馮仁鑫 鄧星 張新 謝渭芬

第二軍醫(yī)大學(xué)附屬長征醫(yī)院消化內(nèi)科(200003)

肝臟細(xì)胞主要由上皮細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞組成，前者包括肝細(xì)胞和膽管上皮細(xì)胞，后者包括肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cells，HSCs)、肝血竇內(nèi)皮細(xì)胞(liver sinusoidal endothelial cells，LSECs)、肝臟巨噬細(xì)胞(Kupffer cells)、肝臟自然殺傷細(xì)胞等。肝再生系指在急慢性肝損傷情況下，各種肝臟細(xì)胞為恢復(fù)正常肝臟體積和功能，在一系列細(xì)胞因子和化學(xué)因子的共同調(diào)控下進(jìn)行的增殖、遷移和分化過程。肝細(xì)胞約占肝臟細(xì)胞總數(shù)的70%，是參與肝臟體積維持和功能發(fā)生的主要細(xì)胞。當(dāng)各種病理原因?qū)е赂渭?xì)胞增殖能力明顯受限時(shí)，肝臟內(nèi)其他細(xì)胞或通過分泌細(xì)胞因子促進(jìn)肝細(xì)胞增殖，或直接向肝細(xì)胞分化，參與肝臟再生過程。本文就不同肝臟細(xì)胞在肝再生過程中作用的研究進(jìn)展作一綜述。

一、正常肝臟的自我更新

肝細(xì)胞的前身是胚胎時(shí)期的肝母細(xì)胞，源自內(nèi)胚層的肝母細(xì)胞首先表達(dá)肝臟相關(guān)標(biāo)記物，隨后逐漸向上皮轉(zhuǎn)變，最后形成成熟肝細(xì)胞，維持肝臟的體積和功能。正常生理狀態(tài)下，肝細(xì)胞更新相對(duì)較緩慢，平均生命周期為200～300 d，平均每2萬個(gè)肝細(xì)胞中僅有一個(gè)處于有絲分裂期，肝臟每1～2年完整更新一次。目前對(duì)正常肝臟中更新肝細(xì)胞的來源尚存在爭議，主要有兩種不同觀點(diǎn)。

首先是“流動(dòng)肝臟”(streaming liver)假說。該假說認(rèn)為在正常肝臟更新過程中，新生肝細(xì)胞產(chǎn)生于門靜脈區(qū)，隨后逐漸向中央靜脈區(qū)遷移并不斷成熟，在肝臟不同區(qū)域表達(dá)不同基因，發(fā)揮不同作用，最后在中央靜脈區(qū)凋亡。但早年Bralet等［1］以LacZ基因標(biāo)記大鼠肝細(xì)胞，并未發(fā)現(xiàn)正常肝臟更新過程中有肝細(xì)胞遷移現(xiàn)象。Thurman等［2］亦發(fā)現(xiàn)不同肝小葉內(nèi)肝細(xì)胞代謝作用的不同與由肝臟血流方向決定的代謝物分布有關(guān)，與“流動(dòng)肝臟”假說的觀點(diǎn)相異。然而，近年又出現(xiàn)了支持“流動(dòng)肝臟”假說的研究證據(jù)。Fellous等［3］和Furuyama等［4］分別在人和小鼠正常肝臟中發(fā)現(xiàn)，部分肝前體細(xì)胞(hepatic progenitor cells，HPCs)通過持續(xù)向肝細(xì)胞分化參與肝細(xì)胞更新，新生肝細(xì)胞于門靜脈區(qū)產(chǎn)生，并向中央靜脈區(qū)遷移，再次掀起了關(guān)于“流動(dòng)肝臟”假說的爭議。

其次是肝細(xì)胞自我復(fù)制理論。在“流動(dòng)肝臟”假說受到質(zhì)疑之際，Kennedy等［5］于1995年應(yīng)用表達(dá)LacZ基因的轉(zhuǎn)基因小鼠研究肝細(xì)胞增殖潛能，發(fā)現(xiàn)正常肝臟更新來源于肝細(xì)胞自我復(fù)制。近年Malato等［6］應(yīng)用腺相關(guān)病毒載體介導(dǎo)由成熟肝細(xì)胞特異性蛋白Trt啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的Cre重組酶標(biāo)記追蹤R26R-EYFP小鼠的全部成熟肝細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)注射病毒3～6個(gè)月后，肝細(xì)胞更新完成1/4～1/2，且未發(fā)現(xiàn)EYFP表達(dá)陰性的肝細(xì)胞，提示成熟肝細(xì)胞自我復(fù)制是肝細(xì)胞更新的惟一來源。但該研究中腺相關(guān)病毒作用持續(xù)時(shí)間較長(超過6個(gè)月)，期間所有成熟肝細(xì)胞均可因表達(dá)Trt而呈EYFP陽性，因此并不能解釋肝細(xì)胞來源問題。

綜合上述研究結(jié)果，似乎“流動(dòng)肝臟”假說更為可信，但迄今仍缺乏充分的研究證據(jù)支持該假說，需開展更為嚴(yán)謹(jǐn)?shù)募?xì)胞譜系追蹤研究加以證實(shí)。

二、肝損傷后肝再生

肝臟最重要的特征之一是其在受損后能基本維持原有體積甚至功能的再生能力。與正常生理狀態(tài)下的肝細(xì)胞更新相比，不同原因肝損傷后肝再生的背景有所不同，此時(shí)除肝細(xì)胞自身增殖外，可能還需要其他肝臟細(xì)胞、因子等共同參與，以維持肝臟生理功能。

1.肝細(xì)胞與肝再生:肝細(xì)胞約占肝臟細(xì)胞總數(shù)的70%和肝容量的80%，是維持肝臟功能和體積的主要細(xì)胞。肝臟由于位置和功能的特殊性而較易因毒素、病毒、免疫紊亂等因素受損，因此肝細(xì)胞具有與其他體細(xì)胞不同的生理特征。早在1965年，Bucher等就發(fā)現(xiàn)肝臟部分切除后，小鼠肝臟內(nèi)細(xì)胞可快速進(jìn)入增殖狀態(tài)，且增殖細(xì)胞比例在一定范圍內(nèi)與切除肝臟體積呈正相關(guān);其后的肝細(xì)胞連續(xù)移植實(shí)驗(yàn)證實(shí)部分肝細(xì)胞具有幾近無限的增殖能力［7］。近年研究中，Malato 等［6］、Espa?ol-Su?er等［8］發(fā)現(xiàn)在肝大部切除和 CCl4所致急性肝損傷中，超過98%的肝細(xì)胞來源于殘存肝細(xì)胞的自我復(fù)制，在膽堿缺乏、乙硫氨基酪酸飲食補(bǔ)充(CDE)所致慢性肝損傷中，殘存肝細(xì)胞自我復(fù)制產(chǎn)生的肝細(xì)胞亦高達(dá)97%，而在 CCl4和 3，5-二乙酯基-1，4-二氫三甲基吡啶(DDC)所致慢性肝損傷中甚至未發(fā)現(xiàn)其他細(xì)胞來源的新生肝細(xì)胞。Schaub等［9］對(duì)CDE慢性肝損傷小鼠模型肝臟中的不同細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記追綜，同樣發(fā)現(xiàn)殘存肝細(xì)胞是再生肝細(xì)胞的惟一來源。上述研究表明，在各種急慢性肝損傷中，殘存健康成熟肝細(xì)胞持續(xù)分裂仍然是最快速、最有效的肝再生方式。

肝大部切除后，大鼠門靜脈區(qū)肝細(xì)胞除自我復(fù)制外，還可分泌大量血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)，通過誘導(dǎo)LSECs增殖促進(jìn)肝再生［10］。慢性肝損傷時(shí)，受損成熟肝細(xì)胞可產(chǎn)生Hedgehog配體，激活HPCs內(nèi)Hedgehog通路，促進(jìn)其增殖并部分向肝細(xì)胞分化［11］。

2.HPCs與肝再生:HPCs系指肝臟中可向肝細(xì)胞和膽管上皮細(xì)胞分化的一類細(xì)胞，通常位于膽管末端的Hering管。肝細(xì)胞增殖能力明顯受限和(或)肝細(xì)胞需求明顯增加時(shí)，HPCs可活化、增殖并向肝細(xì)胞分化，這一過程稱為“膽管反應(yīng)”(ductular reaction)或“卵圓細(xì)胞反應(yīng)”(oval cell reaction)。研究發(fā)現(xiàn)上皮細(xì)胞黏附分子(EpCAM)、Sox-9、骨橋蛋白(OPN)、OV-6、CK-19、panCK、CD133、CD34、Scal-1 等標(biāo)記陽性的細(xì)胞具有HPCs的生物學(xué)特性。對(duì)HPCs的研究歷史雖較長，但其在肝損傷后肝細(xì)胞再生中的作用一直存在爭議。

①HPCs對(duì)急性肝損傷的作用:Katoonizadeh等［12］對(duì)急性或亞急性重度肝損傷患者的研究顯示，當(dāng)肝細(xì)胞缺失超過50%，出現(xiàn)急性甚至爆發(fā)性肝衰竭時(shí)，HPCs數(shù)量明顯增加;在同一肝臟中，與組織殘存較好的區(qū)域相比，全小葉或多小葉壞死的區(qū)域有更多HPCs以及由其分化而來的中間狀態(tài)肝細(xì)胞(intermediate hepatocytes)。上述發(fā)現(xiàn)提示HPCs參與急性肝損傷時(shí)的肝再生，參與程度與肝細(xì)胞缺失率和臨床肝損傷嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，Malato等［6］發(fā)現(xiàn)小鼠肝大部切除后3周，約1.4%的新生肝細(xì)胞并非源自殘存肝細(xì)胞，提示HPCs參與了小部分肝細(xì)胞再生;但 Espa?ol-Su?er等［8］在肝大部切除和CCl4所致小鼠急性肝損傷中幾乎未見HPCs來源的新生肝細(xì)胞。鑒于HPCs的來源和標(biāo)記物的多樣性，且其是否參與肝再生可能與肝損傷嚴(yán)重程度相關(guān)，故不能排除HPCs參與急性肝損傷后肝細(xì)胞再生的可能性。

②HPCs對(duì)慢性肝損傷的作用:研究表明酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝病、慢性病毒性肝炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化、自身免疫性肝病等晚期肝病患者多有肝細(xì)胞衰老、壞死和(或)細(xì)胞周期阻滯，此時(shí)卵圓細(xì)胞可活化并參與肝再生，卵圓細(xì)胞數(shù)量及其向肝細(xì)胞樣細(xì)胞分化的程度與肝細(xì)胞損傷和炎癥程度呈正相關(guān)［13-15］。Lin等［16］將線粒體 DNA 突變［細(xì)胞色素c氧化酶(CCO)缺失］作為克隆擴(kuò)增標(biāo)志檢測(cè)了10例肝硬化患者的526個(gè)肝再生結(jié)節(jié)，發(fā)現(xiàn)CCO缺失結(jié)節(jié)的線粒體DNA突變類型與周圍HPCs相同，表明再生結(jié)節(jié)來源于HPCs，間接證實(shí)HPCs參與肝細(xì)胞再生。Yoon等［17］在慢性病毒性肝炎肝纖維化患者的肝組織中發(fā)現(xiàn)，膽管反應(yīng)細(xì)胞及其周圍部分肝細(xì)胞同時(shí)表達(dá)CK-19和EpCAM，而周圍其他肝細(xì)胞僅表達(dá)EpCAM，這類僅表達(dá)EpCAM的肝細(xì)胞隨病程進(jìn)展不斷增多，至肝硬化階段可占肝細(xì)胞的50%;從膽管反應(yīng)細(xì)胞、EpCAM陽性肝細(xì)胞至EpCAM陰性成熟肝細(xì)胞，端粒長度逐漸縮短。上述發(fā)現(xiàn)表明EpCAM陽性肝細(xì)胞來源于膽管反應(yīng)細(xì)胞，為慢性肝損傷時(shí)再生肝細(xì)胞的HPCs來源提供了直接證據(jù)。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)亦顯示，在 CCl4、DDC、CDE、膽管結(jié)扎(DBL)、2-乙酰氨基芴/肝大部切除(2-AAF/PHx)等所致慢性肝損傷中，位于肝膽管末端和門靜脈區(qū)的HPCs可增殖并部分向肝細(xì)胞分化［4，8，18］。不同類型肝損傷中的 HPCs活化程度及其向肝細(xì)胞分化的程度不盡相同。Furuyama等［4］發(fā)現(xiàn)源自Sox-9陽性HPCs的肝細(xì)胞在CCl4和DBL小鼠模型中增多，在其他肝損傷模型如肝大部切除、DDC模型中則相對(duì)較少，而 Espa?ol-Su?er等［8］在 CDE 小鼠模型中發(fā)現(xiàn)僅 2.45% 的新生肝細(xì)胞來源于OPN陽性HPCs，Schaub等［9］則未在CDE小鼠模型中發(fā)現(xiàn)CK-19陽性HPCs向肝細(xì)胞分化。上述動(dòng)物實(shí)驗(yàn)即使發(fā)現(xiàn)源自HPCs的肝細(xì)胞，其在新生肝細(xì)胞中所占比例亦小于5%，與在人類肝臟中觀察到的現(xiàn)象有很大差異，究其原因可能為動(dòng)物模型肝損傷較輕且病程較短，而肝病患者肝損傷較重且病程較長。更明顯的膽管反應(yīng)現(xiàn)象可能需在損傷更重、病程更長的動(dòng)物模型中加以證實(shí)。

有較多研究關(guān)注了HPCs參與肝再生的機(jī)制。Pi等［18］發(fā)現(xiàn)結(jié)締組織生長因子(CTGF)表達(dá)上調(diào)可能在卵圓細(xì)胞反應(yīng)和增殖中起關(guān)鍵作用。此外，HPCs的活化、增殖尚與白細(xì)胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子(TNF)家族成員TWEAK等相關(guān)［19-20］，而 Hedgehog、Wnt、Notch 通路則在調(diào)控 HPCs分化方向中發(fā)揮重要作用［21-23］。

值得注意的是，新近Kuramitsu等［24］發(fā)現(xiàn)在肝大部切除小鼠模型中，HPCs活化可加速CCl4誘導(dǎo)的纖維化進(jìn)程而不利于肝細(xì)胞再生。該研究顯示，HPCs活化可增強(qiáng)模型小鼠的轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)、前膠原 α1、α 平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)、組織金屬蛋白酶抑制劑-1(TIMP-1)等基因表達(dá)，早期抑制肝細(xì)胞增殖，晚期加速肝細(xì)胞凋亡。

3.HSCs與肝再生:HSCs是位于Disse間隙的一類間質(zhì)細(xì)胞，約占肝臟細(xì)胞總數(shù)的13%。目前普遍認(rèn)為HSCs活化是肝纖維化發(fā)生、發(fā)展的中心環(huán)節(jié)，近年大量研究發(fā)現(xiàn)HSCs在損傷肝臟的再生過程中亦起重要作用。

HSCs在解剖結(jié)構(gòu)上與肝細(xì)胞直接接觸，具有感知其損傷而調(diào)控肝再生的可能性。有研究顯示肝損傷時(shí)活化的HSCs在卵圓細(xì)胞周圍大量聚集，以左旋半胱氨酸抑制HSCs活化或以膠霉毒素清除活化的HSCs，卵圓細(xì)胞反應(yīng)和肝細(xì)胞增殖能力明顯減弱，肝細(xì)胞凋亡和壞死增加［25-26］，提示HSCs活化可直接或間接調(diào)控肝細(xì)胞再生，其機(jī)制可能與HSCs分泌肝細(xì)胞生長因子(HGF)以促進(jìn)HPCs和肝細(xì)胞內(nèi)的c-Met表達(dá)有關(guān)［27-28］。此外，HSCs還可分泌成纖維細(xì)胞生長因子7(FGF7)，與肝細(xì)胞內(nèi)受體FGFR2b結(jié)合以促進(jìn)其增殖［29］。Chen 等［30］的研究發(fā)現(xiàn)，HSCs在 2-AAF/PHx所致慢性肝損傷早期主要分泌HGF以促進(jìn)HPCs增殖，晚期則主要分泌TGF-β1以抑制HPCs增殖，在卵圓細(xì)胞反應(yīng)介導(dǎo)的肝再生中發(fā)揮重要調(diào)控作用。

另有研究發(fā)現(xiàn)HSCs本身即具有HPCs的特性。靜息HSCs(Q-HSCs)可同時(shí)表達(dá)三個(gè)胚層以及部分干細(xì)胞標(biāo)記物，在不同培養(yǎng)條件下可分別向肌成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞樣細(xì)胞、肝細(xì)胞樣細(xì)胞等分化，提示HSCs可能作為HPCs之一參與肝再生。由于Q-HSCs表達(dá)膠質(zhì)細(xì)胞原纖維酸性蛋白(GFAP)，Yang等［31］在CDE小鼠模型中以GFAP驅(qū)動(dòng)的Cre重組酶/綠色熒光蛋白(GFP)標(biāo)記追蹤Q-HSCs，發(fā)現(xiàn)其可活化并向肝細(xì)胞分化，參與約1/3的肝細(xì)胞再生。Swiderska-Syn等［32］在肝大部切除小鼠模型中發(fā)現(xiàn)，高達(dá)25%的新生肝細(xì)胞來源于活化HSCs，Michelotti等［33］在慢性肝損傷模型中亦有類似發(fā)現(xiàn)，其機(jī)制可能與HSCs內(nèi)Hedgehog通路激活介導(dǎo)的間質(zhì)-上皮轉(zhuǎn)化有關(guān)。然而上述研究采用的HSCs標(biāo)記物缺乏特異性，如GFAP驅(qū)動(dòng)的Cre重組酶還可標(biāo)記膽管上皮細(xì)胞，必須排除膽管上皮細(xì)胞參與這一過程的可能性。Mederacke等［34］應(yīng)用更為特異性表達(dá)于HSCs的卵磷脂視黃醇?；D(zhuǎn)移酶(Lrat)驅(qū)動(dòng)的Cre重組酶標(biāo)記追蹤小鼠HSCs，排除了HSCs在損傷肝臟中兼具HPCs功能的可能性。對(duì)于此結(jié)果，應(yīng)考慮到動(dòng)物模型中的肝細(xì)胞損傷程度不足以刺激HSCs向肝細(xì)胞分化等問題。在2-AAF或倒千里光堿/PHx這一更為嚴(yán)重的肝損傷模型中，Kordes等［35］予模型大鼠尾靜脈移植異體原代HSCs，細(xì)胞標(biāo)記追蹤顯示部分移植細(xì)胞可向HPCs轉(zhuǎn)化，繼而向成熟肝細(xì)胞分化，參與肝細(xì)胞再生。然而目前尚未見應(yīng)用此模型對(duì)自體HSCs進(jìn)行追蹤的研究證據(jù)。

此外，HSCs還可通過分泌基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)、TIMPs參與細(xì)胞外基質(zhì)的重塑，為慢性肝損傷時(shí)HPCs的活化、增殖、存活提供適宜的微環(huán)境并影響其分化方向［36］。

4.LSECs與肝再生:LSECs是肝臟間質(zhì)中數(shù)量最多的細(xì)胞，約占肝間質(zhì)細(xì)胞總數(shù)的70%。其沿肝竇伸展并呈線性排列，是一類形態(tài)和功能相對(duì)獨(dú)特的內(nèi)皮細(xì)胞。早在1993年，即有研究者在CCl4所致急性肝損傷中發(fā)現(xiàn)LSECs可分泌大量HGF。其后Greene等［37］在肝大部切除小鼠模型中發(fā)現(xiàn)，腹腔注射血管生成刺激因子bFGF在促進(jìn)LSECs增殖的同時(shí)，可使肝臟質(zhì)量明顯增加，提示LSECs可能在肝再生中起重要作用。近年Ding等［38］在小鼠模型中證實(shí)，肝大部切除后3 d內(nèi)，LSECs主要通過VEGF/VEGFR2通路上調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子Id1，以旁分泌方式分泌HGF、Wnt2，作用于肝細(xì)胞促進(jìn)其增殖;肝大部切除4 d后，LSECs在該通路作用下大量增殖，為大量新生肝細(xì)胞提供血液供應(yīng)，參與后期肝再生。然而，亦有研究［39］報(bào)道肝臟成熟LSECs及其前體細(xì)胞的HGF表達(dá)量和增殖率相對(duì)較低，骨髓來源的LSECs前體細(xì)胞是肝大部切除后早期內(nèi)皮細(xì)胞源性HGF和后期大量LSECs的主要來源。鑒于上述研究結(jié)果均基于殘存肝臟組織結(jié)構(gòu)未受影響的肝再生情況，而其他肝損傷動(dòng)物模型和人類肝臟疾病多伴有肝臟組織結(jié)構(gòu)破壞以及LSECs周圍微環(huán)境改變，LSECs在肝再生中的作用是否依然存在及其作用程度尚需進(jìn)一步研究。

5.其他肝臟細(xì)胞與肝再生:越來越多的研究表明，Kupffer細(xì)胞等其他肝臟細(xì)胞在肝再生中的作用不容忽視。肝再生過程中，Kupffer細(xì)胞通過吞噬肝細(xì)胞碎片誘導(dǎo)Wnt3a表達(dá)，可由此激活毗鄰HPCs中的Wnt-β-catenin-CTNNB1通路，從而促進(jìn)HPCs向肝細(xì)胞分化［23］。Kupffer細(xì)胞還可分泌TWEAK，通過與卵圓細(xì)胞內(nèi)受體Fn14結(jié)合，促進(jìn)卵圓細(xì)胞增殖［20］。此外，Kupffer細(xì)胞尚可分泌 IL-6、TNF-α 等以促進(jìn) HSCs活化［40］。另有研究［41］顯示 Kupffer細(xì)胞主要通過促進(jìn)HPCs向肝實(shí)質(zhì)遷移而促進(jìn)肝再生，對(duì)HPCs增殖的影響不明顯。臍帶、骨髓、脂肪組織來源的間質(zhì)干細(xì)胞或可直接分化為與肝細(xì)胞功能相近的細(xì)胞［42-43］，或可分泌細(xì)胞因子促進(jìn)肝細(xì)胞存活、增殖并減少其凋亡［44-45］。而肝臟自然殺傷細(xì)胞可通過分泌干擾素γ(IFN-γ)對(duì)肝細(xì)胞增殖起抑制作用［46］。

三、結(jié)語與展望

綜上所述，肝臟再生是一系列細(xì)胞和細(xì)胞因子共同參與并相互調(diào)控的復(fù)雜過程。肝細(xì)胞以其強(qiáng)大的自我復(fù)制能力在各種生理和病理情況下的肝再生過程中發(fā)揮主導(dǎo)和關(guān)鍵作用，肝臟內(nèi)的其他細(xì)胞如HSCs、LSECs、Kupffer細(xì)胞等可通過分泌細(xì)胞因子等方式促進(jìn)這一過程。HPCs和HSCs還可能作為肝細(xì)胞來源之一參與肝再生。由于人類慢性肝病尤其是在終末期系以肝細(xì)胞大量破壞和功能喪失為主要表現(xiàn)，促進(jìn)肝細(xì)胞再生仍是目前慢性肝病治療面臨的主要問題。深入研究肝再生過程中肝臟內(nèi)不同細(xì)胞的作用及其機(jī)制，明確慢性肝損傷狀態(tài)下新生肝細(xì)胞的來源，有助于進(jìn)一步增加對(duì)肝臟再生的了解，為各種晚期肝病的臨床診治提供新的思路和方法。

1 Bralet MP，Branchereau S，Brechot C，et al.Cell lineage study in the liver using retroviral mediated gene transfer.Evidence against the streaming of hepatocytes in normal liver［J］.Am J Pathol，1994，144(5):896-905.

2 Thurman RG，Kauffman FC.Sublobular compartmentation of pharmacologic events(SCOPE):metabolic fluxes in periportal and pericentral regions of the liver lobule［J］.Hepatology，1985，5(1):144-151.

3 Fellous TG，Islam S，Tadrous PJ，et al.Locating the stem cell niche and tracing hepatocyte lineages in human liver［J］.Hepatology，2009，49(5):1655-1663.

4 Furuyama K，Kawaguchi Y，Akiyama H，et al.Continuous cell supply from a Sox9-expressing progenitor zone in adult liver，exocrine pancreas and intestine［J］.Nat Genet，2011，43(1):34-41.

5 Kennedy S，Rettinger S，F(xiàn)lye MW，et al.Experiments in transgenic mice show that hepatocytes are the source for postnatal liver growth and do not stream［J］.Hepatology，1995，22(1):160-168.

6 Malato Y，Naqvi S，Schürmann N，et al.Fate tracing of mature hepatocytes in mouse liver homeostasis and regeneration［J］.J Clin Invest，2011，121(12):4850-4860.

7 Overturf K，al-Dhalimy M，Ou CN，et al.Serial transplantation reveals the stem-cell-like regenerative potential of adult mouse hepatocytes［J］.Am J Pathol，1997，151(5):1273-1280.

8 Espa?ol-Su?er R，Carpentier R，Van Hul N，et al.Liver progenitor cells yield functional hepatocytes in response to chronic liver injury in mice［J］.Gastroenterology，2012，143(6):1564-1575.e7.

9 Schaub JR，Malato Y，Gormond C，et al.Evidence against a stem cell origin of new hepatocytes in a common mouse model of chronic liver injury［J］.Cell Rep，2014，8(4):933-939.

10 Shimizu H，Miyazaki M，Wakabayashi Y，et al.Vascular endothelial growth factor secreted by replicating hepatocytes induces sinusoidal endothelial cell proliferation during regeneration after partial hepatectomy in rats［J］. J Hepatol，2001，34(5):683-689.

11 Jung Y，Witek RP，Syn WK，et al.Signals from dying hepatocytes trigger growth of liver progenitors［J］.Gut，2010，59(5):655-665.

12 Katoonizadeh A，Nevens F，Verslype C，et al.Liver regeneration in acute severe liver impairment:a clinicopathological correlation study［J］.Liver Int，2006，26(10):1225-1233.

13 Roskams T，Yang SQ，Koteish A，et al.Oxidative stress and oval cell accumulation in mice and humans with alcoholic and nonalcoholic fatty liver disease［J］.Am J Pathol，2003，163(4):1301-1311.

14 Fujiwara K，Nakano M，Yasui S，et al.Advanced histology and impaired liver regeneration are associated with disease severity in acute-onset autoimmune hepatitis［J］.Histopathology，2011，58(5):693-704.

15 Bird TG，Lorenzini S，F(xiàn)orbes SJ.Activation of stem cells in hepatic diseases［J］.Cell Tissue Res，2008，331(1):283-300.

16 Lin WR，Lim SN，McDonald SA，et al.The histogenesis of regenerative nodules in human liver cirrhosis［J］.Hepatology，2010，51(3):1017-1026.

17 Yoon SM，Gerasimidou D，Kuwahara R，et al.Epithelial cell adhesion molecule(EpCAM)marks hepatocytes newly derived from stem/progenitorcells in humans［J］.Hepatology，2011，53(3):964-973.

18 Pi L，Oh SH，Shupe T，et al.Role of connective tissue growth factor in oval cell response during liver regeneration after 2-AAF/PHx in rats［J］.Gastroenterology，2005，128(7):2077-2088.

19 Matthews VB，Klinken E，Yeoh GC.Direct effects of interleukin-6 on liver progenitor oval cells in culture［J］.Wound Repair Regen，2004，12(6):650-656.

20 Tirnitz-Parker JE，Viebahn CS，Jakubowski A，et al.Tumor necrosis factor-like weak inducer of apoptosis is a mitogen for liver progenitor cells［J］.Hepatology，2010，52(1):291-302.

21 Jung Y，Brown KD，Witek RP，et al.Accumulation of hedgehog-responsive progenitors parallels alcoholic liver disease severity in mice and humans［J］.Gastroenterology，2008，134(5):1532-1543.

22 Spee B，Carpino G，Schotanus BA，et al.Characterisation of the liver progenitor cell niche in liver diseases:potential involvement of Wnt and Notch signaling［J］.Gut，2010，59(2):247-257.

23 Boulter L，Govaere O，Bird TG，et al.Macrophagederived Wnt opposes Notch signaling to specify hepatic progenitor cell fate in chronic liver disease［J］.Nat Med，2012，18(4):572-579.

24 Kuramitsu K，Sverdlov DY，Liu SB，et al.Failure of fibrotic liver regeneration in mice is linked to a severe fibrogenic response driven by hepatic progenitorcell activation［J］.Am J Pathol，2013，183(1):182-194.

25 Pintilie DG，Shupe TD，Oh SH，et al.Hepatic stellate cells’involvement in progenitor-mediated liver regeneration［J］.Lab Invest，2010，90(8):1199-1208.

26 Shen K，Chang W，Gao X，et al.Depletion of activated hepatic stellate cell correlates with severe liver damage and abnormal liver regeneration in acetaminophen-induced liver injury［J］.Acta Biochim Biophys Sin(Shanghai)，2011，43(4):307-315.

27 Ishikawa T，F(xiàn)actor VM，Marquardt JU，et al.Hepatocyte growth factor/c-met signaling is required for stem-cellmediated liver regeneration in mice［J］.Hepatology，2012，55(4):1215-1226.

28 Huh CG，F(xiàn)actor VM，Sánchez A，et al.Hepatocyte growth factor/c-met signaling pathway is required for efficient liver regeneration and repair［J］.Proc Natl Acad Sci U S A，2004，101(13):4477-4482.

29 Tsai SM，Wang WP.Expression and function of fibroblast growth factor(FGF)7 during liver regeneration［J］.Cell Physiol Biochem，2011，27(6):641-652.

30 Chen L，Zhang W，Zhou QD，et al.HSCs play a distinct role in differentphases ofovalcell-mediated liver regeneration［J］.Cell Biochem Funct，2012，30(7):588-596.

31 Yang L，Jung Y，Omenetti A，et al.Fate-mapping evidence that hepatic stellate cells are epithelial progenitors in adult mouse livers［J］.Stem Cells，2008，26(8):2104-2113.

32 Swiderska-Syn M，Syn WK，Xie G，et al.Myofibroblastic cells function as progenitors to regenerate murine livers after partial hepatectomy［J］.Gut，2014，63(8):1333-1344.

33 Michelotti GA，Xie G，Swiderska M，et al.Smoothened is a master regulator of adult liver repair［J］.J Clin Invest，2013，123(6):2380-2394.

34 Mederacke I，Hsu CC，Troeger JS，et al.Fate tracing reveals hepatic stellate cells as dominant contributors to liver fibrosisindependentofitsaetiology［J］. Nat Commun，2013，4:2823.

35 Kordes C，Sawitza I，G?tze S，et al.Hepatic stellate cells contribute to progenitor cells and liver regeneration［J］.J Clin Invest，2014，124(12):5503-5515.

36 Van Hul NK，Abarca-Quinones J，Sempoux C，et al.Relation between liverprogenitorcellexpansion and extracellular matrix deposition in a CDE-induced murine model of chronic liver injury［J］.Hepatology，2009，49(5):1625-1635.

37 Greene AK，Wiener S，Puder M，et al.Endothelialdirected hepatic regeneration after partial hepatectomy［J］.Ann Surg，2003，237(4):530-535.

38 Ding BS，Nolan DJ，Butler JM，et al.Inductive angiocrine signals from sinusoidal endothelium are required for liver regeneration［J］.Nature，2010，468(7321):310-315.

39 Wang L，Wang X，Xie G，et al.Liver sinusoidal endothelial cell progenitor cells promote liver regeneration in rats［J］.J Clin Invest，2012，122(4):1567-1573.

40 Roskams T.Relationships among stellate cell activation，progenitor cells，and hepatic regeneration［J］.Clin Liver Dis，2008，12(4):853-860，ix.

41 Van Hul N，Lanthier N，Espa?ol Su?er R，et al.Kupffer cells influence parenchymalinvasion and phenotypic orientation，but not the proliferation，of liver progenitor cells in a murine model of liver injury［J］.Am J Pathol，2011，179(4):1839-1850.

42 Yan Y，Xu W，Qian H，et al.Mesenchymal stem cells from human umbilical cords ameliorate mouse hepatic injury in vivo［J］.Liver Int，2009，29(3):356-365.

43 Kuo TK，Hung SP，Chuang CH，et al.Stem cell therapy for liver disease:parameters governing the success of using bone marrow mesenchymal stem cells［J］.Gastroenterology，2008，134(7):2111-2121，2121.e1-3.

44 Banas A，Teratani T，Yamamoto Y，et al.IFATS collection:in vivo therapeutic potential of human adipose tissue mesenchymal stem cells after transplantation into mice with liver injury［J］.Stem Cells，2008，26(10):2705-2712.

45 van Poll D，Parekkadan B，Cho CH，et al.Mesenchymal stem cell-derived molecules directly modulate hepatocellular death and regeneration in vitro and in vivo ［J］.Hepatology，2008，47(5):1634-1643.

46 Sun R，Gao B.Negative regulation of liver regeneration by innate immunity(natural killer cells/interferon-gamma)［J］.Gastroenterology，2004，127(5):1525-1539.