日葵耐鹽品系組織培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)條件，為向日葵耐鹽細(xì)胞系的懸浮培養(yǎng)奠定基礎(chǔ)；為吉林西部土地資源的充分利用及促進(jìn)土壤改良，提供技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗選用向日葵品種為1628由白城市農(nóng)科院研究員張義惠贈。

1.2 方法

1.2.1 無菌苗的制備

選取飽滿的向日葵種子，用70%的酒精浸泡60S， 再用3%的次氯酸鈉浸泡20 min，用無菌水沖洗3～5次，然后放在無菌濾紙上吸干，并接種于MS培養(yǎng)基，培養(yǎng)條件為（25±2） ℃，16h/d，5 000 Lux。7 d后獲得無菌苗。

1.2.2 愈傷組織的誘導(dǎo)

切取向日葵無菌苗的子葉、胚軸，接種于含有3%蔗糖及2，4-D 和IAA的MS培養(yǎng)基中，25±2 ℃，16 h/d，5 000 Lux條件下誘導(dǎo)愈傷組織。因素水平選取見表1，其中5號為空白對照組。

1.2.3 芽的誘導(dǎo)

根據(jù)愈傷組織誘導(dǎo)結(jié)果，選出6-BA（0.05 mg/L，0.1 mg/L，0.5 mg/L）3個濃度，IAA（0.01 mg/L，0.03 mg/L，0.07 mg/L）3個濃度，設(shè)計蔗糖3個濃度（100%，66.67%，60%），3個pH值（5.5，6.0，6.5），3個溫度值（20 ℃，25 ℃，30 ℃），采用L18（37）做正交表進(jìn)行體系優(yōu)化，處理組合見表2，每種組合4皿，兩皿子葉、兩皿胚軸，每皿15個外植體，培養(yǎng)條件同“1.2.1”，1個月后觀察并統(tǒng)計出芽情況。

2 結(jié)果與分析

子葉、胚軸，但子葉僅分化出根，胚軸只有少量分化出芽，試驗結(jié)果見表2。

由表2的數(shù)據(jù)分析可見：對于向日葵胚軸分化效果的影響，5個參試因子的比較結(jié)果是蔗糖>IAA>6-BA>pH=溫度；其中以蔗糖因素對向日葵胚軸的分化影響最大，極差為7；pH 與溫度影響最小，極差為3。由此得出，在向日葵胚軸分化試驗中最佳方案為：6-BA 0.1-0.5 mg/L+IAA 0.07 mg/L+蔗糖30 g/L，培養(yǎng)溫度為25℃，pH為5.5。

3 結(jié)果與討論

不同的生長調(diào)節(jié)劑濃度、蔗糖濃度、pH及培養(yǎng)溫度，均對向日葵的芽誘導(dǎo)有影響。試驗結(jié)果表明，本研究所設(shè)計的生長調(diào)節(jié)劑、蔗糖、pH、溫度梯度范圍不適合誘導(dǎo)向日葵子葉分化成芽，且子葉有很多處理分化出根，說明生長素濃度偏高或分裂素濃度偏低，后人可據(jù)此適當(dāng)增大濃度梯度，或改變生長調(diào)節(jié)劑種類。本試驗數(shù)據(jù)表明，當(dāng)6-BA 為0.5 mg/L，IAA為0.07 mg/L，蔗糖濃度為3%，pH為5.5，培養(yǎng)溫度為25 ℃時，向日葵胚軸可分化出芽，且分化率為13.3%，由于向日葵屬難再生植物，盡管本試驗分化率較低，但只要多次嘗試，終會使其分化率提高的。

（責(zé)任編輯：劉昀）