鄧毅 吳雪峰 雷鳴 吳建華

對(duì)比檢測(cè)血清中抗環(huán)瓜氨酸肽抗體對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的診斷價(jià)值評(píng)估

鄧毅 吳雪峰 雷鳴 吳建華

目的探討檢測(cè)血清中抗環(huán)瓜氨酸肽(抗-CCP)抗體對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)的診斷價(jià)值。方法 收集RA患者86例(RA組)、非RA患者44例(非RA組)和健康體檢者32例(對(duì)照組), 分別采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)抗-CCP抗體水平, 并以免疫透射比濁法檢測(cè)類風(fēng)濕因子(RF), 比較各組的檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果 RA組的抗-CCP抗體及RF水平均顯著高于非RA組與對(duì)照組(P＜0.05)；RA組的抗-CCP靈敏度為69.77％, 顯著低于RF的靈敏度81.40％(P＜0.05)；抗-CCP對(duì)RA的診斷特異度與陽性預(yù)測(cè)值顯著高于RF(P＜0.05)；抗-CCP聯(lián)合RF的靈敏度、特異度及陰性預(yù)測(cè)值均獲得顯著提高, 與單項(xiàng)檢測(cè)相比, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論 血清抗-CCP抗體檢測(cè)對(duì)于RA的診斷具有較高的特異性,聯(lián)合RF檢測(cè)能夠提高診斷準(zhǔn)確率與敏感性。

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎；抗環(huán)瓜氨酸肽抗體；臨床診斷

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)是臨床常見自身免疫性疾病, 主要特征為對(duì)稱性關(guān)節(jié)滑膜炎, 如不及時(shí)治療可誘發(fā)關(guān)節(jié)強(qiáng)直、畸形甚至是功能喪失等[1］。故早期診斷并予以有效治療對(duì)于延緩或者逆轉(zhuǎn)關(guān)節(jié)破壞, 改善臨床預(yù)后至關(guān)重要。由于RA早期發(fā)展迅速, 病情復(fù)雜, 對(duì)于缺乏典型臨床表現(xiàn)以及X線特征且類風(fēng)濕因子(RF)檢測(cè)為陰性者, 早期臨床診斷難度較大,導(dǎo)致患者喪失最佳治療時(shí)機(jī)[2］?？弓h(huán)瓜氨酸肽(抗-CCP)抗體是近年臨床推出的RF診斷敏感指標(biāo), 本院通過比較RA與非RA疾病以及健康志愿者的血清抗-CCP抗體以及RF水平,探討了抗-CCP抗體檢測(cè)對(duì)RA的診斷價(jià)值, 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2012年1月～2014年1月, 本院門診或住院的RA患者86例作為RA組, 其中, 男29例, 女57例,年齡22～85歲, 平均年齡(46.33±13.26)歲。同期就診的非RA患者44例作為非RA組, 其中, 男12例, 女32例, 年齡20～79歲, 平均年齡(45.53±11.79)歲, 包括8例結(jié)締組織病,6例系統(tǒng)性紅斑狼瘡,6例干燥綜合征,5例系統(tǒng)性硬化癥,5例強(qiáng)直性脊柱炎,5例痛風(fēng),5例骨性關(guān)節(jié)炎,4例自身免疫性肝病。同期健康體檢者32例作為對(duì)照組, 其中, 男11例,女21例, 年齡23～81歲, 平均年齡(44.91±13.03)歲。三組年齡與性別構(gòu)成差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 方法 所有受試者均晨取空腹靜脈血3 ml, 常規(guī)分離血清并收集編號(hào), 置于-20℃低溫冰箱中保存待檢。

1.2.1 抗-CCP抗體檢測(cè) 采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)間接法進(jìn)行抗-CCP抗體的檢測(cè), 試劑盒由上海富純中南生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。取待測(cè)血清標(biāo)本, 以緩沖液按照1∶101進(jìn)行稀釋, 然后取經(jīng)稀釋后的待測(cè)血清標(biāo)本、陽性與陰性質(zhì)控樣本以及標(biāo)準(zhǔn)參照品100 μl, 分別加入到96孔板的反應(yīng)微孔之中, 在室溫條件下孵育60 min, 然后進(jìn)行洗滌3次, 再向每孔中加入堿性磷酸酶標(biāo)記抗體100 μl, 在室溫條件下孵育30 min, 再加入100 μl顯色劑進(jìn)行顯色30 min, 最后加入100 μl反應(yīng)終止液終止反應(yīng)。置于酶標(biāo)儀中在450 nm以及620 nm雙波長下測(cè)定吸收光度值(OD)。對(duì)于抗體濃度高于曲線范圍的, 再次稀釋血清標(biāo)本重新測(cè)定。操作均嚴(yán)格按照試劑說明書以及實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程執(zhí)行, 以抗-CCP抗體≥25 RU/ml判定為陽性。

1.2.2 RF檢測(cè) 以免疫速率散射比濁法進(jìn)行RF檢測(cè), 儀器為羅氏公司生產(chǎn)的Modular DPP型全自動(dòng)生化分析儀, 試劑盒由上海捷門生物技術(shù)合作公司提供, 操作嚴(yán)格按照說明書以及實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程執(zhí)行, 以RF≥25 IU/ml判定為陽性。

1.2.3 抗-CCP抗體聯(lián)合RF檢測(cè) 以抗-CCP抗體和RF中任意一項(xiàng)或者兩項(xiàng)均為陽性判定為聯(lián)合檢測(cè)陽性, 兩項(xiàng)均為陰性時(shí)判定為陰性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差±s)表示, 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(％)表示, 采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組檢測(cè)結(jié)果比較 RA組的抗-CCP抗體及RF水平均顯著高于非RA組與對(duì)照組, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

2.2 各組的陽性檢出率與診斷效能比較 抗-CCP抗體對(duì)RA的診斷靈敏度顯著低于RF, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；但特異度與陽性預(yù)測(cè)值顯著高于RF, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；將抗-CCP抗體與RF聯(lián)合檢測(cè)后, 靈敏度、特異度及陰性預(yù)測(cè)值均獲得顯著提高, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表2。

表1 各組檢測(cè)結(jié)果比較(±s)

表1 各組檢測(cè)結(jié)果比較(±s)

注：與非RA組和對(duì)照組比較,aP＜0.05

組別 例數(shù) 抗-CCP抗體(RU/ml) RF(IU/ml) RA組 86 288.91±133.52a 128.31±45.79a非RA組 44 3.63±1.18 6.92±4.33對(duì)照組 32 2.42±0.85 4.12±2.09

表2 各組的陽性檢出率與診斷效能比較(n)

3 討論

RA主要是由于體內(nèi)IgG分子變性, 導(dǎo)致機(jī)體生成抗變形IgG自身抗體, 即RF而發(fā)病。RF能夠與變性IgG相結(jié)合形成免疫復(fù)合物大量沉積在關(guān)節(jié)滑膜上, 導(dǎo)致補(bǔ)體激活, 誘發(fā)慢性以及漸進(jìn)性免疫炎癥損傷, 誘發(fā)RA[3］。因此, RF檢測(cè)是臨床診斷RA的常用血清指標(biāo), 陽性率可到70％左右。但臨床研究發(fā)現(xiàn), 在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、慢性肺結(jié)核以及干燥綜合征等疾病中也可檢出RF陽性, 甚至在部分健康人群中也可檢出滴度較低的RF。故血清RF檢測(cè)對(duì)于RA雖然具有較高的靈敏度, 但特異度較低, 極易發(fā)生誤診[4］。

近年來, 臨床通過檢測(cè)血清抗-CCP抗體進(jìn)行RA的診斷, 諸多研究證實(shí)了其具有較高的特異性[5］。本研究中, 血清抗-CCP抗體檢測(cè)對(duì)于RA的診斷特異度達(dá)93.18％, 陽性預(yù)測(cè)值達(dá)95.24％, 充分體現(xiàn)了其良好的診斷效能, 認(rèn)為檢測(cè)血清抗-CCP抗體對(duì)于RA的診斷以及病情嚴(yán)重程度判斷具有重要預(yù)測(cè)價(jià)值。此外, 本研究還發(fā)現(xiàn), 將抗-CCP抗體檢測(cè)與RF檢測(cè)聯(lián)合應(yīng)用后, 靈敏度提高至91.86％, 特異度、陽性及陰性預(yù)測(cè)值分別達(dá)77.27％、88.76％、82.93％, 診斷效能得以提高。認(rèn)為將兩者聯(lián)合檢測(cè)有利于提高RA的診斷靈敏度, 提高診斷準(zhǔn)確率。

綜上所述, 血清抗-CCP抗體檢測(cè)對(duì)于RA的診斷具有較高的特異性, 聯(lián)合RF檢測(cè)能夠提高診斷靈敏度以及準(zhǔn)確度, 降低誤診或漏診率, 為臨床診斷與治療決策提供可靠信息, 具有重要臨床應(yīng)用價(jià)值。

[1]葛艷玲, 宋慧, 趙育靖, 等.單獨(dú)檢測(cè)抗環(huán)瓜氨酸肽抗體以診斷類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎.中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2014,18(1):94-97.

[2]邢桂芝, 馬麗明, 安媛, 等.聯(lián)合檢測(cè)類風(fēng)濕因子與抗環(huán)瓜氨酸肽抗體對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的診斷價(jià)值.中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2014,18(6):990-992.

[3]劉志昌, 肖游君, 勞敏曦, 等.抗環(huán)瓜氨酸肽抗體與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者成纖維樣.中國病理生理雜志,2013,29(12):2278-2282,2292.

[4]鄧連瑞, 徐江霞, 漆堅(jiān), 等.抗環(huán)瓜氨酸肽抗體、類風(fēng)濕因子對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的診斷價(jià)值.山東醫(yī)藥,2013,53(9):85-87.

[5]岳濤, 程鵬, 范曉蕾, 等.抗環(huán)瓜氨酸肽抗體和關(guān)節(jié)磁共振成像對(duì)早期類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的意義.中華醫(yī)學(xué)雜志,2011,91(23):1633-1636.

Diagnostic value evaluation of serum anti-cyclic citrullinated peptide antibody by contrast detection for rheumatoid arthritis

DENG Yi, WU Xue-feng, LEI Ming, et al. Department of Inspection, Changshu City the First People’s Hospital, Changshu415003, China

ObjectiveTo investigate the diagnostic value of serum anti-cyclic citrullinated peptide (anti-CCP) antibody detection for rheumatoid arthritis (RA).MethodsThere were86 RA patients (RA group),44 non-RA patients (non-RA group), and32 health physical examination people (control group). The level of anti-CCP antibody was detected by enzyme linked immunosorbent assay, and rheumatoid factor (RF) was detected by immunity transmission turbidity. The detection results of every group were compared.ResultsThe Anti -CCP antibody and RF levels of the RA group were significantly higher than those in the non-RA group and the control group (P<0.05). The sensitivity of anti-CCP of the RA group was69.77％, which was obviously lower than81.40％ of RF (P<0.05). Anti-CCP had higher diagnostic specificity and positive predicted value for RA than RF (P<0.05). The sensitivity, specificity, and negative predicted value of anti-CCP combined with RF were all significantly increased. It had a statistically significant difference from single detection (P<0.05).ConclusionSerum anti-CCP antibody detection has high specificity for the diagnosis of RA, and its combination with RF in detection can improve the accuracy and sensitivity of diagnosis.

Rheumatoid arthritis; Anti-cyclic citrullinated peptide antibody; Clinical diagnosis

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.02.004

2014-10-27］

415003 常德市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科

吳雪峰