李輝敏，吳 萍，江 和

(九江學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，江西九江 332000)

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刺頭復(fù)葉耳蕨生藥鑒定學(xué)研究

李輝敏，吳 萍，江 和

(九江學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，江西九江 332000)

[目的]對(duì)刺頭復(fù)葉耳蕨進(jìn)行生藥學(xué)研究，為開發(fā)利用該資源提供參考依據(jù)。[方法]分別從基源、性狀、顯微特征方面對(duì)刺頭復(fù)葉耳蕨進(jìn)行了系統(tǒng)的鑒別研究。[結(jié)果]描述了原植物形態(tài)特征、藥材性狀特征、橫切面及粉末顯微特征。[結(jié)論]這些特征可作為刺頭復(fù)葉耳蕨的鑒別依據(jù)。

刺頭復(fù)葉耳蕨; 生藥學(xué)研究; 性狀;顯微鑒別

刺頭復(fù)葉耳蕨(ArachniodesexilisChing)為鱗毛蕨科復(fù)葉耳蕨屬植物，廣泛分布于世界熱帶和亞熱帶濕潤(rùn)區(qū)域，以亞洲東部和東南部種類最為豐富，我國主要分布于長(zhǎng)江流域以南地區(qū)及山東、河南等省，具有清熱利濕、抗菌消炎、鎮(zhèn)靜作用，民間習(xí)取其根部入藥，用于治療急性黃疸型肝炎、關(guān)節(jié)炎、腰腿疼、痢疾、燙火傷等[1]。為了更好地鑒別、開發(fā)利用刺頭復(fù)葉耳蕨，該研究對(duì)其進(jìn)行了基源鑒別、性狀鑒別、顯微鑒別研究，從而為今后刺頭復(fù)葉耳蕨的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制訂提供研究基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料全草采自江西省九江市星子縣，由九江學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院高春華教授鑒定為鱗毛蕨科(Dryopteridaceae)復(fù)葉耳蕨屬(Arachniodes)刺頭復(fù)葉耳蕨(ArachniodesexilisChing)。樣本保存于九江學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院藥學(xué)標(biāo)本室，標(biāo)本編號(hào)為F1205；水合氯醛、稀甘油等均為分析純(AR)，天津科密歐化學(xué)試劑公司。

1.2 儀器FCI30/B型中草藥粉碎機(jī)(上海中藥機(jī)械廠)，KL-UP-IV-20型超純水機(jī)(成都唐氏康寧科技發(fā)展有限公司)，RM2016型切片機(jī)(德國徠卡)，AB300型數(shù)碼成像顯微系統(tǒng)(Motic)。

1.3 方法

1.3.1基源鑒定。取采自廬山周邊地域復(fù)葉耳蕨屬的植物，利用植物分類方法及查閱文獻(xiàn)[2]進(jìn)行原植物鑒別。

1.3.2性狀鑒定。取干燥藥材根莖，觀察其特征，并對(duì)其外觀性狀進(jìn)行描述。

1.3.3顯微鑒定。

1.3.3.1制片。取刺頭復(fù)葉耳蕨葉柄莖、根及葉片，分別進(jìn)行徒手制片、組織石蠟切片及粉末制片，以便對(duì)該植物的顯微特征進(jìn)行觀察。①徒手制片。分取刺頭復(fù)葉耳蕨葉柄莖及根的橫切面，進(jìn)行徒手切片，將薄片置于潔凈的載玻片上，滴加水合氯醛試液加熱透化后，滴加稀甘油，蓋上蓋玻片，制成顯微裝片進(jìn)行觀察[3]。取刺頭復(fù)葉耳蕨葉片，以鑷子內(nèi)側(cè)的尖端刺破葉片，夾住材料向外撕取，撕下的一層薄膜立即放到有水的干凈玻片上，加水合氯醛試液加熱透化后，滴加稀甘油，蓋上蓋玻片，在顯微鏡下觀察葉表皮細(xì)胞的形態(tài)，氣孔類型等。②石蠟切片。取組織進(jìn)行固定后經(jīng)沖洗、用遞升濃度的乙醇等脫水、用二甲苯等透明、用石蠟浸蠟，然后用石蠟將組織包埋成蠟塊，再經(jīng)切片機(jī)切片后染色而制成切片[4]。③粉末制片。取60目刺頭復(fù)葉耳蕨根莖粉末少許，置于潔凈的載玻片上，滴加1～2滴醋酸甘油試液，蓋上蓋玻片，在顯微鏡下觀察細(xì)胞中的不溶性物質(zhì)。另取粉末少許，置于潔凈的載玻片上，用滴加水合氯醛加熱透化除去細(xì)胞中的油脂、淀粉等后裝片，在顯微鏡下觀察。

1.3.3.2顯微特征觀察。取刺頭復(fù)葉耳蕨葉柄莖、根及葉片的組織切片與粉末片，利用顯微鏡來觀察刺頭復(fù)葉耳蕨的組織結(jié)構(gòu)、細(xì)胞性狀及內(nèi)含物，并對(duì)顯微特征描述，從而制定顯微鑒別依據(jù)。包括組織鑒定和粉末鑒定。

2 結(jié)果與分析

2.1 基源鑒定利用植物分類方法及查閱文獻(xiàn)進(jìn)行原植物鑒別可知，本品植株高50～60 cm。葉柄長(zhǎng)40 cm，粗約2 mm，禾稈色，基部密被深棕色、披針形鱗片，向上疏被黑褐色同樣鱗片。葉片闊卵形，長(zhǎng)22 cm、寬12 cm，頂部略狹縮呈三角形，長(zhǎng)漸尖頭，基部闊楔形，充分三回羽狀；羽片8對(duì)，基部一對(duì)對(duì)生，向上的互生，有柄，斜展，基部一對(duì)最大，三角形，長(zhǎng)10 cm，下部寬6 cm，尾狀漸尖頭，基部圓楔形，二回羽狀；分離小羽片12對(duì)，互生，有短柄，基部一對(duì)斜上，上部的開展，基部下側(cè)一片小羽片伸長(zhǎng)，披針形，長(zhǎng)6 cm，寬2 cm，漸尖頭，基部闊楔形，羽狀；末回小羽片10對(duì)，有短柄，斜長(zhǎng)圓形，下部的長(zhǎng)1 cm，寬約5 mm，漸尖頭，基部斜楔形，深羽裂，裂片具芒刺，基部上側(cè)一片小羽片闊披針形，長(zhǎng)3.5 cm，基部寬1.5 cm，漸尖頭，羽狀；第二對(duì)羽片披針形，略呈鐮刀狀，長(zhǎng)9 cm，基部寬2.5 cm，漸尖頭，二回羽狀；基部下側(cè)一(二)片較同側(cè)第二(三)片為小，基部上側(cè)一片至伸達(dá)第三對(duì)羽片的基部。葉干后紙質(zhì)，棕綠色，光滑，葉軸、羽軸和小羽柄下面有相當(dāng)多褐色或棕色、披針形小鱗片。葉可分成營養(yǎng)葉和孢子葉2種。孢子囊群每小羽片6～8對(duì)(末回小羽片或裂片2～5對(duì))，略近中脈；囊群蓋深棕色，宿存(圖1)。生長(zhǎng)習(xí)性，生山谷林下，海拔180～520 m。

2.2 性狀鑒定根據(jù)對(duì)干燥藥材外觀性狀的觀察，可知本品根莖呈不規(guī)則扁圓形，長(zhǎng)4～35 cm，直徑2～6 mm；根莖表面深黃棕色，可見彎曲棕色須根及淺棕色鱗片；質(zhì)硬而脆，斷面不規(guī)則，淺灰白色，并具粉性；氣微，味澀(圖2)。

2.3 顯微鑒別

2.3.1葉柄莖顯微特征。刺頭復(fù)葉耳蕨葉柄莖顯微特征具有特異性，其橫切面可見分體中樞5，維管組織呈有限外韌型，其中有2個(gè)分體中樞木質(zhì)部呈喇叭狀(圖3。)。有的薄壁細(xì)胞可見含細(xì)小的砂晶。

2.3.2葉顯微特征。由圖4可見，刺頭復(fù)葉耳蕨葉的表面薄壁細(xì)胞長(zhǎng)方形，呈波狀彎曲，下表面氣孔周圍副位細(xì)胞4～5個(gè)，多為不定式，偶見不等式。在表皮細(xì)胞外壁有角質(zhì)層，胞壁可見紋孔，氣孔分布密，保衛(wèi)細(xì)胞中含葉綠體；葉片邊緣可見梯紋導(dǎo)管。

2.3.3根莖橫切面顯微特征。 根莖徒手制片難度大，因根莖含有大量的淀粉，難以有根莖全面的橫切面圖，無法可見根莖有多少個(gè)分體中樞；石蠟切片也未觀察到根莖全面的橫切面圖。但從切片的部分(圖5)可知根莖具有周韌型維管束，作為物種的鑒定依據(jù)不充分。

2.3.4根莖的粉末顯微特征。取本品粉末少量，置載玻片上，滴加少量的水合氯醛加熱透化，再加數(shù)滴稀甘油，蓋上蓋玻片，在鏡下觀察可見螺紋、梯紋導(dǎo)管，有不規(guī)則紅棕色的細(xì)胞色素塊(圖6)；另取潔凈的載玻片，加少量樣品粉末，滴加醋酸甘油試液，蓋上蓋玻片，在顯微鏡下觀察可見具明顯的細(xì)胞后含物淀粉粒，其直徑<10 μm(圖7)。

3 討論

該研究通過對(duì)刺頭復(fù)葉耳蕨的基源、性狀及顯微特征的研究觀察，為該植物的基礎(chǔ)研究提供了依據(jù)，便于科學(xué)準(zhǔn)確地鑒別該草藥，為刺頭復(fù)葉耳蕨的深入研究奠定了生藥學(xué)基礎(chǔ)，從而有利于今后對(duì)其的綜合開發(fā)利用。

在顯微鑒別制片操作當(dāng)中，石蠟切片操作復(fù)雜，過程較長(zhǎng)，對(duì)操作技術(shù)要求較高，一步不慎易導(dǎo)致前功盡棄，且處理過程會(huì)引起組織塊或多或少的收縮，切片時(shí)受環(huán)境濕度、溫度等影響較大，而徒手制片操作相對(duì)簡(jiǎn)單、快速，無需貴重切片機(jī)，可觀察到植物組織活體結(jié)構(gòu)及自然色澤，應(yīng)用廣泛，為植物顯微鑒別常用的制片方法。從顯微鑒別結(jié)果可知，刺頭復(fù)葉耳蕨葉柄橫切面的組織結(jié)構(gòu)特殊，對(duì)于刺頭復(fù)葉耳蕨的鑒定有一定的科學(xué)意義，從葉柄橫切面可觀察到分體中樞為5，維管組織有限外韌型，上端3個(gè)分體中樞環(huán)列，下端2個(gè)分體中樞較大，形態(tài)各異，在其木質(zhì)部形成明顯具拖尾的喇叭形。而供藥用的根莖，由于含有豐富的淀粉類物質(zhì)，不利于徒手制片進(jìn)行鑒別，所含分體中樞整體形態(tài)難以判斷，顯微特征特異性并不突出，因此該部位不適應(yīng)于對(duì)該植物物種的鑒定。由此可認(rèn)為選擇刺頭復(fù)葉耳蕨葉柄橫切面的顯微特征作為鑒別標(biāo)準(zhǔn)對(duì)于刺頭復(fù)葉耳蕨的鑒定更具有科學(xué)意義。而這種情況在鱗毛蕨科其他藥用植物的鑒定中也曾出現(xiàn)過，如綿馬貫眾藥用部位為其根莖，而藥典采用其葉柄橫切面顯微特征作為顯微鑒別的標(biāo)準(zhǔn)[5]。刺頭復(fù)葉耳蕨葉的組織形態(tài)，如表皮細(xì)胞形態(tài)、氣孔類型及粉末形態(tài)特征均可作為輔助鑒定的依據(jù)。

[1] 周道年，阮金蘭，蔡亞玲.復(fù)葉耳蕨地上部分黃酮類化合物[J].中國藥學(xué)雜志，2008，43(16)：1218-1220.

[2] 高發(fā)全.淺論幾種植物分類方法[J].陜西林業(yè)科技，1990(2)：25-27.

[3] 楊漢民，賈敬芬.怎樣制作植物徒手切片[J].植物雜志，1978(4)：17.

[4] 吳立人.生藥學(xué)實(shí)驗(yàn)[M].2版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2012：17-23.

[5] 國家藥典委員會(huì).中國藥典.Ⅰ部[S].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：231-232.

Pharmacognostic Study onArachniodesexilisChing

LI Hui-min, WU Ping, JIANG He

(Basic Medical College of Jiujiang University, Jiujiang, Jiangxi 332000)

[Objective] To conduct pharmacognostic study ofArachniodesexilisChing and thus to afford reference for development and utilization of the resource. [Method] Macroscopic and microscopic identification were used to identifyArachniodesexilisChing. [Result] The morphological feature of original plant, character of crude drug, microscopic characters of transverse section, powder were described. [Conclusion]The study could be applied to identifyArachniodesexilisChing.

ArachniodesexilisChing; Pharmacognostical study; Shape and properties; Microscopic identification

江西省教育廳資助項(xiàng)目(GJJ12737)；江西省衛(wèi)生廳資助項(xiàng)目(2012A014)。

李輝敏(1974- )，女，江西九江人，副教授，博士，從事中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)與質(zhì)量控制研究。

2014-11-21

S 567

A

0517-6611(2015)01-029-04

鳴 謝 九江學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院高春華教授在該研究整個(gè)過程中提供的幫助與指導(dǎo)。